專利名稱:瓊脂培養(yǎng)基及其制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種瓊脂培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,尤其是一種分離和鑒別腸道細菌的瓊脂培養(yǎng)基及其制作方法。
背景技術(shù):
目前市場上同類產(chǎn)品的作用主要在于鑒別腸道細菌,這個只是該產(chǎn)品其中一個指標之一,而該產(chǎn)品的另外一個重要指標為非發(fā)酵細菌能在該培養(yǎng)基上生長,這個是市場上同類產(chǎn)品做不到的或者是做到效果不明顯和顯色不容易鑒別的,該指標也是檢驗該產(chǎn)品的唯一標準。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種瓊脂培養(yǎng)基及其制作方法,提高了對非發(fā)酵細菌漏檢的現(xiàn)象。
為了達到上述設(shè)計目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下
一種瓊脂培養(yǎng)基,其組成成分及質(zhì)量數(shù)為每IOOOml營養(yǎng)液中蛋白胨17_23g、乳糖 7-13g、氯化鈉 4-6g、膽鹽 4-6g、中性紅 0. 04-0. 06g、瓊脂 13_17g。
優(yōu)選地,其組成成分及質(zhì)量數(shù)為每IOOOml營養(yǎng)液中蛋白胨20g、乳糖10g、氯化鈉5g、膽鹽5g、中性紅0. 05g、瓊脂15g。
優(yōu)選地,所述營養(yǎng)液的主要成分為氨基酸、維生素、生長因子。
一種瓊脂培養(yǎng)基的制作方法,包括以下步驟
1)將蛋白胨20g、乳糖10g、氯化鈉5g、膽鹽5g、瓊脂15g溶解在IOOOml營養(yǎng)液中;
2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;
3)調(diào)節(jié)pH至7. 2 士0. 2,加入中性紅0. 05g;
4)加熱至115°C,并保持20min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;
5)無菌檢驗后在2V _8°C環(huán)境中冷藏備用。
優(yōu)選地,所述調(diào)整PH至7. 2 士0. 2的方法是,用1N-10N氫氧化鈉或1N-10N鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH至7. 2 士 0. 2。
其原理為蛋白胨在培養(yǎng)基中提供氮源和其他的營養(yǎng)物質(zhì),乳糖作為可發(fā)酵的碳源,乳糖被發(fā)酵利用后,局部的PH值降低使得菌落呈紅色,同時形成膽酸鹽沉淀,膽鹽抑制革蘭氏陽性菌生長。
本發(fā)明所述的瓊脂培養(yǎng)基及其制作方法的有益效果是在原來的基礎(chǔ)上添加非發(fā)酵細菌(鮑曼不動桿菌)的所需的特殊營養(yǎng)物質(zhì),通過營養(yǎng)物質(zhì)對細菌的供應(yīng),結(jié)果表明不單單是非發(fā)酵細菌在該產(chǎn)品上生長情況極好,而其他腸道細菌在該產(chǎn)品上生長也極好,菌落大小和判讀結(jié)果的時間甚至超過了國內(nèi)外同類產(chǎn)品,該產(chǎn)品的改進大大提高了對非發(fā)酵細菌漏檢的現(xiàn)象。
菌落大小優(yōu)勝于國內(nèi)外同類產(chǎn)品;標本判讀結(jié)果的時間比同類產(chǎn)品更短;非發(fā)酵細菌的生長改善了市場上同類培養(yǎng)不出或者是培養(yǎng)不好的現(xiàn)象;非發(fā)酵細菌的鑒別通過顯色更加容易判斷。
具體實施方式
實施例1、
一種瓊脂培養(yǎng)基,其組成成分及質(zhì)量數(shù)為 7g、氯化鈉4g、膽鹽6g、中性紅0. 06g、瓊脂17g。
實施例2、
一種瓊脂培養(yǎng)基,其組成成分及質(zhì)量數(shù)為 13g、氯化鈉6g、膽鹽4g、中性紅0. 04g、瓊脂13g。
實施例3、
一種瓊脂培養(yǎng)基,其組成成分及質(zhì)量數(shù)為 10g、氯化鈉5g、膽鹽5g、中性紅0. 05g、瓊脂15g。
上述實施例中,所述營養(yǎng)液的主要成分為氨基酸、維生素、生長因子。
實施例4、
一種瓊脂培養(yǎng)基的制作方法,包括以下步驟
1)將蛋白胨17g、乳糖7g、氯化鈉4g、膽鹽6g、瓊脂17g溶解在IOOOml營養(yǎng)液中;
2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;
3)調(diào)節(jié)pH至7. 2 士0. 2,加入中性紅0. 06g;
4)加熱至115°C,并保持20min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;
