專利名稱：放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種細(xì)胞培養(yǎng)器，具體的涉及一種放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器。
背景技術(shù)：
如圖1所示，現(xiàn)有裝置的用途為實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞代謝產(chǎn)生的放射性二氧化碳的收集。底部液體為細(xì)胞培養(yǎng)液(Incubation Mixture)，細(xì)胞在瓶底貼壁生長(zhǎng)。瓶底中間 的柱子，為一支持物，作用是支撐上面的圓柱形的管子，管子內(nèi)加上二氧化碳的收集液體氫 氧化季胺(Hydroxide of Hyamine)，瓶子的側(cè)臂內(nèi)加入H2S04。整個(gè)體系用橡膠蓋密封。使用方法1、預(yù)先在培養(yǎng)瓶側(cè)壁中加入0. 3ml 6N H2S04，用橡膠蓋密封整個(gè)體系；2、用醫(yī)用注射器通過橡膠蓋，向瓶底加入細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)液5ml，進(jìn)行培養(yǎng)，其中， 細(xì)胞培養(yǎng)液中含有放射性的葡萄糖，可以使細(xì)胞通過有氧氧化而生成放射性的二氧化碳；3、培養(yǎng)一段時(shí)間后，終止反應(yīng)。通過注射，向圓柱形管子內(nèi)加入氫氧化季胺0. 5ml, 同時(shí)將側(cè)臂內(nèi)的硫酸倒入細(xì)胞培養(yǎng)的部位，使硫酸殺死細(xì)胞，并充分釋放出放射性的二氧 化碳；4、將整個(gè)體系放置在Dubnoff震蕩器上，在37°C的條件下震蕩3小時(shí)；5、將收集有放射性二氧化碳的氫氧化季胺抽出來，加入閃爍瓶中，與閃爍液混勻， 測(cè)量放射性二氧化碳的放射性計(jì)數(shù)。經(jīng)使用發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有裝置(Warburg flask)具有以下不足之處1、不易培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，此裝置對(duì)于培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，沒有優(yōu)勢(shì)(1)不易加入細(xì)胞懸 液；(2)不易換液；(3)不易消化細(xì)胞和傳代。2、體積太大，不易放入培養(yǎng)箱內(nèi)批量培養(yǎng)，不易滿足批量實(shí)驗(yàn)的要求。3、裝置結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，不易批量生產(chǎn)，從而增加了單件裝置的成本。4、整個(gè)裝置空間較大，需要較長(zhǎng)的震蕩時(shí)間(3h以上)才能使放射性二氧化碳被 充分吸收，并且整個(gè)還需要額外的震蕩設(shè)備，才能實(shí)現(xiàn)充分吸收的目的。5、裝置結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，不易達(dá)到細(xì)胞培養(yǎng)所需的無(wú)菌要求，滅菌、搬運(yùn)過程容易損 壞裝置部件。6、裝置體積較大，作為放射性實(shí)驗(yàn)，一次性使用，相應(yīng)地增加了放射性廢物的體 積。

實(shí)用新型內(nèi)容為克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本實(shí)用新型的目的在于提供一種放射性氣體細(xì)胞培養(yǎng) 器，該裝置結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用方便，適用范圍廣，并能有效的收集放射性氣體。為解決上述技術(shù)問題，達(dá)到上述技術(shù)目的，本實(shí)用新型采用如下技術(shù)方案一種放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，其包括一培養(yǎng)皿底座，所述培養(yǎng)皿底座包括一 小皿和一大皿，所述大皿的邊沿上有螺紋結(jié)構(gòu)，所述小皿與所述大皿底面同心并且固定在
3一起；其還包括一螺口蓋子和一無(wú)螺口蓋子，所述螺口蓋子可旋合在所述大皿上，所述無(wú)螺 口蓋子與所述大皿之間過盈配合并可直接拆卸。進(jìn)一步的，所述螺口蓋子的面板上設(shè)置有第一橡膠塞和第二橡膠塞。進(jìn)一步的，所述小皿的外直徑小于所述大皿的內(nèi)直徑，所述小皿的高度小于所述 大皿的高度。優(yōu)選的，所述小皿的外直徑為30mm，內(nèi)直徑為27mm，高度為10mm ；所述大皿的外直 徑為56mm，內(nèi)直徑為53mm，高度為16_20mm。優(yōu)選的，所述螺口蓋子的高度為ll_15mm。優(yōu)選的，所述螺口蓋子旋合在所述大皿上時(shí)，所述第一橡膠塞的位置處于所述小 皿的半徑范圍內(nèi)，所述第二橡膠塞的位置處于在所述小皿的半徑范圍外。優(yōu)選的，所述螺口蓋子內(nèi)設(shè)有一橡膠密封圈，保證所述螺口蓋子與所述大皿之間 旋合后的密封效果。