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一種高保水性微生物培養(yǎng)基及其制備方法

文檔序號:412543閱讀:378來源:國知局
專利名稱:一種高保水性微生物培養(yǎng)基及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及微生物培養(yǎng)基及其制備方法,尤其涉及一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術(shù)
自德國細菌學(xué)家柯霍首次用明膠作為固體培養(yǎng)基凝固劑進行細菌劃線開始,凝固劑在細菌培養(yǎng)、分離、鑒定中擔(dān)當(dāng)重要的作用。隨后各親水性凝固劑相繼被發(fā)現(xiàn),溶于水后膨脹形成粘稠溶液或凝膠,并用于微生物培養(yǎng)基。目前,現(xiàn)有技術(shù)中細菌培養(yǎng)基大部分以瓊脂為基質(zhì),并添加一些細菌生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),然后在無菌實驗室中按照嚴(yán)格的無菌操作程序?qū)毦M行培養(yǎng)、觀察與測定。瓊脂是應(yīng)用最廣泛的凝固劑,但其仍存在問題I)凝膠水分容易揮發(fā);2)凝結(jié)水積聚在培養(yǎng)皿壁容易形成菌落間污染;3)冰凍易產(chǎn)生結(jié)晶或裂開,不利于菌種傳代和長期保藏;4)過分開采導(dǎo)致價格昂貴。
高吸水性樹脂是一種具有優(yōu)異的吸水性和保水性的新型功能高分子材料,能吸收自身重量幾百倍或數(shù)千倍的水而溶脹呈凝膠狀,在一定范圍的壓力下水也不會吸出,吸水后的樹脂凝膠物干燥后可以重新恢復(fù)其吸水性能,因而在許多領(lǐng)域都有重要的應(yīng)用。如在醫(yī)藥衛(wèi)生方面應(yīng)用于嬰兒紙尿布、婦女衛(wèi)生巾、藥物緩釋材料等,在工業(yè)及建筑業(yè)作為油水分離劑、干燥劑、脫臭劑、電纜及隧道建筑的阻水防水等,在農(nóng)業(yè)上用作土壤改良、沙漠綠化、無土栽培介質(zhì)、抗旱保水、農(nóng)藥化肥緩釋、食品及水果保鮮材料等。由于高吸水性樹脂具有這些優(yōu)點,故將其應(yīng)用于瓊脂培養(yǎng)基可以改善其凝膠水分容易揮發(fā);凝結(jié)水積聚在培養(yǎng)皿壁容易形成菌落間污染;冰凍易產(chǎn)生結(jié)晶或裂開,不利于菌種傳代和長期保藏的缺點;以及使成本降低30%。在高吸水性樹脂合成的現(xiàn)有技術(shù)中,多采用水溶液聚合法和反相懸浮聚合法。反相懸浮聚合法由于需要使用大量的有機溶劑,主要缺點在于合成工藝的復(fù)雜,成本的提高,以及對環(huán)境的污染。而水溶液聚合的方法無需有機溶劑是一種環(huán)保的合成方法,它多采用的是熱分解引發(fā)劑,因此在聚合反應(yīng)的過程中會產(chǎn)生大量的熱量。如果這些熱量來不及散發(fā),特別是在工業(yè)生產(chǎn)中,不可避免的會產(chǎn)生爆聚,不僅會造成產(chǎn)品質(zhì)量的下降甚至報廢,而且還容易釀成危險?,F(xiàn)有文獻中對于高吸水性樹脂合成的報道多為一步法,其中對反應(yīng)體系溫度的控制成為一大難點。而本專利依據(jù)聚合反應(yīng)動力學(xué)和熱力學(xué)的規(guī)律性,改善高吸水性樹脂的合成工藝,將反應(yīng)過程分成三步,可有效的避免反應(yīng)過程中爆聚反應(yīng)的發(fā)生,并提聞廣品的質(zhì)量和穩(wěn)定性。在一些無菌生產(chǎn)車間中,環(huán)境微生物的收集一般分為培養(yǎng)皿自然沉降法和利用采樣器自動收集法兩種方法。在培養(yǎng)皿自然沉降法的實施過程中,培養(yǎng)皿需敞開暴露在空氣中,但由于培養(yǎng)皿中的水分會隨著敞開時間的延長逐漸喪失,對沉降在培養(yǎng)基上的微生物的生長產(chǎn)生影響,使可生長的微生物數(shù)量減少,最終影響實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。在利用采樣器自動收集法的實施過程中,由于氣流的作用,同樣也會帶走培養(yǎng)基上的水分,最終也會使培養(yǎng)皿中的水分會逐漸喪失,最終影響實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
為了解決在微生物收集、培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基失水問題,延長微生物的培養(yǎng)時間,我們研發(fā)了一種微生物培養(yǎng)基用高吸水性樹脂。將其與瓊脂培養(yǎng)基進行復(fù)合共混,獲得了高吸水性樹脂與培養(yǎng)基進行復(fù)合的新工藝,并對培養(yǎng)基制備工藝進行改進,最終獲得了一種高保水性微生物培養(yǎng)基。由此樹脂為骨架配得的培養(yǎng)基除了具有和普通培養(yǎng)基一樣的微生物生長性和生物相容性,還具有吸水和保水性,以及適合的凝膠強度和透明性
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點,提供一種凝膠水分不容易揮發(fā);凝結(jié)水不易積聚在培養(yǎng)皿壁故而不易形成菌落間污染;冰凍不易產(chǎn)生結(jié)晶或裂開,有利于菌種傳代和長期保藏的具有高保水性的微生物培養(yǎng)基及其制備方法。為達到上述目的本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
具有高保水性的微生物培養(yǎng)基包括上下兩層,下層為含有高吸水性樹脂的樹脂凝膠層,上層為覆蓋在樹脂凝膠層上的普通瓊脂培養(yǎng)基層;或者僅為一層即含有高吸水性樹脂的供水和供營養(yǎng)物質(zhì)的樹脂凝膠層。所述的上層采用的普通瓊脂培養(yǎng)基為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基或霉菌培養(yǎng)基 其中,
細菌培養(yǎng)基的組成為
營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 18g/L 瓊脂20g/L
余量為水
放線菌培養(yǎng)基的組成為
可溶性淀粉20g/L
KNO3:lg/L
K2HPO4:O. 5g/L
MgSO4:O. 5g/L
NaCl:0.5g/L
FeSO4:微量
pH :7. 2 7. 4
瓊脂6. 67g/L
余量為水
霉菌培養(yǎng)基的組成為
鹿糖30g/L
NaN03:3g/L
MgS04:0. 5g/L
KCl:0.5g/L
FeS04:微量
K2HP04:lg/L
pH:6. 0 6. 5
瓊脂6. 67g/L余量為水
所述下層采用的樹脂凝膠組成為
高吸水性樹脂水 1:300 1:900 或者
營養(yǎng)成分 O. 5 5%
高吸水性樹脂O. I O. 9%
水94. I 99. 4%
或者
瓊脂粉O. 5 5%
水93. 5 99. 4%
高吸水性樹脂 O. I I. 5%
或者
營養(yǎng)成分O. 5 5%
瓊脂粉O. 5 5%
水88. 5 98. 9%
高吸水性樹脂 O. I I. 5%
所述僅為一層采用樹脂凝膠組成為
營養(yǎng)成分O. 5 5%
瓊脂粉O. 5 5%
水88. 5 98. 9%
高吸水性樹脂 O. I I. 5%
或者
營養(yǎng)成分O. 5 5%
高吸水性樹脂 O. I O. 9%
水94. I 99. 4%
所述營養(yǎng)成分為前面述及的各種培養(yǎng)基中除去瓊脂和水之后的營養(yǎng)物質(zhì)的總和。具有高保水性的微生物培養(yǎng)基的制備方法的步驟如下
I)聞吸水性樹脂的制備
(1)首先在冰水浴中將與單體質(zhì)量比為I: (Γι:ι的堿溶解在水中(或者在主要單體為非酸性單體時不加入堿);然后緩慢滴入單體將其配置成濃度為5 90%的單體溶液(此單體可以是一種,也可以是與主單體質(zhì)量比為O. 019Tl%的疏水性單體共同組成的共單體),保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與單體質(zhì)量比為1:1000(Γ :10的交聯(lián)劑和l:1000(Tl:10的引發(fā)劑,將其溶解在溶液中;
(2)將反應(yīng)容器放入70 90°C的水浴中加熱O.5 5min,同時磁力攪拌,或者將反應(yīng)容器放入微波爐中O. 5 lOmin,并旋轉(zhuǎn),均勻加熱,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫;
(3)放入40 80°C烘箱中反應(yīng)I 6h;
