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全自動串行式熒光pcr檢測系統(tǒng)的制作方法

文檔序號:577828閱讀:214來源:國知局
專利名稱:全自動串行式熒光pcr檢測系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本實用新型涉及用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的基因檢測儀器,特別是可實現(xiàn)從樣品 處理到反應(yīng)結(jié)束全過程自動化的串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)。
背景技術(shù)
聚合酶鏈式反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction)簡稱PCR,已經(jīng)成為核酸檢測的常 規(guī)技術(shù)。在PCR儀中,一個熱循環(huán)塊上有一個或多個用于放置裝有反應(yīng)物混合液的小管的 小孔。循環(huán)塊的溫度在一個約50-55度相對低溫的復(fù)性階段和一個約90-95度的高溫變性 階段之間循環(huán)、并在升溫過程中完成聚合酶鏈延伸反應(yīng)。反應(yīng)樣品在熱循環(huán)塊上經(jīng)過反復(fù) 的"變性"、"退火"、"延伸"階段,即在90-95度高溫處理30秒左右,然后在幾秒鐘之內(nèi)降溫 至50-55度,維持約30秒后再次升溫到90-95度,如此往復(fù)30-40個周期,在每個周期的低 溫段,用外加的光源激發(fā)反應(yīng)液中預(yù)加的熒光示蹤物,使之產(chǎn)生熒光,測量這種熒光變化, 就可獲得相應(yīng)的信息。 現(xiàn)有的PCR儀器都是并行工作的,即需要備足一個批次的待測樣品后, 一起放入 PCR處理裝置,常用的PCR儀器大多允許一次反應(yīng)數(shù)十個試樣、比如常見的96個樣品,也就 是說,這96個試樣要在同一個溫度程序中完成。譬如,羅氏公司的LightCycler 480型高 通量實時熒光定量PCR系統(tǒng)。 在醫(yī)院或?qū)嶒炇?,隨時都會要用到PCR儀器來檢測不同時間處理好的樣品。但是 由于PCR的周期較長,要等待上一個批次反應(yīng)完成才能開始下一個批次的反應(yīng),這樣造成 PCR儀器使用率不高,而且也很影響工作效率,甚至由于樣品需要凍存而會影響檢測結(jié)果。 另外,目前也沒有一臺PCR儀器可以實現(xiàn)從樣品的處理到反應(yīng)過程的完成全部自動化而不 需要人工操作。 一般都需要人工處理樣品,配好PCR反應(yīng)混合液,放于PCR儀上反應(yīng),最后 還需要處理反應(yīng)后的樣品管。在整個PCR檢測過程中,摻入了很多人為因素,影響檢測結(jié)果 的準確性。

實用新型內(nèi)容為克服上述技術(shù)缺陷,本實用新型的目的是提供一種全自動串行式熒光PCR檢測 系統(tǒng),大大提高PCR儀器的使用率,且實現(xiàn)檢測全過程的自動化。 為實現(xiàn)上述目的,采用如下的技術(shù)方案 本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)包括光電閱讀器、待測樣品裝置、 核酸處理裝置、反應(yīng)裝置、機械手和導(dǎo)軌,所述光電閱讀器與所述待測樣品裝置連接,所述 待測樣品裝置與所述核酸處理裝置之間設(shè)置所述導(dǎo)軌和所述機械手,所述核酸處理裝置與 所述反應(yīng)裝置之間設(shè)置所述機械手。 所述待測樣品裝置包括樣品盤、旋轉(zhuǎn)軸和步進電機,所述樣品盤通過旋轉(zhuǎn)軸與所
