專利名稱：多層組織培養(yǎng)容器的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及實驗室容器。更具體地說，本發(fā)明涉及多層組織培養(yǎng)容器。
背景技術：
細胞(如真核細胞)的培養(yǎng)用于多種目的，包括基礎研究和高通量篩選。然而，在 無菌環(huán)境下培養(yǎng)細胞既費力又昂貴。因此，有必要尋找更高效和更廉價的用于細胞培養(yǎng)的 實驗室容器。

發(fā)明內容
本發(fā)明公開了一種培養(yǎng)細胞的容器，包括底部，包括基底，一向上延伸的壁至少 部分地形成底部的基底的邊界；頂部，包括基底，一向下延伸的壁至少部分地形成頂部的基 底的邊界；管狀頸，其內限定有開口 ；以及，一個或多個架子，其中，每一個架子包括基底， 一向上延伸的壁至少部分地形成架子的基底的邊界。第一架子的向上延伸的壁與頂部的向 下延伸的壁鄰接，第一架子位于底部和頂部之間。每一個架子的基底具有其內形成的至少 一個孔。底部、頂部以及一個或多個架子共同界定了一用于培養(yǎng)細胞的封閉空間。管狀頸 從帶有封閉空間的容器伸出，該封閉空間可通過管狀頸中的開口進入。有利地，這種容器以 提高效率和減少細胞培養(yǎng)花費的方式來提供高容量細胞培養(yǎng)。本發(fā)明的容器增加了培養(yǎng)容器的底面的每表面積的總培養(yǎng)面積。該容器也增加了 培養(yǎng)容器的底面的每表面積的細胞回收百分率。因此，這種容器提供了有效的高容量細胞 培養(yǎng)途徑。這樣的容器可以以手動和/或自動的方式使用。示范性的實施方式包括，但不 限于，保持了標準BD Falcon T-175瓶總底面的容器，并且因此與自動細胞培養(yǎng)系統(tǒng)相容， 例如Automation Partnership's SelecT 和CompacT 自動細胞培養(yǎng)系統(tǒng)。然而，該容器 相較于標準瓶例如BD Falcon T-175瓶的高度可以擴大或縮小。具體地說，在所述容器中 架子的堆疊排列允許高度被改變，從而培養(yǎng)細胞的表面積能夠得以擴展。此外，本發(fā)明的容器的設計使得填充和移除培養(yǎng)基所需的操作次數(shù)最小化，從而 提高了培養(yǎng)細胞的效率，并降低了在每次操作處理時容器污染的幾率。優(yōu)選地，該容器包括 足夠大的開口，使吸液管能夠接近容器的后壁，從而改善了適合良好細胞培養(yǎng)技術的良好 實驗室實踐條件。示范性的實施方式可包括，但不限于，其中開口大到可以使IOmL的吸液 管，甚至50mL的吸液管接近后壁的容器。本發(fā)明的容器的設計也減少了沿著容器內部的壁面和角落處的培養(yǎng)基和“懸掛” 細胞的數(shù)量，并允許培養(yǎng)基和細胞的有效移除。該容器的設計也能夠將液體(如，培養(yǎng)基， 磷酸鹽緩沖液(PBS)，胰酶)有效地分配至不同細胞層，從而減少所需液體的數(shù)量，促進液 體更為均等的分配，并且在接種時促進更為均等的細胞分配。如此，在細胞收獲時能夠使得 營養(yǎng)物、營養(yǎng)消耗率、細胞生長率和分裂率得到更一致的分配，從而能夠培養(yǎng)更為均勻的細 胞生長和/或分化，以及總體上更健康的細胞群體。這樣的容器在細胞生長和解離分別所 需的培養(yǎng)基和消化劑(例如，胰酶)方面也提供了大的成本節(jié)省?？傊?，本發(fā)明的容器減少
4了與培養(yǎng)細胞相關的人力和費用。通過下面具體的描述和附隨的附圖能更好地理解本發(fā)明的這些和其它特征。


