利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法，既能低成本處理肉聯(lián)廠廢水，又能獲得有重要餌料價(jià)值的蛇目圓篩藻。蛇目圓篩藻傳統(tǒng)上采用f/2培養(yǎng)液并使用環(huán)形跑道池培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢、產(chǎn)量低、投資大、易污染、效益低，現(xiàn)在我采用白色貯水桶充氣培養(yǎng)且在培養(yǎng)基中增加了肉聯(lián)廠廢水、乙二胺四乙酸鈉、羧甲基纖維素鈉、海藻酸丙二醇酯、胰蛋白、鵝糞浸出液、鹿糞浸出液、人尿、土壤浸出液、海泥浸出液、黃原膠、蛋白胨、DL蘋果酸、組氨酸、脫氧膽酸鈉、山梨醇、甘露醇等營(yíng)養(yǎng)成分，有機(jī)和無(wú)機(jī)肥混合使用，營(yíng)養(yǎng)更全面、均衡，生長(zhǎng)快，不易污染，蛇目圓篩藻生長(zhǎng)速度大幅提高，產(chǎn)量提高280％。
【專利說(shuō)明】利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其涉及一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]肉類食品是人類生活必需品，是滿足人類對(duì)蛋白質(zhì)、脂防等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需求主要來(lái)源之一。肉類加工是指對(duì)豬、牛、羊等家畜和雞、鴨等家禽屠宰和進(jìn)一步加工，以便生產(chǎn)人們生活所必需的肉類食品和副食品。在屠宰和肉類加工過(guò)程中，要耗用大量水，同時(shí)又排出含有血污、油脂、毛、肉屑、畜禽內(nèi)臟雜物、未消化的食料和糞便等污染物質(zhì)的廢水，廢水還含有大量致病微生物。肉類加工廢水如不經(jīng)處理直接排放，會(huì)對(duì)水環(huán)境造成嚴(yán)重污染，對(duì)人畜健康造成危害。肉類加工廢水所含污染物質(zhì)大多屬于易生物降解有機(jī)物，排入水體后，會(huì)迅速耗掉水中溶解氧，造成魚、蝦等水生生物缺氧死亡；缺氧還會(huì)使水體變成厭氧狀態(tài)，惡化水質(zhì)，產(chǎn)生臭味，影響衛(wèi)生。同時(shí)，廢水中致病微生物會(huì)大量繁殖，危害人類健康。對(duì)屠宰肉類加工廢水進(jìn)行處理對(duì)保護(hù)生態(tài)環(huán)境和人類健康是十分必要的。
[0003]屠宰和肉類加工過(guò)程為，牲畜在宰殺前進(jìn)行檢疫，進(jìn)入屠宰區(qū)，先用機(jī)械、電力或者化學(xué)方法將其致暈，懸掛后腳割斷靜脈宰殺放血。牛采用機(jī)械剝皮，豬一般不去皮，豬體進(jìn)入60 °C的燙毛池煮后去毛，剖肚取出內(nèi)臟，將食用部分和非食用部分分開，再?zèng)_洗胴體、分割、冷藏，加工成不同肉類食品，如新鮮肉或者花色配制品和臘、腌熏，罐頭肉等。屠宰廢水來(lái)自圈欄沖洗、淋洗、屠宰及其它廠房地坪沖洗、燙毛、剖解、副食加工、洗油等,具有水量大、排水不均勻、濃度高、雜質(zhì)和懸浮物多、可生化性好等特點(diǎn)。與其它高濃度有機(jī)廢水最大不同在于它的NH3-N濃度較高，約120mg/l，故工藝設(shè)計(jì)中應(yīng)充分考慮NH3-N對(duì)廢水處理造成的影響。傳統(tǒng)上肉聯(lián)廠廢水有以下幾種處理方法。
[0004]I射流曝氣一生物接觸氧化處理方法
[0005]該工藝是通過(guò)微生物生化分解作用，使廢水中有機(jī)物氧化分解為無(wú)害無(wú)機(jī)物質(zhì)。其工藝流程為，廢水經(jīng)過(guò)柵流入初沉池，經(jīng)調(diào)節(jié)池將濃度混合均勻后，用射流葬將廢水抽入曝氣池，池中掛有軟性填料，填料上生長(zhǎng)著經(jīng)培訓(xùn)后的生物膜，廢水與微生物在射流曝氣池中進(jìn)行復(fù)雜的生化反應(yīng)，使廢水得到凈化處理，后廢水流入二沉池進(jìn)行泥水分離，上清液再經(jīng)裝有濾料的排放池處理，使懸浮物和色度得到進(jìn)一步去除后排放。主要優(yōu)點(diǎn)有:射流曝氣氧化利用率高，攪動(dòng)混合力強(qiáng)，微生物生化反應(yīng)快，生物接觸氧化耐沖擊負(fù)荷高，污泥量小，維修管理方便，軟性填料具有空隙，表面積大，即使工廠間斷停產(chǎn)微生物活性也恢復(fù)快，投資省。處理后水體PH值、懸浮物、化學(xué)耗氧量、生化需氧量、色度五項(xiàng)指標(biāo)都達(dá)到國(guó)家規(guī)定的一類水域排放標(biāo)準(zhǔn)，這五項(xiàng)指標(biāo)中除色度外，去除率都在90%以上。缺點(diǎn)是工藝復(fù)雜，微生物培養(yǎng)困難且其活力難以掌控。
[0006]2聚鐵絮凝劑絮凝法