5)無菌檢驗后在2V _8°C環(huán)境中冷藏備用。
實施例5、
一種瓊脂培養(yǎng)基的制作方法,包括以下步驟
1)將蛋白胨23g、乳糖13g、氯化鈉6g、膽鹽4g、瓊脂13g溶解在IOOOml營養(yǎng)液中;
2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;
3)調(diào)節(jié)pH至7. 2 士0. 2,加入中性紅0. 04g;
4)加熱至115°C,并保持20min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;
5)無菌檢驗后在2V _8°C環(huán)境中冷藏備用。
實施例6、
一種瓊脂培養(yǎng)基的制作方法,包括以下步驟
1)將蛋白胨20g、乳糖10g、氯化鈉5g、膽鹽5g、瓊脂15g溶解在IOOOml營養(yǎng)液中;
2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;
3)調(diào)節(jié)pH至7. 2 士0. 2,加入中性紅0. 05g;
4)加熱至115°C,并保持20min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;
5)無菌檢驗后在2V _8°C環(huán)境中冷藏備用。每IOOOml營養(yǎng)液中蛋白胨17g、乳糖 每IOOOml營養(yǎng)液中蛋白胨23g、乳糖 每IOOOml營養(yǎng)液中蛋白胨20g、乳糖
上述實施例中,用1N-10N氫氧化鈉或1N-10N鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至7. 2 士0. 2。
本具體實施方式
只本發(fā)明的優(yōu)選實施例,并不能對本發(fā)明進行限定,具體各項權(quán)利保護范圍由權(quán)利要求書限定。
權(quán)利要求
1.一種瓊脂培養(yǎng)基,其特征在于其組成成分及質(zhì)量數(shù)為每IOOOml營養(yǎng)液中蛋白胨 17-23g、乳糖 7-13g、氯化鈉 4-6g、膽鹽 4_6g、中性紅 0. 04-0. 06g、瓊脂 13_17g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的瓊脂培養(yǎng)基,其特征在于其組成成分及質(zhì)量數(shù)為每 IOOOml營養(yǎng)液中蛋白胨20g、乳糖10g、氯化鈉5g、膽鹽5g、中性紅0. 05g、瓊脂15g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的瓊脂培養(yǎng)基,其特征在于所述營養(yǎng)液的主要成分為氨基酸、維生素、生長因子。
4.一種瓊脂培養(yǎng)基的制作方法,其特征在于包括以下步驟1)將蛋白胨20g、乳糖10g、氯化鈉5g、膽鹽5g、瓊脂15g溶解在IOOOml營養(yǎng)液中;2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;3)調(diào)節(jié)pH至7.2 士0. 2,加入中性紅0. 05g ;4)加熱至115°C,并保持20min,冷卻至50左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;5)無菌檢驗后在2V -8 °C環(huán)境中冷藏備用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的瓊脂培養(yǎng)基的制作方法,其特征在于所述調(diào)整PH至 7. 2 士0. 2的方法是,用1N-10N氫氧化鈉或1N-10N鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至7. 2 士0. 2。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種瓊脂培養(yǎng)基,其組成成分及質(zhì)量數(shù)為每1000ml營養(yǎng)液中蛋白胨17-23g、乳糖7-13g、氯化鈉4-6g、膽鹽4-6g、中性紅0.04-0.06g、瓊脂13-17g。其制作方法,1)將蛋白胨20g、乳糖10g、氯化鈉5g、膽鹽5g、瓊脂15g溶解在1000ml營養(yǎng)液中;2)加熱;3)調(diào)節(jié)pH至7.2±0.2,加入中性紅0.05g;4)加熱至115℃,并保持20min,冷卻至50℃左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;5)冷藏。
文檔編號C12Q1/10GK102492765SQ201110414080
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月13日
發(fā)明者王立超 申請人:江門市凱林貿(mào)易有限公司