圖1為根據(jù)本發(fā)明形成的容器的立體圖。圖2為沿著圖1的2-2線的橫截面圖。圖3為容器的俯視圖。圖4為沿著圖3的4-4線的橫截面圖。圖5為容器的側視圖。圖6為本發(fā)明可用的底部的立體圖。圖7為沿著圖6的7-7線的橫截面圖。圖8為本發(fā)明可用的頂部的立體圖。圖9為沿著圖8的9-9線的橫截面圖。圖10為沿著圖8的10-10線的橫截面圖。圖11為本發(fā)明可用的架子的立體圖。圖12為沿著圖11的12-12線的橫截面圖。圖13為根據(jù)本發(fā)明形成的容器的立體圖。圖14為沿著圖13的14-14線的橫截面圖。圖15為本發(fā)明可用的架子的立體圖。圖16為展現(xiàn)細胞培養(yǎng)基在根據(jù)本發(fā)明形成的容器中平衡的示意圖。圖17為展現(xiàn)吸液管進入根據(jù)本發(fā)明形成的容器中的示意圖。圖18為展現(xiàn)細胞培養(yǎng)基在根據(jù)本發(fā)明形成的容器中分層排列的示意圖。圖19為本發(fā)明可用的架子的俯視圖。圖20為沿著圖19的20-20線的橫截面圖。圖21和圖22分別為圖20的部分21和部分22的放大圖。圖23和圖24描繪了不同的約束壁構造。圖25-27描繪了本發(fā)明可用的蓋。發(fā)明詳述參考各附圖，其中描繪了用于細胞培養(yǎng)的容器10。本領域的技術人員將理解的是， 容器10可以供各種細胞培養(yǎng)物使用。容器10總體而言包括底部12、頂部14、其內具有限 定的開口 18的管狀頸16，以及位于底部12與頂部14中間的一個或多個架子20。底部12、 頂部14和架子20共同界定了用于培養(yǎng)細胞的封閉空間22。管狀頸16從容器10延伸，可 通過管狀頸16中的開口 18進入封閉空間22。底部12為帶有基底24的大致碟狀，該基底向上延伸出壁26，該壁26至少部分地 形成基底24的邊界。優(yōu)選地，壁26完全形成基底24的周邊邊界。取決于容器10的總體希望的尺寸，可以應用一個或多個架子20。架子20的數(shù)目 越多，容器10的細胞培養(yǎng)容量越大。由于氣體流動和分配的限制，過度的尺寸可能是不合 期望的。設想了利用兩個或4個架子20的實施方式。然而，也可使用其它數(shù)目的架子。每 一個架子20大致為碟狀，具有一個基底28和從該基底向上延伸的壁30，該壁至少部分地形成基底28的邊界。優(yōu)選地，在每一個架子20上，壁30完全形成基底28的周邊邊界。此外， 至少一個孔32通過每一個架子20的基底28形成。優(yōu)選地，每一個架子20包括至少兩個孔 32，一個氣體傳送孔32a和一個流動孔32b。如下面進一步討論的那樣，氣體流動孔32a允 許氣體通過架子20傳送，以使氣體流動穿過容器10。流動孔32b可以用來對進入容器10 的細胞培養(yǎng)基進行平衡，以使在由底部12和架子20界定的容器10的各個支撐層之間分配 細胞培養(yǎng)基。盡管優(yōu)選的是每一架子20都采用雙孔布置，然而每個架子20可以設置單孔 32，該單孔可發(fā)揮氣體傳送和平衡的這兩個功能。此外，對于氣體傳送功能和平衡功能中的 一個或兩個功能，可以利用兩個以上的孔32。優(yōu)選地，各個架子20的氣體傳送孔32a和流 動孔32b在空間上分隔開。頂部14為大致倒置的碟狀，帶有基底34和從該基底向下延伸的壁36，該壁至少 部分地形成基底34的邊界。優(yōu)選地，管狀頸16與頂部14 一體地形成，從而從該頂部延伸。 可選地，可在頂部14中形成開口，管狀頸16作為一個單獨的元件來形成，并利用任何已知 的技術與頂部14相連，如熔接或粘接。此外，可能形成從頂部14延伸并進入管狀頸16所 連接的一個或多個架子20的開口。在管狀頸16中的開口 18可為橢圓形(包括圓形)或 者半圓形，并可由沿著管狀頸16的長度的不變或可變輪廓形成(例如，沿著管狀頸16的長 度，開口 18的一部分可為橢圓形，一部分可為的半圓形)。底部12、頂部14和一個或多個架子20以堆疊的方式排列以共同形成容器10。優(yōu) 選地，這些元件由與所關注的細胞相容的熱塑性材料形成?？刹捎镁郾揭蚁?。