專利名稱：一種防治螺旋粉虱的微生物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)是一種微生物及其制備方法。
背景技術(shù)：
螺旋粉虱屬于同翅目Homoptera，粉虱科Homoptera，復(fù)孔粉虱屬Aleyrodidae，是 一種危險(xiǎn)性入侵害蟲(chóng)，正向世界各熱帶地區(qū)擴(kuò)散?，F(xiàn)在已經(jīng)傳入到亞洲、非洲、歐洲、美洲， 大洋洲的40多個(gè)國(guó)家和地區(qū)。2006年在中國(guó)海南陵水縣椰林鎮(zhèn)首次發(fā)現(xiàn)，通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)這 種粉虱幾乎已遍布海南各市縣。螺旋粉虱的寄主植物廣泛，已經(jīng)報(bào)道的寄主植物多達(dá)95科 295屬481種，能夠危害包括蔬菜、果樹(shù)、觀賞植物和行道樹(shù)等的重要害蟲(chóng)，螺旋粉虱成蟲(chóng)、 若蟲(chóng)均可造成危害，該蟲(chóng)所造成的產(chǎn)量損失可高達(dá)73% 80%，嚴(yán)重時(shí)可造成絕收。螺旋 粉虱為害廣，繁殖快，給人們?cè)斐蓢?yán)重?fù)p失，防治也比較困難。鑒于螺旋粉虱為害的嚴(yán)重性， 國(guó)內(nèi)外對(duì)該蟲(chóng)開(kāi)展了藥劑防治、生物防治等防治研究。當(dāng)前主要以化學(xué)防治為主，但由于螺 旋粉虱為害的特殊性，寄主植物有高大喬木不易施藥，有行道樹(shù)和城市綠化苗木等施藥易 于造成環(huán)境污染以及蔬菜花卉等使用化學(xué)農(nóng)藥對(duì)人體安全等原因，有鑒于此，人們?cè)诜e極 研究使用生物防治手段來(lái)對(duì)該蟲(chóng)進(jìn)行防控。用該蟲(chóng)的病原菌進(jìn)行大規(guī)模應(yīng)用是防治該蟲(chóng)的 一種有效方法。我們從該蟲(chóng)的自然感染死亡群體中分離篩選出一株病原菌，具有很高的殺 蟲(chóng)活性，經(jīng)鑒定為L(zhǎng)ecanicillium. sp.，目前還未見(jiàn)用該菌株進(jìn)行螺旋粉虱防治的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為了防治新入侵的昆蟲(chóng)螺旋粉虱，本發(fā)明的目的是提供一株輪枝菌菌株 HNL20090101 (Lecanicillium sp.)，它具有很高的對(duì)螺旋粉虱的殺蟲(chóng)能力；并提供一種利 用該菌株進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)大量孢子的方法。本發(fā)明提供的輪枝菌菌株其特征在于該菌株是從蟲(chóng)生真菌自然感染的螺旋粉 虱的蟲(chóng)體上分離得到的野生菌株，將野生菌株回接到螺旋粉虱，從染病的螺旋粉虱再分離 得到復(fù)壯的輪枝菌菌株，本研究分離篩選菌株采用選擇性培養(yǎng)基篩選法。該菌種屬于輪枝 菌屬(Lecanicillium sp.)，2010年10月19日菌種保藏于北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路中國(guó) 科學(xué)院微生物研究所中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC N0. 4246。該菌株的 18s rDNA 與 Lecanicillium saksenae 菌株的相似性為 99. 48%，其 DNA 序列已遞交到GenBank，可通過(guò)序列號(hào)查看。本發(fā)明用于防治螺旋粉虱具有明顯效果。本發(fā)明的輪枝菌的形態(tài)特征在于，在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)7天以后，菌落圓形， 平鋪，白色，氣生菌絲絨毛狀致密如絮。實(shí)施例1 本發(fā)明的菌株HNL20090101對(duì)螺旋粉虱不同齡期若蟲(chóng)致病力測(cè)定。取培養(yǎng)的本發(fā)明菌株HNL20090101新鮮孢子，用適量的0. 吐溫配制成孢子濃 度為IX IO7個(gè)/mL的孢子懸浮液，供試蟲(chóng)為采自番石榴葉片上的寄生為害的螺旋粉虱若蟲(chóng)，分別挑取螺旋粉虱的一齡、二齡、三齡和四齡若蟲(chóng)，每個(gè)葉片上均保留同一齡期的若蟲(chóng)， 剔除其余齡期的若蟲(chóng)供試驗(yàn)用。采用液浸法進(jìn)行菌株致病力測(cè)定，浸液時(shí)間為30秒，對(duì)照 試驗(yàn)為加入等量吐溫的蒸餾水，試驗(yàn)有三個(gè)重復(fù)，處理完畢后的供試蟲(chóng)在培養(yǎng)。統(tǒng)計(jì) 數(shù)據(jù)并計(jì)算蟲(chóng)口死亡率。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，從表中可以看出該菌株對(duì)螺旋粉虱若蟲(chóng)各齡期 均有防治效果，對(duì)二齡、三齡和四齡蟲(chóng)效果較好，室內(nèi)防治效果分別達(dá)到88. 9%，99. 16%和 93. 99%。表1HNL20090101菌株對(duì)的不同齡期螺旋粉虱若蟲(chóng)的室內(nèi)毒力測(cè)定
權(quán)利要求
1.一株輪枝菌菌株，其特征在于從蟲(chóng)生真菌自然侵染的螺旋粉虱分類獲得的野生 菌株，將該菌株回接到螺旋粉虱復(fù)壯獲得HNL20090101菌株，再通過(guò)單孢分離方法獲 得純化菌株，該菌株保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，編號(hào)為 CGMCCN0. 4246 ο
2.根據(jù)權(quán)利1所述的菌株，其特征在于用于防治螺旋粉虱。
3.一種利用權(quán)利要求1所述菌株生產(chǎn)孢子的方法，其特征在于孢子制備采用液體和 固體兩次發(fā)酵方法生產(chǎn)，以含大米、黃豆粉、谷殼為固態(tài)發(fā)酵的主要成分，其孢子產(chǎn)量可達(dá) 1. OX IO9 個(gè)/g。
全文摘要
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明提供一種微生物及其制備方法。其特征在于它是從自然感染的螺旋粉虱上分離獲得的野生菌株，通過(guò)回接復(fù)壯和單孢分離技術(shù)分離純化后獲得純菌，其保藏登記號(hào)為CGMCC NO.4246，本發(fā)明的菌株對(duì)螺旋粉虱若蟲(chóng)具有高毒性，可以用來(lái)防治農(nóng)作物、花卉和行道樹(shù)等寄主植物上的螺旋粉虱為害。本發(fā)明提供的孢子制備方法采用液體和固體兩次發(fā)酵方法生產(chǎn)，以大米、黃豆粉、谷殼為固態(tài)發(fā)酵的主要成分，其孢子產(chǎn)量可達(dá)1.0×109個(gè)/g。
文檔編號(hào)C12N1/14GK102071147SQ20101055402
公開(kāi)日2011年5月25日 申請(qǐng)日期2010年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月23日
發(fā)明者代鵬, 張敬寶, 張方平, 牛黎明, 符悅冠, 賁慶賀, 韓冬銀, 黃武仁 申請(qǐng)人:中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所