專利名稱：：容器裝黑咖啡飲料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及抑制了加熱殺菌后的羥基氫醌產(chǎn)生的具有降血壓作用的容器裝黑咖啡飲料。
背景技術(shù)：
：作為高血壓癥的治療藥，可以列舉作用于取決于神經(jīng)因素的調(diào)節(jié)系統(tǒng)的各種神經(jīng)屏蔽藥、作用于有關(guān)液性因素的調(diào)節(jié)系統(tǒng)的ACE阻礙藥、AT受體對(duì)抗劑、有關(guān)取決于來(lái)自血管內(nèi)層皮的物質(zhì)的調(diào)節(jié)系統(tǒng)的Ca對(duì)抗劑、關(guān)于在腎臟中的體液調(diào)節(jié)系統(tǒng)的降壓利尿藥等的醫(yī)藥品，在醫(yī)療機(jī)關(guān)中這些主要使用于重癥的高血壓病患者。但是，就現(xiàn)狀來(lái)說(shuō)，以高血壓癥治療對(duì)策為目的而使用的醫(yī)藥品給患者帶來(lái)莫大的負(fù)擔(dān)，因?yàn)殡m然這些能夠滿足作為藥物的有效性，但存在不少的副作用。另外，食物療法、運(yùn)動(dòng)療法、以及通過(guò)限制飲酒吸煙等改善生活而進(jìn)行的一般治療方法，正廣泛適用于從輕度癥狀的正常高值高血壓癥患者到重癥高血壓患者。隨著對(duì)一般治療方法的重要性的認(rèn)識(shí)的提高，特別認(rèn)為重要的是對(duì)飲食生活的改善。具有降血壓作用的食品數(shù)量很多，從以前開(kāi)始就盛行探索來(lái)自食品的降血壓素材，并進(jìn)行著各種這些的有效成分的分離鑒定。其中，已報(bào)道有在咖啡等的食品中所含有的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸等顯示卓越的降血壓作用(專利文獻(xiàn)13)。但也有報(bào)道說(shuō)對(duì)于已知的含有大量綠原酸類的咖啡飲料，并沒(méi)有確認(rèn)到其明確的降血壓作用，相反促使血壓上升(非專利文獻(xiàn)l)。專利文獻(xiàn)1:特開(kāi)2002-363075號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2:特開(kāi)2002-22062號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)3:特開(kāi)2002-53464號(hào)公報(bào)非專利文獻(xiàn)1:Eur.J.Clin.Nutr.,53(11)，831(1999)
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供滿足下述條件(A)(C)的容器裝黑咖啡飲料(A)綠原酸類0.011質(zhì)量％;(B)羥基氫醌小于綠原酸類含量的0.1質(zhì)量％;(C)以質(zhì)量比計(jì)，綠原酸類/咖啡固體成分》0.025。具體實(shí)施方式本發(fā)明提供具有卓越的高血壓改善作用、能夠通常攝取的容器裝黑咖啡飲料。本發(fā)明者著眼于咖啡飲料雖然含有綠原酸但是不顯示充分的降血壓作用的事實(shí)，對(duì)降血壓作用和咖啡飲料成分的關(guān)系做了種種研究，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)，包含于咖啡飲料中的羥基氫醌阻礙了綠原酸類的降血壓作用。而且發(fā)現(xiàn)，如果將綠原酸類的量保持在一定的范圍內(nèi)，并且將羥基氫醌的量降低至比通常時(shí)的含量少很多的一定的量以下時(shí)，就可以得到具有卓越的降血壓作用的咖啡組合物。但是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在將咖啡組合物作為容器裝飲料時(shí)，即使降低羥基氫醌的含量，在加熱殺菌處理工序中還會(huì)再生成羥基氫醌。因此，進(jìn)行了進(jìn)一步的研究探討，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)通過(guò)將在飲料中的咖啡固體成分中所占的綠原酸類的比例提高到一定值以上，就能夠抑制在加熱殺菌處理過(guò)程中的羥基氫醌的生成。本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料具有卓越的高血壓改善作用，即降血壓作用或抑制血壓上升的作用，并且可以長(zhǎng)期攝取。因此，本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料可以用作高血壓改善用的藥品，而且也可以用作被標(biāo)注"為了降低血壓或?yàn)榱艘种蒲獕荷仙褂?