(4)再升高溫度至85 140°C,繼續(xù)反應(yīng)10 90min,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫,得到凝膠狀高吸水性樹脂;
(5)將凝膠狀高吸水性樹脂剪碎,再放入敞口容器中,于100 150°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
將質(zhì)量比為1:300 1:900的高吸水性樹脂和水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基 ;
或者按質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. I O. 9%的高吸水性樹脂和94. I 99. 4%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為下層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為上層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基;或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的瓊脂粉和93. 5 99. 4%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基;
或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. 5 5%的瓊脂粉和88. 5 98. 9%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基;
或者按照質(zhì)量百分比將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. 5 5%的瓊脂粉和88. 5 98. 9%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,得到具有高保水性的微生物培養(yǎng)基;
或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. I O. 9%的樹脂和94. I 99. 4%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,得到具有高保水性的微生物培養(yǎng)基。所述的普通瓊脂培養(yǎng)基為細菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基中的一種或幾種。所述的單體為丙烯酸、甲基丙烯酸、N-羥甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、甲基丙烯酸羥基乙酯、甲基丙烯酸-2-羥乙酯、甲基丙烯酸-2-羥丙酯、順丁烯二酸、N-乙烯基甲酰胺、4-乙烯基吡啶、丙烯酸正丁酯、丙烯酸-2-乙基己酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥丙酯、2-甲基丙烯酸乙酯、2-丙烯酰胺-2-甲基丙磺酸、丙烯酸十六酯、丙烯酸十八酯、甲基丙烯酸十八酯中的一種或多種。所述的交聯(lián)劑為含有兩個以上乙烯基的單體或官能度為兩個以上的多官能度化合物中的一種或多種;
所述的乙烯基的單體為N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺、聚乙二醇雙馬來酸酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸酯、二縮三乙二醇二丙烯酸酯、二乙(丙)二醇雙(甲基)丙烯酸酯、一縮二乙二醇雙(甲基)丙烯酸酯及不同分子量聚醚的雙丙烯酸酯、聚乙二醇雙(甲基)丙烯酸酯、新戊二醇雙(甲基)丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三(甲基)丙烯酸酯或1,6-己二醇雙(甲基)丙烯酸酯;所述的多官能度化合物為丙二醇、乙二醇、二甘醇、三甘醇、丙三醇、四甘醇、2,2,4-三甲基-1,3-戊二醇、1,2-環(huán)己烷、戊二醇、季戊四醇、山梨糖醇、二乙醇胺、三乙醇胺、聚乙二醇、聚丙三醇、聚丙二醇或乙二醇二縮水甘油醚。所述的引發(fā)劑為水溶性引發(fā)劑,水溶性引發(fā)劑為過硫酸鉀、過硫酸銨、過硫酸鈉、V-40 或 V-501。
所述的堿為氫氧化鈉、碳酸氫鈉或碳酸鈉中的一種或多種。本發(fā)明將高吸水性樹脂運用于微生物培養(yǎng)基的改性,并通過對培養(yǎng)基制備工藝的優(yōu)化,獲得一種高保水性微生物培養(yǎng)基相對于普通培養(yǎng)基可以改善其凝膠水分容易揮發(fā);凝結(jié)水積聚在培養(yǎng)皿壁容易形成菌落間污染;冰凍易產(chǎn)生結(jié)晶或裂開,不利于菌種傳代和長期保藏的缺點,以及降低產(chǎn)品的成本。解決了瓊脂培養(yǎng)基固有的缺點和微生物收集過程中的培養(yǎng)基失水問題。此微生物培養(yǎng)基除了具有和普通培養(yǎng)基一樣的微生物生長性和生物相容性,還具有吸水和保水性,以及適合的凝膠強度和透明性。


圖I是空白水樣在80°C烘箱中的保水性曲線 圖2是專利產(chǎn)品吸水后在80°C烘箱中的保水性曲線圖; 圖3是專利產(chǎn)品吸O. 9%鹽水后在80°C烘箱中的保水性曲線 圖4是專利產(chǎn)品吸O. 9%營養(yǎng)肉湯溶液后在80°C烘箱中的保水性曲線 圖5是TTC顯色試驗照片,其中左圖為專利產(chǎn)品,右圖為普通瓊脂培養(yǎng)基對照,由圖5說明TTC活性平板顯示和對照相近;
圖6實施例5的放線菌平皿形態(tài)照片;
圖7實施例5的真菌平皿形態(tài)照片;
圖8實施例5產(chǎn)品上生長的真菌孢子顯微形態(tài)照片;
圖9作為對照的普通培養(yǎng)基上生長的真菌孢子顯微形態(tài)照片;
圖10實施例5產(chǎn)品上生長的放線菌顯微形態(tài)照片;
圖11作為對照的普通培養(yǎng)基上生長的放線菌顯微形態(tài)照片。
具體實施例方式具有高保水性的微生物培養(yǎng)基包括上下兩層,下層為含有高吸水性樹脂的樹脂凝膠層,上層為覆蓋在樹脂凝膠層上的普通瓊脂培養(yǎng)基層;或者僅為一層即含有高吸水性樹脂的供水和供營養(yǎng)物質(zhì)的樹脂凝膠層。所述的上層采用的普通瓊脂培養(yǎng)基為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基或霉菌培養(yǎng)基 其中,
細菌培養(yǎng)基的組成為
營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 18g/L 瓊脂20g/L
余量為水
放線菌培養(yǎng)基的組成為
可溶性淀粉20g/L
KNO3:lg/L
K2HPO4:O. 5g/L
MgSO4:O. 5g/L
NaCl:0.5g/L
FeSO4:微量pH :7· 2 7· 4
瓊脂6. 67g/L
余量為水
霉菌培養(yǎng)基的組成為
鹿糖30g/L NaN03:3g/L
MgS04:0. 5g/L
KCl:0.5g/L
FeS04:微量
K2HP04:lg/L
pH:6. (Γ6. 5
瓊脂6. 67g/L
余量為水
所述下層采用的樹脂凝膠組成為
高吸水性樹脂水 1:300 1:900或者
營養(yǎng)成分 O. 5 5%
高吸水性樹脂O. I O. 9%
水94. I 99. 4%
或者
瓊脂粉O. 5 5%
水93. 5 99. 4%
高吸水性樹脂 O. I I. 5%
或者
營養(yǎng)成分O. 5 5%
瓊脂粉O. 5 5%
水88. 5 98. 9%
高吸水性樹脂 O. I I. 5%
所述僅為一層采用樹脂凝膠組成為
營養(yǎng)成分O. 5 5%
瓊脂粉O. 5 5%
水88. 5 98. 9%
高吸水性樹脂 O. I I. 5%
或者
營養(yǎng)成分O. 5 5%
高吸水性樹脂 O. I O. 9%
水94. I 99. 4%
具有高保水性的微生物培養(yǎng)基的制備方法的步驟如下I)聞吸水性樹脂的制備(1)首先在冰水浴中將與單體質(zhì)量比為I: (Γι:ι的堿溶解在水中(或者在主要單體為非酸性單體時不加入堿);然后緩慢滴入單體將其配置成濃度為5 90%的單體溶液(此單體可以是一種,也可以是與主單體質(zhì)量比為O. 019Tl%的疏水性單體共同組成的共單體),保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與單體質(zhì)量比為1:1000(Γ :10的交聯(lián)劑和l:1000(Tl:10的引發(fā)劑,將其溶解在溶液中;
(2)將反應(yīng)容器放入70 90°C的水浴中加熱O.5 5min,同時磁力攪拌,或者將反應(yīng)容器放入微波爐中O. 5 lOmin,并旋轉(zhuǎn),均勻加熱,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫;