本領域技術人 員將理解的是，也可以采用其他材料。這些元件可以形成透明的、淡色(例如，淡藍色)的 或者彩色(例如，琥珀色)的。此外，底部12、頂部14以及架子20的各個部分可被改性或 處理以便增強特定的條件。例如，一種或多種生物試劑可應用到底部12、頂部14和/或架 子20的一個或多個部分，包括，但不限于，細胞外基質或者其組分，如層粘蛋白(Iaminin)、 纖粘蛋白和膠原蛋白，按照任何組合。此外，或可選地，合成試劑可被應用。表面也可被預 處理，例如組織培養(yǎng)處理或原生質聚合。本領域技術人員將理解的是，這些不同的處理或改 性方式可以以各種方式組合使用，并依據(jù)既定目標來利用。底部12、頂部14和架子20相鄰接地形成容器10。具體地說，頂部14的壁36鄰 接架子20的壁30，該架子20鄰近頂部14。所有的架子20都位于底部12和頂部14之間。 相鄰的各架子20以堆疊方式排列，并與較低處堆疊的架子20的壁30鄰接，該較低處堆疊 的架子20鄰接較高處堆疊的鄰近架子20。底部12鄰接著與底部12相鄰的架子20，如果 采用了多個架子20，其會是最低堆疊的架子20，底部12的壁26與相鄰的架子20鄰接。可 以任何組合利用任何已知的技術，如熔接(例如，超聲焊接)、粘接和/或機械連接(例如， 互鎖的舌和榫)，以提供在它們的界面處的不透液體的密封。密封構件，如墊圈，可插入相 鄰元件之間，如在頂部14和相鄰的架子20之間。墊圈材料可選擇為透氣性的，但不透液性 的。此外，一個或多個通風開口 37可在底部12、頂部14和/或一個或多個架子20中形成。 透氣性的/不透液性的膜39可被設置為延伸跨過一個或多個通風開口 37。底部12、頂部14和架子20可制成不同的形狀以提供不同的用于細胞培養(yǎng)的表面 積。相應地，容器10可以以不同的尺寸和不同的形狀形成，例如如附圖中所示的那樣的扁 瓶狀?？蛇x地，容器10可具有矩形形狀，或者形成其它多邊形或其它形狀。優(yōu)選地，容器10 包括第一末端38，該第一末端38形成為用以支持容器10使之處于直立位置，從而各架子20是向上排列的。這對于裝載細胞培養(yǎng)液來達到平衡是優(yōu)選的狀態(tài)。更優(yōu)選地，第一末端 38位于容器10上與管狀頸16的開口 18相對的位置。第一末端38可為平面的或多個點的 軌跡(locus)，所述多個點共同界定一支撐平面。底部12、頂部14和架子20形成了容器10。底部12、頂部14和架子20相應的壁 26、30、36，以及底部12和頂部14相應的基底24、28界定了容器10外表面的各部分。為了達到平衡，優(yōu)選的是，流動孔32b處于鄰近第一末端38的位置。在這種方式 下，如圖16所示，細胞培養(yǎng)基C置于容器10中，容器10由第一末端38支撐，細胞培養(yǎng)基C 可通過流動孔32b，并在底部12、架子20和頂部14之間分開的空間(V1J2J3……)實現(xiàn)平 衡狀態(tài)。如圖18所示，從這種平衡狀態(tài)后，容器10被水平設置，并由底部12支撐著。細胞 培養(yǎng)基C的分開的各部分量因此而被分布在由底部12或架子20界定的支撐底層上。優(yōu)選地，細胞培養(yǎng)基C在底部12、架子20和頂部14之間平衡成同等體積。均等的 間距，如在底部12、頂部14和架子20相應的基底24、28和34之間的間距z，可以在各層之 間分出均等體積，特別是在鄰近容器10的第一末端38處。如圖13-14所示，頂部14的基底34整體上可形成為大致平面形。如圖14所示， 為了允許良好的吸液管進入，頂部14的基底34與鄰近架子20的基底28分隔出了一些部 分，這些部分比在架子20的基底28之間、或底部12的基底24和鄰近架子20的基底28之 間的ζ間距大。如圖17所示，這個增大的間距(間距q)使得吸液管能穿過容器10的整個 長度并與第一末端38接觸。