或者被標(biāo)注"面向高血壓人員"的飲料。從降血壓作用、抑制血壓上升作用以及味道的觀點(diǎn)出發(fā)，本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料含有(A)綠原酸0.011質(zhì)量％，優(yōu)選含有0.050.8質(zhì)量％，更優(yōu)選含有0.10.6質(zhì)量％，進(jìn)一步優(yōu)選含有0.130.5質(zhì)量％，特別優(yōu)選含有0.150.4質(zhì)量％。作為(A)該綠原酸類含有(A1)單咖啡酰奎寧酸、(A2)阿魏?？鼘幩帷?A3)二咖啡?？鼘幩岬娜N。在此，作為(A1)單咖啡?？鼘幩峥梢粤信e從3-咖啡?？鼘幩?、4-咖啡?？鼘幩嵋约?-咖啡?？鼘幩嶂羞x擇的1種以上。作為(A2)阿魏?？鼘幩峥梢粤信e從3-阿魏?？鼘幩帷?-阿魏?？鼘幩嵋约?-阿魏?？鼘幩嶂羞x擇的l種以上。作為(A3)二咖啡?？鼘幩峥梢赃x擇從3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡?？鼘幩嵋约?,5-二咖啡?？鼘幩嶂羞x擇的l種以上。該綠原酸類的含量可以由高效液相色譜法(HPLC)進(jìn)行測(cè)定。作為在HPLC中的檢測(cè)手段，一般為UV檢測(cè)，但是也可以由CL(化學(xué)發(fā)光)檢測(cè)、EC(電化學(xué))檢測(cè)以及LC-Mass檢測(cè)等以更高靈敏度進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料中羥基氫醌(B)的含量為，相對(duì)于綠原酸的量，不滿0.1質(zhì)量％，優(yōu)選為0.0010.07質(zhì)量％，更優(yōu)選0.0020.05質(zhì)量％，進(jìn)一步優(yōu)選的是0.0030.03質(zhì)量％，特別優(yōu)選的是0.0040.02質(zhì)量％。如果相對(duì)于綠原酸類的量羥基氫醌的量是0.1質(zhì)量％以下，則就能發(fā)揮綠原酸類的降血壓作用。在此，在本發(fā)明飲料等中的羥基氫醌的含量也可以為0。該羥基氫醌的含量可以由高效液相色譜法(HPLC)來(lái)進(jìn)行測(cè)定。作為在HPLC中的檢測(cè)手段，一般為UV檢測(cè)，但是也可以由CL(化學(xué)發(fā)光)檢測(cè)、EC(電化學(xué))檢測(cè)以及LC-Mass檢測(cè)等以更高靈敏度進(jìn)行檢測(cè)，特別是EC(電化學(xué))檢測(cè)能夠測(cè)定極其微量的羥基氫醌，因而優(yōu)選該測(cè)定方法。另外，至于由HPLC進(jìn)行的羥基氫醌含量的測(cè)定而言，也可以在濃縮容器裝黑咖啡飲料等之后進(jìn)行測(cè)定。此外，羥基氫醌的含量可以由HPLC直接進(jìn)行測(cè)定，也可以從容器裝黑咖啡飲料或咖啡組合物通過(guò)各種色譜法濃縮羥基氫醌，通過(guò)測(cè)定其濃縮分餾物的量來(lái)進(jìn)行定量。另外，就綠原酸類的量的測(cè)定而言，優(yōu)選將容器裝黑咖啡飲料開(kāi)封后立即用例如含有50mM醋酸、10mM醋酸鈉以及O.lmM的1-羥乙烷-l，l-二膦酸的5%乙腈溶液稀釋至IO倍而得的溶液來(lái)進(jìn)行測(cè)定，或者，將容器裝黑咖啡飲料開(kāi)封后立即以含有4050mM醋酸、910mM醋酸鈉以及0.090.1mM的l-羥乙烷-l，l-二膦酸的45。/。(V/V)乙腈溶液體系來(lái)進(jìn)行測(cè)定。再則，就羥基氫醌的測(cè)定而言，優(yōu)選將容器裝黑咖啡飲料開(kāi)封后立即用含有0.5%(W/V)磷酸以及0.5mM的l-羥乙烷-l，l-二膦酸的5%(V/V)甲醇溶液稀釋至2倍而得的溶液來(lái)進(jìn)行測(cè)定，或者，將容器裝黑咖啡飲料開(kāi)封后立即以含有0.250.5%(W/V)磷酸、0.250.5mM的l-羥乙烷-l,l-二膦酸的2.55%(V/V)甲醇溶液體系來(lái)進(jìn)行測(cè)定。在本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料中，飲料等中的咖啡固體成分中所占的(A)綠原酸類(CGA)的比例，即綠原酸/咖啡固體成分的質(zhì)量比為0.025以上，優(yōu)選為0.030.9，更優(yōu)選0.040.8、進(jìn)一步優(yōu)選的是0.040.6，特別優(yōu)選的是0.040.4，最為優(yōu)選的是0.040.2。該比例低于0.025時(shí)，加熱殺菌處理過(guò)程中抑制生成羥基氫醌的效果不夠充分。在此，綠原酸是飲料或組合物中的總綠原酸類的量(質(zhì)量％)，亦即所述綠原酸類(A1)(A3)的3種，具體而言是9種的合計(jì)量。