[0007]聚鐵絮凝劑是一種無(wú)機(jī)高分子化合物，1982年研制成功以來(lái)，先后對(duì)多個(gè)肉聯(lián)廠廢水進(jìn)行處理試驗(yàn)，證明它是一種高效化學(xué)混凝劑，在去除COD、BOD、SS、色度、硫化物及某些重金屬離子方面效果顯著，COD去除率在77%以上，pH、COD、B0D、色度等幾項(xiàng)主要指標(biāo)可達(dá)到二級(jí)企業(yè)三類地區(qū)排放標(biāo)準(zhǔn)。本法處理效果穩(wěn)定，不受氣溫變化限制。絮凝劑原料是工業(yè)廢料，可用電石渣代替石灰。處理后的水清澈透明，久置不變色，不沉淀，不變臭，可回收利用，一次性投資和操作費(fèi)用均低于生化法，特別適合北方地區(qū)。本法產(chǎn)生一定量污泥，其熱值和干基蛋白含量較高，可作為能源(如沼氣原料)和飼料。缺點(diǎn)是易產(chǎn)生二次污染，操作麻煩，工作量大。
[0008]3穩(wěn)定塘法
[0009]穩(wěn)定塘是一種利用水體微生物天然凈化能力的生物處理構(gòu)筑物總稱，主要利用細(xì)菌、藍(lán)藻、綠藻、硅藻、病毒、支原體、立克氏體等共同作用處理廢水有機(jī)污染物。穩(wěn)定塘污水處理系統(tǒng)具有基建投資和運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用低、維護(hù)和維修簡(jiǎn)單、便于操作、能有效去除污水中有機(jī)物和病原體、無(wú)需污泥處理等優(yōu)點(diǎn)，在我國(guó)特別是缺水干旱地區(qū)，是實(shí)施污水處理和資源化利用有效方法，近年來(lái)成我國(guó)著力推廣的一項(xiàng)污水處理新技術(shù)。缺點(diǎn)是占地面積大，處理廢水速度慢，經(jīng)濟(jì)效益低。
[0010]為了解決目前抗生素廠廢水處理技術(shù)存在的不足，我發(fā)明了一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻培養(yǎng)基和培養(yǎng)技術(shù)，既能低成本高效率處理肉聯(lián)廠廢水，又能獲得有重要餌料價(jià)值的生物產(chǎn)品-蛇目圓篩藻，變廢為寶，化害為利，可大幅減少?gòu)U水處理費(fèi)用并提高處理效果，是肉聯(lián)廠廢水處理的最佳選擇。
[0011]蛇目圓篩藻Coscinodiscus argus Ehrenberg 隸屬娃藻門 Bacillariophyta,中心綱Centricae,盤狀娃藻目Discoidales,圓篩藻科Coscinodiscaceae,圓篩藻屬Coscinodiscus Ehrenberg。細(xì)胞圓盤狀,殼面平或中部略凹，直徑95-209 μ m。殼面室六角形，呈放射狀和螺旋狀排列。殼面中心由5個(gè)較大的室組成玫瑰紋，中央玫瑰紋中還有直徑1.7-3 μ m中央無(wú)紋區(qū),亦有玫瑰紋不明顯而僅有中央無(wú)紋區(qū)者。殼中部室較小,4-6個(gè)/10 μ m,向外逐漸變粗，2.5-5個(gè)/10 μ m。室大小略有變化，但接近最外圍，因殼套較陡，室又逐漸變小而近圓形，4-5個(gè)/ΙΟμπι。在殼套上5-10個(gè)/ΙΟμπι。殼緣薄。在普通顯微鏡下，殼面邊緣無(wú)緣突。電鏡下可見殼緣有I圈唇形突，3-4個(gè)/10 μ m，其中兩個(gè)較大，上半部卷起。色素體顆粒狀，數(shù)目多。中國(guó)渤海北部及東海、印度安達(dá)曼群島以南以及歐洲各海皆有。廣布性底棲種，今生性浮游生活或化石種。作為海洋初級(jí)生產(chǎn)力，因其繁殖快、營(yíng)養(yǎng)豐富、不含纖維質(zhì)細(xì)胞壁、易被貝類幼蟲捕捉、吞食和消化，是海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物櫛孔扇貝、刺參、馬糞海膽、日本對(duì)蝦、牡蠣、文蛤、貽貝、舌鰨、銀鮫、鮑魚、梭子蟹等多種名貴海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物良好餌料。特別是在海參人工育苗中，蛇目圓篩藻影響海參幼蟲附著與變態(tài)，直接關(guān)系到海參育苗成敗、產(chǎn)量高低。
[0012]蛇目圓篩藻傳統(tǒng)上采用m培養(yǎng)液并使用環(huán)形跑道池培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢、產(chǎn)量低、投資大、易污染、效益低，現(xiàn)在我采用白色貯水桶充氣培養(yǎng)且在培養(yǎng)基中增加了肉聯(lián)廠廢水、乙二胺四乙酸鈉、羥基乙基乙烯二胺三醋酸、羧甲基纖維素鈉、海藻酸丙二醇酯、胰蛋白、鵝糞浸出液、鹿糞浸出液、人尿、土壤浸出液、海泥浸出液、f/2維生素溶液、f/2微量元素溶液、葡萄糖、酵母抽取物、硅酸鉀、檸檬酸鐵銨、硝酸銨、谷朊粉、硬脂酰乳酸鈣、脂肪酶、黃原膠、蛋白胨、生物素、DL蘋果酸、碳酸氫鈉、組氨酸、脫氧膽酸鈉、山梨醇、甘露醇等營(yíng)養(yǎng)成分，有機(jī)和無(wú)機(jī)肥混合使用，營(yíng)養(yǎng)更全面、均衡，生長(zhǎng)快，不易污染，蛇目圓篩藻生長(zhǎng)速度大幅提高，產(chǎn)量提高280%。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]為了克服目前肉聯(lián)廠廢水處理存在的費(fèi)用高、效率低、占地面積大和蛇目圓篩藻培養(yǎng)生長(zhǎng)慢、產(chǎn)量低、投資大、易污染、效益低等技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)基，配方如下:
[0014]肉聯(lián)廠廢水100毫升，乙二胺四乙酸鈉I毫克，羥基乙基乙烯二胺三醋酸2毫克，羧甲基纖維素鈉7毫克，海藻酸丙二醇酯2毫克，胰蛋白2毫克，鵝糞浸出液I毫升，鹿糞浸出液1.4毫升，人尿1.5毫升，土壤浸出液1.4毫升，海泥浸出液1.6毫升，f/2維生素溶液1.2毫升，f/2微量元素溶液1.2毫升，葡萄糖10毫克，酵母抽取物7毫克，硅酸鉀2毫克，檸檬酸鐵銨4毫克，硝酸銨5毫克，谷朊粉3毫克，硬脂酰乳酸鈣3毫克，脂肪酶I毫克，黃原膠2毫克，蛋白胨2毫克，生物素I毫克，DL蘋果酸3毫克，碳酸氫鈉20毫克，組氨酸5毫克，脫氧膽酸鈉I毫克，山梨醇5毫克，甘露醇4毫克，臭氧消毒后的純凈海水1000毫升；
[0015]一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)方法，具體步驟如下:
[0016]培養(yǎng)容器為1000升貯水桶，市場(chǎng)有售，食品級(jí)高密度聚乙烯材料制成，無(wú)色或白色，有較好的透光性，以利藻類進(jìn)行光合作用?？拷撞坑幸凰堫^，水桶頂部有一圓形蓋子，上有旋絲，可旋轉(zhuǎn)而密封，蓋子打上2個(gè)孔，一個(gè)孔插入充氣管，另一個(gè)孔插入排氣管，充氣管和排氣管都是玻璃管，內(nèi)徑6毫米。將貯水桶洗刷干凈，后用蒸餾水潤(rùn)洗3遍，裝入權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基650升，充氣混合5分鐘，選擇生命力旺盛、無(wú)污染的蛇目圓篩藻接種，接種密度6X 104cell/mL ;蓋子上插入兩根干凈玻璃管,一根較長(zhǎng)，60厘米,頂端露出蓋子15厘米，下端通過(guò)料管與散氣石連接，用以充氣(散氣石的作用是形成很小的氣泡，避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細(xì)胞)；另一根較短，30厘米，兩端露出蓋子即可，用以排氣；兩根玻璃管同樣粗細(xì)；用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定；長(zhǎng)的玻璃管上端用料管與充氣泵相連，充入混合氣體，混合氣體成分和體積比例是空氣:純二氧化碳:臭氧:氨氣=92%: 6%: 1%: 1%;連續(xù)充氣，充氣量不宜太大，以藻細(xì)胞浮起不下沉即可；室外培養(yǎng)，太陽(yáng)光照射，最佳溫度25±2°C，最佳光照強(qiáng)度5000-10000Lux ;培養(yǎng)的前5天，水桶上方搭建一簡(jiǎn)易棚，上放置簾子遮擋光線，使光照強(qiáng)度維持在1500-2800LUX，避免強(qiáng)烈陽(yáng)光對(duì)細(xì)胞造成的光傷害；第6天撤掉簾子，較強(qiáng)的光照有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖和高不飽和脂肪酸的合成；培養(yǎng)至第7天，停止充氣，拿開蓋子，補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基100升，以彌補(bǔ)蒸發(fā)掉的水分，蓋上蓋子，充氣，繼續(xù)培養(yǎng)，至第9天，蛇目圓篩藻密度增加至600 X IO4CelΙ/mL，停止培養(yǎng)，從底部的水龍頭放出藻液，將培養(yǎng)容器洗刷干凈后，加入中藥消毒液消毒30分鐘，后進(jìn)入下一輪培養(yǎng)；
[0017]所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成:每100份85%乙醇中加入以下重量份的中藥材:白屈菜20~50份、忍冬藤10~20份、桉樹葉15~25份、桅子5~10份、甘草5~15份，防腐輔料1-3份；中藥消毒液制作方法:將新鮮白屈菜、忍冬藤、桉樹葉、甘草、山桅果切碎，于60-70°C下烘干，再用中藥材粉碎機(jī)分別粉碎至80目備用，用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的白屈菜120克，忍冬藤60克，桉樹葉葉60克，甘草30克，山桅果30克，防腐輔料6克，置于三角燒瓶中充分混合后，加入1000毫升85%乙醇，浸泡48小時(shí)，200篩絹過(guò)濾，將清液靜置沉淀32-36小時(shí)，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為復(fù)方中藥消毒液，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰箱備用。[0018]優(yōu)選地，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用紫外燈消毒，消毒10-20分鐘。
