專利名稱：甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物有效成分的提取方法，尤其是一種甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法。
背景技術(shù)：
甘薯，植物分類上屬于旋花科甘薯屬(Ipomoea Batas.Lam)甘薯種草本植物，又名番薯、紅薯，原產(chǎn)南非洲。約在500年前傳入我國，由于它具有高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)、抗災(zāi)能力強(qiáng)、適應(yīng)性廣、容易栽培等特點(diǎn)，所以深受廣大人民群眾歡迎，很快普及到我國南北各地。現(xiàn)在，我國北自遼寧、南至海南都種植甘薯，常年種植面積在1億畝以上，成為僅次于水稻、小麥、玉米之后的糧食作物。在我省，甘薯種植面積達(dá)220萬畝，產(chǎn)紅薯葉、柄、藤1010萬噸，產(chǎn)紅薯470萬噸。過去，甘薯主要用作糧食和飼料用，但隨著工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展和人民生活水平的提高，甘薯越來越多地被作為工業(yè)原料來進(jìn)行多種深加工?，F(xiàn)在，以甘薯塊根為原料的加工產(chǎn)品有淀粉、酒精、味精、檸檬酸、果糖、丁醇、丁酸、丙酮等幾百個(gè)品種。而對(duì)甘薯葉、柄、藤的加工利用卻很少，一般只用作飼料，雖然現(xiàn)在有用做營養(yǎng)菜肴上了餐桌，而大部分都被丟棄在田地邊、道路旁，基本上作為廢棄物被拋棄，造成資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。有關(guān)資料表明，甘薯葉中含有豐富的胡蘿卜素、VB1、VB2、VC以及鐵、鈣、鎂等礦質(zhì)元素。據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，甘薯葉具有促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)，刺激消化，治療便秘，促進(jìn)膽固醇排泄，防止脂肪沉積在心血管壁上，維持動(dòng)脈血管彈性，保護(hù)消化道、呼吸道及關(guān)節(jié)腔的潤滑功效。我國中藥資料上也記載，以(甘薯)“莖葉入藥，(其藥)性微涼，味甘澀，無毒；具有通乳汁、潰癰瘡、排膿、解毒”的功效，主治婦人乳汁不通，痛瘡久不潰膿，大便帶血、腹瀉等癥狀。所以甘薯葉作為天然綠色蔬菜日益受到人們的重視，在我國南方部分地區(qū)，人們就有食用甘薯葉的習(xí)慣，人們常常用“甘薯之葉，羊肝同煮熟食之”來治夜盲，用“鮮甘薯葉煮熟后淡食其湯”來治小兒蚶積，用“鮮甘薯嫩葉，鮮冬瓜適量，水煮服”來治糖尿病。像以上的例子還很多，這雖然只是民間驗(yàn)方，但說明甘薯葉能夠作為保健食品原料利用。在香港被稱之為“蔬菜皇后”，在美國、日本也被列為“長壽食品”。開發(fā)甘薯葉保健食品途徑很多，可以將甘薯葉或其他蔬菜一起打漿、過濾、滅菌，加入配料，制成保健菜汁飲料，或薯塊和藤葉配合蒸煮，發(fā)酵后制成滋補(bǔ)酒，也可以與莖、塊根一起浸提，濃縮，經(jīng)噴霧干燥成營養(yǎng)粉、片、沖劑等保健食品。但更重要是研究甘薯葉功能因子的提取、分離和純化等技術(shù)，最大限度地保留它們的活性，提高它們?cè)诒＝∈称分械姆€(wěn)定性，采用外加法生產(chǎn)第三代保健食品。
現(xiàn)有的甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，很少采用酶解技術(shù)，為保證較高的提取率，需要加大量的水才能將多糖、黃酮、氨基酸等有效成分提出，需消耗大量的能源才能將大量的水除去。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，該提取方法能得到甘薯葉柄藤多糖、黃酮類化合物等有效成分。該法提取效率高，用水量小，能節(jié)約能源。
本發(fā)明的技術(shù)方案為一種甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，甘薯葉柄藤經(jīng)常規(guī)的預(yù)處理，加水水提，過濾，得到濾液a和濾渣b；濾液a和濾渣b進(jìn)一步提取各有效成分，預(yù)處理后的甘薯葉柄藤與加水量之間的固液比為1∶3-50；水提過程中采用添加量為0.002-0.05％的果膠酶進(jìn)行酶解，果膠酶解條件PH為3.0-6.0，溫度40-60攝氏度，時(shí)間0.2-2小時(shí)，果膠酶解結(jié)束后還增加纖維酶解步驟，纖維酶解條件纖維酶量為0.1-2％，PH為3.0-6.0，溫度30-60攝氏度，時(shí)間0.5-2小時(shí)。