另外，所謂"固體成分"不是飲料或組合物中的所有的固體成分，而是根據(jù)下述計(jì)算式來(lái)定義，單位是基準(zhǔn)質(zhì)量?？Х裙腆w成分[質(zhì)量。/OhBrix—[糖類+食物纖維]在此，上述各項(xiàng)目以下述計(jì)算式來(lái)定義。糖類=葡萄糖+果糖+蔗糖+麥芽糖在此，各個(gè)項(xiàng)目的測(cè)定方法由下述方法進(jìn)行定量。Brix:以在2(TC的糖用折射計(jì)指示(°Brix)來(lái)表示。例如可以用AtagoRX-5000(Atago公司制造)進(jìn)行分析。最新軟飲料(平成15年9月30日發(fā)行，發(fā)行所株式會(huì)社光琳，記載在243頁(yè))*糖類葡萄糖、果糖、蔗糖、麥芽糖高效液相色譜法(在日本食品分析中心進(jìn)行分析)，食物纖維高效液相色譜法(酶-HPLC法)(在日本食品分析中心進(jìn)行分析)在此，"食物纖維"是指依據(jù)在《食品的營(yíng)養(yǎng)表示基準(zhǔn)制度》第2版(平成11年7月1日發(fā)行，編輯財(cái)團(tuán)法人日本健康營(yíng)養(yǎng)食品協(xié)會(huì)營(yíng)養(yǎng)食品部，46頁(yè)51頁(yè))中所記載的分析方法的分析對(duì)象。另外，上述各個(gè)項(xiàng)目的分析方法遵照東京都消費(fèi)生活綜合中心發(fā)行的商品測(cè)試系列(12-5):罐裝咖啡-糖和咖啡因的量是多少？-(平成13年11月發(fā)行)中所記載的分析方法和平成11年4月26日厚生省生活衛(wèi)生局食品保健課新開(kāi)發(fā)食品保健對(duì)策室長(zhǎng)通知，衛(wèi)新第13號(hào)"關(guān)于營(yíng)養(yǎng)表示基準(zhǔn)中的營(yíng)養(yǎng)成分等的分析方法等"。本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料除了減少羥基氫醌的含量以外優(yōu)選照原樣含有通常的咖啡成分。另外，從咖啡固有的風(fēng)味的觀點(diǎn)出發(fā)，本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料中H202(過(guò)氧化氫)的含量為lppm以下，更優(yōu)選0.1ppm以下，進(jìn)一步優(yōu)選的是0.05ppm以下，特別優(yōu)選的是O.Olppm以下。過(guò)氧化氫的測(cè)定可以使用通常所使用的過(guò)氧化氫測(cè)試計(jì)進(jìn)行，例如，可以使用CENTRALKAGAKUCORP.制造的高靈敏度過(guò)氧化氫測(cè)試計(jì)SUPER0RITECT0RM0DEL5等。特別是，H202雖然在開(kāi)罐前由于殺菌處理而已經(jīng)失去，但是因開(kāi)罐而與空氣接觸時(shí)則隨著時(shí)間的延續(xù)有漸漸增加的傾向，所以遵照專利文獻(xiàn)3732782號(hào)以及3706339號(hào)中所記載的測(cè)定條件，開(kāi)罐后迅速并及時(shí)地進(jìn)行分析。對(duì)用于本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料的咖啡豆的種類沒(méi)有特別的限定，可以列舉例如巴西、哥倫比亞、坦桑尼亞以及摩加等。作為咖啡種類有阿拉比卡種以及羅布斯塔種等?？Х榷箍梢允且环N，也可以混合使用多種。對(duì)于烘焙咖啡豆的烘焙方法沒(méi)有特別的限制，對(duì)于烘焙的溫度以及烘焙環(huán)境也沒(méi)有任何限制，采用通常的方法就可以。再則，對(duì)于從這些咖啡豆進(jìn)行萃取的方法也沒(méi)有任何的限制，例如可以列舉從烘焙咖啡豆或其粉碎物使用水熱水(0100°C)經(jīng)10秒30分鐘進(jìn)行萃取的方法。萃取方法可以列舉煮沸式、濃縮(Espresso)式、滴下(Drip)式(濾紙以及法蘭絨布等)等。本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料是指每100g以生咖啡豆換算使用lg以上咖啡豆的黑咖啡飲料，優(yōu)選使用2.5g以上的咖啡豆，更優(yōu)選使用5g以上的咖啡豆。本發(fā)明的黑咖啡是含有糖分以及抗氧化劑等的咖啡飲料。另外，優(yōu)選容器裝黑咖啡飲料為單倍濃度(single-strength)。所謂"單倍濃度"是將容器裝飲料開(kāi)封后以常態(tài)不稀釋直接飲用的情況。用于本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料的咖啡組合物，是通過(guò)對(duì)烘焙咖啡豆萃取物進(jìn)行吸附處理從而減少羥基氫醌的含量，并將綠原酸/咖啡固體成分調(diào)整至0.025以上而得到的。