專利名稱:從瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中回收dna、rna或蛋白質(zhì)片段的系統(tǒng)的制作方法
從瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中回收DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段的系統(tǒng)技術(shù)領(lǐng)域生物技術(shù)、分子生物技術(shù)、生物技術(shù)平臺、電化學(xué)、電分析化學(xué)。本發(fā)明是關(guān)于一種用于從瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中分離 DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段的技術(shù)。本發(fā)明介紹了在使用瓊脂糖凝膠或聚 丙烯酰胺凝膠(下文將稱為凝膠)電泳后,收集凝膠中存在的DNA片段、 RNA片段或蛋白質(zhì)片段的各種方法中的一種方法。在瓊脂糖凝膠的情況下,電泳主要用于DNA或RNA,而在聚丙烯 酰胺凝膠的情況下,電泳主要用于蛋白質(zhì),但是偶爾可用于DNA或RNA。
背景技術(shù):
在使用電泳后,通常將凝膠中的DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段切成凝 膠片。為了提高所需片段的選擇性,應(yīng)該將它們沿每條泳帶切成片。有 幾種方法可用于從切片的凝膠中收集DNA、 RNA或蛋白質(zhì)。常用的方法是將切片的凝膠放入透析管中,填充適當(dāng)?shù)木彌_溶液, 然后在電泳槽中再次使用電泳。于是凝膠中的片段就會出現(xiàn),收集管中 除凝膠外的其他內(nèi)容物。通過分離所收集的緩沖溶液和片段可以收集所 需片段。或者,在使用化學(xué)藥品或加熱溶解切片的凝膠后,直接放入細玻璃 珠、磁性物質(zhì)或樹脂使各片段結(jié)合在一起。然后通過分離結(jié)合的玻璃珠、 磁性物質(zhì)或細樹脂,可以從中收集所需片段。相比蛋白質(zhì)而言,更多不同方法可用于收集DNA或RNA片段。將 膜放入注射器圓筒中,然后將切片瓊脂糖凝膠放入其中。用適宜的壓力 推動注射器活塞,向下磨碎凝膠。 一直推動活塞,以收集粘附在膜上的 DNA。在切片的凝膠上滴一滴或兩滴緩沖溶液。將凝膠置于陰極射線和陽 極射線之間,通過供電將電荷傳送到緩沖溶液和凝膠。于是凝膠中的DNA將被推入緩沖溶液中。以這種方式,可以提取緩沖溶液中所含的 DNA。在帶蓋塑料管的兩個側(cè)面上形成孔并放上膜。將切片的凝膠放入管 中,并在蓋上蓋后將膜與凝膠放置成對齊。將管放入電泳槽中,使電荷 傳送到在兩個側(cè)面上放置膜的地方,以便可以提取凝膠中的DNA、 RNA 或蛋白質(zhì)。 一定時間過后,當(dāng)將要提取凝膠中的DNA、RNA或蛋白質(zhì)時, 倒轉(zhuǎn)管,以便在從膜提取DNA、 RNA或蛋白質(zhì)前使其移到電荷流的相反 方向。然后取出管中的緩沖溶液并收集其中的片段。如上所述可以使用各種技術(shù),但是最普遍的技術(shù)是使用過濾柱。將 含有玻璃元素的一張濾紙放入柱中。把凝膠切成片,使用化學(xué)藥品溶解, 然后使溶解的溶液滲透進入過濾柱。使片段與濾紙中的玻璃元素結(jié)合, 以便通過洗滌可以提取DNA。 一種提取蛋白質(zhì)的流行方法是只使用樹脂 的方法。這種方法是最普遍使用的一種方法,并且關(guān)于這種特殊方法的 具體技術(shù)正在快速進展中,其將成為生物科學(xué)工業(yè)中的重要核心。