述步進電機連接,所述樣品盤上沿盤面圓周規(guī)則分布若干用于插入樣品管的孔。 所述核酸處理裝置包括核酸處理盤、旋轉(zhuǎn)機械推桿和核酸處理器;
3[0010] 所述旋轉(zhuǎn)機械推桿在所述核酸處理盤的圓心處活動連接; 所述核酸處理盤包括內(nèi)圈和外圈,所述核酸處理盤沿盤面圓周設(shè)置48個存儲位 和24個核酸處理位,所述存儲位在所述內(nèi)圈,所述核酸處理位在所述外圈;所述外圈固定, 所述內(nèi)圈由計算機控制轉(zhuǎn)動。所述核酸處理器位于所述核酸處理盤的外周,與所述核酸處 理位相對應(yīng)。存儲位并不局限于48個,核酸處理位也不局限于24個;這只是本實用新型的 優(yōu)選實施方式中的一種情況。 所述反應(yīng)裝置包括恒溫反應(yīng)盤和雙溫度反應(yīng)盤。恒溫反應(yīng)盤是指溫度恒定的反應(yīng) 盤,溫度可分別在37t: -55t^P89°C _951:之間選擇,只是本實用新型優(yōu)選為481:反應(yīng)盤或 94t:反應(yīng)盤。 恒溫反應(yīng)盤包括恒溫旋轉(zhuǎn)盤、蓋板和固定軸;蓋板與固定軸相連,固定軸位于恒溫 反應(yīng)盤的圓心;所述恒溫反應(yīng)盤位于所述蓋板的下方,所述恒溫反應(yīng)盤沿盤面圓周有20個 用于承放反應(yīng)杯或管的孔;所述蓋板的側(cè)面有T形槽開口卡;所述T形槽開口卡與所述恒 溫反應(yīng)盤上的孔相對應(yīng);所述蓋板上有兩個相對的缺口。承放反應(yīng)杯或管的孔不局限于20 個,這只是本實用新型的優(yōu)選實施方式中的一種。 如果恒溫定為4『C,則其蓋板上的兩個缺口的位置可以根據(jù)反應(yīng)條件設(shè)定,作為 一個優(yōu)選實施方式,兩個缺口沿圓周直徑處于相對位置。 如果恒溫定為94t:,則其蓋板上的兩個缺口的位置可以根據(jù)反應(yīng)條件設(shè)定,作為
一個優(yōu)選實施方式,兩個缺口的角度可以為108度。 所述雙溫度反應(yīng)盤包括低溫盤、高溫盤、隔熱層、蓋板和固定軸,所述低溫盤位于 外圈,所述高溫盤位于內(nèi)圈,所述低溫盤與所述高溫盤之間用所述隔熱層相互分割形成咬 合線,所述咬合線為齒輪樣交錯狀;所述咬合線上沿盤面圓周的同一圓周線上分布了樣品 管孔;所述蓋板與所述固定軸相連,所述固定軸位于所述低溫盤或高溫盤的圓心;所述低 溫盤和高溫盤位于所述蓋板的下方;所述蓋板的側(cè)面周邊設(shè)置了 T型槽開口卡,所述T型槽 開口卡與所述樣品管孔相對應(yīng);樣品管安裝在蓋板側(cè)面周邊的T型槽開口卡內(nèi),跟隨蓋板 做圓周步進動作和上下動作,從一個樣品管孔逐次移動至相鄰的樣品管孔中,完成了足夠 溫度周期后才脫離蓋板。所述樣品管孔的底部設(shè)置了用于安裝激光二極管的孔位;所述低 溫盤上的樣品管孔設(shè)置了用于安裝光導(dǎo)纖維的孔位。 本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)還包括四孔杯,四孔杯位于所述導(dǎo) 軌上,所述四孔杯設(shè)置了四個樣品管孔。作為優(yōu)選實施方式,所述四孔杯分別在轉(zhuǎn)運過程中 自動加入裂解液、洗滌液1、洗滌液2和洗脫液。 本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)還包括料斗,所述料斗與所述反應(yīng) 盤之間設(shè)置有所述機械手。作為優(yōu)選實施方式,所述料斗內(nèi)有反應(yīng)所需的原料和材料,比如 蓋子,石蠟油、反應(yīng)混合溶液等。 本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)是為實現(xiàn)全自動PCR反應(yīng)過程而設(shè) 計的一種溫度變化并且采集熒光信息的裝置。 