作為吸附劑可以列舉活性炭、反相色譜載體等。更具體而言，在烘焙咖啡豆萃取液或烘焙咖啡豆萃取液的干燥產(chǎn)品的水溶液中加入吸附劑，在0100。C下攪拌10分鐘5小時(shí)之后除去吸附劑即可。在此，相對(duì)于烘焙咖啡豆的重量的吸附劑的量為，活性炭的情況下為烘焙咖啡豆的重量的0.021.0倍，反相色譜載體的情況下為烘焙咖啡豆的重量的2100倍。作為活性炭，優(yōu)選微孔領(lǐng)域中的平均細(xì)孔半徑為5埃(A)以下，更為優(yōu)選的是25埃(A)的范圍，特別優(yōu)選的是35埃(A)的范圍。本發(fā)明中的微孔領(lǐng)域是表示10埃(A)以下，平均細(xì)孔半徑是表示由MP方法測(cè)定而得到的細(xì)孔分布曲線的峰值所表示的細(xì)孔半徑的值。所謂MP方法是文獻(xiàn)(ColloidandInterfaceScience,26，46(1968))中所記載的細(xì)孔測(cè)定方法，該方法是株式會(huì)社住化分析中心(SumikaChemicalAnalysisService,Ltd.)以及株式會(huì)社東麗研究中心(TorayResearchCenter,Inc.)所采用的方法。另外，作為活性炭的種類，優(yōu)選椰子殼活性炭，更加優(yōu)選的是水蒸氣活化椰子殼活性炭。作為活性炭的市售品，可以使用"SHIRASAGIWH2C"(JapanEnviroChemcials,Ltd.)、"TAIKOCW"(FutamuraChemicalIndustriesCo"Ltd.)、"KURARAYCOALGW"(KurarayChemcialCo.,Ltd.)等。作為反相色譜載體可以列舉"YMCODS-A"(YMCCo.,Ltd.)、"C18"(GLScience,Inc.)等。這些吸附劑處理法中的使用特定的活性炭的吸附劑處理法，不會(huì)降低綠原酸類的量，不僅可以選擇性地降低羥基氫醌的含量，而且有利于工業(yè)化生產(chǎn)，同時(shí)也不會(huì)降低鉀的含量(以質(zhì)量比計(jì)，保持在1/5以上，特別是l/2以上)，因此從這些觀點(diǎn)出發(fā)優(yōu)選這樣的吸附劑處理方法。在本發(fā)明中，在將咖啡組合物中的綠原酸/咖啡固體成分調(diào)整至0.025以上時(shí)，可以通過(guò)以下方法進(jìn)行調(diào)整控制咖啡豆的烘焙度和控制萃取時(shí)的烘焙咖啡豆與萃取液的比例的方法；將萃取時(shí)所得到的萃取液分成各個(gè)部分，并選取成為目的的綠原酸/咖啡固體成分的部分的方法；由活性炭處理吸附特定成分的方法等。另外，也可以添加其他來(lái)自低烘焙度咖啡豆和生咖啡豆的萃取物來(lái)進(jìn)行調(diào)整。本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料在由高速液相色譜進(jìn)行的分析中，優(yōu)選在以沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)相對(duì)于沒(méi)食子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.540.61的時(shí)間區(qū)域中實(shí)質(zhì)上沒(méi)有峰。在確認(rèn)該時(shí)間區(qū)域中實(shí)質(zhì)上沒(méi)有峰這一事實(shí)時(shí)，可以使用一般的HPLC，例如作為洗提液使用0.05M醋酸水溶液和0.05M醋酸100%乙腈溶液的梯度，使用ODS柱，由通過(guò)紫外線吸光光度計(jì)等進(jìn)行檢測(cè)而進(jìn)行確認(rèn)。在本發(fā)明中，在相對(duì)于沒(méi)食子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.540.61的時(shí)間區(qū)域中實(shí)質(zhì)上沒(méi)有峰是指，以分析沒(méi)食子酸的lppm溶液時(shí)的面積值作為Sl，以在相同條件下分析容器裝黑咖啡飲料時(shí)來(lái)自在所述特定的區(qū)域洗脫的成分的峰面積的總和作為S2時(shí)，滿足S2/S1<0.01。在本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料中可以添加蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、果糖葡萄糖液以及糖醇等的糖分、抗氧化劑、pH調(diào)整劑、乳化劑以及香料等。本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料優(yōu)選是不含有乳成分的咖啡飲料，即優(yōu)選所謂的黑咖啡。