[0019]優(yōu)選地，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓氮?dú)鈬娚湎?，消?-10分鐘，
[0020]優(yōu)選地，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒5-6分鐘，
[0021]優(yōu)選地，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后分兩個(gè)階段消毒，先使用高壓氮?dú)鈬娚湎?，消?-3分鐘，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒2-3分鐘，消毒完畢后再進(jìn)行藻類培養(yǎng)。
[0022]優(yōu)選地，所述防腐輔料為食用鹽。
[0023]優(yōu)選地，所述防腐輔料為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物，混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5。
[0024]優(yōu)選地，所述防腐輔料組分為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物，混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5，所述防腐輔料的制備步驟為:用托盤天平分別稱取出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸，混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5，置于三角燒瓶中充分混合后，加入混合物30-50倍體積的85%乙醇，搖勻靜置沉淀12-15小時(shí)，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為防腐輔料，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于3-4°C冰箱備用。
[0025]有益結(jié)果:
[0026]為了克服目前肉聯(lián)廠廢水處理存在的費(fèi)用高、效率低、占地面積大和蛇目圓篩藻培養(yǎng)生長(zhǎng)慢、產(chǎn)量低、投資大、易污染、效益低等技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)基和培養(yǎng)技術(shù)，既能低成本高效率處理肉聯(lián)廠廢水，又能獲得有重要餌料價(jià)值的生物產(chǎn)品-蛇目圓篩藻，變廢為寶，化害為利，可大幅度減少?gòu)U水處理費(fèi)用并提高處理效果，是肉聯(lián)廠廢水處理的最佳選擇。蛇目圓篩藻傳統(tǒng)上采用f/2培養(yǎng)液并使用環(huán)形跑道池培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢、產(chǎn)量低、投資大、易污染、效益低，現(xiàn)在我采用白色貯水桶充氣培養(yǎng)且在培養(yǎng)基中增加了肉聯(lián)廠廢水、乙二胺四乙酸鈉、羥基乙基乙烯二胺三醋酸、羧甲基纖維素鈉、海藻酸丙二醇酯、胰蛋白、鵝糞浸出液、鹿糞浸出液、人尿、土壤浸出液、海泥浸出液、f/2維生素溶液、f/2微量元素溶液、葡萄糖、酵母抽取物、硅酸鉀、檸檬酸鐵銨、硝酸銨、谷朊粉、硬脂酰乳酸鈣、脂肪酶、黃原膠、蛋白胨、生物素、DL蘋果酸、碳酸氫鈉、組氨酸、脫氧膽酸鈉、山梨醇、甘露醇等營(yíng)養(yǎng)成分，有機(jī)和無(wú)機(jī)肥混合使用，營(yíng)養(yǎng)更全面、均衡，生長(zhǎng)快，不易污染，蛇目圓篩藻生長(zhǎng)速度大幅提高，產(chǎn)量提高280%。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0027]圖1為蛇目圓篩藻形態(tài)結(jié)構(gòu)圖；
[0028]其中附圖標(biāo)記為:1殼緣，2中央無(wú)紋區(qū)，3篩孔。
[0029]圖2為利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻方法圖；
[0030]其中附圖標(biāo)記為:4排氣管，5水龍頭，6散氣石，7藻液，8貯水罐，9充氣管?！揪唧w實(shí)施方式】[0031]肉聯(lián)廠廢水預(yù)處理方法:肉聯(lián)廠廢水用于養(yǎng)藻前需要進(jìn)行預(yù)處理，方法是:先用60目的篩絹過(guò)濾廢水，除去漂浮物、玻璃渣子、毛發(fā)、泥沙、樹葉、塑料袋等體積較大固形物，后將污水引入長(zhǎng)30米、寬20米、深0.7米的水泥曝氣池中，池子呈東西走向，以接受更多的陽(yáng)光照射；水深保持在60厘米；按每立方米污水加入50克生石灰的量均勻潑灑生石灰(生石灰最好預(yù)先按I公斤加入5升純水的量在塑料桶中溶解、稀釋、攪拌均勻，再全池潑灑)，隔60分鐘，再按每立方米污水加入80克的量全池潑灑明礬(明礬最好預(yù)先按100克加4升純水的量在塑料桶中溶解、稀釋并攪拌均勻，再全池潑灑)，然后用耙子攪動(dòng)或充氣攪拌60分鐘，使石灰和明礬充分溶解、混合并與污水中有機(jī)物充分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，然后自然沉淀、發(fā)酵、曝光72小時(shí)，撇去水面泡沫等漂浮物，勿攪動(dòng)池底，取中上層的污水，裝入不透光的黑色塑料桶中，密封，4°C冰箱或冷庫(kù)保存，備用；