所謂"串行",是指將每一個試樣按照先后秩序各自單獨進入反應(yīng)環(huán)境,本實用新 型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)為每一個試樣都提供一個獨立的反應(yīng)環(huán)境;并且可以 做到在每一個試樣完成從高溫到低溫反復(fù)循環(huán)的30-40個周期的過程中還實現(xiàn)了信息的 單獨采集。[0021] 與現(xiàn)有技術(shù)相比,本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)對傳統(tǒng)PCR儀進 行了革新性的改進,改變了傳統(tǒng)PCR儀批次反應(yīng)的模式,提出了流水線式的PCR工作模式, 提高PCR設(shè)備的使用率,節(jié)省使用者的時間,實現(xiàn)隨來隨測,使得系統(tǒng)有更大的靈活性和適 用性。由于采用了兩個固定溫度的溫度盤,沒有采用產(chǎn)生溫度急劇變化的元器件,就避免了 因長期急劇熱脹冷縮帶來的元器件故障,提高了可靠性,降低了制造和使用成本。比采用傳 統(tǒng)的半導(dǎo)體制冷、發(fā)熱方式能獲得更高的溫度變化率,提高了反應(yīng)效率。從待測樣品處理到 結(jié)果甚至廢棄反應(yīng)管的處理,整個檢測過程實現(xiàn)無人干預(yù),完全自動化,節(jié)約了勞力,提高 了工作效率,同時也減少了人為因素對檢測結(jié)果的影響。
圖1是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的待測樣品裝置的一個優(yōu) 選實施例的立體示意圖; 圖2是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的核酸處理裝置的一個優(yōu) 選實施例的俯視示意圖; 圖3是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的48°C恒溫反應(yīng)盤的一個 優(yōu)選實施例的側(cè)視示意圖和俯視示意圖;其中,圖3-1是該實施例中4『C反應(yīng)盤的側(cè)視示 意圖,圖3-2是該實施例中4『C反應(yīng)盤的俯視示意圖; 圖4是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的94°C恒溫反應(yīng)盤的一個 優(yōu)選實施例的俯視示意圖; 圖5是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的雙溫度反應(yīng)盤的一個優(yōu) 選實施例的俯視示意圖和側(cè)視示意圖;其中,圖5-1是該雙溫度反應(yīng)盤的俯視圖,圖5-2是 該雙溫度反應(yīng)盤的側(cè)視示意圖; 圖6是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的四孔杯的一個優(yōu)選實施 例的俯視示意圖和側(cè)視示意圖;其中,圖6-1是四孔杯的俯視示意圖,圖6-2是四孔杯放置 于導(dǎo)軌的剖面圖; 圖7是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的反應(yīng)過程的一個優(yōu)選 實施例的流程示意圖;其中,圖7-1是全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)的在進行熒光定量 RT-PCR的工作流程簡圖;圖7-2是將樣品轉(zhuǎn)移到四孔杯中,并向四孔杯中添加試劑的示意 圖;圖7-3是核酸處理過程的示意圖。