作為容器裝黑咖啡飲料的pH值優(yōu)選57，更優(yōu)選5.46.5，特別優(yōu)選的是5.66.3。作為在容器裝黑咖啡飲料中的單咖啡?？鼘幩岬臉?gòu)成比，4-咖啡?？鼘幩?3-咖啡?？鼘幩岬馁|(zhì)量比為0.61.2，優(yōu)選5-咖啡?？鼘幩?3-咖啡酰奎寧酸的質(zhì)量比為0.013。本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料可以使用PET瓶、罐(鋁、鋼鐵)、紙、軟罐頭、瓶(玻璃)等的容器。在此種情況下容器可以是502500mL。作為容器，從防止咖啡中的成分的變化的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選氧透過(guò)率低的容器，例如可以使用鋁制的以及鋼鐵制等的罐和玻璃制的瓶等。罐和瓶的情況也包括了可再蓋上的和可再密封的情況。在此，所謂氧透過(guò)率是用容器膜氧透過(guò)率測(cè)定器在20°C以及相對(duì)濕度50%的環(huán)境條件下測(cè)定的氧透過(guò)率(cc'mm/mMayatm)，氧透過(guò)率優(yōu)選為5以下，更為優(yōu)選的是3以下，特別優(yōu)選的是l以下。在制造容器裝黑咖啡飲料時(shí)通常進(jìn)行殺菌處理，該殺菌處理是填充在金屬罐等的容器中之后，在可以加熱殺菌的情況下按食品衛(wèi)生法所規(guī)定的殺菌條件來(lái)進(jìn)行。對(duì)于如PET瓶、紙容器等的不能進(jìn)行加熱加壓殺菌的容器則采用，預(yù)先按與食品衛(wèi)生法所規(guī)定的條件和同等的殺菌條件，例如在以平板式熱交換器進(jìn)行高溫短時(shí)間殺菌后，冷卻至一定的溫度之后填充到容器中等的方法。另外，也可以采用在無(wú)菌條件下進(jìn)行加熱殺菌后，在無(wú)菌條件下將pH調(diào)回至中性的才作，或者在中性條件下加熱殺菌后，在無(wú)菌條件下將pH調(diào)回至酸性等的操作。本發(fā)明的容器裝黑咖啡飲料含有有效量的具有高血壓改善作用的綠原酸類，并且在加熱殺菌處理后阻礙綠原酸類的高血壓改善作用的羥基氫醌的量也很低，所以作為降血壓用或抑制血壓上升的醫(yī)藥組合物、降血壓用飲料、以及抑制血壓上升的飲料是有用的。實(shí)施例綠原酸類以及羥基氫醌的分析方法如下所述。綠原酸類的分析方法容器裝黑咖啡飲料或咖啡組合物的綠原酸類的分析方法是如下所述。分析儀器使用HPLC。裝置的構(gòu)成單元的型號(hào)是如下所述。UV-VIS檢測(cè)器L-2420(HitachiHigh-TechnologiesCorporation)柱溫箱L-2300(HitachiHigh-TechnologiesCorporation)泵L-2130(HitachiHigh-TechnologiesCorporation)自動(dòng)取樣機(jī)L-2200(HitachiHigh-TechnologiesCorporation)柱CadenzaCD-C18,內(nèi)經(jīng)4.6mmX長(zhǎng)度150mm、粒徑3|im(IntactCorp.)分析條件如下所述。試樣注入量lO(lL流量1.0mL/minUV-VIS檢測(cè)器設(shè)定波長(zhǎng)325nm柱溫箱設(shè)定溫度35°C洗提液A:0.05mM醋酸、O.lmM的l-羥乙烷-l,l-二膦酸、10mM勾、5%(V/V)乙腈溶液洗提液B:乙腈濃度梯度條件時(shí)間O.OminlO.Omin15.0min2O.Omin洗提液A100%100%95%95%洗提液B0%0%5%5%22.0min92%8%50.0min92%8%52.0min10%90%60.0min10%90%60.1min100%0%70.0min100%0%在HPLC中，精確秤取lg試樣后以洗提液A稀釋至10mL，用膜過(guò)濾器(GLCHROMATODISK25A，孔徑0.45|im，GLScience,Inc.)進(jìn)行過(guò)濾后提供給分析。綠原酸類的保留時(shí)間(單位min)(A1)單咖啡?？鼘幩?.3;8.8;11.6合計(jì)為3點(diǎn)(A2)阿魏?？鼘幩?3.0;19.9;21.0合計(jì)為3點(diǎn)(A3)二咖啡酰奎寧酸36.6;37.4;44.2合計(jì)為3點(diǎn)在此，以5-咖啡酰奎寧酸作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，從求得的9種綠原酸類的面積值求得質(zhì)量百分比(％)。依據(jù)HPLC-電化學(xué)檢測(cè)器的羥基氫醌的分析方法。容器裝黑咖啡飲料或咖啡組合物的羥基氫醌的分析方法如下所述。