發(fā)明內(nèi)容技術(shù)問題生物科學(xué)工業(yè)的最終目標(biāo)是質(zhì)量生活的延伸。為了達到此目標(biāo),各 領(lǐng)域和形式都在發(fā)展。其中,在許多容易想象的任務(wù)存在下,分子生物 學(xué)行進步伐非常緩慢。從DNA領(lǐng)域到蛋白質(zhì)領(lǐng)域的研究,包括最基本 DNA、些許高級的RNA和接近目的的蛋白質(zhì)的發(fā)現(xiàn),已經(jīng)相繼和同時在 進行中。這些研究計劃通常由不同的分段工作構(gòu)成。它們通常采取不同途徑, 但只有少數(shù)在要求時能形成完成短區(qū)段計劃的組合。這些工作多數(shù)用手 完成,并且從工作性質(zhì)考慮需要受過良好教育的人。出于這些原因,研 究的前進步伐不可避免地比科學(xué)家所希望看到的慢。對科學(xué)家而言,研 究步伐與科學(xué)家大腦的速度保持一樣快將會非常理想。這種需要要求一種被稱為自動化的技術(shù),而在DNA研究中自動化主要用于堿基序列的分 析。然而,堿基序列分析之前的階段仍由分段工作構(gòu)成。有鑒于上述問題,本發(fā)明的技術(shù)提出一種自動化的技術(shù)方案,并且 為省時、高再現(xiàn)性以及未來自動化的技術(shù)線索鋪平道路。技術(shù)方案在本發(fā)明中,使用瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳后,將與DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段相同寬度的薄膜(ll)以較小間距放置于凝膠上。在薄 膜上形成狹縫(12)并填入緩沖溶液或電解液,然后在緩沖溶液或電解液的 上部連接電泳電極(21) (+,-)。盡管經(jīng)常連接正電極,但是根據(jù)待收集的 片段的電荷,可以連接負電極。附圖顯示了如何處理與電極(21)連接的電 泳槽蓋(圖2、圖3)。與電泳槽蓋(圖2、圖3)連接的電極(圖2)通過狹縫 浸沒在緩沖溶液或電解液中。 一旦在凝膠(14)上完成電泳,則通過截斷片 段方向的電源(31、 32)并將其轉(zhuǎn)向與蓋連接的電極(21)(圖2b),使DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段流進狹縫(12)中的緩沖溶液或電解液。然后通過聚集 緩沖溶液或電解液收集DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段。在狹縫(12)的下部(14)有孔,此處的下部指與狹縫接觸的瓊脂糖凝膠 的上部或聚丙烯酰胺凝膠的一面(93)。狹縫(12)由一片薄膜構(gòu)成(圖7), 而提取DNA、 RNA或蛋白質(zhì)需要多于一個像薄膜的面(圖7)。向薄膜另 一面供給緩沖溶液或電解液,并且向供給的緩沖溶液或電解液上施加電 泳電源(62)。在凝膠的上部或凝膠的里面放置狹縫或薄膜的一面,對于由狹縫、 一個狹縫或多于一個的狹縫構(gòu)成的狹縫而言,通過將電荷的起點或終點 限定在狹縫內(nèi),可以將DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段聚集于狹縫內(nèi)。這就是 此方法與傳統(tǒng)方法的不同之處,傳統(tǒng)方法只可以通過將凝膠切片來收集 DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段。有幾種已知的方法用于從瓊脂糖凝膠中收集蛋白質(zhì)、DNA和聚丙烯 酰胺。這些方法的共同之處是必須在電泳后將凝膠切片,并且為了切片 而停止電泳。'如果相繼研究針對同一目標(biāo)而進行的八個實驗,就很容易理解本發(fā)明的結(jié)構(gòu)。