具體實施方式為使本實用新型更加容易理解,下面結(jié)合具體實施例,進一步闡述本實用新型。應(yīng) 理解,這些實施例僅用于說明本實用新型而不用于限制本實用新型的范圍,下列實施例中 未提及的具體實驗方法,通常按照常規(guī)實驗方法進行。
實施例1 : 如圖1所示,為本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的待測樣品裝置 的一個優(yōu)選實施例的立體示意圖,由圖可見,待測樣品裝置包括樣品盤13、旋轉(zhuǎn)軸12和步 進電機ll,樣品盤13通過旋轉(zhuǎn)軸12與步進電機11連接,樣品盤13沿盤面圓周上規(guī)則分布 若干用于插樣品管15的樣品孔130。工作人員將待測樣品裝入樣品管15后,再插入樣品孔 130。同時在樣品管15的管側(cè)面貼上條形碼,光電閱讀器14通過識別樣品管15上的條形 碼以區(qū)分并跟蹤記憶每個待測樣品管的反應(yīng)狀態(tài)。在本實施例中,該樣品盤13可以一次插入三十只試管,步進電機每三十秒移動一個樣品位。
實施例2 : 如圖2所示,為本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的核酸處理裝置 的一個優(yōu)選實施例的俯視圖。該核酸處理裝置包括核酸處理盤21、旋轉(zhuǎn)機械推桿23、核酸 處理器24,還可以包括旋轉(zhuǎn)換頭器22 ;旋轉(zhuǎn)機械推桿23和旋轉(zhuǎn)換頭器22在核酸處理盤21 的圓心處活動連接;核酸處理盤21包括內(nèi)圈和外圈,其沿盤面圓周設(shè)置四十八個存儲位 211和二十四個核酸處理位212,存儲位211在內(nèi)圈,核酸處理位212在外圈;外圈固定,內(nèi) 圈由計算機控制轉(zhuǎn)動。所述核酸處理器位于所述核酸處理盤的外周,與所述核酸處理位相 對應(yīng)。核酸處理裝置配合四孔杯一起工作四孔杯通過導(dǎo)軌62進入存儲位211,然后旋轉(zhuǎn) 機械推桿23將四孔杯移到鄰近的一個位置,進而向外推到外圈的核酸處理位212,接著由 核酸處理器24在四孔杯中對核酸進行處理。最后,四孔杯被送出處理位,轉(zhuǎn)移核酸后,推入 垃圾箱。 實施例3 如圖3所示,為本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的48t:反應(yīng)盤的 一個優(yōu)選實施例的示意圖。 圖3-1是該實施例中48t:反應(yīng)盤的側(cè)視示意圖,該圖顯示,48t:反應(yīng)盤包括恒溫 旋轉(zhuǎn)盤31、蓋板32和固定軸33,蓋板32與固定軸33相連,固定軸33位于48。C反應(yīng)盤的圓 心;48t:反應(yīng)盤位于蓋板32的下方,恒溫旋轉(zhuǎn)盤31有用于承放反應(yīng)杯的孔311 ;蓋板32的 側(cè)面有T形槽開口卡321 ;T形槽開口卡321與48。C反應(yīng)盤上的孔311相對應(yīng)。 圖3-2是該實施例中48t:反應(yīng)盤的俯視示意圖,該圖顯示,恒溫旋轉(zhuǎn)盤31沿盤面 圓周有二十個用于承放反應(yīng)杯的孔311,恒溫旋轉(zhuǎn)盤31恒溫4『C,每30秒轉(zhuǎn)動一次,一次 轉(zhuǎn)18度,10次轉(zhuǎn)180度。蓋板32上沿圓周直徑有兩個相對的缺口 322A和322B,反應(yīng)杯從 322A缺口裝入,從322B缺口卸下,跟隨恒溫旋轉(zhuǎn)盤31旋轉(zhuǎn)180度,時間為五分鐘。 實施例4 : 圖4為本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的94t:反應(yīng)盤的一個優(yōu)選 實施例的俯視示意圖。