專利名稱：十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及--種十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯，特別是一種十二烷基硫酸鈉中和 增菌肉湯的配方及其制備方法。其主要成分是胰蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、 水楊苷、土溫-80、 Triton X-100、甘氨酸、氯化鈉、十二垸基硫酸鈉、蒸餾水制備而成；用 于中和水和食品中大腸桿菌檢驗(yàn)。任何一個(gè)環(huán)境樣品的增菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)，都必須有可靠的去 除殘余的消毒劑及抗菌因子的方法。不采用去除殘余的消毒劑及抗菌因子措施的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)認(rèn) 為是在設(shè)計(jì)上的嚴(yán)重失誤，依據(jù)這樣的實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)果是不可靠的?；瘜W(xué)中和法是目前最常 用的去除殘余的消毒劑及抗菌因子方法，其優(yōu)點(diǎn)是方法簡單，使用方便，效果可靠。已有中 和方法很多，常見的有酸、堿、吸附、稀釋、離心、過濾等。上述均未經(jīng)過嚴(yán)格的篩選并無 法確定其使用濃度；對相應(yīng)的消毒劑及抗菌因子不具有切實(shí)可靠的中和作用；中和劑本身或 與消毒劑及抗菌因子反應(yīng)的產(chǎn)物對樣品微生物有殺滅或抑制其生長的作用；對培養(yǎng)成分有破 壞作用，亦影響其物理性狀。培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營 養(yǎng)基質(zhì)，就營養(yǎng)物質(zhì)而言， 一般不外乎碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子及水等幾大類。在配 制培養(yǎng)基時(shí)，根據(jù)各類微生物的特點(diǎn)，就可以配制出適合不同種類微生物生長發(fā)育所需要的 培養(yǎng)基。培養(yǎng)基除了滿足微生物所必需營養(yǎng)物質(zhì)外，還要求有一定的酸堿度和滲透壓。各類 微生物對營養(yǎng)的要求不盡相同，因而培養(yǎng)基的種類繁多。培養(yǎng)基的制備程序方法，可因其種 類不同而各異，即使同一種配方的培養(yǎng)基，各實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)廠家也會根據(jù)各自的經(jīng)驗(yàn)和原料 質(zhì)量的差異有所調(diào)整，因此，在配制之前，應(yīng)先進(jìn)行小量調(diào)配、預(yù)試，符合使用要求，再按 確定的配方用料實(shí)施配制。試驗(yàn)工作者一直希望能有一種能克服上述不足的中和增菌肉湯， 該培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富，對接種少量大腸菌群可刺激其生長和產(chǎn)氣。需氧芽孢桿菌則全被抑制， 可直接用于吲哚試驗(yàn)，做吲哚試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)預(yù)先加入少量乙醚并震搖后，再加上一層吲哚試劑， 不在震搖，視二液接觸面有無紫紅色出現(xiàn)，若不加乙醚，則易形成持久的乳化而干擾n引哚試 驗(yàn)，這是因存在十二烷基硫酸鈉的關(guān)系。也用于中和樣品增菌培養(yǎng)。
背景技術(shù)：
本發(fā)明的目的在于提供一種十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯，該培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富， 適宜腸道菌的測定；用于樣品增菌培養(yǎng)，可用于中和樣品增菌培養(yǎng)。十二垸基硫酸鈉中和增 菌肉湯營養(yǎng)豐富、配制簡單、選擇性強(qiáng)，與傳統(tǒng)培養(yǎng)基比較，檢出率高，污染小，臨床應(yīng)用效果 滿意.大大提高檢測陽性率，方法簡單、時(shí)間短、準(zhǔn)確性高
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要點(diǎn)在于選擇合適的組分，并進(jìn)行合理混配，經(jīng)加溫、溶解、混合、 冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種十二垸基硫酸鈉中和增菌肉湯。
本發(fā)明選擇的培養(yǎng)基配方如下(克、ml /每升蒸餾水)胰蛋白胨20. 0-22. 0;乳糖5. 0_5. 5; 磷酸氫二鉀2. 70-2. 75;磷酸二氫鉀2. 70-2. 75;水楊苷0. 5-0. 6; 土溫_80 1. 0-1. 2; Triton X-1001. 0-1. 2;甘氨酸0. 5-0. 6;氯化鈉5. 0-5. 5;十二烷基硫酸鈉0. 1_0. 2;蒸餾水至1000mL。
胰蛋白胨對接種少量大腸菌群可刺激其生長和產(chǎn)氣。需氧芽孢桿菌則全被抑制，可直接 用于吲哚試驗(yàn)，做吲哚試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)預(yù)先加入少量乙醚并震搖后，再加上一層吲哚試劑，不在 震搖，視二液接觸面有無紫紅色出現(xiàn)，若不加乙醚，則易形成持久的乳化而干擾吲哚試驗(yàn)，這是因存在十二烷基硫酸鈉的關(guān)系。