在使用普通電泳進行DNA、 RNA或蛋白質(zhì)的分離及確認過程 的情況下,給出以下實驗條件。下列條件基于水平的情況。相同條件也 可以用于垂直的情況,在此情況下,將位置由水平轉(zhuǎn)為垂直可以得到相 同的結(jié)果。第一,當(dāng)使用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳時(圖5),片段通常 從負電極(41)流向正電極(42)。對于凝膠板(43),在片段方向形成孔(44) 并使用緩沖溶液填充孔(44)。當(dāng)使用電泳時,各種片段(45)—旦到達孔就 迅速穿過(48)孔而到達孔的另一面。即使將熒光物質(zhì)或染料用于片段使其 發(fā)光,但是憑裸眼仍不能直接觀察到片段穿過(48)孔的場面。此時,可以 觀察到(48)的是圍繞孔的片段(47)從負電極消失,然后在正電極方向出 現(xiàn)。如果此時截斷電流并收集孔(49)中的緩沖溶液,可以提取到非常少量 的各種片段。如果將可以吸收DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段的材料,即細玻璃珠、 磁性物質(zhì)或樹脂放入緩沖溶液或電解液中,然后一起取出,那么效率會 極大提高。第二,當(dāng)使用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳時,如果在電源負 極(51)和電源正極(52)之間將非導(dǎo)電材料與凝膠(53)連接起來,就會形成 與非導(dǎo)體相同寬度的不能電泳的陰影(54)區(qū)段。但是如果用允許電流自由流動的導(dǎo)體(53)代替非導(dǎo)體與其連接,則從導(dǎo)體到負電極方向會發(fā)生電泳 (57)。如果使用電泳直至片段到達電源正極,則從導(dǎo)體到電源正極會形成 陰影(57)。第三,按照上述第二個實驗組合導(dǎo)體與非導(dǎo)體,以此方式形成薄膜 (65),使得導(dǎo)體(62)與正電極連接,而非導(dǎo)體(61)與負電極連接。導(dǎo)體(63) 被設(shè)置成與非導(dǎo)體(65)的上部(66)重疊,并且覆蓋至非導(dǎo)體上部的某一高 度。將其稱作"雙薄膜"作為它的俗名。使用凝膠電泳后,連接"雙薄 膜"(圖7、圖8)到待收集片段的正電極方向,即,片段泳帶邊緣的正方 向。當(dāng)"雙薄膜"與凝膠板連接時,導(dǎo)體應(yīng)面對正電極方向,而非導(dǎo)體 應(yīng)面對負電極方向,并且凝膠不應(yīng)該接觸"雙薄膜"的非導(dǎo)體上部的導(dǎo) 體(62)。將電解液或緩沖溶液沿"雙薄膜"的非導(dǎo)體方向滴入,即負電極方向。此時,不允許電解液或緩沖溶液擴散,而是使其停留在待提取的 泳帶上。電荷流動從正電極開始,然后通過"雙薄膜"的導(dǎo)體、"雙薄膜"非導(dǎo)體上部的導(dǎo)體(62)、和電解液或緩沖溶液,直至到達片段。片段在被 電解液或緩沖溶液阻止之前,沿著電荷流動的相反方向前進。此外,如 果使用移液管移取緩沖溶液,則可以簡單地收集各種片段。因此,使用 此實驗可以收集凝膠上的片段。第四,可以使用另一種實驗方法以不同方式制作"雙薄膜"。向與緩 沖溶液或電解液接觸的"雙薄膜"的一面加入由非導(dǎo)體(73)制成的薄膜, 使緩沖溶液或電解液不擴散而保留在安全區(qū)域內(nèi)(圖10、圖11)。以這種 方式制作的"雙薄膜"也被稱為"雙薄膜孔",而非導(dǎo)體薄膜與"雙薄膜" 之間的空間被稱為"狹縫",有時也被稱為"孔"。當(dāng)電泳結(jié)束時,調(diào)整 "狹縫"到待收集片段泳帶的上部(74)。將"雙薄膜孔"(圖10、圖11) 與凝膠連接,然后在再次使用電泳之前將緩沖溶液或電解液放入"孔" 中。