該94t:反應(yīng)盤4和4『C反應(yīng)盤的結(jié)構(gòu)基本類似,包括恒溫旋轉(zhuǎn)盤、 蓋板和固定軸,蓋板與固定軸相連,固定軸位于94t:反應(yīng)盤4的圓心;94t:反應(yīng)盤位于蓋板 的下方,94t:反應(yīng)盤4沿盤面圓周有20個用于承放反應(yīng)杯的孔;蓋板的側(cè)面有T形槽開口 卡;T形槽開口卡與所述94t:反應(yīng)盤4上的孔相對應(yīng);恒溫旋轉(zhuǎn)盤沿盤面圓周有二十個用 于承放反應(yīng)杯的孔,恒溫旋轉(zhuǎn)盤每30秒轉(zhuǎn)動一次, 一次轉(zhuǎn)18度,蓋板上沿圓周有兩個缺口 , 反應(yīng)杯從缺口 4A裝入,從缺口 4B卸下。兩者差別之處在于該94t:反應(yīng)盤4恒溫在94t:; 缺口的位置不同,見圖4所示,缺口 4A和缺口 4B的位置相隔108度,這樣,反應(yīng)時間只有3 分鐘。調(diào)整缺口的角度位置,可以改變熱處理的時間。 實施例5 : 圖5是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的雙溫度反應(yīng)盤的一個 優(yōu)選實施例的結(jié)構(gòu)示意圖。其中,圖5-1是該雙溫度反應(yīng)盤的俯視圖,由圖5-1可見,該雙 溫度盤裝置包括低溫盤51、高溫盤52、隔熱層53,低溫盤51和高溫盤52是兩塊導(dǎo)熱性能 良好的金屬盤;低溫盤51位于外圈,溫度可以是50-55°C,高溫盤52位于內(nèi)圈,溫度可以是 90-95t:,低溫盤51與高溫盤52之間用隔熱層53相互分割形成齒輪樣交錯狀的咬合線。
6咬合線上沿盤面圓周的同一圓周線上分布了樣品管孔56。樣品管孔56可以為40個或80 個,這樣,相鄰的試樣杯孔實際上位于不同的溫度區(qū)上。如果一個試樣從一個孔被移入相鄰 的另一個孔中,就從一個溫度區(qū)到了另一個溫度區(qū)。如果這個試樣沿著圓周移動了 80個孔 位,那么這個試樣就經(jīng)歷了40個高、低溫變化的周期,也就是說完成了一個PCR反應(yīng)環(huán)境的 全過程。 如何實現(xiàn)試樣杯沿著圓周依次從一個孔向相鄰的孔移動呢?這是通過可轉(zhuǎn)動并 可上下移動的蓋板來實現(xiàn)的。圖5-2是該雙溫度反應(yīng)盤的側(cè)視示意圖,結(jié)合圖5-2,該雙溫 度反應(yīng)盤除了低溫盤51、高溫盤52和隔熱層53,還包括蓋板54和固定軸55,蓋板54與固 定軸55相連,固定軸55位于低溫盤51或高溫盤52的圓心;低溫盤51和高溫盤52位于蓋 板54的下方;蓋板54的側(cè)面周邊設(shè)置了 40個T型槽開口卡541,樣品管59通過T型槽開 口卡541卡在蓋板54上。T型槽開口卡541與樣品管孔56相對應(yīng);樣品管59安裝在蓋板 54側(cè)面周邊的T型槽開口卡541內(nèi),跟隨蓋板54做圓周步進動作和上下動作,30秒鐘之后, 蓋板向上移動,將所有樣品管59拔出樣品管孔56。蓋板54轉(zhuǎn)動一個孔位,再向下移動,這 樣,所有樣品管59就一起更換了溫度環(huán)境。蓋板54的上下移動和步進旋轉(zhuǎn)移動可以由兩 個步進電機分別驅(qū)動。蓋板54攜帶樣品管作上下和圓周運動,每三十秒動作一次,40次動 作旋轉(zhuǎn)一周。蓋板每轉(zhuǎn)動一個孔位,可以用機械手將一個新的樣品管卡在蓋板上,當(dāng)這個樣 品管已經(jīng)完成了 40個溫度周期后,就會被從蓋板上移出。 樣品管孔56底部設(shè)置了用于安裝激光二極管的二十個孔位57 ;低溫盤51上的樣 品管孔56的側(cè)面設(shè)置了用于安裝光導(dǎo)纖維的二十個孔位58,用于讀取信號。在樣品管停留 于低溫試樣孔中時,激光管發(fā)出激發(fā)光,剌激樣品管中的試樣發(fā)出可能的熒光,可能的熒光 被光纖捕捉并傳送到光電檢測部分。