分析儀器使用HPLC-電化學(xué)檢測(cè)器(coulometrictype)"COULARRAYSYSTEM"(model:5600A,開(kāi)發(fā)制造美國(guó)ESA公司，進(jìn)口'銷售MCMEDICAL,INC.)。裝置的構(gòu)成單元的名稱型號(hào)如下所述。分析池MODEL5010庫(kù)侖陣列組織器(Coularrayorganizer)Coularmyelectronicsmodule軟件MODEL5600A溶劑送料模塊(solventfeedermodule):MODEL582梯度混合器(gradientmixer)自動(dòng)進(jìn)樣器(auto-sampler):MODEL542l;]c沖阻尼器(Pulsedamper)脫氣裝置(degasser):DegasysUltimateDU3003柱溫箱(columnoven):505柱(column):CAPCELLPAKCI8AQ內(nèi)經(jīng)4.6mmx長(zhǎng)度250mm粒徑5(im(ShiseidoCo..,Ltd.)分析條件如下所述。試樣注入量lO^lL流量1.0mL/min電化學(xué)檢測(cè)器的施加電壓Omv柱溫箱設(shè)定溫度40°C洗提液A:0.1%(W/V)磷酸、O.lmM的l-羥乙垸-l,l-二膦酸、5%(V/V)甲醇溶液洗提液B:0.1%(W/V)磷酸、O.lmM的l-羥乙烷-l,l-二膦酸、50%(V/V)甲醇溶液在洗提液A以及洗提液B的調(diào)制中使用高效液相色譜用蒸餾水(KantoChemicalCo.,Ltd.)、高效液相色譜用甲醇(KantoChemicalCo.,Ltd.)、磷酸(特級(jí)，WakoPureChemicalIndustried,Ltd.)、l-羥乙垸-l，l-酸(60%水溶液，東京化成工業(yè)株式會(huì)社)。濃度梯度條件時(shí)間洗提液A洗提液BO.Omin100%0%lO.Omin100%0%lO.lmin0%100%20.0min0%100%20.1min100%0%50.0min100%0%精確秤取5g試樣后，用0.5。/。(W/V)磷酸、0.5mM的l-羥乙烷-l,l-二膦酸、5%(V/V)甲醇溶液稀釋至lOmL，對(duì)該溶液進(jìn)行離心分離，而得到上層清液的分析試樣。使該上層清液通過(guò)BONDELUTESCX(固相填充量500mg，貯存容量3mL，GLScience,Inc.),去除初始通過(guò)的溶液大約0.5mL，從而得到通過(guò)液(passedsolution)。對(duì)該通過(guò)液用膜過(guò)濾器(GLCHROMATODISK25A，孔徑0.45|im，GLScience,Inc.)進(jìn)行過(guò)濾，然后迅速提供給分析。在HPLC-電化學(xué)檢測(cè)器的所述條件下進(jìn)行的分析中，羥基氫醌的保留時(shí)間為6.38分鐘。以羥基氫醌(WakoPureChemicalIndustried,Ltd.)作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，從得到的峰的面積值求得質(zhì)量百分比(質(zhì)量％)。實(shí)施例1對(duì)于中等烘焙度的咖啡豆使用8倍量的離子交換水(95°C)進(jìn)行萃取，從而得到咖啡萃取液。接著，測(cè)定該咖啡萃取液中的Brix，準(zhǔn)備充填有相對(duì)于Brix的50重量°/。的量的活性炭(SHIRASAGIWH2C)的柱(內(nèi)徑45mm、長(zhǎng)度150mm)。其后，在溫度25°C、SV8[l/容量(m3)/流量(mVhr)]的條件下使咖啡萃取液通過(guò)充填有活性炭的柱，得到經(jīng)過(guò)活性炭處理已除去了羥基氫醌的咖啡組合物。測(cè)定由此而得到的已除去了羥基氫醌的咖啡組合物中的綠原酸的量，用離子交換水進(jìn)行稀釋，用碳酸氫鈉進(jìn)行調(diào)整pH值，使得加熱殺菌處理后的pH值達(dá)到如表1所示的值。加熱殺菌處理前的羥基氫醌的量在檢測(cè)界限以下(依據(jù)HPLC-電化學(xué)檢測(cè)器的羥基氫醌的分析方法)。接著，將由此而得到的咖啡組合物填充在190g的罐內(nèi)，之后進(jìn)行密封，按表1所示的殺菌條件實(shí)施加熱加壓殺菌處理，從而得到容器裝黑咖啡飲料。另外，加熱殺菌后的羥基氫醌的分析方法采用依據(jù)HPLC-電化學(xué)檢測(cè)器的羥基氫醌的分析方法。實(shí)施例23除通過(guò)改變烘焙度和SV來(lái)分別控制綠原酸/咖啡固體成分以外，與實(shí)施例1相同地制造容器裝黑咖啡飲料。