專利名稱：銅綠假單胞菌簡(jiǎn)易測(cè)試瓶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種水、食品等物質(zhì)中微生物的測(cè)試器具，特別是涉及 一種檢測(cè)水或其它物質(zhì)中銅綠假單胞菌的測(cè)試瓶。
技術(shù)背景銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)在自然界分布廣泛，對(duì)人類而言，屬于條件致 病菌，長(zhǎng)期應(yīng)用激素、免疫抑制劑，進(jìn)行腫瘤化療、放射治療等導(dǎo)致病人免疫 功能低下，以及手術(shù)后或某些治療操作后(氣管切開、保留導(dǎo)尿管等)的病人 易導(dǎo)致本菌感染，故認(rèn)為該菌為醫(yī)院內(nèi)感染的重要病原菌之一?！缎掠⒏裉m 醫(yī)學(xué)雜志》日前發(fā)表的兩份研究報(bào)告表明，銅綠假單胞菌的水污染問(wèn)題已經(jīng) 引起了有關(guān)專家和醫(yī)學(xué)管理部門的極大關(guān)注，即使是對(duì)于裙些通常被認(rèn)為是 非常清潔的水源。 ..銅綠假單胞菌目前傳統(tǒng)的測(cè)定方法是利用增菌分離培養(yǎng)和多種生化試驗(yàn) 相結(jié)合來(lái)進(jìn)行判斷，其傳統(tǒng)的測(cè)定方法為①采集水樣一②無(wú)菌水制備一③ 器皿、試劑滅菌一④培養(yǎng)基制備一⑤稀釋和接種水樣一⑥增菌培養(yǎng)一⑦分離 培養(yǎng)一⑧革蘭染色鏡檢一⑨生化試驗(yàn)一⑩結(jié)果報(bào)告，完成整個(gè)測(cè)試過(guò)程一般需要10天傳統(tǒng)方法不但操作程序繁瑣、復(fù)雜，時(shí)間冗長(zhǎng)，而且其對(duì)測(cè)試環(huán)境 及操作人員的素質(zhì)要求極高，從采樣技術(shù)、實(shí)驗(yàn)室條件、儀器設(shè)備、器皿試 劑質(zhì)量、操作人員的技能，直至質(zhì)量控制等全部監(jiān)測(cè)過(guò)程及控制程序都.有著 嚴(yán)格的規(guī)定和要求。此外，繁雜的測(cè)試環(huán)節(jié)極易產(chǎn)生較大的誤差，造成測(cè)試 結(jié)果的誤判。實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型的目的是提供一種水或其它物質(zhì)中銅綠假單胞菌的測(cè)試液及 其簡(jiǎn)易測(cè)試瓶。本實(shí)用新型解決技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是根據(jù)銅綠假單胞菌代謝產(chǎn)物與特定試劑發(fā)生顯色反應(yīng)的原理制備出高選 擇性液體培養(yǎng)基，封存于透明瓶中，并滅菌，從而制成可較長(zhǎng)時(shí)間存儲(chǔ)的簡(jiǎn) 易銅綠假單胞菌測(cè)試瓶。一種銅綠假單胞菌簡(jiǎn)易測(cè)試瓶，包括封口的無(wú)色透明小瓶和裝在瓶?jī)?nèi)的 銅綠假單胞菌測(cè)試液，測(cè)試液在測(cè)試瓶中的高度H,和測(cè)試瓶等截面留空高度 H2之比H" H2=l: 0.3 0.8，測(cè)試瓶?jī)?nèi)部在測(cè)試前A無(wú)菌狀態(tài)。所述無(wú)色透明小瓶可以是以膠塞和鋁皮蓋封口的無(wú)色透明玻璃瓶。所述無(wú)色透明瓶可以是以膠塞和鋁皮蓋封口的5 15mL西林瓶或口服液瓶。以重量百分比計(jì)，所述銅綠假單胞菌測(cè)試液含有十六垸三甲基溴化鎮(zhèn)十 六烷三甲基溴化銨0.02 0. 15%、氯化物0.2 1.0%、蛋白胨O. 5 2.0%、牛 肉浸提物O. 1 0. 5%、蒸餾水96. 35 99. 18%。所述銅綠假單胞菌簡(jiǎn)易測(cè)試瓶中的銅綠假單威菌測(cè)試液含有十六烷三甲 基溴化銨0.04 0.1%、氯化物0.2 1.0%、蛋白胨0.5 2.0%、牛肉浸提物 0.1 0. 5%、蒸餾水96. 4 99.16%。所述銅綠假單胞菌測(cè)試液中的氯化物可以為氯化鈉、氯化鉀中的一種或 兩種。
所述銅綠假單胞菌測(cè)試液含有十六烷三甲基溴化銨0. 05%、氯化鈉0. 5%、 蛋白胨1.0%、牛肉浸提物0.5%、蒸餾水97.95%。 本實(shí)用新型具有以下積極有益的效果(1) 特制測(cè)試培養(yǎng)液密封貯存于玻璃瓶中，并滅菌，貯存期較長(zhǎng)，省去 傳統(tǒng)方法繁瑣、復(fù)雜的操作步驟，檢測(cè)時(shí)間僅需2天，大大縮短了測(cè)試時(shí)間， 減輕了勞動(dòng)強(qiáng)度。(2) 不需要傳統(tǒng)方法所要求的無(wú)菌操作條件，使得生化檢驗(yàn)可以在二般 環(huán)境中進(jìn)行，進(jìn)而節(jié)省大量基礎(chǔ)建設(shè)投資。(3) 銅綠假單胞菌與測(cè)試液的特征反應(yīng)是在無(wú)菌的細(xì)菌測(cè)試瓶中自動(dòng)進(jìn) 行，可避免傳統(tǒng)方法多步驟操作過(guò)程中的沾污和干擾，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠， 且最低檢出限符合國(guó)家水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)要求。(4) 可應(yīng)用于各種水中或其物質(zhì)中銅綠假單胞菌的快速測(cè)試，非專業(yè)人 員數(shù)分鐘內(nèi)即可學(xué)會(huì)操作。


