一種細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)，包括第一細(xì)胞工廠和連接在細(xì)胞工廠上的進(jìn)液管道、出液管道，所述進(jìn)液管道、出液管道可替換地與洗滌消化系統(tǒng)、接毒系統(tǒng)或收獲系統(tǒng)連接。本發(fā)明還提出應(yīng)用所述系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞工廠的洗滌消化、接毒或收獲的方法。本發(fā)明克服現(xiàn)有的應(yīng)用細(xì)胞工廠進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞及病毒培養(yǎng)時，操作時間長、操作繁瑣、批量大、易污染、細(xì)胞消化程度不均一等缺點，提供一種新的用于細(xì)胞工廠操作的管道連接系統(tǒng)，分別適用于細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)中的細(xì)胞傳代、接毒、收獲操作。該方法可以增加操作空間使用效率、縮短操作時間、且操作相對簡單，降低污染的風(fēng)險，從而提高細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)效率。
【專利說明】一種細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種病毒懸液的制備系統(tǒng)及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]細(xì)胞工廠為生物、醫(yī)藥行業(yè)常用的一種細(xì)胞培養(yǎng)工具，主要適合工業(yè)化的批量生產(chǎn)，如疫苗、單克隆抗體或者制藥工業(yè)。不僅適合貼壁細(xì)胞培養(yǎng)也適合懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，其培養(yǎng)模式與小規(guī)模的細(xì)胞瓶培養(yǎng)相同，因此可進(jìn)行放大培養(yǎng)。常用的細(xì)胞工廠規(guī)模有2層、4層、10層和40層。
[0003]現(xiàn)有技術(shù)常用的細(xì)胞工廠操作液體量小，操作相對簡單，通常使用簡單的管道體系利用重力差的方式通過細(xì)胞工廠的小口進(jìn)行液體的進(jìn)出。若采用這種方式在40層細(xì)胞工廠中使用，則需要多次的更換連接管道，不僅操作速度慢、在多個細(xì)胞工廠同時操作時容易出誤差，而且細(xì)胞工廠進(jìn)出口部位暴露于空氣中的時間較長，增加污染風(fēng)險。進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞及病毒培養(yǎng)時，操作時間長、操作繁瑣、批量大、易污染、細(xì)胞消化程度不均一等缺點尤為明顯。因此需要一種合理規(guī)范的管道連接系統(tǒng)，使得利用細(xì)胞工廠進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)、病毒接種和病毒收獲的工藝更加的簡便和安全。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，建立一套新型的用于細(xì)胞工廠操作的管道連接系統(tǒng)，能夠?qū)ο鄬焖俚倪M(jìn)行細(xì)胞工廠液體進(jìn)出，完成細(xì)胞消化、傳代、傳種及收獲等操作。
[0005]本發(fā)明的另一目的是提 出所述系統(tǒng)的應(yīng)用。
[0006]實現(xiàn)本發(fā)明上述目的的技術(shù)方案為:
[0007]一種細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)，包括第一細(xì)胞工廠I和連接在細(xì)胞工廠上的進(jìn)液管道2、出液管道3，所述進(jìn)液管道2、出液管道3可替換地與洗滌消化系統(tǒng)、接毒系統(tǒng)或收獲系統(tǒng)連接。
[0008]通過Y三通、T三通等連接件對硅膠管道進(jìn)行連接，可根據(jù)生產(chǎn)車間具體情況調(diào)節(jié)管道的連接位置和長度。
[0009]所述洗滌消化系統(tǒng)包括上清液罐4、緩沖液罐5和消化液罐6，所述緩沖液罐5和消化液罐6通過管道與所述出液管道3連接在三通7上，所述上清液罐4與進(jìn)液管道2連接；
[0010]所述接毒系統(tǒng)包括配液罐8、血清容器9、無血清液罐10、濾器11、無血清分散液罐12、懸液罐13 ;所述配液罐8通過管道、血清容器9通過管道連接在三通14的兩個接口上，所述三通14的第三個接口連接有管道并通過三通15與無血清分散液罐12連接；所述三通15的第三個接口連接濾器11 ;所述濾器11的出液管道通過三通16和管道分別連接有無血清分散液罐12和三通17，所述三通17另外兩個接口分別連接懸液罐13的進(jìn)口和進(jìn)液管道
2；[0011]所述收獲系統(tǒng)包括緩沖液罐5、裂解液罐18、第二細(xì)胞工廠24，所述緩沖液罐5和裂解液罐18與第二細(xì)胞工廠24通過管道連接在三通19上。所述第二細(xì)胞工廠24還連接有第二出液管道25。
[0012]其中，所述管道均為硅膠材質(zhì)。 [0013]其中，所述系統(tǒng)還包括可設(shè)置在管道上的3-12個夾緊裝置和1-3個蠕動泵。所述夾緊裝置可以為止血鉗或彈簧夾，可以夾在管道上任何位置。所述蠕動泵通過夾在軟管上的輥子的轉(zhuǎn)動驅(qū)動液體流動，可以夾在管道的任何位置。
[0014]其中，所述接毒系統(tǒng)中還包括設(shè)置在所述濾器11的出液管道上的三通20，所述三通20的第三個接口連接取樣裝置。
[0015]其中，所述接毒系統(tǒng)中還包括和第二細(xì)胞工廠24，所述懸液罐13的出口與第二細(xì)胞工廠24連接。
[0016]其中，所述接毒系統(tǒng)中還包括設(shè)置在懸液罐13進(jìn)口處的三通21，所述三通21的第三個接口連接毒種容器。
[0017]第一細(xì)胞工廠通常規(guī)模小于第二細(xì)胞工廠。說明書附圖2、3中，分別以4個離心管和14個離心管代表其規(guī)模的大小。
[0018]一種應(yīng)用本發(fā)明所述的細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)的方法，包括步驟:
[0019]I)洗滌消化:利用所述洗滌消化系統(tǒng)
[0020]①封閉出液管道3，將第一細(xì)胞工廠I內(nèi)的上清液泵入上清液罐4 ；
[0021]②封閉進(jìn)液管道2，將裝在緩沖液罐5內(nèi)的緩沖液泵入第一細(xì)胞工廠I進(jìn)行洗滌；
[0022]③洗滌完成后再將第一細(xì)胞工廠I內(nèi)的緩沖液排入緩沖液罐5 ；
[0023]④封閉緩沖液罐5連接在三通7上的管道，將消化液罐6內(nèi)消化液泵入細(xì)胞工廠I ;
[0024]⑤消化完成后再將消化液排回消化液罐6 ；
[0025]2)接毒:利用所述接毒系統(tǒng)
[0026]①無血清液罐10內(nèi)加入無血清生長液配制原料，封閉血清容器9連接在三通14上的管道，將無血清生長液配制原料泵入配液罐8 ；
[0027]②配制完成后，封閉無血清液罐10連接在三通15上的管道，無血清生長液配制原料從配液罐泵入濾器11過濾至無血清分散液罐12，留做分散細(xì)胞用。
[0028]③過濾完成后將無血清分散液罐12連接至三通16的管道封閉，將無血清分散液罐12連接至進(jìn)液管道2 ；
[0029]④過濾完成后，打開血清容器9連接在三通14上的管道，將血清泵入配液罐8，配制含血清生長液。