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器具有如下有點(diǎn)1、本裝置較現(xiàn)有裝置更適宜貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，從而大大增加了該裝置的適用范 圍。并且該裝置操作較現(xiàn)有裝置簡(jiǎn)便，與操作普通細(xì)胞培養(yǎng)皿相似。2、本裝置的體積比現(xiàn)有裝置明顯小，與普通培養(yǎng)皿(60X15mm)相似，從而可以節(jié) 約培養(yǎng)空間，比現(xiàn)有裝置更適合批量培養(yǎng)，更能滿足批量實(shí)驗(yàn)的要求。3、可量產(chǎn)化各部件均可以制作相應(yīng)的模具，通過模具實(shí)現(xiàn)批量生產(chǎn)，從而降低單 件部件的成本。4、氣體收集過程無(wú)需長(zhǎng)時(shí)間震蕩由于通過螺口蓋子密封后，整個(gè)皿的容積較小， 并且收集液體與放射性氣體有較大的接觸面積，所以有利于氣體的吸收，減少了震蕩所需 時(shí)間，只需要適當(dāng)?shù)卣鹗幖纯墒箽怏w充分被吸收。5、細(xì)胞培養(yǎng)的滅菌簡(jiǎn)單由于整個(gè)裝置類似與現(xiàn)有的一次性塑料細(xì)胞培養(yǎng)皿，所 以批量滅菌較現(xiàn)有裝置簡(jiǎn)便。6、放射性廢物管理方便由于裝置形狀結(jié)構(gòu)較為規(guī)則，且體積較小，更易于批量運(yùn) 輸、儲(chǔ)存和管理，而且由于體積更小，減少了放射性廢物的生成量。7、由于尺寸設(shè)計(jì)可以比較靈活，所以，可以利用現(xiàn)成規(guī)格的60mmX 15mm細(xì)胞培養(yǎng)
皿的蓋子，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，從而節(jié)省了成本。

圖1為現(xiàn)有的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)裝置。圖2為本實(shí)用新型的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器的小皿大皿組合結(jié)構(gòu)示意圖。圖3為本實(shí)用新型的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器的螺口蓋子的結(jié)構(gòu)示意圖。圖4為本實(shí)用新型的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器的無(wú)螺口蓋子的結(jié)構(gòu)示意圖。圖5為本實(shí)用新型的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器的一裝配示意圖。圖6為本實(shí)用新型的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器的另一裝配示意圖。圖中標(biāo)號(hào)說明1.小皿，2.大皿，3.螺口蓋子，4.無(wú)螺口蓋子，301.第一橡膠塞， 302.第二橡膠塞。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖，對(duì)本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的介紹。請(qǐng)參見圖2、圖3、圖4、圖5所示，一種放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，其一培養(yǎng)皿底 座，所述培養(yǎng)皿底座包括一小皿1和一大皿2，所述大皿2的邊沿上有螺紋結(jié)構(gòu)，所述小皿1 與所述大皿2底面同心并且固定在一起；其還包括一螺口蓋子3和一無(wú)螺口蓋子4，所述螺 口蓋子3可旋合在所述大皿2上，所述無(wú)螺口蓋子4與所述大皿2之間過盈配合并可直接 拆卸。進(jìn)一步的，所述螺口蓋子3的面板上設(shè)置有第一橡膠塞301和第二橡膠塞302。進(jìn)一步的，所述小皿1的外直徑小于所述大皿2的內(nèi)直徑，所述小皿1的高度小于 所述大皿2的高度。優(yōu)選的，所述小皿1的外直徑為30mm，內(nèi)直徑為27mm，高度為10mm ；所述大皿2的 外直徑為56mm，內(nèi)直徑為53mm，高度為16_20mm。優(yōu)選的，所述螺口蓋子3的高度為ll_15mm。優(yōu)選的，所述螺口蓋子3旋合在所述大皿2上時(shí)，所述第一橡膠塞301的位置處于 所述小皿1的半徑范圍內(nèi)，所述第二橡膠塞302的位置處于在所述小皿1的半徑范圍外。優(yōu)選的，所述螺口蓋子3內(nèi)設(shè)有一橡膠密封圈(圖中為示意)，保證所述螺口蓋子 3與所述大皿2之間旋合后的密封效果。利用本實(shí)用新型的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)皿的使用步驟如下首先將所有部件均經(jīng)過輻射滅菌，分別包裝好。1、在細(xì)胞培養(yǎng)專用的超凈工作臺(tái)中，取出包裝中的培養(yǎng)皿底座，在小皿1的范圍 內(nèi)，加入培養(yǎng)基和細(xì)胞懸液約1ml，蓋上無(wú)螺口蓋子4，在細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h (37 °C，5 % C02)使細(xì)胞貼壁。2、24h后，取出培養(yǎng)皿底座，在大皿2與小皿1之間的范圍加入放射性二氧化碳收 集液約3 4ml，用移液管吸走小皿1內(nèi)原有培養(yǎng)基，取螺口蓋子3，將之與大皿2旋緊。