以這種方式,可以從"狹縫"的電解液或緩沖溶液中收集DNA或 RNA片段。如果將"雙薄膜孔"的"雙薄膜"下部剪掉而不是與凝膠連接,則 可以得到(圖12)所示的結(jié)果。只除去正電極的導(dǎo)體部分并且直接將電源 正極與其上部連接。截斷電泳的電源正極并向與電泳的電源負極相連接 的電源正極和"雙薄膜孔"的上部提供電流。于是從"狹縫"可以收集 DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段以及緩沖溶液或電解液。第五,如圖15所示,制作具有不同導(dǎo)體位置的"雙薄膜孔"。在下 部建一座橋(101),并且在橋上形成一個像簾子一樣的隔板(101)。將"雙 薄膜孔"(圖16)放入將要在電泳中分離的樣品的泳道上。當(dāng)確認將要凝膠中提取的片段正好在狹縫下面時,停止正在進行的 電泳,向?qū)w連接部分的電源和相關(guān)的電源供電。于是從負電極(lll)方 向,即任意x軸(113)方向,流向正電極(112)方向的片段將同時向任意y 軸(114)和任意z軸(115)方向移動。此處y軸(114)指x軸(113)水平面的垂 直方向,z軸(115)指x軸和y軸平面的垂直方向。移動的片段將包含在 狹縫或孔的緩沖溶液或電解液中。此處在"雙薄膜孔"的情況下,y軸方向的下部(116)比x軸方向的 下部(117)還要向下。因此,當(dāng)使用多泳道電泳時,可阻止相鄰泳道的各 片段相混合。從凝膠孔底到凝膠底的高度(92)應(yīng)該高于"雙薄膜孔"y軸 下部的高度。第六,上述實驗結(jié)果表明,DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段可以通過電泳 得到部分收集。當(dāng)使用多泳道電泳時,必須配備可以收集多泳帶片段的 裝置。因此,應(yīng)該將它們的"雙薄膜孔" 一個接一個地水平和垂直放置。 直接連接薄膜孔的導(dǎo)體和電源正極,或者從"雙薄膜孔"完全除去導(dǎo)體, 并將正電極插腳直接浸泡在緩沖溶液或電解液中。當(dāng)制作瓊脂糖凝膠或 聚丙烯酰胺凝膠時,凝膠中的孔(94)的位置應(yīng)該在與薄膜孔(即,狹縫)對 齊的x軸(95)方向,并且凝膠中的孔(94)的底面高度(94)(S卩,凝膠中的孔 (92)的底面位置)應(yīng)該高于"雙薄膜孔"下部的y軸(102)方向下部的高度。 此方法將避免提取片段時相鄰泳道的片段偶然混合的可能性。通過將緩 沖溶液或電解液放入狹縫中,并使用狹縫的正電流和相同軸線的負電流 提取片段。第七,當(dāng)在使用電泳后將要收集片段時,將"雙薄膜孔"以重疊形 式(圖17)置于瓊脂糖凝膠(圖13)或聚丙烯酰胺凝膠(93)上。"雙薄膜孔" 在正電極里面應(yīng)該具有導(dǎo)體??梢园凑請D12的狀態(tài)制作"雙薄膜孔", 其中切去其用于連接的下部,而不是如第四個實驗所示與凝膠連接。在任意x軸線上使用電泳后,保留負電流而關(guān)閉正電流。使用"雙 薄膜孔"的導(dǎo)體供電,并且為電泳供應(yīng)負電流,為"雙薄膜孔"的導(dǎo)體 供應(yīng)正電流。當(dāng)用于在狹縫中聚集片段所需時間結(jié)束后,切斷電源,并 收集狹縫中的緩沖溶液或電解液以收集其中的片段。最后的方法從制作(圖18)所示的瓊脂或聚丙烯酰胺凝膠板開始。如 圖19和圖20所示,"雙薄膜孔"由導(dǎo)體(131)和非導(dǎo)體(132)構(gòu)成。當(dāng)欲 將其置于凝膠板上使瓊脂或聚丙烯酰胺轉(zhuǎn)化為凝膠時,在凝膠切片后將 其置于固化的凝膠板上。使用非導(dǎo)體作為狹縫。當(dāng)將"雙薄膜孔"置于 凝膠中以固化凝膠時,確保液化凝膠不會在狹縫之間流動。