專利名稱：冬蟲夏草滋補(bǔ)湯及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于真菌發(fā)酵工業(yè)領(lǐng)域，特別是涉及以冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液為主要原料的生產(chǎn)冬蟲夏草滋補(bǔ)湯及其生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
冬蟲夏草[Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.]，屬子囊菌亞門、麥角菌科、冬蟲夏草屬，為我國傳統(tǒng)名貴的中草藥類真菌，素有“藥王”之稱，其價值高于人參和鹿茸。幾千年來冬蟲夏草一直被列為滋補(bǔ)藥物之首。近20年來，國內(nèi)外深入開展了冬蟲夏草相關(guān)功能因子的研究，冬蟲夏草的顯著療效正逐漸被人們所認(rèn)識。冬蟲夏草味甘性溫，具有益肺腎、補(bǔ)精髓、止血化痰等功效，主治虛勞咳血、陽痿遺精、盜汗虛喘、腰膝酸痛等癥狀。研究表明發(fā)酵生產(chǎn)的冬蟲夏草菌絲體和天然冬蟲夏草功效相同，兩者均富含冬蟲夏草多糖、氨基酸、甘露醇和蟲草素等功能因子。冬蟲夏草多糖是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的大分子化合物，具有明顯的抗腫瘤作用，也是理想的免疫增強(qiáng)劑；蟲草素對人體支氣管擴(kuò)張有明顯療效；甘露醇有利尿功能。冬蟲夏草發(fā)酵液中也含有豐富的功能因子。
目前，國內(nèi)外相關(guān)研究主要集中在冬蟲夏草功能因子的提取及藥理、藥效、保健功能等方面。而在液體深層發(fā)酵法生產(chǎn)冬蟲夏草過程中，多以獲取冬蟲夏草菌絲體為目的，不含菌絲體的發(fā)酵清液被廢棄，使發(fā)酵清液中營養(yǎng)成分不能充分利用，并對環(huán)境造成污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯及其生產(chǎn)方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，按重量百分比組成為含菌絲體的發(fā)酵液93.5％～98.45％，動物蛋白水解液0.3～1.5％，甜味劑1.0～5.0％的，酸味劑0.05～0.8％，穩(wěn)定劑0.05～0.2％，經(jīng)(1)發(fā)酵液的獲得；(2)發(fā)酵液加熱；(3)發(fā)酵液的調(diào)配；(4)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理；(5)滅菌灌裝制得，冬蟲夏草滋補(bǔ)湯pH在4.0～7.0。
甜味劑可以選擇蔗糖或蜂蜜；酸味劑可以選檸檬酸或香醋。
穩(wěn)定劑可以選羧甲基纖維素鈉或黃原膠或明膠。
一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯的生產(chǎn)方法，包括如下步驟(1)發(fā)酵液的獲得采用斜面菌種逐級擴(kuò)培獲得冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液；(2)發(fā)酵液加熱將冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液加熱到60～90℃，保持10～30分鐘，達(dá)到滅酶和預(yù)熱效果；(3)發(fā)酵液的調(diào)配按重量百分比將含菌絲體的發(fā)酵液93.5％～98.45％，加入0.3～1.5％的動物蛋白水解液，1.0～5.0％的甜味劑，0.05～0.8％的酸味劑，0.05～0.2％的穩(wěn)定劑，調(diào)節(jié)PH在4.0～7.0；(4)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理將調(diào)配后的發(fā)酵液輸送給膠體磨，調(diào)整膠體磨定子與轉(zhuǎn)子的間隙為10～50微米，對發(fā)酵液中菌絲體進(jìn)行破碎，膠體磨流量為1～5噸/小時；再經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)處理，調(diào)整高壓均質(zhì)機(jī)壓力為20～60Mpa，高壓均質(zhì)流量為0.5～3噸/小時，顯微鏡鏡檢菌絲體破壁率為100％；(5)滅菌灌裝將處理后的發(fā)酵液在95℃～135℃，滅菌3～30秒，滅菌完畢進(jìn)行灌裝，即得到一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯。
(6)產(chǎn)品包裝將所得產(chǎn)品進(jìn)行包裝，包裝后即為冬蟲夏草滋補(bǔ)湯產(chǎn)品。