3、使用醫(yī)用一次性注射器，通過螺口蓋子3的內(nèi)側(cè)的第一橡膠塞301向培養(yǎng)皿底 座的小皿1內(nèi)加入含有放射性葡萄糖的培養(yǎng)基(注意加的過程中盡量使液體貼小皿側(cè)壁下 流，避免將細(xì)胞沖走)。將培養(yǎng)皿底座放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)lh左右。(此步在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行)4、終止反應(yīng)，將培養(yǎng)皿底座從培養(yǎng)箱中取出，用醫(yī)用一次性注射器，通過螺口蓋子 3的內(nèi)側(cè)的第一橡膠塞301向培養(yǎng)皿底座的小皿1中加入0. lml左右4N H2S04，適當(dāng)搖晃培 養(yǎng)皿使放射性二氧化碳?xì)怏w被吸收液充分吸收(注意搖晃過程中應(yīng)保持培養(yǎng)皿水平，防止 大皿2、小皿1內(nèi)的液體互混)。5、使用醫(yī)用一次性注射器，通過螺口蓋子3的外側(cè)的第二橡膠塞302將小皿1外 側(cè)的收集有放射性二氧化碳的液體抽出，加入事先加有閃爍液的閃爍瓶，旋緊閃爍瓶蓋，將 瓶?jī)?nèi)液體混勻，避光一段時(shí)間后，放入液體閃爍計(jì)數(shù)器內(nèi)進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)測(cè)量。(此步在通 風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行)以上對(duì)本實(shí)用新型實(shí)施例所提供的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)皿及其使用方法進(jìn) 行了詳細(xì)介紹，對(duì)于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員，依據(jù)本實(shí)用新型實(shí)施例的思想，在具體實(shí)施方 式及應(yīng)用范圍上均會(huì)有改變之處，因此凡依本實(shí)用新型設(shè)計(jì)思想所做的任何改變都在本實(shí) 用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求一種放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，包括一培養(yǎng)皿底座，其特征在于所述培養(yǎng)皿底座包括一小皿(1)和一大皿(2)，所述大皿(2)的邊沿上有螺紋結(jié)構(gòu)，所述小皿(1)與所述大皿(2)底面同心并且固定在一起；其還包括一螺口蓋子(3)和一無(wú)螺口蓋子(4)，所述螺口蓋子(3)可旋合在所述大皿(2)上，所述無(wú)螺口蓋子(4)與所述大皿(1)之間過盈配合并可直接拆卸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，其特征在于所述螺口蓋子(3) 的面板上設(shè)置有第一橡膠塞(301)和第二橡膠塞(302)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，其特征在于所述小皿(1)的 外直徑小于所述大皿(2)的內(nèi)直徑，所述小皿(1)的高度小于所述大皿(2)的高度。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，其特征在于所述小皿(1) 的外直徑為30mm，內(nèi)直徑為27mm，高度為10mm ；所述大皿(2)的外直徑為56mm，內(nèi)直徑為 53mm，高度至少為16mm。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，其特征在于所述螺口蓋子(3) 旋合在所述大皿(2)上時(shí)，所述第一橡膠塞(301)的位置處于所述小皿(1)的半徑范圍內(nèi)， 所述第二橡膠塞(302)的位置處于在所述小皿(1)的半徑范圍外。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，其特征在于所述螺口蓋子(3) 內(nèi)設(shè)有一橡膠密封圈。
專利摘要本實(shí)用新型公開了一種放射性氣體收集細(xì)胞培養(yǎng)器，其包括一培養(yǎng)皿底座，所述培養(yǎng)皿底座包括一小皿和一大皿，所述大皿的邊沿上有螺紋結(jié)構(gòu)，所述小皿與所述大皿底面同心并且固定在一起；其還包括一螺口蓋子和一無(wú)螺口蓋子，所述螺口蓋子可旋合在所述大皿上，所述無(wú)螺口蓋子與所述大皿之間過盈配合并可直接拆卸，所述螺口蓋子的面板上設(shè)置有第一橡膠塞和第二橡膠塞，所述螺口蓋子內(nèi)設(shè)有一橡膠密封圈。本實(shí)用新型的培養(yǎng)器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用方便，適用范圍廣，并能有效的收集放射性氣體。
文檔編號(hào)C12M3/00GK201746555SQ201020204408

公開日2011年2月16日 申請(qǐng)日期2010年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月27日
發(fā)明者劉建軍, 劉芬菊, 張昊文 申請(qǐng)人:蘇州大學(xué)