在檢査使用 電泳進行的片段分離和使用緩沖溶液或電解液填充狹縫后,使電荷從狹 縫(132)側(cè)流向片段(133)側(cè),以將待收集的DNA、RNA或蛋白質(zhì)片段(133)送到狹縫(132)側(cè)。以這種方式,將DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段(133)收集 到狹縫(134)中。在需要多泳道電泳的情況下,將多個插腳置于泳道之間,然后如上 所述順次使用電泳。有益效果上述發(fā)明已經(jīng)整合了以往在RNA、 DNA或蛋白質(zhì)片段確認(傳統(tǒng)電 泳工作的下一步驟)后所作的單獨提取工作,因此節(jié)省了時間并允許由連 續(xù)工作代替無關(guān)聯(lián)的多階段手動操作。本方法還在只有分離和確認功能 的電泳過程中加入了量化和純化的新過程。電泳技術(shù)還不能發(fā)揮其全部功能,因為還沒有辦法收集電解的物質(zhì), 而不管它是否是電解作用的一部分,但是電泳技術(shù)已開創(chuàng)了一個新紀元, 即通過促進收集而從組織、細胞、動物血液和植物中直接提取DNA、 RNA、甚至蛋白質(zhì)。這將是一項使手動操作自動化的基礎(chǔ)性技術(shù),特別是提高了工作的 再現(xiàn)性,并將成為生物科學(xué)領(lǐng)域的一項有益發(fā)明。
圖1顯示了本發(fā)明的凝膠板。 圖2顯示了向凝膠板提供電源。圖3顯示了向凝膠板提供電源的電極的后部分,其中背面的電路與 電極相分離。圖4顯示了本發(fā)明的凝膠板。圖5顯示了在有孔存在時,片段穿過孔的順序。圖6顯示了當(dāng)使用電泳時導(dǎo)體和非導(dǎo)體的排列。圖7和圖8顯示了本發(fā)明中片段收集裝置的最基本形式和其操作原理。圖9、圖IO和圖11顯示了比圖7和圖8更有效地收集片段的裝置。圖12顯示了比圖9、圖10和圖11更有效地收集片段的裝置。圖13和圖14解釋了凝膠表面和孔之間的距離以及x軸方向。圖15顯示了當(dāng)同時收集大量片段時,不會被相鄰泳道污染的原理。圖16簡要顯示了同時收集大量片段而不被相鄰泳道污染的裝置。圖17顯示了不管片段尺寸如何而從相同樣品同時收集大量片段的 裝置。圖18、圖19和圖20顯示了幫助生產(chǎn)大量易于使用的收集裝置的設(shè)備。附圖主要部分的附圖標(biāo)記說明11:薄膜12:狹縫13:凝膠鑄件和凝膠板14:凝膠16: L,待純化和收集的諸如DNA、 RNA、蛋白質(zhì)和組織等實驗對象放入其中31、 32、 41、 42、 51、 52、 71、 72、 81、 111、 112:電源的電極或?qū)Ь€44:含有緩沖溶液或電解液的孔 45: DNA、 RNA或蛋白質(zhì)片段 53:非導(dǎo)體 55:導(dǎo)體62、 63、 66:包括導(dǎo)體的板65:由非導(dǎo)體制成的薄板 53:非導(dǎo)體 55:導(dǎo)體62、 63、 66:包括導(dǎo)體的板65:由非導(dǎo)體制成的薄板74:包括部分導(dǎo)體和非導(dǎo)體的雙重板的薄膜孔92:放置實驗對象的孔和凝膠外壁之間的厚度103:關(guān)于為了不被相鄰泳道污染,而應(yīng)該薄于厚度92的說明113、 114、 115:關(guān)于x、 y和z軸電泳部分的詳細理論說明具體實施方式
為了使本發(fā)明的效果最大化,這將是從收集裝置中分離凝膠的最佳 方式,并且在分離后通過獨立地進行確認過程和收集過程,用戶使用新 技術(shù)說明而無需脫離現(xiàn)有方法就能獲得便利。發(fā)明實施方式作為放置圖1中凝膠的凝膠鑄件,圖2a的蓋部分作為下側(cè),而圖 2b作為上側(cè)。它們的組合使得能夠進行分離、純化和收集。工業(yè)實用性大多數(shù)在生物基因工程實驗室中進行的實驗通常是需要大量手動操 作的第一階段實驗。本發(fā)明對這些實驗將有很大幫助,并且通過作為使 手動操作自動化的技術(shù)背景,將為生命科學(xué)進程做出實質(zhì)性的貢獻。