[0032]土壤浸出液制備方法:取樹林中松散、富含有機(jī)質(zhì)的上層土壤I公斤，加純水1000毫升，煮沸60分鐘，在暗處放置2天，過(guò)濾，濾液600毫升加純水400毫升使用；
[0033]人尿制備方法:取人尿1000毫升，燒瓶煮沸后冷卻備用；
[0034]臭氧消毒海水方法:取海水，脫脂棉過(guò)濾，通入臭氧消毒；所用臭氧發(fā)生器產(chǎn)臭氧量為3500毫克/小時(shí)，每立方米海水充臭氧30分鐘，充完后自然曝氣90分鐘，讓水體中過(guò)多的臭氧揮發(fā)出來(lái)，即可用以養(yǎng)藻；
[0035]過(guò)氧乙酸消毒液制備方法和使用注意事項(xiàng):市售過(guò)氧乙酸原液含量35% (以重量計(jì))，無(wú)色液體，有強(qiáng)烈刺激性氣味。使用時(shí)應(yīng)用潔凈自來(lái)水稀釋成0.2%溶液，浸泡貯水桶內(nèi)壁2小時(shí)。該品對(duì)眼睛、皮膚、粘膜和上呼吸道有強(qiáng)烈刺激作用，頭痛、惡心且易燃，具爆炸性、強(qiáng)腐蝕性、強(qiáng)刺激性，可致人體灼傷，加熱至100°C即猛烈分解，遇火或受熱、受震都可起爆。與還原劑、促進(jìn)劑、有機(jī)物、可燃物等接觸會(huì)發(fā)生劇烈反應(yīng)；不可直接用手接觸，操作時(shí)應(yīng)帶膠皮手套、口罩和眼鏡，對(duì)金屬有腐蝕性，不可用于金屬器械的消毒；原液長(zhǎng)期放置可分解，注意保質(zhì)期，應(yīng)貯于塑料桶內(nèi)涼暗處保存；
[0036]接種用的蛇目圓篩藻預(yù)先進(jìn)行提純(本領(lǐng)域常規(guī)方法，只要可實(shí)現(xiàn)提純即可，例如凱氏提取法)，以確保接種時(shí)藻種處于生長(zhǎng)旺盛的指數(shù)生長(zhǎng)期；
[0037]各種營(yíng)養(yǎng)鹽要按配方中提供的順序加入，以免發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；
[0038]各種無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)鹽和維生素需預(yù)先配成母液且置于4°C冰箱冷藏保存?zhèn)溆茫胖脮r(shí)間不要超過(guò)45天；
[0039]鵝糞浸出液制備方法:把新鮮鵝糞、青草、豆餅、米糠、穎殼(五谷雜糧的外殼)和腐殖土按60: 10: 12: 15: 2: I的重量比例混合，攪拌均勻，裝入缸內(nèi)密閉進(jìn)行發(fā)酵，30天后，倒出，在干凈水泥地上，攤成薄層，晾干48小時(shí)，后取2公斤，置于塑料水桶，加自來(lái)水10公斤，攪拌均勻，用80目篩絹過(guò)濾，將清液煮沸5分鐘，冷卻，靜置24小時(shí)，取上清液，裝入試劑瓶，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰箱保存，備用；
[0040]鹿糞浸出液制備方法:取新鮮鹿糞50公斤，加入麩皮3公斤，玉米面I公斤，自來(lái)水4升，充分?jǐn)嚢?，堆成圓錐狀，自然發(fā)酵15天，后攤成薄層，陽(yáng)光下暴曬3天，后取3公斤放入水桶中，加入10升蒸餾水，充分?jǐn)噭颍o置，48小時(shí)后100目篩絹過(guò)濾，取濾液加熱，煮沸45分鐘，殺死其中的細(xì)菌、霉菌、病毒等，冷卻，沉淀24小時(shí)，取上清液，即得鹿糞浸出液，裝入磨口塞試劑瓶，密封，置于4°C冰箱或冷庫(kù)保存?zhèn)溆茫?br> [0041]海泥抽取液制備方法:取比較肥沃又不於黑的海泥，以1份泥加2份淡水，充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置1-2分鐘，取上層泥漿于鋁鍋中，按每1000毫升泥漿加I克NaOH的量加入NaOH，煮沸25分鐘。煮時(shí)需不斷攪拌均勻，煮后靜置24小時(shí)取上清液，密封，置于4°C冰箱或冷庫(kù)備用；
[0042]f/2 微量元素溶液配方=ZnSO4.4H20 23 毫克，MnCl2.4H20 178 毫克，CuSO4.5H2010 毫克，F(xiàn)eC6H5O7.5H20 3.9 克，Na2MoO4.2H20 7.3 毫克，CoCl2.6H20 12 毫克，Na2EDTA 4.35克，純水1000毫升；
[0043]f/2維生素溶液配方:維生素B12 0.5毫克，維生素B1 100毫克，維生素H 0.5毫克，純水1000毫升；
[0044]所用化學(xué)藥品純度均需化學(xué)純級(jí)別。
[0045]一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)基，配方如下:
[0046]肉聯(lián)廠廢水100毫升，乙二胺四乙酸鈉I毫克，羥基乙基乙烯二胺三醋酸2毫克，羧甲基纖維素鈉7毫克，海藻酸丙二醇酯2毫克，胰蛋白2毫克，鵝糞浸出液I毫升，鹿糞浸出液1.4毫升，人尿1.5毫升，土壤浸出液1.4毫升，海泥浸出液1.6毫升，f/2維生素溶液
1.2毫升，f/2微量元素溶液1.2毫升，葡萄糖10毫克，酵母抽取物7毫克，硅酸鉀2毫克，檸檬酸鐵銨4毫克，硝酸銨5毫克，谷朊粉3毫克，硬脂酰乳酸鈣3毫克，脂肪酶I毫克，黃原膠2毫克，蛋白胨2毫克，生物素I毫克，DL蘋果酸3毫克，碳酸氫鈉20毫克，組氨酸5毫克，脫氧膽酸鈉I毫克，山梨醇5毫克，甘露醇4毫克，臭氧消毒后的純凈海水1000毫升；
[0047]一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)方法，具體步驟如下:
[0048]培養(yǎng)容器為1000升貯水桶，市場(chǎng)有售，食品級(jí)高密度聚乙烯材料制成，無(wú)色或白色，有較好的透光性，以利藻類進(jìn)行光合作用?？拷撞坑幸凰堫^，水桶頂部有一圓形蓋子，上有旋絲，可旋轉(zhuǎn)而密封，蓋子打上2個(gè)孔，一個(gè)孔插入充氣管，另一個(gè)孔插入排氣管，充氣管和排氣管都是玻璃管，內(nèi)徑6毫米。將貯水桶洗刷干凈，后用蒸餾水潤(rùn)洗3遍，裝入權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基650升，充氣混合5分鐘，選擇生命力旺盛、無(wú)污染的蛇目圓篩藻接種，接種密度6X 104cell/mL ;蓋子上插入兩根干凈玻璃管,一根較長(zhǎng)，60厘米,頂端露出蓋子15厘米，下端通過(guò)料管與散氣石連接，用以充氣(散氣石的作用是形成很小的氣泡，避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細(xì)胞)；另一根較短，30厘米，兩端露出蓋子即可，用以排氣；兩根玻璃管同樣粗細(xì)；用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定；長(zhǎng)的玻璃管上端用料管與充氣泵相連，充入混合氣體，混合氣體成分和體積比例是空氣:純二氧化碳:臭氧:氨氣=92%: 6%: 1%: 1%;連續(xù)充氣，充氣量不宜太大，以藻細(xì)胞浮起不下沉即可；室外培養(yǎng)，太陽(yáng)光照射，最佳溫度25±2°C，最佳光照強(qiáng)度5000-10000Lux ;培養(yǎng)的前5天，水桶上方搭建一簡(jiǎn)易棚，上放置簾子遮擋光線，使光照強(qiáng)度維持在1500-2800LUX，避免強(qiáng)烈陽(yáng)光對(duì)細(xì)胞造成的光傷害?’第6天撤掉簾子，較強(qiáng)的光照有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖和高不飽和脂肪酸的合成；培養(yǎng)至第7天，停止充氣，拿開蓋子，補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基100升，以彌補(bǔ)蒸發(fā)掉的水分，蓋上蓋子，充氣，繼續(xù)培養(yǎng)，至第9天，蛇目圓篩藻密度增加至600X 104cell/mL，停止培養(yǎng)，從底部的水龍頭放出藻液，將培養(yǎng)容器洗刷干凈后，加入中藥消毒液消毒30分鐘，后進(jìn)入下一輪培養(yǎng)；
[0049]所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成:每100份85%乙醇中加入以下重量份的中藥材:白屈菜20~50份、忍冬藤10~20份、桉樹葉15~25份、桅子5~10份、甘草5~15份，防腐輔料1-3份；中藥消毒液制作方法:將新鮮白屈菜、忍冬藤、桉樹葉、甘草、山桅果切碎，于60-70°C下烘干，再用中藥材粉碎機(jī)分別粉碎至80目備用，用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的白屈菜120克，忍冬藤60克，桉樹葉葉60克，甘草30克，山桅果30克，防腐輔料6克，置于三角燒瓶中充分混合后，加入1000毫升85%乙醇，浸泡48小時(shí)，200篩絹過(guò)濾，將清液靜置沉淀32-36小時(shí)，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為復(fù)方中藥消毒液，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰箱備用。
[0050]優(yōu)選地，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用紫外燈消毒，消毒10-20分鐘。
[0051]優(yōu)選地，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓氮?dú)鈬娚湎?，消?-10分鐘，
[0052]優(yōu)選地，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒5-6分鐘，