圖1是一種銅綠假單胞菌簡(jiǎn)易測(cè)試瓶的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例一參見(jiàn)圖l，圖中l(wèi)為鋁皮蓋，2為膠塞，3等截面玻璃瓶腔，4 為銅綠假單胞菌測(cè)試液。Hi為銅綠假單胞菌測(cè)試液的高度，H2為測(cè)試瓶等截面 留空高度。本實(shí)施例中測(cè)試瓶為15mL的無(wú)色透明口服液瓶，測(cè)試液的高度H, 為6cm，留空高度H2為4cm。上述測(cè)試液配方為十六烷三甲基溴化銨0.02%、氯化鈉0.2%、蛋白胨 0.5%、牛肉浸提物O. 1%，測(cè)試液配好后，按每瓶9. 0mL封裝于15mL的無(wú)色透
明口服液瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。使用時(shí)采用絕跡稀釋法，即用無(wú)菌注射器將待測(cè)定的水樣(固體樣品則 須用水溶解或浸提，處理成液體后測(cè)定)逐級(jí)注入到測(cè)試瓶中，進(jìn)行接種稀 釋后，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)，根據(jù)測(cè)試瓶陽(yáng)性反應(yīng)和稀釋的倍數(shù)，計(jì)算出水樣中 細(xì)菌量總數(shù)。銅綠假單胞菌瓶陽(yáng)性反應(yīng)時(shí)由近無(wú)色液體變成藍(lán)綠色液體。實(shí)施例二本實(shí)施例與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于測(cè)試瓶為8mL 的無(wú)色透明西林瓶，測(cè)試液的高度仏為4.5cm，留空高度H2為3.5cm。上述測(cè)試液配方為十六烷三甲基溴化銨0.15%、氯化物1.0%、蛋白胨 2.0%、牛肉浸提物0.5%，余量為蒸餾水。將上述試液配好后，按每瓶4.5mL 封裝于8mL的無(wú)色透明西林瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。使用時(shí)用無(wú)菌注射器將吸取0.5mL水質(zhì)樣品，注入到測(cè)試瓶中，搖勻后 放置于37。C干燥箱或水浴鍋中24小時(shí)，根據(jù)瓶中液體的變化判斷陰性或陽(yáng)性 反應(yīng)，此為定性分析；按此方法做2組或3組平行樣，按逐級(jí)稀釋法査MPN 表，即可進(jìn)行定量測(cè)試。污泥等其它固體樣品則須用水溶解或浸提，處理成 液體后再按上述方法進(jìn)行測(cè)定。實(shí)施例三本實(shí)施例與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于測(cè)試瓶為10mL 的無(wú)色透明圓底玻璃瓶，測(cè)試液的高度仏為3.0cm，留空高度H2為0.9fcm。上迷測(cè)試液配方為十六烷三甲基溴化銨0. 04、氯化鈉0. 2、蛋白胨0. 5%、 牛肉浸提物0.1%、蒸餾水96. 4 99. 6%，余量為蒸餾水。將上述試液配好后， 按每瓶4. 5毫升封裝于10mL測(cè)試瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。使用方法同實(shí)施例一。實(shí)施例四本實(shí)施例與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于測(cè)試瓶為8.'lmL
的無(wú)色透明西林瓶，測(cè)試液的高度Hi為3.0cm，留空高度H2為2.4cm。上述測(cè)試液配方為十六垸三甲基溴化銨0. 1%、氯化鈉1, 0%、蛋白胨2:0%、牛肉浸提物0.5%、蒸餾水96. 4 99. 6%，余量為蒸餾水。將上述試液配好后，'按照需要量罐裝在上述測(cè)試瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。 使用方法同實(shí)施例一。實(shí)施例五本實(shí)施例與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于測(cè)試瓶為 12. 6mL的無(wú)色透明西林瓶，測(cè)試液的高度Hi為5.0cm，留空高度^為2. Ocm。.