因此，在細胞培養(yǎng)后，容器10由第一末端38支撐時，可利用吸 液管通道來進行有效的細胞培養(yǎng)基及細胞回收。然而，相較于各架子20之間形成的空間、 以及底部12和其相鄰的架子20之間形成的空間，在頂部14的基底34和相鄰的架子20的 基底28之間的增大間距可導致在頂部14和相鄰的架子20之間形成擴大的空間。優(yōu)選地，頂部14的基底34由第一、第二和第三部分42、44、46分別形成，縮小了在 接近第一末端38處的頂部14的基底34和相鄰的架子20的基底28之間形成的空間。具 體地說，參考圖18，第一部分42位于與相鄰的架子20的基底28的距離為χ的位置，第二部 分44位于與相鄰的架子20的基底28的距離為y的位置，距離χ大于距離y。從第一末端 38延伸出第二部分44，從而部分地封閉鄰近第一末端38的空間。優(yōu)選地，距離y與間距ζ 相等，間距ζ設在每對相鄰的架子20之間，以及底部12和相鄰的架子20之間。進一步優(yōu) 選地，第二部分44具有從第一末端38延伸的預定長度L，該長度與容納目標平衡空間所需 長度相等或更長。如圖16所示，在這種方式下，隨著細胞培養(yǎng)基C達到平衡，第二部分44 共同延伸或超過細胞培養(yǎng)基C的高度(被平衡為空間義、^、^……)。優(yōu)選地，在平衡狀態(tài) 時，細胞培養(yǎng)基C的高度低于第三部分46。細胞培養(yǎng)基C的高度在第二部分44之上、接觸 第三部分46，可能導致由平衡產(chǎn)生的不均等體積。采用第一、第二和第三部分42、44、46的 布置，可提供給第一末端38良好的吸液管通路，其包括進入接近第一末端38的在第二部分 44附近的空間的通路，吸液管通過在第一部分42附近的更高區(qū)域。這種排列也允許在各層 之間平衡出均等的體積。第一部分和第二部分42、44可各自形成平面，可平行排列，盡管其 它形狀(如，弓形)也是可用的?；?4的第三部分46在第一部分和第二部分42、44之間延伸并對第一部分和第 二部分42、44加以結合。優(yōu)選地，第三部分46形成平面，然而可形成其它形狀，例如弓形輪 廓。有利地，第三部分46可界定出合適的表面來打印或承載其它標記，如條形碼。對于第
7二部分44界定出的平面，第三部分46置于范圍為約10-90度的夾角α，更優(yōu)選地，范圍是 約10-30度，更優(yōu)選地，夾角α是約20度。與第二部分44成角度設置的第三部分46提供 了帶錐度的表面，在容器10由第一末端38支撐時，該表面導引細胞培養(yǎng)基C流向第一末端 38。盡管夾角α為90度是可能的，然而優(yōu)選的夾角α是小于90度，以防止任何細胞培養(yǎng) 基或細胞殘留在第一和第三部分42、26的交接處。如圖1所示，隨著第二部分44的應用，可在容器10中界定凹處48。頂部14的壁 36可部分地形成凹處48的邊界。凹處48提供了在壁36的暴露區(qū)域的把柄功能，允許使用 者通過該處而抓住容器。如圖2所示，優(yōu)選地，各氣體傳送孔32a沿直線對準，以在封閉空間22中界定出氣 體流動通道40。優(yōu)選地，氣體流動通道40延伸到管狀頸16中限定的開口 18附近。貫穿架 子20的氣體流動通道40允許氣體流動到達封閉的空間22的各個部分。如上所討論的，以及圖18所示，在細胞培養(yǎng)的使用狀態(tài)時，容器10被置于由底部 12支撐。在這個位置上，細胞培養(yǎng)基C由于其液體的本性而跨過相應的底部12或架子20 的基底24、28的表面而布置。就底部12而言，壁26提供了對液體的約束以蔣細胞培養(yǎng)基C 保持在基底24的上方。就架子20而言，為了提供約束以阻止組織細胞培養(yǎng)基C通過任何 孔32(32a、32b)，約束壁50可沿著每一個孔32的邊緣設置，作為提壩。優(yōu)選地，架子20的 壁30的高度高于約束壁50的高度。