(3)放入40 80°C烘箱中反應(yīng)I 6h;
(4)再升高溫度至85 140°C,繼續(xù)反應(yīng)10 90min,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫,得到凝膠狀高吸水性樹脂; (5)將凝膠狀高吸水性樹脂剪碎,再放入敞口容器中,于100 150°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
將質(zhì)量比為1:300 1:900的高吸水性樹脂和水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基;
或者按質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. I O. 9%的高吸水性樹脂和94. I 99. 4%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為下層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為上層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基;或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的瓊脂粉和93. 5 99. 4%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基;
或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. 5 5%的瓊脂粉和88. 5 98. 9%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基;
或者按照質(zhì)量百分比將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. 5 5%的瓊脂粉和88. 5 98. 9%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,得到具有高保水性的微生物培養(yǎng)基;
或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. I O. 9%的樹脂和94. I 99. 4%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,得到具有高保水性的微生物培養(yǎng)基。所述的普通瓊脂培養(yǎng)基為細菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基中的一種或幾種。所述的單體為丙烯酸、甲基丙烯酸、N-羥甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、甲基丙烯酸羥基乙酯、甲基丙烯酸-2-羥乙酯、甲基丙烯酸-2-羥丙酯、順丁烯二酸、N-乙烯基甲酰胺、4-乙烯基吡啶、丙烯酸正丁酯、丙烯酸-2-乙基己酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥丙酯、2-甲基丙烯酸乙酯、2-丙烯酰胺-2-甲基丙磺酸、丙烯酸十六酯、丙烯酸十八酯、甲基丙烯酸十八酯中的一種或多種。
所述的交聯(lián)劑為含有兩個以上乙烯基的單體或官能度為兩個以上的多官能度化合物中的一種或多種;
所述的乙烯基的單體為N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺、聚乙二醇雙馬來酸酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸酯、二縮三乙二醇二丙烯酸酯、二乙(丙)二醇雙(甲基)丙烯酸酯、一縮二乙二醇雙(甲基)丙烯酸酯及不同分子量聚醚的雙丙烯酸酯、聚乙二醇雙(甲基)丙烯酸酯、新戊二醇雙(甲基)丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三(甲基)丙烯酸酯或1,6-己二醇雙(甲基)丙烯酸酯;所述的多官能度化合物為丙二醇、乙二醇、二甘醇、三甘醇、丙三醇、四甘醇、2,2,4-三甲基-1,3-戊二醇、1,2-環(huán)己烷、戊二醇、季戊四醇、山梨糖醇、二乙醇胺、三乙醇胺、聚乙二醇、聚丙三醇、聚丙二醇或乙二醇二縮水甘油醚。所述的引發(fā)劑為水溶性引發(fā)劑,水溶性引發(fā)劑為過硫酸鉀、過硫酸銨、過硫酸鈉、V-40 或 V-501。所述的堿為氫氧化鈉、碳酸氫鈉或碳酸鈉中的一種或多種。 實施例I :
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與丙烯酸質(zhì)量比為310的氫氧化鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸將其配置成濃度為30%的丙烯酸溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與丙烯酸質(zhì)量比為1:1000的N,N' -亞甲基雙丙烯酰胺和1:1000的過硫酸鉀,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入70°C的水浴中加熱5min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中6min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入45°C烘箱中反應(yīng)6h ;
④再升高溫度至85°C,繼續(xù)反應(yīng)30min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于100°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用;
此合成樹脂的吸純水率為668g/g,吸O. 9%鹽水率為106g/g,吸O. 9%營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基溶液率為186g/g。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
將樹脂和水按照質(zhì)量比1:300配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后按照質(zhì)量百分比將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,制成具有上下兩層結(jié)構(gòu)的微生物培養(yǎng)基。實施例2
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與甲基丙烯酸質(zhì)量比為2:5的氫氧化鈉溶解在水中;然后緩慢滴入甲基丙烯酸將其配置成濃度為40%的甲基丙烯酸溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與甲基丙烯酸質(zhì)量比為1:500的聚乙二醇雙馬來酸酯和1:500的過硫酸鉀,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入75°C的水浴中加熱4min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中5min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入50°C烘箱中反應(yīng)5h;
④再升高溫度至87V,繼續(xù)反應(yīng)50min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于110°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。此合成樹脂的吸純水率為789g/g,吸O. 9%鹽水率為113g/g,吸O. 9%營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基溶液率為198g/g。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將1%的營養(yǎng)成分、O. 2%的樹脂和98. 8%的水配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后按照質(zhì)量百分比將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為 頂層,制成具有上下兩層結(jié)構(gòu)的微生物培養(yǎng)基。實施例3