[0053]優(yōu)選地，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后分兩個(gè)階段消毒，先使用高壓氮?dú)鈬娚湎荆?-3分鐘，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒2-3分鐘，消毒完畢后再進(jìn)行藻類培養(yǎng)。
[0054]優(yōu)選地，所述防腐輔料為食用鹽。
[0055]優(yōu)選地，所述防腐輔料為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物，混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5。
[0056]優(yōu)選地，所述防腐輔料組分為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物，混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5，所述防腐輔料的制備步驟為:用托盤天平分別稱取出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸，混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5，置于三角燒瓶中充分混合后，加入混合物30-50倍體積的85%乙醇，搖勻靜置沉淀12-15小時(shí)，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為防腐輔料，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于3-4°C冰箱備用。
[0057]最后應(yīng)說(shuō)明的是:以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對(duì)其限制；盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解:其依然可以對(duì)前述實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明實(shí)施例技術(shù)方案的精神和范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的培養(yǎng)基，其特征在于配方如下: 肉聯(lián)廠廢水100毫升，乙二胺四乙酸鈉I毫克，羥基乙基乙烯二胺三醋酸2毫克，羧甲基纖維素鈉7毫克，海藻酸丙二醇酯2毫克，胰蛋白2毫克，鵝糞浸出液I毫升，鹿糞浸出液1.4毫升，人尿1.5毫升，土壤浸出液1.4毫升，海泥浸出液1.6毫升，f/2維生素溶液1.2毫升，f/2微量元素溶液1.2毫升，葡萄糖10毫克，酵母抽取物7毫克，硅酸鉀2毫克，檸檬酸鐵銨4毫克，硝酸銨5毫克，谷朊粉3毫克，硬脂酰乳酸鈣3毫克，脂肪酶I毫克，黃原膠2毫克，蛋白胨2毫克，生物素I毫克，DL蘋果酸3毫克，碳酸氫鈉20毫克，組氨酸5毫克，脫氧膽酸鈉I毫克，山梨醇5毫克，甘露醇4毫克，臭氧消毒后的純凈海水1000毫升。
2.一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的方法，其特征在于具體步驟如下: 培養(yǎng)容器為1000升貯水桶，市場(chǎng)有售，食品級(jí)高密度聚乙烯材料制成，無(wú)色或白色，有較好的透光性，以利藻類進(jìn)行光合作用，靠近底部有一水龍頭，水桶頂部有一圓形蓋子，上有旋絲，可旋轉(zhuǎn)而密封，蓋子打上2個(gè)孔，一個(gè)孔插入充氣管，另一個(gè)孔插入排氣管，充氣管和排氣管都是玻璃管，內(nèi)徑6毫米，將貯水桶洗刷干凈，后用蒸餾水潤(rùn)洗3遍，裝入權(quán)利要求I所述的培養(yǎng)基650升，充氣混合5分鐘，選擇生命力旺盛、無(wú)污染的蛇目圓篩藻接種，接種密度6 X 104cel 1/mL,蓋子上插入兩根干凈玻璃管,一根較長(zhǎng)，60厘米,頂端露出蓋子15厘米，下端通過(guò)料管與散氣石連接，用以充氣，所述散氣石的作用是形成很小的氣泡，避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細(xì)胞；另一根較短，30厘米，兩端露出蓋子即可，用以排氣，兩根玻璃管同樣粗細(xì)，用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定，長(zhǎng)的玻璃管上端用料管與充氣泵相連，充入混合氣體，混合氣體成分和體積比例是空氣:純二氧化碳:臭氧:氨氣=92%: 6%: 1%: 1% ;連續(xù)充氣，充氣量不宜太大，以藻細(xì)胞浮起不下沉即可，室外培養(yǎng)，太陽(yáng)光照射，最佳溫度25±2°C，最佳光照強(qiáng)度5000-10000LUX，培養(yǎng)的前5天，水桶上方搭建一簡(jiǎn)易棚，上放置簾子遮擋光線，使光照強(qiáng)度維持在1500-2800LUX，避免強(qiáng)烈陽(yáng)光對(duì)細(xì)胞造成的光傷害，第6天撤掉簾子，較強(qiáng)的光照有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖和高不飽和脂肪酸的合成，培養(yǎng)至第7天，停止充氣，拿開蓋子，補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基100升，以彌補(bǔ)蒸發(fā)掉的水分，蓋上蓋子，充氣，繼續(xù)培養(yǎng)，至第9天，蛇目圓篩藻密度增加至600 X 104cell/mL,停止培養(yǎng)，從底部的水龍頭放出藻液，將培養(yǎng)容器洗刷干凈后，加入中藥消毒液消毒30分鐘，后進(jìn)入下一輪培養(yǎng)。 