由于本發(fā)明是全部利用冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液(含菌絲體)直接經(jīng)加熱、調(diào)配和高壓均質(zhì)處理得到冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，因此完全保留了冬蟲夏草真菌發(fā)酵液(含菌絲體)中的各種營養(yǎng)成分，實(shí)現(xiàn)了菌絲體功能因子的高效溶出和完全利用，克服了目前多數(shù)企業(yè)只為獲取冬蟲夏草菌絲體而將不含菌絲體的發(fā)酵清液廢棄并排放的不足之處，實(shí)現(xiàn)了冬蟲夏草真菌發(fā)酵液生產(chǎn)過程的無污物排放的潔凈化生產(chǎn)，其產(chǎn)品填補(bǔ)了市場空白。冬蟲夏草滋補(bǔ)湯是一種具有營養(yǎng)、保健功能的方便食品即可飲用也可烹飪。
具體實(shí)施例方式
下面的實(shí)施例可以使本領(lǐng)域技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例1生產(chǎn)100公斤冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，取經(jīng)過液體深層發(fā)酵法生產(chǎn)并通過加熱工藝處理后得到的含菌絲體的發(fā)酵液95.5公斤，加入動物蛋白水解液1公斤，蔗糖1公斤，蜂蜜2公斤，檸檬酸0.4公斤、羧甲基纖維素鈉0.1公斤進(jìn)行發(fā)酵液的調(diào)配；再經(jīng)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理工藝、滅菌灌裝制得冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，控制冬蟲夏草滋補(bǔ)湯pH在7.0。
本發(fā)明中動物蛋白水解液的獲得方法是取一定量的雞肉(牛肉或豬肉)經(jīng)絞肉機(jī)絞碎，絞碎后的雞肉與水以1∶2～5的比例混合并經(jīng)膠體磨處理，調(diào)整膠體磨定子與轉(zhuǎn)子的間隙為50～100微米，膠體磨流量控制為0.1～0.5噸/小時；將經(jīng)膠體磨處理后的雞肉(牛肉或豬肉)調(diào)整溫度為40～60℃，PH為5.0～8.0，加入0.01～0.1％的木瓜蛋白酶或風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解4～6小時后得到雞肉(牛肉或豬肉)蛋白水解液。
本實(shí)施例中，動物蛋白水解液的獲得方法是取一定量的牛肉，經(jīng)絞肉機(jī)絞碎，絞碎后的牛肉與水以1∶3的比例混合并經(jīng)膠體磨處理，調(diào)整膠體磨定子與轉(zhuǎn)子的間隙為70微米，膠體磨流量控制為0.3噸/小時；將經(jīng)膠體磨處理后的牛肉調(diào)整溫度為55℃，PH為5.5，加入0.06％的木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解5小時后得到牛肉蛋白水解液。
實(shí)施例2生產(chǎn)100公斤冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，取經(jīng)發(fā)酵液的獲得、發(fā)酵液加熱后工藝后得到的含菌絲體的發(fā)酵液95公斤，加入動物蛋白水解液1.5公斤(制備同實(shí)施例1)，蔗糖2公斤，蜂蜜0.95公斤，香醋0.05公斤、黃原膠0.05公斤進(jìn)行發(fā)酵液的調(diào)配；再經(jīng)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理工藝、滅菌灌裝制得冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，控制冬蟲夏草滋補(bǔ)湯pH在6.0。
實(shí)施例3生產(chǎn)100公斤冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，取經(jīng)發(fā)酵液的獲得、發(fā)酵液加熱后工藝后得到的含菌絲體的發(fā)酵液93.5公斤，加入動物蛋白水解液0.5公斤(制備同實(shí)施例1)，蔗糖5公斤，香醋0.8公斤、明膠0.2公斤進(jìn)行發(fā)酵液的調(diào)配；再經(jīng)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理工藝、滅菌灌裝制得冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，控制冬蟲夏草滋補(bǔ)湯pH在5.0。