[0030]⑤配制完成后，含血清生長液通過濾器11過濾至懸液罐13中，液體流動動力來自配液罐內(nèi)的壓縮空氣(由水氣系統(tǒng)提供)，三通21連接的取樣口用于生長液的取樣、送檢；
[0031]⑥用無血清分散液罐12內(nèi)的無血清生長液分散細(xì)胞，分散后的細(xì)胞懸液泵入懸液罐13內(nèi)，毒種通過三通21加入至懸液罐13內(nèi)；
[0032]⑦懸液罐13內(nèi)的細(xì)胞懸液加入第二細(xì)胞工廠24中，液體流動動力來自懸液罐內(nèi)壓縮空氣(由水氣系統(tǒng)提供)。
[0033]3)收獲:利用所述收獲系統(tǒng)[0034]①將細(xì)胞工廠I內(nèi)的上清液通過出液管道3排出，然后封閉第二出液管道25，將所述緩沖液罐5內(nèi)的緩沖液泵入第二細(xì)胞工廠24進(jìn)行洗滌；
[0035]②洗滌完成后再通過第二出液管道25將緩沖液排出；
[0036]③向第二細(xì)胞工廠24內(nèi)加入裂解液。
[0037]其中，所述封閉，是用夾緊裝置夾在管道上，實現(xiàn)管道的封閉。例如止血鉗夾在軟管上，軟管內(nèi)的液體就不再流動。
[0038]其中，所述泵入，是將蠕動泵設(shè)置在管道上，具體地是將管道夾在蠕動泵泵頭上，通過操作螺動泵實現(xiàn)管道內(nèi)正向或反向的流動。
[0039]其中，所述2)接毒步驟中還包括對濾器11的出液取樣檢測的步驟；所述3)收獲中還包括緩沖液取樣檢測的步驟。
[0040]本發(fā)明的有益技術(shù)效果在于:
[0041]本發(fā)明克服現(xiàn)有的應(yīng)用細(xì)胞工廠進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞及病毒培養(yǎng)時，操作時間長、操作繁瑣、批量大、易污染、細(xì)胞消化程度不均一等缺點，提供一種新的用于細(xì)胞工廠操作的管道連接系統(tǒng)，分別適用于細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)中的細(xì)胞傳代、接毒、收獲操作。該方法可以增加操作空間使用效率、縮短操作時間、且操作相對簡單，降低污染的風(fēng)險，從而提高細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)效率。
[0042]本發(fā)明提出的管道連接系統(tǒng)通過Y三通、T三通等連接件對硅膠管道進(jìn)行連接，可根據(jù)生產(chǎn)車間具體情況調(diào)節(jié)管道長度，此外，也可根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模調(diào)整細(xì)胞工廠操作數(shù)量，為I~20個。連接細(xì)胞工廠接頭和溶液接頭可根據(jù)工序需要加減(控制范圍I~20個)。可操作CFlO (10層細(xì)胞工廠)、CF40 (40層細(xì)胞工廠)、CF2 (2層細(xì)胞工廠)。各管道的長短根據(jù)車間操作空間設(shè)計，有一定長度`限制，應(yīng)便于操作。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0043]圖1為細(xì)胞工廠和洗滌消化管道系統(tǒng)組合圖。
[0044]圖2為細(xì)胞工廠和接毒管道系統(tǒng)組合圖。
[0045]圖3為細(xì)胞工廠和收獲管道系統(tǒng)組合圖。
[0046]圖中，I為細(xì)胞工廠,2為進(jìn)液管道,3為出液管道,4為上清液罐,5緩沖液罐,6為消化液罐，7為Y三通,8為配液罐,9為血清容器，10為無血清原料液罐，11為濾器，12為無血清分散液罐，13為含血清生長液罐，14為三通，15、16、17為Y三通，18為裂解液罐，19、20,21為Y三通，22、23為取樣口，24為第二細(xì)胞工廠，25為第二出液管道。
【具體實施方式】