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為I:2的氫氧化鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的甲基丙烯酸二甲氨基乙酯組成的共單體,將其配置成濃度為50%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為3:1000的三羥甲基丙烷三丙烯酸酯和3:1000的過硫酸鉀,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌。或者將反應(yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入60°C烘箱中反應(yīng)4h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)60min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于120°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。此合成樹脂的吸純水率為845g/g,吸O. 9%鹽水率為117g/g,吸O. 9%營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基溶液率為203g/g。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將2%的瓊脂粉和97%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入1%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,制成具有上下兩層結(jié)構(gòu)的微生物培養(yǎng)基。實施例4
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為I:2的氫氧化鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的甲基丙烯酸二甲氨基乙酯組成的共單體,將其配置成濃度為50%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為3:1000的三羥甲基丙烷三丙烯酸酯和3:1000的過硫酸鉀,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌。或者將反應(yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入60°C烘箱中反應(yīng)4h;
④再升高溫度至90°C, 繼續(xù)反應(yīng)60min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于120°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將2%的瓊脂粉和97%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入1%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,制成具有上下兩層結(jié)構(gòu)的微生物培養(yǎng)基。實施例5
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為3:5的氫氧化鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的甲基丙烯酸羥基乙酯組成的共單體,將其配置成濃度為60%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:250的二縮三乙二醇二丙烯酸酯和1:250的過硫酸鉀,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入70°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至85°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于100°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。此合成樹脂的吸純水率為912g/g,吸O. 9%鹽水率為124g/g,吸O. 9%營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基溶液率為210g/g。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將I. 5%的營養(yǎng)成分、I. 8%的瓊脂粉和96%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. 7%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,制成具有上下兩層結(jié)構(gòu)的微生物培養(yǎng)基。實施例6:
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為3:5的氫氧化鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的甲基丙烯酸羥基乙酯組成的共單體,將其配置成濃度為60%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:250的二縮三乙二醇二丙烯酸酯和1:250的過硫酸鉀,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入70°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至85°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于100°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將I. 5%的營養(yǎng)成分、I. 8%的瓊脂粉和96%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. 7%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅 菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,制成具有上下兩層結(jié) 構(gòu)的微生物培養(yǎng)基。 實施例7
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的氫氧化鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的甲基丙烯酸-2-羥丙酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺和1:200的過硫酸鉀,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。此合成樹脂的吸純水率為865g/g,吸O. 9%鹽水率為127g/g,吸O. 9%營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基溶液率為206g/g。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將2. 5%的營養(yǎng)成分、3%的瓊脂粉和93. 5%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入1%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為微生物培養(yǎng)基。將培養(yǎng)基用于微生物的培養(yǎng),并將其與真菌培養(yǎng)基進行菌落數(shù)量對比,結(jié)果如表所示。
II_.菌cfu/mL_I α =甘士 W
I_ 專利產(chǎn)品真菌培養(yǎng)基—
i 酵母菌丨 IlXlOe I 1.2X10^ ■NS[TTC平板釀酒酵母菌落計數(shù)結(jié)果,差異顯著水平進行t檢測,NS不顯著,P>0. 05 實施例8
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的氫氧化鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的甲基丙烯酸-2-羥丙酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺和1:200的過硫酸鉀,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。