權(quán)利要求
1. 片段在瓊脂糖凝膠上沿著電流流動的x軸方向流動,在x軸方向形成孔,所述片段將移向所述孔,并使用片段吸收劑收集所述孔中的片段,一種收集緩沖溶液或電解液的方法,以及一種利用所述孔中的剩余片段進行另一個過程的方法。
2. 片段在聚丙烯酰胺凝膠上沿著電流流動的x軸方向流動,在x軸 方向形成孔,所述片段將移向所述孔,并使用片段吸收劑收集所述孔中 的片段, 一種收集緩沖溶液或電解液的方法,以及一種利用所述孔中的 剩余片段幫助進行下一個過程的設(shè)備。
3. 片段在二維聚丙烯酰胺凝膠上沿著電流流動的x軸方向流動,并 且當(dāng)電流在y軸方向流動時片段也流動,在y軸方向形成孔,所述片段 將移向所述孔,使用片段吸收劑收集所述孔中的片段, 一種收集緩沖溶 液或電解液的方法,以及一種利用所述孔中的剩余片段幫助進行下一個 過程的設(shè)備。
4. 通過切斷水平面上x軸的電流并使用垂直面上z軸方向的電流, 使片段垂直移向收集裝置,其中在水平面上電流在瓊脂糖凝膠上流動, 并且通過在z軸方向上施加電流使片段垂直移動而進行收集,以及一種 通過使其在z軸方向移動而不是試圖收集來幫助從所述收集裝置進行下 一個過程的設(shè)備。
5. 通過切斷水平面上x軸的電流并使用垂直面上z軸方向的電流, 使片段垂直移向收集裝置,其中在水平面上電流在聚丙烯酰胺凝膠上流 動,并且通過在z軸方向上施加電流使片段垂直移動而進行收集,以及 一種通過使其在z軸方向移動而不是試圖收集來幫助從所述收集裝置進 行下一個過程的設(shè)備。
6. 通過切斷水平面上x軸的電流和水平面上y軸的電流并使用與兩條線垂直的垂直面上Z軸方向的電流,使片段垂直移向收集裝置,其中 在水平面上電流在二維聚丙烯酰胺凝膠上流動,并且通過在Z軸方向上 施加電流使片段垂直移動而進行收集,以及一種通過使其在Z軸方向移 動而不是試圖收集來幫助從所述收集裝置進行下一個過程的設(shè)備。
7. 通過在水平面的x軸和與x軸垂直的z軸的總和方向施加電流, 使片段移向收集裝置,其中在水平面上電流在瓊脂糖凝膠上流動,與x 軸相似,在水平面的y軸和與y軸垂直的z軸的總和方向上施加電流, 使片段移向所述收集裝置,并且在由x軸、y軸和z軸形成的平面的某一 起點方向上施加電流后,通過在水平面和z軸的總和方向施加電流,使 片段移向收集裝置,并移動片段進行收集,以及一種幫助從所述收集裝 置進行下一個過程而不是試圖收集的設(shè)備。
8. 通過在水平面的x軸和與x軸垂直的z軸的總和方向施加電流, 使片段移向收集裝置,其中在水平面上電流在聚丙烯酰胺凝膠上流動, 與x軸相似,在水平面的y軸和與y軸垂直的z軸的總和方向上施加電 流,使片段移向所述收集裝置,并且在由x軸、y軸和z軸形成的平面的 某一起點方向上施加電流后,通過在水平面和z軸的總和方向施加電流, 使片段移向所述收集裝置,并移動片段進行收集,以及一種幫助從所述 收集裝置進行下一個過程而不是試圖收集的設(shè)備。
9.置,在平面的某一起點方向上施加電流后,通過 在水平面和z軸的總和方向施加電流,使片段移向所述收集裝置,并移 動片段進行收集,以及一種幫助從所述收集裝置進行下一個過程而不是 試圖收集的設(shè)備。
10. 通過將電流從使用瓊脂糖凝膠電泳的x軸轉(zhuǎn)向水平面上的y軸 方向,使片段移向收集裝置,并且通過在y軸方向上施加電流使片段移 動而進行收集,以及一種通過使其在y軸方向移動而不是試圖收集來幫助從所述收集裝置進行下一個過程的設(shè)備。