十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯，原材料易得，制作方便，基礎(chǔ)成分加入營養(yǎng)豐富的牛肉 浸粉、酵母浸膏粉，酵母浸膏粉主要為微生物生長繁殖提供可溶性含氮物質(zhì)、核酸降解物、 維生素及無機(jī)鹽類等，以補(bǔ)充蛋白胨營養(yǎng)成分的不足部分。
水楊苷、土溫-80 、 Triton X-100、甘氨酸中和樣品中磺胺類藥物及消毒劑的抑菌作用； 十二烷基硫酸鈉破壞樣品中存在的四環(huán)素、金霉素、新霉素、多黏菌素及鏈霉素的抑菌作用。
質(zhì)控此培養(yǎng)基呈淡琥珀色，透明，可有絮狀沉淀。質(zhì)控菌株接種后，兩種溫度培養(yǎng)18~24h， 結(jié)果如下產(chǎn)氣大腸桿菌(ATCC13048)生長良好、大腸埃希菌(ATCC25922)生長良好、鼠傷 寒沙門菌(ATCC14028)生長良好、金黃色葡萄球菌(ATCC25923)生長良好。
本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是
1) 、各成分混合于水中，加熱溶解，調(diào)p朋.6 7.0，
2) 、分裝于放有發(fā)酵倒管的試管，每管10mL， 12rC15min高壓滅菌備用。
3) 、質(zhì)控菌株為產(chǎn)氣大腸桿菌(ATCC13048)、大腸埃希菌(ATCC25922)、鼠傷寒沙門菌
(ATCC14028)、金黃色葡萄球菌(ATCC25923)與相應(yīng)合格對照培養(yǎng)基平行進(jìn)行細(xì)菌生 長的靈敏度試驗(yàn)，應(yīng)符合要求。 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯，營養(yǎng)豐富、配制簡單；(2)選 擇性強(qiáng)、方法靈敏、檢出率高、污染小，臨床應(yīng)用效果滿意；(3)大大提高檢測陽性率，方法 簡單、時(shí)間短、準(zhǔn)確性高。(4)靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一歩的詳細(xì)說明-
按照下表所列數(shù)據(jù)(克、ml /每升蒸餾水)及其所述歩驟進(jìn)行配置 配方一.-
配方
胰蛋白胨20. 0-22. 0
乳糖5. 0-5. 5
磷酸氫二鉀2. 70-2. 75
磷酸二氫鉀2. 70-2. 75
水楊苷0. 5-0. 6
土溫-801. O-l. 2
Triton X-1001. O-l. 2
甘氨酸0. 5-0. 6
氯化鈉5. 0-5. 5
十二垸基硫酸鈉0. l-O. 2
蒸餾水lOOOmL
胰蛋白胨20. 0-22. 0
乳糖5. 2-5. 5磷酸氫二鉀2. 72-2. 75
磷酸二氫鉀2. 71-2. 75
水楊苷0. 55-0. 6
土溫-801. l-l. 2
Triton X-1001. l-l. 2
甘氨酸0. 55-0. 6
氯化鈉5. 2—5. 5
十二烷基硫酸鈉0. 15-0. 2
蒸餾水IOOOibL
配方三:
胰蛋白胨20. 0-21. 0
乳糖5. 0-5. 4
磷酸氫二鉀2. 70-2. 74
磷酸二氫鉀2. 70-2. 73
水楊苷0. 5-0. 57
土溫-801. 0-1. 1
Triton X-1001. 0-1. 1
甘氨酸0. 5-0. 58
氯化鈉5. 0-5. 4
十二烷基硫酸鈉0. 1-0. 12
蒸餾水lOOOmL
配方四:
胰蛋白胨21. 0-22. 0
乳糖5. 0-5. 3
磷酸氫二鉀2. 73-2. 75
眾 減 驚 整2. 70-2. 74
水楊苷0. 55-0. 6
土溫-801. 0-1. 1
Triton X-1001. 1-1. 2
甘氨酸0. 5-0. 55
氯化鈉5. 3-5. 5
十二烷基硫酸鈉0. 16-0. 2
蒸餾水lOOOmL
權(quán)利要求
1、本發(fā)明涉及一種十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯，其特征在于具有如下配方(克、ml/每升蒸餾水)胰蛋白胨20.0-22.0；乳糖5.0-5.5；磷酸氫二鉀2.70-2.75；磷酸二氫鉀2.70-2.75；水楊苷0.5-0.6；土溫-80 1.0-1.2；Triton X-1001.0-1.2；甘氨酸0.5-0.6；氯化鈉5.0-5.5；十二烷基硫酸鈉0.1-0.2；蒸餾水至1000mL。
2、 一種權(quán)利要求1所述十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯的制備方法，其特征在于具有如下的歩驟1) 、各成分混合于水中，加熱溶解，調(diào)p服.6-7.0;2) 、分裝于放有發(fā)酵倒管的試管，每管10mL， 12rC15min高壓滅菌備用；3) 、質(zhì)控菌株為產(chǎn)氣大腸桿菌(ATCC薦8)、大腸埃希菌(ATCC25922)、鼠傷寒沙門菌(ATCC14028)、金黃色葡萄球菌(ATCC25923)與相應(yīng)合格對照培養(yǎng)基平行進(jìn)行細(xì)菌生 長的靈敏度試驗(yàn)，應(yīng)符合要求。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯，特別是一種十二烷基硫酸鈉中和增菌肉湯的配方及其制備方法。其主要成分是胰蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、水楊苷、土溫-80、Triton X-100、甘氨酸、氯化鈉、十二烷基硫酸鈉、蒸餾水制備而成；用于中和水和食品、環(huán)境樣品中大腸桿菌檢驗(yàn)。
文檔編號C12Q1/10GK101591695SQ20081010015
公開日2009年12月2日 申請日期2008年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月26日
發(fā)明者俠 劉 申請人:俠 劉