專利名稱:一種鑒定史氏鱘、達(dá)氏鰉的技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬物種的種屬鑒定技術(shù)領(lǐng)域,由其是利用分子標(biāo)記進(jìn)行鱘科魚類的種屬鑒定技術(shù)。
背景技術(shù):
鱘是淡水魚類中個體最大、壽命最長的魚類,我國境內(nèi)就有史氏鱘、達(dá)氏鰉等8個種。其肉味鮮美,營養(yǎng)豐富,全身是寶。近年來由于其資源量下降,這一種群已瀕臨滅絕。世界各國都在對其進(jìn)行保護(hù)性開發(fā)。國際市場對出售的鱘魚產(chǎn)品進(jìn)行DNA水平的物種鑒定,限額出口。目的就是了解鱘魚的現(xiàn)行捕撈量進(jìn)而了解其資源量,制定保護(hù)措施來減緩其滅絕速度。目前我國只有史氏鱘和達(dá)氏鰉有一定的產(chǎn)量。
對鱘類產(chǎn)品進(jìn)行DNA物種鑒定國外主要利用細(xì)胞色素b基因在不同種類上可表現(xiàn)出多態(tài)性這一特點(diǎn)對鱘類產(chǎn)品進(jìn)行DNA檢測,但這種檢測方法目前還未公開。我國的檢測機(jī)構(gòu)還無法利用此技術(shù)開展此項(xiàng)工作,也無自主開發(fā)的技術(shù)。因此開發(fā)一種適于我國檢測機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室對鱘魚產(chǎn)品進(jìn)行檢測的技術(shù),打破國外對我們進(jìn)行的技術(shù)封鎖,提高我國鱘類產(chǎn)品在國際市場上的競爭力是非常必要的。而獲得在史氏鱘、達(dá)氏鰉中具有種屬特異性的DNA分子標(biāo)記是開展此項(xiàng)工作的關(guān)鍵。
發(fā)明內(nèi)容
為了獲得在史氏鱘、達(dá)氏鰉中具有種屬特異性的DNA分子標(biāo)記,本發(fā)明利用在種屬間具有多態(tài)性的隨機(jī)引物分子標(biāo)記對史氏鱘、達(dá)氏鰉進(jìn)行種屬特異性分子標(biāo)記的篩選,獲得了在史氏鱘、達(dá)氏鰉間具有種屬特異性分子標(biāo)記。
本發(fā)明解決問題的技術(shù)方案是1、利用DNA合成儀合成10個堿基的隨機(jī)引物,利用PCR技術(shù)對史氏鱘、達(dá)氏鰉及其產(chǎn)品的基因組DNA進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,獲得了一個在這二種魚中具有種屬特異性的隨機(jī)引物分子標(biāo)記AHN,AHN引物大小為10bp,堿基序列為cacccggatg。用此引物對史氏鱘、達(dá)氏鰉進(jìn)行PCR檢測,史氏鱘可獲得200bp電泳帶,達(dá)氏鰉則無此帶。達(dá)到對兩種魚及其產(chǎn)品進(jìn)行鑒、標(biāo)識的目的。
本發(fā)明的有益效果是,獲得了一個在史氏鱘、達(dá)氏鰉間具有種屬特異性分子標(biāo)記,這一標(biāo)記可用于進(jìn)出口鱘魚產(chǎn)品的定性檢測,同時(shí)也可用于科學(xué)研究中的種質(zhì)鑒定。
權(quán)利要求
1.一個在史氏鱘、達(dá)氏鰉及其產(chǎn)品DNA檢測中具有種屬特異性的DNA分子標(biāo)記AHN,其特征是AHN引物堿基序列為cacccggatg,用此標(biāo)記對史氏鱘、達(dá)氏鰉進(jìn)行PCR檢測,史氏鱘可獲得200bp電泳帶,達(dá)氏鰉則無此帶。
2.根據(jù)權(quán)力要求1所述的在史氏鱘、達(dá)氏鰉檢測中具有種屬特異性的DNA分子標(biāo)記AHN,其特征是AHN引物大小為10bp,堿基序列為cacccggatg。用此引物對史氏鱘、達(dá)氏鰉及其產(chǎn)品DNA進(jìn)行PCR檢測,史氏鱘可獲得200bp電泳帶,達(dá)氏鰉則無此帶。
全文摘要
一種史氏鱘、達(dá)氏鰉的鑒定技術(shù)。它是在史氏鱘、達(dá)氏鰉及其產(chǎn)品DNA檢測中具有種屬特異性的DNA分子標(biāo)記AHN,AHN引物大小為10bp,堿基序列為cacccggatg。用此引物對史氏鱘、達(dá)氏鰉及其產(chǎn)品DNA進(jìn)行PCR檢測,史氏鱘可獲得200bp電泳帶,達(dá)氏鰉則無此帶,達(dá)到對兩種魚及其產(chǎn)品進(jìn)行鑒定、標(biāo)識的目的。
文檔編號C12Q1/68GK1936567SQ20051001034
公開日2007年3月28日 申請日期2005年9月19日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月19日
發(fā)明者梁利群, 耿波, 孫效文, 閆學(xué)春 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所