實施例6 : 圖6為本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)中的四孔杯的一個優(yōu)選實施 例的示意圖,圖6-1是四孔杯61的俯視示意圖,圖6-2是四孔杯61放置于導(dǎo)軌62的剖面 圖。四孔杯61位于導(dǎo)軌62上,導(dǎo)軌62具有卡槽,可以將四孔杯61固定于導(dǎo)軌的卡槽內(nèi), 并能在槽內(nèi)靈活運行。四孔杯61設(shè)置了四個樣品管孔611,四孔杯61的四個樣品管孔611 分別放入裂解液、洗滌液1、洗滌液2和洗脫液。四孔杯61沿著導(dǎo)軌62進入核酸處理盤內(nèi) 圈上的存貯位置。 實施例7 : 圖7是本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)工作的一個優(yōu)選實施例的具 體工作的流程示意圖。 圖7-1是全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)的在進行熒光定量RT-PCR的工作流程 簡圖。第一階段待檢樣品處理后,含純化后的核酸的反應(yīng)混合液進入48t:反應(yīng)盤3。機械 手71C從料斗72B中抓取反應(yīng)杯15B后,將其放置于48t:反應(yīng)盤3上。待檢樣品通過核酸 處理裝置和四孔杯61得到純化后的核酸,純化后的核酸在四孔杯61中的最后一孔中。四 孔杯61通過導(dǎo)軌62和機械手被移至旋轉(zhuǎn)移液器74B旁,旋轉(zhuǎn)移液器74B將四孔杯61中純 化后的核酸吸取到反應(yīng)杯15B中。旋轉(zhuǎn)移液器74B換頭后,從加液站73B中吸取反應(yīng)液到 反應(yīng)杯15B中,其中,加液站73B預(yù)先存放有反應(yīng)液。然后,機械手71C又從料斗72C中抓 取與反應(yīng)杯15B配合的杯蓋蓋于反應(yīng)杯15B上。上述已經(jīng)詳細說明過48t:反應(yīng)盤3的結(jié)
7構(gòu),簡言之,48°C反應(yīng)盤3分兩層,上層蓋板固定,下層旋轉(zhuǎn),每30秒一個位,上層蓋板有上 料缺口和卸料缺口 ,每一個反應(yīng)杯在此停留5分鐘。 第二階段反應(yīng)杯15B從4『C反應(yīng)盤3轉(zhuǎn)移到94t:反應(yīng)盤4上。此階段動作由機 械手71D完成。94°C反應(yīng)裝盤4的結(jié)構(gòu)與48°C反應(yīng)盤3的結(jié)構(gòu)相似,只是溫度恒定在94°C , 反應(yīng)杯在此停留2-3分鐘,也是通過上料缺口和卸料缺口進入和離開反應(yīng)裝置的。通過調(diào) 整兩缺口的角度,可以控制在此停留時間。 第三階段反應(yīng)杯15B從94t:反應(yīng)盤4轉(zhuǎn)移到雙溫度反應(yīng)盤5上。在本實施例中, 雙溫度反應(yīng)盤5設(shè)置了兩個。雙溫度反應(yīng)盤5的雙溫盤有四十個孔,每三十秒走一步,轉(zhuǎn)過 兩圈可以完成四十個溫度周期,共2400秒,即40分鐘。相鄰反應(yīng)管出結(jié)果的時間間隔一分 鐘。機械手71E完成將反應(yīng)杯15B從94t:反應(yīng)盤4轉(zhuǎn)移到雙溫度反應(yīng)盤5上,并且從雙溫 度反應(yīng)盤5上將反應(yīng)后的反應(yīng)杯15B移至垃圾箱中。 圖7-2是將樣品轉(zhuǎn)移到四孔杯61中,并在核酸處理過程中向四孔杯61添加試劑 的示意圖。旋轉(zhuǎn)移液器74A從裝有待測樣品的試管15A中吸取待測樣品至四孔杯61的第 一個孔內(nèi)。每完成一次,旋轉(zhuǎn)移液器74A旋轉(zhuǎn)90度,至換頭站75A更換新的"槍頭",然后進 行下一個樣品的加樣。