專利名稱：一種羊血高活性免疫球蛋白濃縮物及制備方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明屬于食品添加劑領域，具體涉及一種羊血高活性免疫球蛋白濃縮物及其制
備方法。
背景技術(shù)：
免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)是具有抗體活性的，能與相應的抗原發(fā)生特異 性結(jié)合反應的球蛋白，普遍存在于哺乳動物的血液、組織液、淋巴液和體外分泌液中的蛋白 質(zhì)。免疫球蛋白在動物體內(nèi)具有重要的免疫和生理調(diào)節(jié)作用，對于改善嬰幼兒、中老年人及 免疫力低下人群的健康具有重要的作用。其廣泛應用于開發(fā)功能性食品原料。
動物血液中含有1. 5 2%具有活性的免疫球蛋白，是一種豐富、廉價的活性免疫 球蛋白的來源。從動物血液中提取免疫球蛋白的方法很多，常用的有鹽析法、有機溶劑沉淀 法、變性沉淀法、超濾法、柱層析法等。目前生產(chǎn)上應用的主要有鹽析法、低溫乙醇沉淀法、 超濾法等。其中鹽析法可以在常溫下生產(chǎn)，但其要經(jīng)過長時間的脫鹽；有機溶劑沉淀法大都
需要在低溫下反應，提取的步驟比較繁瑣；如何在提取過程中減少免疫球蛋白的變性，提高 免疫球蛋白得率，是目前免疫球蛋白生產(chǎn)中存在的主要問題。 專利《從牛初乳中制備多種生物活性物質(zhì)的方法》(申請?zhí)枮?00410015868. 5) 《從乳汁中提取免疫球蛋白A的方法》(申請?zhí)枮?9114423. 6)《牛、羊初乳粉的制備方法 及其制備的牛、羊初乳粉》(申請?zhí)枮?00510056717.9)公開了從乳汁中提取免疫球蛋白 的方法?！敦i血中提取免疫球蛋白IgG的方法》(申請?zhí)枮?00510018302. 2)公開了從豬血 中提取免疫球蛋白的方法，但是還沒有發(fā)現(xiàn)從羊血中提取免疫球蛋白的報道，主要是由于 羊血具有膻味，其提取物也具有膻味，因而難以作為食品添加劑應用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種無膻味、含有高活性免疫球蛋白的羊血高活性免疫球蛋 白濃縮物。 本發(fā)明另一 目的是提供上述羊血高活性免疫球蛋白濃縮物的制備方法。
實現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案如下 —種羊血高活性免疫球蛋白濃縮物，按照如下方法制備 (1)、預處理按照重量百分比為0. 3 0. 5%的比例向羊血中加入檸檬酸三鈉，攪 拌均勻，然后在4000 6000g離心6 10min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上 層為羊血漿蛋白溶液，收集上層的羊血漿蛋白溶液； (2)、將所得羊血漿蛋白溶液置于密閉容器中加熱到58 7(TC，用真空泵抽氣，當 真空度達到0. 07 0. 09兆帕時，再抽氣2 4分鐘；得到無膻味的羊血漿蛋白溶液；
(3)、用水將步驟(2)所得羊血漿蛋白溶液稀釋至濃度為5 7%，然后經(jīng)過120 140ku濾膜超濾2 3次，收取截留液； (4)、將截留液冷凍干燥12 24小時，得到無膻味的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物。 上述羊血高活性免疫球蛋白濃縮物步驟(1)中所述的羊血可以是新鮮羊血。
上述羊血高活性免疫球蛋白濃縮物步驟(2)中所述的真空度優(yōu)選為0. 08兆帕。
上述羊血高活性免疫球蛋白濃縮物的制備方法，按照如下步驟進行
(1)、預處理按照重量百分比為0. 3 0. 5%的比例向羊血中加入檸檬酸三鈉，攪 拌均勻，然后在4000 6000g離心6 10min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上 層為羊血漿蛋白溶液，收集上層的羊血漿蛋白溶液； (2)、將所得羊血漿蛋白溶液置于密閉容器中加熱到58 7(TC，用真空泵抽氣，當 真空度達到0. 07 0. 09兆帕時，再抽氣2 4分鐘；得到無膻味的羊血漿蛋白溶液；