比較例1在填充有相對(duì)于高烘焙度的咖啡提取物的Brbc的50重量％的量的活性炭(MOLSIEVONX2M)的柱(內(nèi)徑45mm、長(zhǎng)度150mm)中，在溫度25"C、SV8[l/容量(m"/流量(mVhr)]的條件下，使所述咖啡提取物通過(guò)。使用溶解有碳酸氫鈉的水溶液對(duì)所述經(jīng)活性炭處理的咖啡提取物進(jìn)行pH值調(diào)整，之后用離子交換水稀釋至綠原酸的量成為170mg細(xì)g。將所得的咖啡組合物填充到190g的罐內(nèi)、密封，在12rc溫度條件下實(shí)施12分鐘的加熱加壓殺菌處理，從而制造出容器裝黑咖啡飲料。實(shí)施例4在填充有相對(duì)于中烘焙度的咖啡提取物的Brk的50重量％的量的活性炭(SHIRASAGIWH2C)的柱(內(nèi)徑45mm、長(zhǎng)度150mm)中，在溫度25。C、SV8[l/容量(m流量(mVhr)]的條件下，使所述咖啡提取物通過(guò)。使用溶解有碳酸氫鈉的水溶液對(duì)所述經(jīng)活性炭處理的咖啡提取物進(jìn)行pH值調(diào)整，之后用離子交換水稀釋至綠原酸的量成為170mg/100g。將所得的咖啡組合物填充到190g罐內(nèi)、密封，在13TC溫度條件下實(shí)施IOO秒鐘的加熱加壓殺菌處理，從而制造出容器裝黑咖啡飲料。實(shí)施例5在填充有相對(duì)于中烘焙度以及低烘焙度的混合咖啡提取物的Brix的50重量％的量的活性炭(SHIRASAGIWH2C)的柱(內(nèi)徑45mm、長(zhǎng)度150mm)中，在溫度25。C、SV8[l/容量(m3)/流量(mVhr)]的條件下，使所述咖啡提取物通過(guò)。使用溶解有碳酸氫鈉的水溶液對(duì)所述經(jīng)活性炭處理的咖啡提取物進(jìn)行pH值調(diào)整，之后用離子交換水稀釋至綠原酸的量成為350mg/100g。將所得的咖啡組合物填充到190g的罐內(nèi)、密封，在13rc溫度條件下實(shí)施100秒鐘的加熱加壓殺菌處理，從而制造出容器裝黑咖啡飲料。比較例2對(duì)于中等烘焙度的咖啡豆使用8倍量的離子交換水(95'C)進(jìn)行萃取，從而得到咖啡萃取液。殺菌前的羥基氫醌的量為0.00134質(zhì)量％。除不實(shí)施活性炭處理以外，以與實(shí)施例1相同的操作進(jìn)行pH值調(diào)整，并按照表1所示的殺菌條件制造容器裝黑咖啡飲料。結(jié)果如表1所示，可知通過(guò)將綠原酸/咖啡固體成分的比例控制在0.025以上，抑制了加熱殺菌后的羥基氫醌的再生成。另外，在加熱殺菌前后綠原酸/咖啡固體成分的比例基本沒(méi)有變化?！淳G原酸的測(cè)定前處理的具體例〉將容器裝黑咖啡飲料開(kāi)罐后，立即精確稱取lg，用洗提液A[含有50mM醋酸、10mM醋酸鈉以及O.lmM的l-羥乙垸-l,l-二膦酸的5%(V/V)乙腈溶液]稀釋至10mL，用膜過(guò)濾器(GLCHROMATODISK25A，孔徑0.45(am，GLScience,Inc.)進(jìn)行過(guò)濾后提供給分析。〈羥基氫醌的測(cè)定前處理的具體例〉將容器裝黑咖啡飲料開(kāi)罐后，立即精確秤取5g，用含有0.5%(W/V)磷酸以及0.5mM的l-羥乙烷-l，l-二膦酸的5%(V/V)甲醇溶液稀釋至lOmL，對(duì)該溶液進(jìn)行離心分離，從而得到上層清液。使該上層清液通過(guò)BONDELUTEJRSCX(固相填充量500mg，GLScience,Inc.),去除初始通過(guò)的溶液大約l.OmL，從而得到通過(guò)液。對(duì)該通過(guò)液用膜過(guò)濾器[GLCHROMATODISK25A，孔徑0.45pm，GLScience,Inc.]進(jìn)行過(guò)濾，然后迅速提供給分析。〈過(guò)氧化氫的測(cè)定具體實(shí)例〉使用過(guò)氧化氫分析儀SUPERORITECTORMODEL5(CENTRALKAGAKUCORP.)，用標(biāo)準(zhǔn)校正液(過(guò)氧化氫lppm)進(jìn)行校正后，在分析儀的測(cè)定池內(nèi)加入lmL的配合有0.5%溴酸鉀的0.2M磷酸緩沖液(pH7.0)。在通過(guò)輸送氮?dú)馐共蹆?nèi)的溶存氧達(dá)到零的時(shí)刻，將靜置于3(TC恒溫箱中的市售罐裝咖啡和試驗(yàn)樣品開(kāi)罐后迅速各抽取lmL，并加入到測(cè)定池內(nèi)。之后，按照裝置的測(cè)定順序，從打印機(jī)讀取發(fā)生的氧濃度。另外，如果是使用外推法的情況下，則之后每15分鐘測(cè)定一次，使用所得的1小時(shí)后為止的數(shù)據(jù)，以最小二乘法畫直線，從而求得過(guò)氧化氫的濃度。在此，MODEL5的檢測(cè)界限是0.1mg/kg。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>參考例1用下述方法制造了咖啡飲料Q?