實(shí)施例4生產(chǎn)100公斤冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，取經(jīng)發(fā)酵液的獲得、發(fā)酵液加熱后工藝后得到的含菌絲體的發(fā)酵液98.45公斤，加入動物蛋白水解液0.3公斤(制備同實(shí)施例1)，蔗糖1公斤，檸檬酸0.05公斤、羧甲基纖維素鈉0.2公斤進(jìn)行發(fā)酵液的調(diào)配；再經(jīng)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理工藝、滅菌灌裝制得冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，控制冬蟲夏草滋補(bǔ)湯pH在4.0。
實(shí)施例5一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯的生產(chǎn)方法，包括如下步驟1.發(fā)酵液的獲得采用斜面菌種逐級擴(kuò)培獲得冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液；(1)一級種子培養(yǎng)將冬蟲夏草斜面菌種接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度24℃，培養(yǎng)時間50小時；(2)二級種子培養(yǎng)將一級種子按照10％的接種量接入500毫升二級種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級種子相同；(3)三級種子培養(yǎng)將二級種子以10％接種量接入5000毫升三級種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床100轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度24℃，培養(yǎng)時間50小時；(4)一級種子罐培養(yǎng)將三級種子以10％接種量接入總?cè)莘e為150L的一級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度24℃，攪拌速度150轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V)1∶0.5，罐壓0.05Mpa，培養(yǎng)時間48小時；(5)二級種子罐培養(yǎng)將一級種子罐菌種以10％接種量接入總?cè)莘e為1.5噸二級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量1噸，培養(yǎng)條件與一級種子罐相同；(6)發(fā)酵罐培養(yǎng)將二級種子罐中的菌種以10％接種量接入總?cè)莘e為13噸的發(fā)酵罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量10噸，培養(yǎng)溫度24℃，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V)1∶0.4，罐壓0.05Mpa，培養(yǎng)時間72小時。
本發(fā)明中冬蟲夏草真菌液體深層發(fā)酵液的培養(yǎng)見徐錦堂編《中國藥用真菌學(xué)》。
2.發(fā)酵液加熱將冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液加熱到70℃，保持20分鐘，達(dá)到滅酶和預(yù)熱效果。
3.發(fā)酵液的調(diào)配按實(shí)施例1的比例進(jìn)行調(diào)配。
4.發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理將調(diào)配后的發(fā)酵液輸送給膠體磨，調(diào)整膠體磨定子與轉(zhuǎn)子的間隙為10微米，對發(fā)酵液中菌絲體進(jìn)行破碎，膠體磨流量為1噸/小時；再經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)處理，調(diào)整高壓均質(zhì)機(jī)壓力為40Mpa，高壓均質(zhì)流量為1噸/小時，顯微鏡鏡檢菌絲體破壁率為100％。
5.滅菌罐裝將處理后的發(fā)酵液在120℃，滅菌10秒，滅菌完畢進(jìn)行灌裝，即得到一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯。
6.產(chǎn)品包裝將所得產(chǎn)品進(jìn)行包裝，包裝后即為冬蟲夏草滋補(bǔ)湯產(chǎn)品。