加液站73A中分別預(yù)先存放有裂解液、洗滌液1、洗滌液2、洗脫液。 在四孔杯61中加了待測樣品后,加液站73A中的液體就由計算機程序控制逐步加入四孔杯 61相應(yīng)的管里。樣品處理完后,四孔杯61通過導(dǎo)軌62被轉(zhuǎn)移到合時地方,其中純化后的核 酸被移走,用過的四孔杯61被丟棄。 圖7-3是核酸處理過程的示意圖;四孔杯61通過導(dǎo)軌62進入核酸處理裝置中的 存儲位211(見圖2)。旋轉(zhuǎn)機械手23將存儲位211中的四孔杯61推入處理位212。核酸 處理器24上有可與磁鐵磁性結(jié)合的導(dǎo)套241,在導(dǎo)套241上包裹一塑料管242 ;塑料管242 可以與導(dǎo)套241分離開,并獨自工作。在第一孔中,進行的是核酸的裂解,將塑料管242與 導(dǎo)套241分離開,并且塑料管242獨自在第一孔中攪拌,將液體混勻;3分鐘后,將導(dǎo)套241 與塑料管242套接接在一起,因為第一孔的液體中預(yù)先放入微小磁鐵顆粒,靜置后,微小磁 鐵顆粒可將混合溶液中的核酸吸附,進而通過該磁鐵可吸附在導(dǎo)套241上,進而將核酸帶 入第二孔。在第二孔中,進行的是洗滌。套接于導(dǎo)套241的塑料管242進入第二孔后,將導(dǎo) 套241脫離于塑料管242,則磁鐵脫離于塑料管242,從而吸附于磁鐵的核酸溶于洗滌液中, 進行洗滌,3分鐘后,利用在第一孔中的方式,將洗滌后的核酸吸附于第三孔。第三孔中溶液 為洗滌液,與第二管同樣的方式。同樣的,最后將洗脫后的核酸吸附至第四孔。第四孔為洗 脫液,比如乙醇,在乙醇洗脫液中,核酸可與磁鐵分離,所以最后通過套接有導(dǎo)套241的塑 料管242將溶液中的磁鐵吸附,在溶液中剩余的就是純化后的核酸。全過程12分鐘。處理 結(jié)束后,由旋轉(zhuǎn)機械手23使其回到存儲位211。每處理完一個杯子,用旋轉(zhuǎn)換頭器更換一次 塑料管242。 最后所應(yīng)當(dāng)說明的是,以上實施例僅用以說明本實用新型的技術(shù)方案而非對本實 用新型保護范圍的限制,盡管參照較佳實施例對本實用新型作了詳細說明,本領(lǐng)域的普通 技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解,可以對本實用新型的技術(shù)方案進行修改或者等同替換,而不脫離本實 用新型技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
權(quán)利要求全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,包括光電閱讀器、待測樣品裝置、核酸處理裝置、反應(yīng)裝置、機械手和導(dǎo)軌,所述光電閱讀器與所述待測樣品裝置連接,所述待測樣品裝置與所述核酸處理裝置之間設(shè)置所述導(dǎo)軌和所述機械手,所述核酸處理裝置與所述反應(yīng)裝置之間設(shè)置所述機械手。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,所述待測樣品 裝置包括樣品盤、旋轉(zhuǎn)軸和步進電機,所述樣品盤通過所述旋轉(zhuǎn)軸與所述步進電機連接,所 述樣品盤上沿盤面圓周規(guī)則分布用于插入樣品管的孔。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,所述核酸處理 裝置包括核酸處理盤、旋轉(zhuǎn)機械推桿和核酸處理器;所述核酸處理盤包括內(nèi)圈和外圈,所述核酸處理盤沿盤面圓周設(shè)置48個存儲位和24 個核酸處理位,所述存儲位在所述內(nèi)圈,所述核酸處理位在所述外圈; 所述旋轉(zhuǎn)機械推桿在所述核酸處理盤的圓心處活動連接; 所述核酸處理器位于所述核酸處理盤的外周,與所述核酸處理位相對應(yīng)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,所述反應(yīng)裝置 包括恒溫反應(yīng)盤和雙溫度反應(yīng)盤。