[0047]現(xiàn)以以下最佳實施例來說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。
[0048]實施例1:細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)
[0049]包括細(xì)胞工廠I和連接在細(xì)胞工廠上的進(jìn)液管道2、出液管道3,所述進(jìn)液管道2、出液管道3可替換地與洗滌消化系統(tǒng)(圖1)、接毒系統(tǒng)(圖2)或收獲系統(tǒng)(圖3)連接；
[0050]I)洗滌消化系統(tǒng)包括上清液罐4、緩沖液罐5和消化液罐6，所述緩沖液罐5和消化液罐6通過管道與所述出液管道3連接在三通7上，所述上清液罐4與進(jìn)液管道2連接；[0051]2)所述接毒系統(tǒng)包括配液罐8、血清容器9、無血清液罐10、濾器11、無血清分散液罐12和懸液罐13、第二細(xì)胞工廠24 ;所述配液罐8通過管道、血清容器9通過管道連接在三通14的兩個接口上，所述三通14的第三個接口連接有管道并通過三通15與無血清分散液罐12連接；所述三通15的第三個接口連接濾器11 ;所述濾器11的出液管道通過三通16和管道分別連接有無血清分散液罐12和三通17，所述三通17另外兩個接口分別連接懸液罐13的進(jìn)口和出液管道3 ;所述懸液罐13的出口與進(jìn)液管2連接。濾器11的出液管道上設(shè)置有三通20，三通20的第三個接口用于取樣。懸液罐13進(jìn)口處設(shè)置有三通21，三通21的第三個接口連接毒種容器。[0052]3)所述收獲系統(tǒng)包括緩沖液罐5、第二細(xì)胞工廠24、第二出液管道25、裂解液罐18，所述緩沖液罐5和裂解液罐18、第二細(xì)胞工廠24通過管道連接在三通19上。
[0053]本實施例中管道均為硅膠材質(zhì)。
[0054]本系統(tǒng)還配有多個止血鉗和2個蠕動泵。
[0055]本管道系統(tǒng)使用的三通為不銹鋼材質(zhì)，三通的三個接口可以接三個管道，管道上還可以視需要增加三通和更多管道。
[0056]實施例2
[0057]1.在洗滌和消化操作中使用的細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)(圖1)
[0058]①進(jìn)液管道2用止血鉗夾緊，出液管道3打開并連蠕動泵，連接第一細(xì)胞工廠I后，將VeiO細(xì)胞上清液排入50L上清液罐4內(nèi)。
[0059]②用止血鉗封閉出液管道3，進(jìn)液管道2處連接蠕動泵，4L的消化液罐6至三通7處的管道夾緊，緩沖液罐5的管道保持暢通，將裝在50L緩沖液罐5內(nèi)的PBS緩沖液加入第一細(xì)胞工廠I進(jìn)行洗滌；
[0060]③洗滌完成后再將第一細(xì)胞工廠I內(nèi)的PBS排入緩沖液灌5中；
[0061]④進(jìn)液管道2處仍連接螺動泵,緩沖液灌5的管道、進(jìn)液管道2的管道用止血鉗夾緊，消化液罐6至三通7處的管道保持暢通，向細(xì)胞工廠加入胰蛋白酶(消化液)進(jìn)行消化；
[0062]⑤消化完成后再將胰蛋白酶排回原4L的消化液罐6 ；
[0063]⑥細(xì)胞工廠I可從管道連接處斷開，放入恒溫室進(jìn)行消化。
[0064]2.在接毒操作中使用的細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)(如圖2)
[0065]①配制無血清生長液(含eagle’ s基質(zhì)液、碳酸氫鈉、谷氨酰胺、慶大霉素，含量為行業(yè)公知配方，按照說明說上要求配置完成)，配液罐8的出液管道連接蠕動泵，血清容器9的管道用止血鉗夾緊，無血清液罐10內(nèi)的無血清生長液配制原料(將除血清之外的溶液)打入配液罐8，液體流動動力為蠕動泵；
[0066]②配制完成后，將無血清液罐10的管道也用止血鉗夾緊，無血清生長液配制原料通過濾器11過濾至4個50L的無血清分散液罐12內(nèi)，留做分散細(xì)胞用；