在這種方式下，可以在架子20之間的各層細胞培養(yǎng)基 C的上方保持開口空間。底部12和架子20可被構造為用于處理不同容量的細胞培養(yǎng)基C，雖然優(yōu)選的是在 相同的容器10內，每一層容納相同的空間。底部12的基底24和壁26界定了在底部12上 用于接納細胞培養(yǎng)基C的空間。每一個架子20的基底28、壁30和約束壁50界定了各架子 上方用于接納細胞培養(yǎng)基C的空間。底部12和架子20可被構造為各自容納范圍為4-50mL 的細胞培養(yǎng)基C體積。由于底部12沒有其內形成孔32，底部12的表面積可比每一個架子 20的表面積更大；這樣，在底部12上的細胞培養(yǎng)基C層的高度可略低于在各架子20上的 細胞培養(yǎng)基C層的高度。考慮到每一層細胞培養(yǎng)基C的體積量來設置間距Z，以保證在細胞 培養(yǎng)基C層的上方的足夠頂部空間，用于適當?shù)胤峙錃怏w。細胞培養(yǎng)基C通過約束壁50經(jīng)毛細作用吸到相應孔32的現(xiàn)象受到關注。如圖 11、15和19所示，優(yōu)選地，約束壁50沿著弓形縱向軸線彎曲。弓形的形狀抵抗了毛細管吸 引力，并給約束壁50提供了抗毛細作用效果。孔32(32a、32b)可形成弓形，約束壁50沿著 其邊緣設置。此外，如圖11、15和19所示，孔32可具有各種構造。具體地說，氣體傳送孔 32a可延伸跨過架子20的側邊緣52的一部分來形成(圖11和15)，或沿著架子20的側邊 緣52的全長延伸而形成(圖19)。約束壁50可設有其它抗毛細作用特征，如相較于各自架子20的基底28成角度地 設置(圖21)；設有弓形橫截面(圖23)；和/或，包括背離相應孔32的非平滑表面53。如 圖20-24所示，非平滑表面53可包括各種表面中斷或突起，如隆起、凹坑、粗糙區(qū)域、條紋等 等。這些抗毛細作用特征旨在破壞毛細管吸引。附加地，或者可選地，約束壁50可被制造 成或被制備成具有疏水部分來排斥細胞培養(yǎng)基C。例如，約束壁50終止處的自由邊緣54可 制備成疏水的。約束壁50的其它部分可做同樣處理。為進一步增強這種效果，架子20的 基底28的一些部分可制成親水的，以增強細胞培養(yǎng)基C在架子20的基底28上的保持力。
8這些各種抗毛細作用特征可以各種組合方式使用。容器10可設有額外的特征或變化。例如，參考圖2和25，管狀頸16可設為相對 容器10成不同的角取向。如圖2所示，管狀頸16沿著縱向軸線延伸，該縱向軸線與最上面 的架子20的基底28界定出的平面成夾角β而設置。夾角β可在約0-90度的范圍。如 圖2所示，夾角為0度時，管狀頸16從頂部14的側面伸出。如圖25所示，夾角為90度時， 管狀頸16具有垂直定向，并從頂部14的基底34伸出。對這種布置方式，吸液管通道可設 為通過氣體流動通道40到達位于底部12的基底24附近的空間，用于移除細胞培養(yǎng)基或細 胞。夾角β可選地是銳角。優(yōu)選地，容器10可以形成來與其它容器堆疊。為實現(xiàn)這樣的堆疊，優(yōu)選地，頂部 14界定出上部的支撐表面，該表面與底部12界定出的支撐表面平行。在這種方式中，兩個 或多個容器10可以堆疊，上部堆疊的容器的底部12由下部堆疊的容器10的頂部14支撐。 為了加強穩(wěn)定性，可在底部12的外表面上界定出凸邊56。相應地，頂部14的壁36可以形 成以從基底34輕微突起。壁36可以形成為用以嵌套地容納凸邊56，以在堆疊構造中提供 橫向的穩(wěn)定性。應注意的是，頂部14的壁36，特別是通過從基底34突起，可被構造以主要 承受上部堆疊的容器10的重量。凹處48的存在所造成的不穩(wěn)定問題可因此得以避免。各架子20的基底28優(yōu)選地形成為平面的。可選地，基底28可形成帶有波紋、波 浪或其它構造來增加表面積。