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,所述恒溫反應(yīng) 盤包括恒溫旋轉(zhuǎn)盤、蓋板和固定軸;所述蓋板與所述固定軸相連,所述固定軸位于所述恒溫反應(yīng)盤的圓心; 所述恒溫反應(yīng)盤位于所述蓋板的下方,所述恒溫反應(yīng)盤沿盤面圓周有20個用于承放 反應(yīng)杯的孔;所述蓋板的側(cè)面有T形槽開口卡;所述T形槽開口卡與所述恒溫反應(yīng)盤上的孔相對應(yīng);所述蓋板上有兩個相對的缺口 。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,所述雙溫度反 應(yīng)盤包括低溫盤、高溫盤、隔熱層、蓋板和固定軸;所述低溫盤位于外圈,所述高溫盤位于內(nèi)圈,所述低溫盤與所述高溫盤之間用所述隔 熱層相互分割形成咬合線,所述咬合線為齒輪樣交錯狀;所述咬合線上沿盤面圓周的同一圓周線上分布了樣品管孔; 所述蓋板與所述固定軸相連,所述固定軸位于所述低溫盤或高溫盤的圓心; 所述低溫盤和所述高溫盤位于所述蓋板的下方。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,所述蓋板的側(cè) 面周邊設(shè)置了 T型槽開口卡,所述T型槽開口卡與所述樣品管孔相對應(yīng)。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,所述樣品管孔 的底部設(shè)置了用于安裝激光二極管的孔位;所述低溫盤上的樣品管孔設(shè)置了用于安裝光導(dǎo) 纖維的孔位。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,還包括四孔 杯,所述四孔杯位于所述導(dǎo)軌上,所述四孔杯設(shè)置了四個樣品管孔。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),其特征在于,還包括料斗, 所述料斗與所述反應(yīng)盤之間設(shè)置所述機械手。
專利摘要本實用新型公開了一種全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng),包括光電閱讀器、待測樣品裝置、核酸處理裝置、反應(yīng)裝置、機械手和導(dǎo)軌,光電閱讀器與待測樣品裝置連接,待測樣品裝置與核酸處理裝置之間設(shè)置導(dǎo)軌和機械手,核酸處理裝置與反應(yīng)裝置之間設(shè)置機械手。本實用新型的全自動串行式熒光PCR檢測系統(tǒng)是為實現(xiàn)全自動PCR反應(yīng)過程而設(shè)計的一種溫度變化并且采集熒光信息的裝置,對傳統(tǒng)PCR儀進行了革新性的改進,改變了傳統(tǒng)PCR儀批次反應(yīng)的模式,提出了流水線式的PCR工作模式,提高PCR設(shè)備的使用率,整個檢測過程實現(xiàn)無人干預(yù),完全自動化,節(jié)約了勞力,提高了工作效率,同時也減少了人為因素對檢測結(jié)果的影響。
文檔編號C12M1/34GK201530828SQ20092006128
公開日2010年7月21日 申請日期2009年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月28日
發(fā)明者周榮, 蘇曉波, 郭紹華 申請人:呼吸疾病國家重點實驗室;廣州銳達生物科技有限公司
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