[0067]③過濾完成后將與無血清分散液罐12連接的管道斷開，無血清生長液進(jìn)入第一細(xì)胞工廠I。
[0068]④過濾完成后，血清容器9的管道打開，配液罐8的管道處仍連接蠕動泵，將血清通過蠕動泵打入配液罐，配制含血清生長液；
[0069]⑤配制完成后，含血清生長液通過濾器11過濾至懸液罐13中，液體流動動力來自配液罐13內(nèi)的壓縮空氣，三通20的一個接口用做取樣口 22，將生長液取樣、送檢；[0070]⑥第一細(xì)胞工廠I產(chǎn)生的細(xì)胞用無血清生長液進(jìn)行分散，分散后的細(xì)胞懸液打入懸液te 13內(nèi)；
[0071]⑦分散完成后三通21的一個接口處用于加甲肝病毒TZ84株毒種。
[0072]⑧細(xì)胞懸液與毒種在懸液罐13內(nèi)進(jìn)行攪拌攪拌完成后，連接第二細(xì)胞工廠24，將接種后的細(xì)胞懸液加入第二細(xì)胞工廠24中，液體流動動力來自懸液罐13內(nèi)壓縮空氣。
[0073]3.在收獲操作中應(yīng)用細(xì)胞工廠管道系統(tǒng)(如圖3)
[0074]①第二細(xì)胞工廠24通過三通19連接PBS緩沖液罐5，三通19的另一個接口用于連接裂解液罐18，
[0075]②緩沖液灌4連接第二細(xì)胞工廠24的進(jìn)液管道2并先夾緊，連接完成后，將上清液通過第二出液管道25排出，隨后夾住第二出液管道25，進(jìn)行PBS洗滌；
[0076]③洗滌完成后再通過第二出液管道25將PBS排出。
[0077] ④三通19的另一個接口管道加入裂解液。
[0078]23為取樣口，用于PBS緩沖液配制過濾完成后的檢測取樣。
[0079]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和替換，這些改進(jìn)和替換也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)，其特征在于，包括第一細(xì)胞工廠(I)和連接在第一細(xì)胞工廠(I)上的進(jìn)液管道(2 )、出液管道(3 ),所述進(jìn)液管道(2 )、出液管道(3 )可替換地與洗滌消化系統(tǒng)、接毒系統(tǒng)或收獲系統(tǒng)連接； 所述洗滌消化系統(tǒng)包括上清液罐(4)、緩沖液罐(5)和消化液罐(6)，所述緩沖液罐(5)和消化液罐(6 )通過管道與所述出液管道(3 )連接在三通(7 )上，所述上清液罐(4 )與進(jìn)液管道(2)連接； 所述接毒系統(tǒng)包括配液罐(8)、血清容器(9)、無血清液罐(10)、濾器(11)、無血清分散液罐(12)、懸液罐(13);所述配液罐(8)通過管道、血清容器(9)通過管道連接在三通(14)的兩個接口上，所述三通(14)的第三個接口連接有管道并通過三通(15)與無血清分散液罐(12)連接；所述三通(15)的第三個接口連接濾器(11);所述濾器(11)的出液管道通過三通(16)和管道分別連接無血清分散液罐(12)和三通(17)，所述三通(17)另外兩個接口分別連接懸液罐(13)的進(jìn)口和進(jìn)液管道(2)； 所述收獲系統(tǒng)包括緩沖液罐(5)、裂解液罐(18)和第二細(xì)胞工廠(24)，所述緩沖液罐(5)和裂解液罐(18)與第二細(xì)胞工廠(24)通過管道連接在三通(19)上；所述第二細(xì)胞工廠還連接有第二出液管道(25 )。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的操作管道系統(tǒng)，其特征在于，所述管道均為硅膠材質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的操作管道系統(tǒng)，其特征在于，所述系統(tǒng)還包括可設(shè)置在管道上的3-12個夾緊裝置和1-3個蠕動泵。