2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將2. 5%的營養(yǎng)成分、3%的瓊脂粉和93. 5%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入1%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為微生物培養(yǎng)基。實施例9
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為4:5的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的4-乙烯基吡啶將其配置成濃度為80%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為3:1000的二乙二醇雙甲基丙烯酸酯和3:1000的過硫酸銨,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱4min,同時磁力攪拌。或者將反應(yīng)容器放入微波爐中6min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至88°C,繼續(xù)反應(yīng)80min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于120°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。此合成樹脂的吸純水率為1135g/g,吸O. 9%鹽水率為118g/g,吸O. 9%營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基溶液率為196g/g。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將4%的營養(yǎng)成分、O. 5%的樹脂和95. 5%的水配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為微生物培養(yǎng)基。實施例10
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為4:5的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的4-乙烯基吡啶將其配置成濃度為80%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為3:1000的二乙二醇雙甲基丙烯酸酯和3:1000的過硫酸銨,將其溶解在溶液中;②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱4min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中6min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至88°C,繼續(xù)反應(yīng)80min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于120°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將4%的營養(yǎng)成分、O. 5%的樹脂和95. 5%的水配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為微生物培養(yǎng)基。 實施例11
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為I:10的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比0.01%的丙烯酸正丁酯組成的共單體,將其配置成濃度為5%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:10的一縮二乙二醇雙甲基丙烯酸酯和1:10的過硫酸銨,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入90°c的水浴中加熱5min,同時磁力攪拌,或者將反應(yīng)容器放入微波爐中l(wèi)Omin,并旋轉(zhuǎn),均勻加熱,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫;
③放入80°C烘箱中反應(yīng)6h;
④再升高溫度至140°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫,得到凝膠狀高吸水性樹脂;
⑤將凝膠狀高吸水性樹脂剪碎,再放入敞口容器中,于150°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
將質(zhì)量比為1:300的高吸水性樹脂和水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將真菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例12
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為I:10的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的丙烯酸正丁酯組成的共單體,將其配置成濃度為5%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:10的一縮二乙二醇雙甲基丙烯酸酯和1:10的過硫酸銨,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入90°c的水浴中加熱5min,同時磁力攪拌,或者將反應(yīng)容器放入微波爐中l(wèi)Omin,并旋轉(zhuǎn),均勻加熱,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫;
③放入80°C烘箱中反應(yīng)6h;
④再升高溫度至140°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫,得到凝膠狀高吸水性樹脂;
⑤將凝膠狀高吸水性樹脂剪碎,再放入敞口容器中,于150°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
將質(zhì)量比為1:300的高吸水性樹脂和水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將真菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微 生物培養(yǎng)基。實施例13
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為I:1的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的丙烯酸-2-乙基己酯組成的共單體,將其配置成濃度為90%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:10000的聚乙二醇雙甲基丙烯酸酯和1:10000的過硫酸銨,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入70°C的水浴中加熱O.5min,同時磁力攪拌,或者將
反應(yīng)容器放入微波爐中O. 5min,并旋轉(zhuǎn),均勻加熱,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室
溫;
③放入40°C烘箱中反應(yīng)Ih;
④再升高溫度至85°C,繼續(xù)反應(yīng)lOmin,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫,得到凝膠狀高吸水性樹脂;
⑤將凝膠狀高吸水性樹脂剪碎,再放入敞口容器中,于100°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
將質(zhì)量比為1:900的高吸水性樹脂和水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將真菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例14