(3)、用水將步驟(2)所得羊血漿蛋白溶液稀釋至濃度為5 7%，然后經(jīng)過120 140ku濾膜超濾2 3次，收取截留液； (4)、將截留液冷凍干燥12 24小時，得到無膻味的羊血高活性免疫球蛋白濃縮 物。 上述制備方法步驟(1)中所述的羊血可以是新鮮羊血。 上述制備方法步驟(2)中所述的真空度優(yōu)選為0. 08兆帕。 本發(fā)明羊血高活性免疫球蛋白濃縮物可作為食品添加劑添加于食品中。 本發(fā)明具有的優(yōu)點(1)、本發(fā)明羊血免疫球蛋白活性高，可達90%以上；(2)、本
發(fā)明無膻味，口味好，采用物理方法脫除了羊血免疫球蛋白中85 95%的膻味；(3)、本發(fā)
明羊血免疫球蛋白使用安全，在制備過程中沒添加任何有機溶劑；(4)、本發(fā)明制備方法產(chǎn)
量高，每千克羊血可制備30克以上的羊血免疫球蛋白濃縮物；(5)、本發(fā)明方法簡單易行、
成本低、能耗可降低52%以上；(6)本發(fā)明利用了通常作為廢物排放的羊血，減少了環(huán)境污染。
具體實施例方式
實施例1羊血高活性免疫球蛋白濃縮物的制備 (1)向500g羊血液中加入濃度為20%的檸檬酸三鈉溶液10g，攪拌均勻，然后在 5000g離心(TGL-16A離心機，長沙平凡儀器儀表有限公司)6min，分離得到兩層溶液，下層 為羊血紅蛋白溶液，上層為羊血漿蛋白溶液，收集上層的羊血漿蛋白溶液(175g)。
(2)將所得羊血漿蛋白溶液置于密閉容器中，升溫到65t:，用真空泵抽氣，當真空 度達到0. 085兆帕時，再抽氣2分鐘，得無膻味的羊血漿蛋白溶液。 (3)用水將步驟(2)所得的羊血漿蛋白溶液稀釋至濃度為5%，經(jīng)過120ku濾膜 (LM-125，北京旭邦膜設備有限責任公司)超濾3次，取截留液。 (4)將截留液進行冷凍干燥(FD-1PF，北京德天佑科技發(fā)展有限公司)12小時，得 到無膻味的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物15. 5克。 采用單向免疫擴散法測定所得羊血高活性免疫球蛋白濃縮物中活性免疫球蛋白
的含量，結(jié)果活性免疫球蛋白的含量為7. 1克。 實施例2羊血高活性免疫球蛋白濃縮物的制備 (1)向1000g羊血液中加入濃度為20X的檸檬酸三鈉溶液22g，攪拌均勻，然后在 4000g離心(TGL-16A離心機，長沙平凡儀器儀表有限公司)8min，分離得到兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上層為羊血漿蛋白溶液，收集上層的羊血漿蛋白溶液(370g)。 (2)將所得的羊血漿蛋白溶液置于密閉容器中，升溫到64t:，用真空泵抽氣，在真
空度達到0. 086兆帕時再抽氣3分鐘，得到無膻味的羊血漿蛋白溶液。 (3)用水將步驟(2)所得羊血漿蛋白溶液稀釋至濃度為6X，經(jīng)過130ku濾膜
(LM-125，北京旭邦膜設備有限責任公司)超濾2次，收取截留液。 (4)將截留液進行冷凍干燥(FD-1PF，北京德天佑科技發(fā)展有限公司)15小時，得 到無膻味的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物32克。 采用單向免疫擴散法測定所得羊血高活性免疫球蛋白濃縮物中活性免疫球蛋白
的含量，結(jié)果活性免疫球蛋白的含量為14. 6克。 實施例3羊血高活性免疫球蛋白濃縮物的制備 (1)向1000g羊血液中加入濃度為20X的檸檬酸三鈉溶液22g，然后在5000g下離 心(TGL-16A離心機，長沙平凡儀器儀表有限公司)6min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋 白溶液，上層為羊血漿蛋白溶液，取上層的羊血漿蛋白溶液(365g)。 (2)將所得羊血漿蛋白置于密閉容器中，升溫到64t:，用真空泵抽氣，在真空度達 到0. 086兆帕時再抽氣4分鐘，得無膻味的羊血漿蛋白溶液。 (3)用水將步驟(2)所得羊血漿蛋白溶液稀釋至濃度為7X，經(jīng)過120ku濾膜 (LM-125，北京旭邦膜設備有限責任公司)超濾2次，收取截留液。 (4)將截留液進行冷凍干燥(FD-1PF，北京德天佑科技發(fā)展有限公司)13小時，得 到無膻味的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物32. 5克。 采用單向免疫擴散法測定所得羊血高活性免疫球蛋白濃縮物中活性免疫球蛋白 的含量，結(jié)果活性免疫球蛋白的含量為14. 8克。