上述測(cè)試液配方為十六烷三甲基溴化銨0.06%、氯化鈉0.5%、蛋白寧 1.0%、牛肉浸提物0.5%，余量為蒸餾水。將上述試液配好后，按照需要量罐. 裝在上述測(cè)試瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。使用方法與實(shí)施例一相同。實(shí)施例六本實(shí)施例與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于測(cè)試瓶為6. 5mL 的無(wú)色透明西林瓶，測(cè)試液的高度H,為4.5cm，留空高度H2為1.6cm。上述測(cè)試液配方為十六烷蘭甲基溴化銨0.05%、氯化鉀0.8%、蛋白胨. 1.5%、牛肉浸提物0.6%，余量為蒸餾水。將上述試液配好后，按照需要量罐 裝在上述測(cè)試瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。使用方法與實(shí)施例一相同。實(shí)施例七本實(shí)施例與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于測(cè)試瓶另6mL 的無(wú)色透明西林瓶，測(cè)試液的高度H,為5.0cm，留空高度H2為2.5cm。上述測(cè)試液配方為十六烷三甲基溴化銨0.0^%、氯化鈉0.3%、氯化鉀 0.5%、蛋白胨1.0%、牛肉浸提物0.2%，余量為蒸餾水。將上述試液配好后，. 按照需要量罐裝在上述測(cè)試瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。
使用方法與實(shí)施例一相同。實(shí)施例八本實(shí)施例與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于測(cè)試瓶為5. 0mL 的無(wú)色透明西林瓶，測(cè)試液的高度H,為4.5cm，留空高度f(wàn)t為2.0cm。上述測(cè)試液配方為十六烷三甲基溴化銨0.12%、氯化鉀0.8%、蛋白胨 1.0%、牛肉浸提物0.2%，余量為蒸餾水。將上述試液配好后，按照需要量罐 裝在上述測(cè)試瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。使用方法與實(shí)施例一相同。
權(quán)利要求1.一種銅綠假單胞菌簡(jiǎn)易測(cè)試瓶，包括封口的無(wú)色透明瓶，其特征是所述無(wú)色透明瓶中裝有所述銅綠假單胞菌測(cè)試液，測(cè)試液在測(cè)試瓶中的高度H1和測(cè)試瓶等截面留空高度H2之比H1∶H2＝1∶0.3～0.8。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的銅綠假單胞菌簡(jiǎn)易測(cè)試瓶，其特征是所述無(wú) 色透明小瓶是以膠塞和鋁皮蓋封口的無(wú)色透明玻璃瓶。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的銅綠假單胞菌簡(jiǎn)易測(cè)試瓶，其特征是所述無(wú)色透明瓶是以膠塞和鋁皮蓋封口的5 15mL西林瓶或口服液瓶。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任意一項(xiàng)所述的銅綠假單胞菌簡(jiǎn)易測(cè)試瓶，其特 征是所述銅綠假單胞菌測(cè)試液含有十六垸三甲基溴化銨、氯化物、蛋白胨、 牛肉浸提物、蒸餾水，按一定比例混合而成。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種水、食品等物質(zhì)中微生物的測(cè)試器具，特別是涉及一種檢測(cè)水或其它物質(zhì)中銅綠假單胞菌的測(cè)試瓶。本實(shí)用新型包括封口的無(wú)色透明瓶，其中裝有所述銅綠假單胞菌測(cè)試液，測(cè)試液在測(cè)試瓶中的高度H₁和測(cè)試瓶等截面留空高度H₂之比H₁∶H₂＝1∶0.3～0.8，所述測(cè)試瓶?jī)?nèi)部在測(cè)試前為無(wú)菌狀態(tài)。所述銅綠假單胞菌測(cè)定液含有十六烷三甲基溴化銨0.02～0.15％、氯化物0.2～1.0％、蛋白胨0.5～2.0％、牛肉浸提物0.1～0.5％、蒸餾水96.35～99.18％。本實(shí)用新型可廣泛用于水質(zhì)、食品、藥品、化妝品等多種物質(zhì)中的銅綠假單胞菌的定性、定量檢測(cè)，攜帶、使用方便，測(cè)定簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確，保存時(shí)間長(zhǎng)。
文檔編號(hào)C12Q1/04GK201031225SQ20062013486
公開日2008年3月5日 申請(qǐng)日期2006年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月30日
發(fā)明者劉五一, 宋毛平, 李樹華, 莉 白, 陳恭恩 申請(qǐng)人:莉 白