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為I:1的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的丙烯酸-2-乙基己酯組成的共單體,將其配置成濃度為90%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:10000的聚乙二醇雙甲基丙烯酸酯和1:10000的過硫酸銨,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入70°C的水浴中加熱O.5min,同時磁力攪拌,或者將
反應(yīng)容器放入微波爐中O. 5min,并旋轉(zhuǎn),均勻加熱,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室
溫;
③放入40°C烘箱中反應(yīng)Ih;
④再升高溫度至85°C,繼續(xù)反應(yīng)lOmin,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫,得到凝膠狀高吸水性樹脂;
⑤將凝膠狀高吸水性樹脂剪碎,再放入敞口容器中,于100°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。
2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
將質(zhì)量比為1:900的高吸水性樹脂和水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將真菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例15
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的丙烯酸十六酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的新戊二醇雙甲基丙烯酸酯和1:200的過硫酸鈉,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波 爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按質(zhì)量百分比計,將O. 5%的營養(yǎng)成分、O. 1%的高吸水性樹脂和99. 4%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為下層,之后將真菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為上層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例16
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的丙烯酸十六酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的新戊二醇雙甲基丙烯酸酯和1:200的過硫酸鈉,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按質(zhì)量百分比計,將O. 5%的營養(yǎng)成分、O. 1%的高吸水性樹脂和99. 4%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為下層,之后將真菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為上層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例17 I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的丙烯酸十八酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯和1:200的過硫酸鈉,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌。或者將反應(yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按質(zhì)量百分比計,將5%的營養(yǎng)成分、O. 9%的高吸水性樹脂和94. 1%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為下層,之后將放線菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為上層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例18
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸氫鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的丙烯酸十八酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯和1:200的過硫酸鈉,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按質(zhì)量百分比計,將5%的營養(yǎng)成分、O. 9%的高吸水性樹脂和94. 1%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為下層,之后將放線菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為上層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例19
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的甲基丙烯酸十八酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的1,6-己二醇雙(甲基)丙烯酸酯和1:200的過硫酸鈉,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備 按照質(zhì)量百分比計,將O. 5%的瓊脂粉和99. 4%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. 1%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將放線菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例20
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的甲基丙烯酸十八酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的1,6_己二醇雙(甲基)丙烯酸酯和1:200的過硫酸鈉,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌。或者將反應(yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比計,將O. 5%的瓊脂粉和99. 4%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. 1%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將放線菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例21
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的丙烯酸-2-乙基己酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的丙三醇和1:200的V-40,將其溶解在溶液中;②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比計,將5%的瓊脂粉和93. 5%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將放線菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高 保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例22