；钚蕴刻幚砜Х鹊闹圃鞂⑹惺鬯偃芸Х萚雀巢咖啡(注冊(cè)商標(biāo))GoldBlendRedLabel]20g溶解于1400mL的蒸餾水之后(該咖啡稱作咖啡組合物P)，添加30g活性炭"SHIRASAGIWH2C28/42"(JapanEnviroChemicals,Ltd.)，攪拌1小時(shí)后用膜過(guò)濾器(0.45pm)進(jìn)行過(guò)濾，從而得到濾液(該咖啡稱作咖啡組合物Q)。將所得濾液進(jìn)行凍結(jié)干燥從而得到褐色粉末15.8g。把該褐色粉末溶解于蒸餾水，由HPLC分析對(duì)綠原酸類以及羥基氫醌進(jìn)行定量，綠原酸類含4.12質(zhì)量％，羥基氫醌的量為在檢測(cè)界限以下。另外，用ICP發(fā)光分光分析法測(cè)定鉀的含量，原料速溶咖啡以及活性炭處理咖啡無(wú)論哪一個(gè)均為大約4.2質(zhì)量％。參考例2在參考例1中制作的咖啡組合物Q的降血壓評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)材料以及方法(a)預(yù)先用市售的大鼠用非觀血式血壓測(cè)定裝置(SoftronCo.,Ltd.)對(duì)13-14周齡的雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)進(jìn)行連續(xù)5天的血壓測(cè)定，從而待使大鼠對(duì)血壓測(cè)定操作充分習(xí)慣，之后對(duì)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定。全部大鼠都在溫度25士rC、相對(duì)濕度55士10%、照明時(shí)間12小時(shí)(上午7時(shí)下午7時(shí))的條件下(大鼠區(qū)域內(nèi)飼養(yǎng)室)進(jìn)行飼養(yǎng)。(b)投藥方法以及投藥量在試驗(yàn)組中使用以參考例l制作的咖啡組合物Q(活性炭處理咖啡)。對(duì)照組使用市售的速溶咖啡。將活性炭處理咖啡和速溶咖啡分別溶解于生理食鹽水中，制作成以總綠原酸的量計(jì)達(dá)到200mg/kg的投藥量。投藥方法使用經(jīng)口用的喂食針來(lái)進(jìn)行經(jīng)口投藥。投藥量是5mL/kg。(c)試驗(yàn)方法使用SHR—組46只。測(cè)定經(jīng)口投藥前和12小時(shí)后的尾靜脈的收縮期血壓，并計(jì)算出從投藥前到投藥12小時(shí)后的血壓變化率。(d)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法對(duì)所得到的結(jié)果表示平均值以及標(biāo)準(zhǔn)誤差并進(jìn)行Student'st-test，顯著性水平為5%。結(jié)果從表2可知，相比于攝取通常的速溶咖啡的情況，攝取咖啡組合物Q的情況下確認(rèn)了顯著的血壓降低。[表2]<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>*:相對(duì)于對(duì)照組的危險(xiǎn)率在5%以下，存在顯著差異。權(quán)利要求1.一種容器裝黑咖啡飲料，其特征在于滿足下述條件(A)～(C)(A)綠原酸類0.01～1質(zhì)量％；(B)羥基氫醌小于綠原酸類含量的0.1質(zhì)量％；(C)以質(zhì)量比計(jì)，綠原酸類/咖啡固體成分≥0.025。2.如權(quán)利要求項(xiàng)1所述的容器裝黑咖啡飲料，其特征在于(C)以質(zhì)量比計(jì)，綠原酸類/咖啡固體成分=0.040.2。3.如權(quán)利要求項(xiàng)1或2所述的容器裝黑咖啡飲料，其特征在于4-咖啡酰奎寧酸/3-咖啡?？鼘幩岬馁|(zhì)量比是0.61.2，并且5-咖啡?？鼘幩?3-咖啡?？鼘幩岬馁|(zhì)量比是0.013。4.如權(quán)利要求項(xiàng)13中任意一項(xiàng)所述的容器裝黑咖啡飲料，其特征在于容器的氧透過(guò)率是5ccmm/m2dayatm以下。全文摘要本發(fā)明涉及具有卓越的高血壓改善作用的，通常能夠攝取的容器裝黑咖啡飲料，該容器裝黑咖啡飲料滿足下述條件(A)～(C)(A)綠原酸類0.01～1質(zhì)量％；(B)羥基氫醌小于綠原酸類含量的0.1質(zhì)量％；(C)以質(zhì)量比計(jì)，綠原酸類/咖啡固體成分≥0.025。文檔編號(hào)A23F5/24GK101227827SQ20068002658公開(kāi)日2008年7月23日申請(qǐng)日期2006年7月28日優(yōu)先權(quán)日2005年7月29日發(fā)明者小倉(cāng)義和,山本真士,早川義信,鹽屋靖申請(qǐng)人:花王株式會(huì)社