權(quán)利要求
一種羊血高活性免疫球蛋白濃縮物，按照如下方法制備(1)、預處理按照重量百分比為0.3～0.5％的比例向羊血中加入檸檬酸三鈉，攪拌均勻，然后在4000～6000g離心6～10min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上層為羊血漿蛋白溶液，收集上層的羊血漿蛋白溶液；(2)、將所得羊血漿蛋白溶液置于密閉容器中加熱到58～70℃，用真空泵抽氣，當真空度達到0.07～0.09兆帕時，再抽氣2～4分鐘；得到無膻味的羊血漿蛋白溶液；(3)、用水將步驟(2)所得羊血漿蛋白溶液稀釋至濃度為5～7％，然后經(jīng)過120～140ku濾膜超濾2～3次，收取截留液；(4)、將截留液冷凍干燥12～24小時，得到無膻味的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物。
2. 按照權(quán)利要求l所述的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物，其特征在于其步驟(1)中所 述的羊血是新鮮羊血。
3. 按照權(quán)利要求1或2所述的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物，其特征在于其步驟(2) 中所述的真空度為O. 08兆帕。
4. 權(quán)利要求1所述的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物的制備方法，按照如下步驟進行(1) 、預處理按照重量百分比為0. 3 0. 5%的比例向羊血中加入檸檬酸三鈉，攪拌均 勻，然后在4000 6000g離心6 10min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上層為 羊血漿蛋白溶液，收集上層的羊血漿蛋白溶液；(2) 、將所得羊血漿蛋白溶液置于密閉容器中加熱到58 7(TC，用真空泵抽氣，當真空 度達到0. 07 0. 09兆帕時，再抽氣2 4分鐘；得到無膻味的羊血槳蛋白溶液；(3) 、用水將步驟(2)所得羊血漿蛋白溶液稀釋至濃度為5 7%，然后經(jīng)過120 140ku濾膜超濾2 3次，收取截留液；(4) 、將截留液冷凍干燥12 24小時，得到無膻味的羊血高活性免疫球蛋白濃縮物。
5. 按照權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于其步驟(1)中所述的羊血是新鮮羊血。
6. 按照權(quán)利要求4或5所述的制備方法，其特征在于其步驟(2)中所述的真空度為 0. 08兆帕。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種羊血高活性免疫球蛋白濃縮物及其制備方法，屬于食品添加劑領域。本發(fā)明主要是向羊血中加入檸檬酸三鈉，然后離心，收取羊血漿蛋白溶液；在密閉容器中抽氣，獲得無膻味的羊血漿蛋白溶液；再用水稀釋、然后經(jīng)濾膜超濾、冷凍干燥即得羊血高活性免疫球蛋白濃縮物。本發(fā)明羊血免疫球蛋白活性高，無膻味，口味好，使用安全；本發(fā)明方法產(chǎn)量高，每千克羊血可制備30克以上的羊血免疫球蛋白濃縮物；本發(fā)明方法簡單易行、成本低、能耗可降低52％以上；本發(fā)明利用了充分利用了羊血資源，減少了環(huán)境污染。
文檔編號A23L1/305GK101766252SQ201010000938
公開日2010年7月7日 申請日期2010年1月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月21日
發(fā)明者伏圣興, 楊蘇揚, 蘇東明, 蘇巖, 薛可 申請人:遼源市麒鳴生物技術(shù)綜合開發(fā)有限公司