11. 通過將電流從使用聚丙烯酰胺凝膠電泳的x軸轉(zhuǎn)向水平面上的y 軸方向,使片段移向收集裝置,并且通過在y軸方向上施加電流使片段 移動而進行收集,以及一種通過在y軸方向移動它們而不是試圖收集來 幫助從所述收集裝置進行下一個過程的設(shè)備。
12. 通過向收集裝置施加電流使片段移向收集裝置,其中所述收集 裝置用于經(jīng)使用二維聚丙烯酰胺凝膠電泳分離得到的片段,并移動片段 進行收集,以及一種幫助從所述收集裝置進行下一個過程而不是試圖收 集的設(shè)備。
13. 可以使電流流向容納用于收集片段的緩沖溶液或電解液的容器 或狹縫的電極,浸在緩沖溶液或電解液中的長度大于0.01 mm但小于90 mm的電極,浸在緩沖溶液或電解液中的寬度大于0.01 mm但小于90 mm 的電極。
14. 容納用于收集片段的緩沖溶液或電解液的容器或狹縫,其中如 圖7和圖8所示,導(dǎo)體被部分涂布。
15. 容納緩沖溶液或電解液、用于收集片段的容器或狹縫,其中如 圖5所示,薄膜被部分涂布。
16. 容納用于使用電泳裝置收集片段的緩沖溶液或電解液的容器或 狹縫,其壁寬大于0.01mm但小于40mm。
17. 收集裝置的孔底和凝膠底部之間的距離(84)和所述收集裝置從y 軸下部的底部到凝膠底部的長度(85)(68)很短。
18. 對于收集裝置,必須具有狹縫,其長度(79)大于0.4 mm但小于 40mm,其長度(79)大于孔長度(80)的1/5但小于孔長度的40倍,其寬度大于孔寬度的1/10但小于孔寬度的10倍。
19. 能夠?qū)?lt;-><+>電流的流動方向從x軸轉(zhuǎn)向與x軸相應(yīng)的y軸方 向的電泳槽,其中為在瓊脂電泳槽中進行電泳初始設(shè)定x軸。
20. 在電泳槽中能夠?qū)?lt;-><+>電流的流動方向從x軸方向或y軸方 向轉(zhuǎn)向z軸方向的裝置。
21. 對于電泳槽,放置凝膠或凝膠板的部分必須由透明材料制成, 以使光線可以穿透,而其余部分呈黑色或類似色,以使光線可以被部分 吸收。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種直接收集瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠上的DNA、RNA或蛋白質(zhì)的裝置,所述DNA、RNA或蛋白質(zhì)是在對其使用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳后經(jīng)分離和純化得到的。本發(fā)明已經(jīng)改進了收集凝膠中DNA、RNA或蛋白質(zhì)片段的傳統(tǒng)方法,傳統(tǒng)方法是將凝膠切片,以收集對DNA、RNA或蛋白質(zhì)電泳后經(jīng)分離和純化后得到的DNA、RNA或蛋白質(zhì)片段。本發(fā)明提供了一種系統(tǒng),所述系統(tǒng)在使用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳后,確認經(jīng)電泳的DNA、RNA或蛋白質(zhì)片段,然后通過另一電泳將DNA、RNA或蛋白質(zhì)送到所需位置來收集DNA,其中所述系統(tǒng)集成了根據(jù)電荷的流動方向或逆方向提取DNA、RNA或蛋白質(zhì)的過程,并且利用不同于傳統(tǒng)系統(tǒng)的電泳系統(tǒng)來提取DNA、RNA或蛋白質(zhì)。
文檔編號C12M1/42GK101233224SQ200680028027
公開日2008年7月30日 申請日期2006年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月1日
發(fā)明者鄭在景 申請人:鄭在景