實(shí)施例6一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯的生產(chǎn)方法，包括如下步驟1.發(fā)酵液的獲得采用斜面菌種逐級擴(kuò)培獲得冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液；(同實(shí)施例5)2.發(fā)酵液加熱將冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液加熱到60℃，保持30分鐘，達(dá)到滅酶和預(yù)熱效果；
3.發(fā)酵液的調(diào)配按實(shí)施例2的比例進(jìn)行調(diào)配；4.發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理將調(diào)配后的發(fā)酵液輸送給膠體磨，調(diào)整膠體磨定子與轉(zhuǎn)子的間隙為30微米，對發(fā)酵液中菌絲體進(jìn)行破碎，膠體磨流量為3噸/小時；再經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)處理，調(diào)整高壓均質(zhì)機(jī)壓力為60Mpa，高壓均質(zhì)流量為3噸/小時，顯微鏡鏡檢菌絲體破壁率為100％；5.滅菌罐裝將處理后的發(fā)酵液在95℃，滅菌30秒，滅菌完畢進(jìn)行灌裝，即得到一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯；6.產(chǎn)品包裝將所得產(chǎn)品進(jìn)行包裝，包裝后即為冬蟲夏草滋補(bǔ)湯產(chǎn)品。
實(shí)施例7一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯的生產(chǎn)方法，包括如下步驟1.發(fā)酵液的獲得采用斜面菌種逐級擴(kuò)培獲得冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液；(同實(shí)施例5)2.發(fā)酵液加熱將冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液加熱到90℃，保持10分鐘，達(dá)到滅酶和預(yù)熱效果；3.發(fā)酵液的調(diào)配按實(shí)施例3的比例進(jìn)行調(diào)配；4.發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理將調(diào)配后的發(fā)酵液輸送給膠體磨，調(diào)整膠體磨定子與轉(zhuǎn)子的間隙為50微米，對發(fā)酵液中菌絲體進(jìn)行破碎，膠體磨流量為5噸/小時；再經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)處理，調(diào)整高壓均質(zhì)機(jī)壓力為20Mpa，高壓均質(zhì)流量為0.5噸/小時，顯微鏡鏡檢菌絲體破壁率為100％；5.滅菌罐裝將處理后的發(fā)酵液在135℃，滅菌3秒，滅菌完畢進(jìn)行灌裝，即得到一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯；6.產(chǎn)品包裝將所得產(chǎn)品進(jìn)行包裝，包裝后即為冬蟲夏草滋補(bǔ)湯產(chǎn)品。
冬蟲夏草滋補(bǔ)湯產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)見表1。
表1 冬蟲夏草滋補(bǔ)湯產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

本發(fā)明采用比色法測定甘露醇含量精密量取產(chǎn)品原液0.5mL于試管中，然后加1mL高碘酸鈉溶液(0.015mol高碘酸鈉于0.12mol鹽酸溶液中)，混勻，室溫放置10分鐘，加2mL 0.1％L-鼠李糖溶液以除去過多的高碘酸鹽，混合后加4mL新鮮配制的Nash試劑(150g醋酸銨+2mL冰醋酸+2mL乙酰丙酮，用蒸餾水稀至1000mL)，53℃水浴加熱15分鐘使其呈色，冷卻，在412nm測定OD值，依據(jù)回歸方程計算甘露醇含量。
本發(fā)明采用苯酚-硫酸法測定冬蟲夏草多糖含量取產(chǎn)品10ml，加蒸餾水100ml于回流燒瓶中，在沸水中回流提取2小時，將提取液在5000rpm離心10分鐘，將殘碴清洗后在相同條件下再離心一次。收集上清液于燒杯中，真空濃縮到體積為10～20ml。冷卻后加3倍95％乙醇，冰箱放置過夜。然后在3000rpm離心10分鐘，收集沉淀物，用蒸餾水將沉淀物洗入1000ml容量瓶中，加蒸餾水定容。取2ml置10ml量瓶中，精密加入5％苯酚試液1ml混勻，迅速加入硫酸5.0ml，振搖5分鐘，置沸水浴中放置15分鐘后，于冷水中冷卻30分鐘，加水至刻度搖勻，在412nm測定OD值，同時做空白對照。根據(jù)測定結(jié)果計算相應(yīng)多糖含量。
本發(fā)明斜面培養(yǎng)基組成為馬鈴薯(煮汁)20％，葡萄糖2％，磷酸二氫鉀0.1％，硫酸鎂0.05％，瓊脂2.0％。