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸鈉溶解在水中;然后緩慢滴入丙烯酸及相對于丙烯酸質(zhì)量比1%的丙烯酸-2-乙基己酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的丙三醇和1:200的V-40,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌。或者將反應(yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比計,將5%的瓊脂粉和93. 5%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將放線菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例23
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先將N-羥甲基丙烯酰胺配置成濃度為70%的N-羥甲基丙烯酰胺溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與N-羥甲基丙烯酰胺質(zhì)量比為1:200的N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺和1:200的V-40,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比計,將O. 5%的營養(yǎng)成分、O. 5%的瓊脂粉和98. 9%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. 1%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例24
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先將丙烯酰胺及相對于丙烯酰胺質(zhì)量比O.01%的N-乙烯基甲酰胺配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺和1:200的V-40,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
或者按照質(zhì)量百分比計,將5%的營養(yǎng)成分、5%的瓊脂粉和88. 5%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例25
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先將丙烯酰胺及相對于丙烯酰胺質(zhì)量比1%的N-乙烯基甲酰胺配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的N,N' -亞甲基雙丙烯酰胺和1:200的V-40,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
或者按照質(zhì)量百分比計,將5%的營養(yǎng)成分、5%的瓊脂粉和88. 5%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將細菌培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例26
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸鈉溶解在水中;然后緩慢滴入甲基丙烯酸及相對于甲基丙烯酸質(zhì)量比O. 01%的甲基丙烯酸-2-羥丙酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的乙二醇和1:200的V-501,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫; ③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將5%的營養(yǎng)成分、5%的瓊脂粉和88. 5%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,得到具有高保水性的微生物培養(yǎng)基。實施例27
I)聞吸水性樹脂的制備
①首先在冰水浴中將與共單體總量質(zhì)量比為7:10的碳酸鈉溶解在水中;然后緩慢滴入甲基丙烯酸及相對于甲基丙烯酸質(zhì)量比1%的甲基丙烯酸-2-羥丙酯組成的共單體,將其配置成濃度為70%的共單體溶液,保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與共單體總量質(zhì)量比為1:200的乙二醇和1:200的V-501,將其溶解在溶液中;
②將反應(yīng)容器放入80°C的水浴中加熱3min,同時磁力攪拌?;蛘邔⒎磻?yīng)容器放入微波爐中3min,并讓之旋轉(zhuǎn),均勻加熱。反應(yīng)結(jié)束后立即取出,然后將其放置于室溫處,將體系溫度緩慢降至室溫;
③將其放入80°C烘箱中反應(yīng)3h;
④再升高溫度至90°C,繼續(xù)反應(yīng)90min,結(jié)束反應(yīng),將其取出,降至室溫;
⑤將反應(yīng)結(jié)束后得到的凝膠取出,剪碎,再放入敞口容器中,于115°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用。2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備
按照質(zhì)量百分比將5%的營養(yǎng)成分、5%的瓊脂粉和88. 5%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,得到具有高保水性的微生物培養(yǎng)基。專利產(chǎn)品應(yīng)用結(jié)果如下
I抑菌試驗根據(jù)衛(wèi)生部頒布的《消毒技術(shù)規(guī)范》,選擇大腸桿菌(8099)、金黃色葡萄球菌ATCC6538、白色念珠菌ATCC10231和黑曲霉ATCC16404四種代表菌株做抑菌試驗,考察專利產(chǎn)品的抑菌性。試驗結(jié)果這些菌種在專利產(chǎn)品周圍均能正常生長,無抑菌環(huán)出現(xiàn),并且菌落也可生長。根據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范》,由試驗結(jié)果可知,專利產(chǎn)品對微生物的生長無抑制作用。2 pH值測定
將高吸水性樹脂加 入到去離子水中吸飽水后,pH為5. 4 ;將高吸水性樹脂加入到O. 9%的鹽水中吸飽水后,pH為5. 6 ;將高吸水性樹脂加入到O. 9%的營養(yǎng)肉湯溶液中吸飽水后,pH 為 6. 2。3按照實施例I,吸保水后的聞吸水性樹脂專利廣品在80 C供箱中的保水性
4微生物唯一碳源生長試驗
大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌在葡萄糖基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)2天后,菌落生長良好,白色念珠菌、釀酒酵母、黑曲霉和桔青霉略有生長。5天時白色念珠菌、釀酒酵母、黑曲霉和桔青霉在葡萄糖基本培養(yǎng)基均長出較好菌落。而在專利產(chǎn)品為唯一碳源的基本培養(yǎng)基上,至培養(yǎng)5天時,上述7種菌仍未生長。結(jié)果顯示,在短時間內(nèi)專利產(chǎn)品不能被微生物分解,成為微生物生長的碳源。 5 TTC顯色菌落觀察(實施例5 )
TTC配方
葡萄糖10g/L
蛋白胨2g/L
酵母膏I. 5g/L
KH2P04 lg/L
MgS04 O. 4g/L pH 5. 5 5. 7
瓊脂6. 67g/L
樹脂6. 67g/L。
權(quán)利要求
1.一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基,其特征在于包括上下兩層,下層為含有高吸水性樹脂的樹脂凝膠層,上層為覆蓋在樹脂凝膠層上的普通瓊脂培養(yǎng)基層;或者僅為一層即含有高吸水性樹脂的樹脂凝膠層。