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的操作管道系統(tǒng)，其特征在于，所述接毒系統(tǒng)中還包括和第二細(xì)胞工廠(24)，所述懸液罐(13)的出口與第二細(xì)胞工廠(24)連接。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的操作管道系統(tǒng)，其特征在于，所述接毒系統(tǒng)中還包括設(shè)置在所述濾器(11)的出液管道上的三通(20)，所述三通(20)的第三個接口連接取樣裝置。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的操作管道系統(tǒng)，其特征在于，所述接毒系統(tǒng)中還包括設(shè)置在懸液罐(13 )進(jìn)口處的三通(21)，所述三通(21)的第三個接口連接毒種容器。
7.一種應(yīng)用權(quán)利要求1-6任一所述的細(xì)胞工廠操作管道系統(tǒng)的方法，其特征在于，包括步驟: 1)洗滌消化:利用所述洗滌消化系統(tǒng) ①封閉出液管道(3)，將細(xì)胞工廠(I)內(nèi)的上清液泵入上清液罐(4)； ②封閉進(jìn)液管道(2)，將裝在緩沖液罐(5)內(nèi)的緩沖液泵入細(xì)胞工廠(I)進(jìn)行洗滌； ③洗滌完成后再將細(xì)胞工廠(I)內(nèi)的緩沖液排入緩沖液罐(5)； ④封閉緩沖液罐(5)連接在三通(7)上的管道，將消化液罐(6)內(nèi)消化液泵入細(xì)胞工廠(I); ⑤消化完成后再將消化液排回消化液罐(6)； 2)接毒:利用所述接毒系統(tǒng) ①無血清液罐(10)內(nèi)加入無血清生長液配制原料，封閉血清容器(9)連接在三通(14)上的管道，將無血清生長液配制原料泵入配液罐(8)； ②配制完成后，封閉無血清液罐(10)連接在三通(15)上的管道，無血清生長液配制原料從配液罐泵入濾器(11)過濾至無血清分散液罐(12)； ③過濾完成后將無血清分散液罐(12)連接至三通(16)的管道封閉，將無血清分散液罐(12)連接至進(jìn)液管道(2); ④過濾完成后，打開血清容器(9)連接在三通(14)上的管道，將血清泵入配液罐(8)，配制含血清生長液； ⑤配制完成后，含血清生長液通過濾器(11)過濾至懸液罐(13)中； ⑥用無血清分散液罐(12)內(nèi)的無血清生長液分散細(xì)胞，分散后的細(xì)胞懸液泵入懸液罐(13)內(nèi)，毒種通過三通(21)加入至懸液罐(13)內(nèi)； ⑦懸液罐(13)內(nèi)的細(xì)胞懸液加入第二細(xì)胞工廠(24)中； 3)收獲:利用所述收獲系統(tǒng) ①將第二細(xì)胞工廠(24)內(nèi)的上清液通過第二出液管道(25)排出，然后封閉第二出液管道(25)，將所述緩沖液罐(5)內(nèi)的緩沖液泵入第二細(xì)胞工廠(24)進(jìn)行洗滌； ②洗滌完成后再通過第二出液管道(25)將緩沖液排出； ③向第二細(xì)胞工廠(24)內(nèi)加入裂解液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述封閉，是用夾緊裝置夾在管道上，實現(xiàn)管道的封閉。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述泵入，是將蠕動泵設(shè)置在管道上，通過操作蠕動泵實現(xiàn)管道內(nèi)正向或反向的流動。
10.根據(jù)權(quán)利要求7-9任一所述的方法，其特征在于，所述2)接毒中還包括對濾器(11)的出液取樣檢測的步驟；所述3 )收獲中還包括對緩沖液取樣檢測的步驟。
【文檔編號】C12N7/00GK103484368SQ201310404476
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月6日
【發(fā)明者】張穎, 李進(jìn)軍, 廉曉娟, 譚劍, 王楠, 王云鵬, 黃金鳳, 李靜, 尹衛(wèi)東 申請人:北京科興生物制品有限公司