所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成:每100份85 %乙醇中加入以下重量份的中藥材:白屈菜20~50份、忍冬藤10~20份、按樹葉15~25份、桅子5~10份、甘草5~15份，防腐輔料1-3份沖藥消毒液制作方法:將新鮮白屈菜、忍冬藤、桉樹葉、甘草、山桅果切碎，于60-70°C下烘干，再用中藥材粉碎機(jī)分別粉碎至80目備用，用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的白屈菜120克，忍冬藤60克，桉樹葉葉60克，甘草30克，山桅果30克，防腐輔料6克，置于三角燒瓶中充分混合后，加入1000毫升85%乙醇，浸泡48小時(shí)，200篩絹過(guò)濾，將清液靜置沉淀32-36小時(shí)，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為復(fù)方中藥消毒液，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰箱備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的方法，其特征在于，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用紫外燈消毒，消毒10-20分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的方法，其特征在于，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓氮?dú)鈬娚湎?，消?-10分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的方法，其特征在于，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒5-6分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的方法，其特征在于，對(duì)選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后分兩個(gè)階段消毒，先使用高壓氮?dú)鈬娚湎?，消?-3分鐘，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒2-3分鐘，消毒完畢后再進(jìn)行藻類培養(yǎng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的方法，其特征在于:所述防腐輔料為食用鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的方法，其特征在于:所述防腐輔料為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物，混合比例為重量混合比.1:1:1: 0.5。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種利用肉聯(lián)廠廢水養(yǎng)殖蛇目圓篩藻的方法，其特征在于:所述防腐輔料組分為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物，混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5，所述防腐輔料的制備步驟為:用托盤天平分別稱取出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸，混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5，置于三角燒瓶中充分混合后，加入混合物30-50倍體積的85%乙醇，搖勻靜置沉淀12-15小時(shí)，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為防腐輔料，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于3-4°C冰箱備用。
【文檔編號(hào)】C12R1/89GK104017731SQ201410280627
【公開日】2014年9月3日 申請(qǐng)日期:2014年6月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月23日
【發(fā)明者】王培磊 申請(qǐng)人:臨沂大學(xué)