本發(fā)明中一級種子、二級種子、三級種子、一級種子罐、二級種子罐和發(fā)酵生產(chǎn)培養(yǎng)基組成均為蔗糖5％，葡萄糖2％，蛋白胨0.4％，大豆蛋白粉0.6％，磷酸二氫鉀0.2％，硫酸鎂0.1％，PH6.0。
本發(fā)明所用冬蟲夏草菌種購于中國工業(yè)微生物菌種保藏中心，菌號CICC 14006。
權(quán)利要求
1.一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，冬蟲夏草滋補(bǔ)湯按重量百分比組成為含菌絲體的發(fā)酵液93.5％～98.45％，動物蛋白水解液0.3～1.5％，甜味劑1.0～5.0％的，酸味劑0.05～0.8％，穩(wěn)定劑0.05～0.2％，經(jīng)(1)發(fā)酵液的獲得；(2)發(fā)酵液加熱；(3)發(fā)酵液的調(diào)配；(4)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理；(5)滅菌灌裝制得，冬蟲夏草滋補(bǔ)湯pH在4.0～7.0。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，其特征是所述甜味劑為蔗糖或蜂蜜；
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，其特征是所述酸味劑為檸檬酸或香醋。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，其特征是所述穩(wěn)定劑為羧甲基纖維素鈉或黃原膠或明膠。
5.一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯的生產(chǎn)方法，包括如下步驟(1)發(fā)酵液的獲得采用斜面菌種逐級擴(kuò)培獲得冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液；(2)發(fā)酵液加熱將冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液加熱到60～90℃，保持10～30分鐘；(3)發(fā)酵液的調(diào)配按重量百分比將含菌絲體的發(fā)酵液93.5％～98.45％，加入0.3～1.5％的動物蛋白水解液，1.0～5.0％的甜味劑，0.05～0.8％的酸味劑，0.05～0.2％的穩(wěn)定劑，調(diào)節(jié)PH在4.0～7.0；(4)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理將調(diào)配后的發(fā)酵液輸送給膠體磨，調(diào)整膠體磨定子與轉(zhuǎn)子的間隙為10～50微米，膠體磨流量為1～5噸/小時；再經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)處理，調(diào)整高壓均質(zhì)機(jī)壓力為20～60Mpa，高壓均質(zhì)流量為0.5～3噸/小時，顯微鏡鏡檢菌絲體破壁率為100％；(5)滅菌灌裝將處理后的發(fā)酵液在95℃～135℃，滅菌3～30秒，滅菌完畢進(jìn)行灌裝，即得到一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種冬蟲夏草滋補(bǔ)湯及其生產(chǎn)方法，其步驟(1)發(fā)酵液的獲得；(2)發(fā)酵液加熱；(3)發(fā)酵液的調(diào)配按重量百分比將含菌絲體的發(fā)酵液93.5％～98.45％，加入0.3～1.5％的動物蛋白水解液，1.0～5.0％的甜味劑，0.05～0.8％的酸味劑，0.05～0.2％的穩(wěn)定劑，調(diào)節(jié)pH在4.0～7.0；(4)發(fā)酵液高壓均質(zhì)處理先經(jīng)膠體磨，再經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)處理，顯微鏡鏡檢菌絲體破壁率；(5)滅菌灌裝，本發(fā)明全部利用冬蟲夏草真菌深層發(fā)酵液經(jīng)加熱、調(diào)配和高壓均質(zhì)處理得到冬蟲夏草滋補(bǔ)湯，完全保留了冬蟲夏草真菌發(fā)酵液中各種營養(yǎng)成分，實(shí)現(xiàn)了菌絲體功能因子的高效溶出和完全利用，達(dá)到了潔凈化發(fā)酵生產(chǎn)。
文檔編號A23L1/28GK1689452SQ20041001909
公開日2005年11月2日 申請日期2004年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月28日
發(fā)明者蔡永峰, 程池, 黃宇彤, 岳國海, 李勣 申請人:中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院