對于任何構造，優(yōu)選地，由架子20支撐的細胞培養(yǎng)基C層與 由底部12支撐的容器10平行地設置。底部12的基底24可同樣構造為波紋、波浪或另外 形成以具有增加的表面積。對于任何構造，優(yōu)選地，由底部12支撐的細胞培養(yǎng)基C層與細 胞培養(yǎng)基C的其它層平行。容器10可提供為組件，其帶有相應的蓋58，該蓋58被形成為用以裝配到管狀頸 16上，以密封開口 18。任何已知的允許裝配的排列方式都可使用，例如摩擦配合、干涉配 合、螺紋連接或卡口固定。蓋58可形成固體的以便成為非通風的?？蛇x地，蓋58可設有一 個或多個通風孔60，該孔可包括透氣性的/不透液性的膜61。此外，蓋58可包括一個或多 個可調節(jié)閥門62，該閥門允許在封閉空間22及在外的固定裝置之間的選擇性無菌連接。此 外，蓋58可包括一個或多個管連接件64來允許與一個或多個供給管T (例如，氣體供給管) 直接和連續(xù)地連通。在使用中，容器10置于第一末端38之上，并且通過開口 18引入足夠量的細胞培 養(yǎng)基C到封閉空間22中，來為底部12和每個架子20提供目標體積量。吸液管可用來引入 細胞培養(yǎng)基C，該吸液管通過開口 18插入到頂部14和鄰近架子20之間的封閉空間22。引 入的細胞培養(yǎng)基C集中在鄰近第一末端38的空間中，并在流動孔32b之間平衡，來提供與 底部12和每一架子20相應的細胞培養(yǎng)基C的分隔體積量。一旦達到平衡，容器10就被調 整成用底部12支撐，細胞培養(yǎng)基C分散跨過底部12和每一個架子20。蓋58可裝配到管狀 頸16上來密封開口 18。此后，容器10可設置在培養(yǎng)箱中。為了運輸，容器10優(yōu)選保持直 立，細胞培養(yǎng)基C被積聚在鄰近第一末端38的封閉空間22中。多個容器10可在培養(yǎng)時堆 疊。為了抽取細胞培養(yǎng)基C用于交換、或細胞收集的目的，容器10可置于第一末端38 上。吸液管，或其它抽取裝置，可以引入來從第一末端38附近抽取細胞培養(yǎng)基C。這允許徹 底的移除。吸液管可被引入到頂部14和相鄰的架子20之間的封閉空間22中，進入鄰近第一末端38的空間以便用于抽取。在負壓下，細胞培養(yǎng)基C可被抽吸通過流動孔32b到達鄰 近頂部14的空間，用于從該處抽取。可選地，細胞培養(yǎng)基C可通過開口 18倒出。可以利用 胰酶，或其它消化劑來釋放細胞用于收獲。
權利要求
一種用于培養(yǎng)細胞的容器，包括底部，包括基底，一向上延伸的壁至少部分地形成底部的基底的邊界；頂部，包括基底，一向下延伸的壁至少部分地形成頂部的基底的邊界；管狀頸，其內限定有開口；以及，一個或多個架子，每一個架子包括基底，向上延伸的壁至少部分地形成架子的基底的邊界，其中，一個或多個架子中的第一架子的向上延伸的壁與頂部的向下延伸的壁鄰接，第一架子位于底部和頂部之間，每一個架子的基底具有至少一個在其內形成的孔，并且其中，底部、頂部以及一個或多個架子共同界定了一用于培養(yǎng)細胞的封閉空間，管狀頸從容器中延伸出，能夠通過管狀頸的開口進入封閉空間。
2.權利要求1的容器，其中至少一個架子包括第二架子，第二架子位于底部和第一架 子之間，底部的壁鄰接第二架子。
3.權利要求2的容器，其中容器具有第一末端，在頂部和從第一末端延伸出預定長度 的第一架子之間界定出第一空間，在底部和從第一末端延伸出預定長度的第二架子之間界 定出第二空間，第一和第二空間基本上相等。
4.權利要求3的容器，其中開口被排列為允許吸液管進入到容器第一末端附近的第一 空間。
5.權利要求3的容器，其中在每一個架子中形成流動孔，第一空間與第一架子的流動 孔連通，第二空間與第二架子的流動孔連通。
6.權利要求3的容器，其中頂部的基底具有與第一架子的基底相隔第一距離的第一部 分，頂部的基底具有與第一架子的基底相隔第二距離的第二部分，第一間距比第二間距大。