2.如權(quán)利要求I所述的一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基,其特征在于 所述的上層采用的普通瓊脂培養(yǎng)基為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基或霉菌培養(yǎng)基 其中, 細菌培養(yǎng)基的組成為 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 18g/L 瓊脂20g/L 余量為水 放線菌培養(yǎng)基的組成為 可溶性淀粉20g/L KNO3:lg/L K2HPO4:O. 5g/L MgSO4:O. 5g/L NaCl:0.5g/L FeSO4:微量 pH :7. 2 7. 4 瓊脂6. 67g/L 余量為水 霉菌培養(yǎng)基的組成為 鹿糖30g/L NaN03:3g/L MgS04:0. 5g/L KCl:0.5g/L FeS04:微量 K2HP04:lg/L pH:6. 0 6. 5 瓊脂6. 67g/L 余量為水 所述下層采用的樹脂凝膠組成為 高吸水性樹脂水 1:300 1:900 或者營養(yǎng)成分 O. 5 5% 高吸水性樹脂O. I O. 9% 水94. I 99. 4% 或者 瓊脂粉O. 5 5%水93. 5 99. 4% 高吸水性樹脂O. I I. 5% 或者 營養(yǎng)成分O. 5 5% 瓊脂粉O. 5 5% 水88. 5 98. 9% 高吸水性樹脂O. I I. 5% 所述僅為一層采用樹脂凝膠組成為 營養(yǎng)成分O. 5 5% 瓊脂粉O. 5 5% 水88. 5 98. 9% 高吸水性樹脂 O. I I. 5% 或者 營養(yǎng)成分O. 5 5% 高吸水性樹脂 O. I O. 9% 水94. I 99. 4% 所述營養(yǎng)成分為前面述及的各種培養(yǎng)基中除去瓊脂和水之后的營養(yǎng)物質(zhì)的總和。
3.一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于它的步驟如下 1)聞吸水性樹脂的制備 (1)首先在冰水浴中將與單體質(zhì)量比為I的堿溶解在水中(或者在主要單體為非酸性單體時不加入堿);然后緩慢滴入單體將其配置成濃度為5 90%的單體溶液(此單體可以是一種,也可以是與主單體質(zhì)量比為O. 019Tl%的疏水性單體共同組成的共單體),保持體系在一定的溫度中,不使局部溫度過高;再加入與單體質(zhì)量比為1:1000(Γ :10的交聯(lián)劑和l:1000(Tl:10的引發(fā)劑,將其溶解在溶液中; (2)將反應(yīng)容器放入70 90°C的水浴中加熱O.5 5min,同時磁力攪拌,或者將反應(yīng)容器放入微波爐中O. 5 lOmin,并旋轉(zhuǎn),均勻加熱,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫; (3)放入40 80°C烘箱中反應(yīng)I 6h; (4)再升高溫度至85 140°C,繼續(xù)反應(yīng)10 90min,反應(yīng)結(jié)束后立即取出,緩慢降至室溫,得到凝膠狀高吸水性樹脂; (5)將凝膠狀高吸水性樹脂剪碎,再放入敞口容器中,于100 150°C烘箱中烘干,得到高吸水性樹脂,經(jīng)粉碎機粉碎,180目過篩,備用; 2)高保水性微生物培養(yǎng)基的制備 將質(zhì)量比為1:300 1:900的高吸水性樹脂和水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基; 或者按質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. I O. 9%的高吸水性樹脂和94. I .99. 4%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為下層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為上層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基; 或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的瓊脂粉和93. 5 99. 4%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基; 或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. 5 5%的瓊脂粉和88. 5 98. 9%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,作為底層,之后將普通瓊脂培養(yǎng)基滅菌后覆蓋在樹脂凝膠上作為頂層,得到具有上下兩層結(jié)構(gòu)的高保水性的微生物培養(yǎng)基; 或者按照質(zhì)量百分比將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. 5 5%的瓊脂粉和88. 5 98. 9%的水加熱配置成瓊脂溶液后,保持溫度的狀態(tài)下加入O. I I. 5%的樹脂,繼續(xù)加熱,配置成凝膠滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,得到具有高保水性的微生物培養(yǎng)基; 或者按照質(zhì)量百分比計,將O. 5 5%的營養(yǎng)成分、O. I O. 9%的樹脂和94. I 99. 4%的水配置成樹脂凝膠,滅菌后置于培養(yǎng)皿中,鋪平,得到具有高保水性的微生物培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于所述的普通瓊脂培養(yǎng)基為細菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基中的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于所述的單體為丙烯酸、甲基丙烯酸、N-羥甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、甲基丙烯酸羥基乙酯、甲基丙烯酸-2-羥乙酯、甲基丙烯酸-2-羥丙酯、順丁烯二酸、N-乙烯基甲酰胺、4-乙烯基吡啶、丙烯酸正丁酯、丙烯酸-2-乙基己酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥丙酯、2-甲基丙烯酸乙酯、2-丙烯酰胺-2-甲基丙磺酸、丙烯酸十六酯、丙烯酸十八酯、甲基丙烯酸十八酯中的一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于所述的交聯(lián)劑為含有兩個以上乙烯基的單體或官能度為兩個以上的多官能度化合物中的一種或多種; 所述的乙烯基的單體為N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺、聚乙二醇雙馬來酸酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸酯、二縮三乙二醇二丙烯酸酯、二乙(丙)二醇雙(甲基)丙烯酸酯、一縮二乙二醇雙(甲基)丙烯酸酯及不同分子量聚醚的雙丙烯酸酯、聚乙二醇雙(甲基)丙烯酸酯、新戊二醇雙(甲基)丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三(甲基)丙烯酸酯或1,6-己二醇雙(甲基)丙烯酸酯; 所述的多官能度化合物為丙二醇、乙二醇、二甘醇、三甘醇、丙三醇、四甘醇、2,2,4-三甲基-1,3-戊二醇、戊二醇、季戊四醇、山梨糖醇、二乙醇胺、三乙醇胺、聚乙二醇、聚丙三醇、聚丙二醇或乙二醇二縮水甘油醚。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于所述的引發(fā)劑為水溶性引發(fā)劑,水溶性引發(fā)劑為過硫酸鉀、過硫酸銨、過硫酸鈉、V-40或V-501。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于所述的堿為氫氧化鈉、碳酸氫鈉或碳酸鈉中的一種或多種。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有高保水性的微生物培養(yǎng)基及其制備方法。包括上下兩層,下層為含有高吸水性樹脂的樹脂凝膠層,上層為覆蓋在樹脂凝膠層上的普通瓊脂培養(yǎng)基層;或者僅為一層即含有高吸水性樹脂的樹脂凝膠層。本發(fā)明將高吸水性樹脂運用于微生物培養(yǎng)基的改性,并通過對培養(yǎng)基制備工藝的優(yōu)化,獲得的培養(yǎng)基相對于普通培養(yǎng)基改善其凝膠水分容易揮發(fā);凝結(jié)水積聚在培養(yǎng)皿壁容易形成菌落間污染;冰凍易產(chǎn)生結(jié)晶或裂開,不利于菌種傳代和長期保藏的缺點,降低產(chǎn)品的成本。解決了瓊脂培養(yǎng)基固有的缺點和微生物收集過程中的培養(yǎng)基失水問題。培養(yǎng)基除了具有和普通培養(yǎng)基一樣的微生物生長性和生物相容性,還具有吸水和保水性,以及適合的凝膠強度和透明性。
文檔編號C12N1/14GK102796686SQ20121028866
公開日2012年11月28日 申請日期2012年8月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月14日
發(fā)明者沈曉亮, 郭紅櫻, 陳歡, 葉俊英, 方序 申請人:浙江天科高新技術(shù)發(fā)展有限公司
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