7.權利要求6的容器，其中開口被排列為允許吸液管進入到容器第一末端附近的第一 空間。
8.權利要求6的容器，其中第二部分從容器的第一末端延伸出預定長度。
9.權利要求6的容器，其中頂部的基底包括第三部分，該第三部分在頂部的基底的第 一部分和第二部分之間延伸并鄰接第一部分和第二部分。
10.權利要求9的容器，其中頂部的基底的第一部分和第二部分大體平行地設置。
11.權利要求10的容器，其中第三部分大體是平的，相對由基底的第二部分界定的平 面成夾角地設置，該夾角在約10-90度的范圍內。
12.權利要求11的容器，其中夾角在約10-30度的范圍內。
13.權利要求11的容器，其中夾角是約20度。
14.權利要求6的容器，其中管狀頸從頂部伸出。
15.權利要求1的容器，其中頂部進一步包括至少一個通風開口。
16.權利要求15的容器，其中一透氣性的膜延伸跨過通風開口。
17.權利要求1的容器，其中管狀頸的開口為橢圓形或半圓形，沿著管狀頸的長度的至 少一部分。
18.權利要求1的容器，其中管狀頸沿著一縱向軸線延伸，該縱向軸線與由第一架子的基底界定的平面成夾角地設置，該夾角在約0-90度的范圍內。
19.權利要求18的容器，其中夾角是約0度。
20.權利要求18的容器，其中夾角是約90度。
21.權利要求18的容器，其中夾角是銳角。
22.權利要求1的容器，其中在每一個架子中形成氣體傳送孔，各架子的氣體傳送孔沿 直線對準，以界定出氣體流動通道。
23.權利要求22的容器，其中氣體流動通道延伸到在管狀頸中界定的開口附近。
24.權利要求22的容器，其中在每一個架子中形成流動孔，每一個架子的流動孔與各 個架子的氣體傳送孔相間隔開。
25.權利要求1的容器，其中每一個架子包括從基底向上延伸的約束壁，該約束壁沿著 孔的至少一部分界定。
26.權利要求25的容器，其中約束壁沿著弓形縱向軸線彎曲。
27.權利要求25的容器，其中約束壁與各個架子的基底成角度地設置。
28.權利要求25的容器，其中約束壁具有弓形橫截面。
29.權利要求25的容器，其中約束壁具有背離各個孔的非平滑表面。
30.權利要求25的容器，其中約束壁終止于自由邊緣，約束壁至少沿著自由邊緣是疏 水的。
31.權利要求30的容器，其中各個架子的基底具有與約束壁相間隔開的親水部分。
32.一種組件，包括根據(jù)權利要求1形成的容器；以及， 蓋，該蓋形成為用以裝配到管狀頸上。
33.權利要求32的組件，其中蓋是通風的。
34.權利要求32的組件，其中蓋不是通風的。
35.權利要求32的組件，其中蓋包括閥門以允許選擇性地進入封閉空間。
36.權利要求32的組件，其中蓋包括用于連接一個或多個管的裝置。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種培養(yǎng)細胞的容器，包括底部，包括基底，一向上延伸的壁至少部分地形成底部的基底的邊界；頂部，包括基底，一向下延伸的壁至少部分地形成頂部的基底的邊界；其內限定有開口的管狀頸；以及，一個或多個架子，其中，每一個架子包括基底，向上延伸的壁至少部分地形成架子的基底的邊界。第一架子的向上延伸的壁與頂部向下延伸的壁的邊界，第一架子位于底部和頂部之間。每一個架子的基底具有其內形成的至少一個孔。底部、頂部以及一個或多個架子共同界定了一用于培養(yǎng)細胞的封閉空間。管狀頸從帶有封閉空間的容器伸出，該封閉空間可通過管狀頸中的開口進入。有利地，這種容器以提高效率和減少細胞培養(yǎng)花費的方式來提供高容量細胞培養(yǎng)。
文檔編號C12M3/00GK101962615SQ201010289380
公開日2011年2月2日 申請日期2010年7月22日 優(yōu)先權日2009年7月22日
發(fā)明者A·W·凱, M·S·尚勒, W·J·萊西 申請人:貝克頓·迪金森公司