本發(fā)明最主要的貢獻(xiàn)就是加果膠酶酶解與纖維酶解聯(lián)合使用，可以將固液比控制在1∶50以內(nèi)，且黃酮類得率可達(dá)4％以上，相比不加任何酶酶解，固液比則需控制在1∶100黃酮類得率才能達(dá)4％。在同等條件下，固液比小意味用較少量的水提取，在后續(xù)的濃縮步驟中可以減少能源消耗。
較優(yōu)的發(fā)明的技術(shù)方案有下列甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，水提過程還增加蛋白酶解步驟，蛋白酶解條件蛋白酶量為0.1-2％，PH為2-5.5，溫度25-50攝氏度，時(shí)間0.3-2小時(shí)。
甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為8000-12000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為400-8000的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.2-6mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。
甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，預(yù)處理還包括粉碎處理，粉碎處理將甘薯葉柄藤粉碎為4-200目的細(xì)粉。
甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，濾渣b按固液比為1∶2-20的用量加濃度為50％-95％的乙醇，在溫度25-85攝氏度條件下醇提0.3-2小時(shí)，再過濾，得到的濾液d，先超濾，超濾采用截留分子量為4000-7000的超濾膜，截流液b1可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為400-1100的納濾膜，截流液b2進(jìn)一步精制得到黃酮化合物，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.2-6mpa，得到的截流液b3可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，反滲透的透過液含有大量的乙醇可以回收循環(huán)使用。
黃酮化合物的精制可以采用常規(guī)的方法截流液b2經(jīng)硅藻土、樹脂吸附，經(jīng)聚已內(nèi)酰胺吸附，50％乙醇洗脫解吸，乙醇回收，得到黃酮化合物。黃酮精制可以采用《糧油加工與食品機(jī)械》2001(6).-34-35出版的“竹葉黃酮精制的研究”文獻(xiàn)中公開的方法。
本發(fā)明所得多糖、黃酮等有效成分采用下列方法驗(yàn)證效果多糖沉淀物與硫酸苯酚試劑反應(yīng)呈橙黃色，與硫酸蒽酮試劑反應(yīng)呈藍(lán)綠色，說明兩個(gè)定性反應(yīng)均呈陽性。
紫外光譜多糖沉淀物的紫外光譜圖。
譜圖顯示，多糖沉淀物在260nm、280nm及其附近沒有吸收峰，而這兩個(gè)吸收峰分別是核酸與蛋白質(zhì)的典型峰，這說明該多糖沉淀物中不含核酸與蛋白質(zhì)，Sevage法除去游離蛋白質(zhì)是成功的，因?yàn)镾evage法對(duì)結(jié)合蛋白質(zhì)無影響，因此也證明甘薯葉中多糖沉淀物中不含結(jié)合蛋白質(zhì)。
紅外光譜多糖沉淀物的紅外光譜圖。
譜圖顯示出多糖的特征吸收峰，表現(xiàn)在由兩種C-O(C-O-H與C-O-C)伸縮振動(dòng)所引起的1200-1000cm-1間比較大的吸收峰；由的變角振動(dòng)引起的1400-1200cm-1間的吸收峰；C＝O伸縮振動(dòng)引起的1750cm-1較大的吸收峰和其非對(duì)稱伸縮振動(dòng)引起的1620cm-1左右的吸收峰；O-H伸縮振動(dòng)引起的3400cm-1的寬峰等等。
從以上顯色反應(yīng)與紅外光譜及紫外光譜分析結(jié)果可以鑒定沉淀物是多糖產(chǎn)物，且不含蛋白質(zhì)。
甘薯葉多糖純化研究純化方法通過熱水浸提、法脫蛋白、脫色、乙醇沉淀的多糖是多糖混合物，通常稱為粗多糖(crude polysaccharide)，即含有不同的組分(級(jí)份)的多糖，不同的組分其分子量是不同的，也許結(jié)構(gòu)也不一樣，而且其生物活性也不盡相同，有的相輔相成，有的甚至相反相克，因此，要深入研究多糖結(jié)構(gòu)與功能，最關(guān)鍵的是粗多糖的純化。
采用DEAE-纖維素柱層析法(DEAE-cellulos ColumnChromatography)純化甘薯葉多糖，比較階梯式梯度法脫法和連續(xù)式梯度法脫法，選擇一種較好的洗脫方法，將多糖產(chǎn)物純化成單一組分的多糖，通常稱為純多糖(pure polysaccharide)。
柱的準(zhǔn)備稱取20gDEAE-纖維素，浸泡在蒸餾水里，使其充分膨脹，過濾后用0.01mol/L(乙二胺四乙酸)處理；再用300ml0.5mol/L浸泡30min，再轉(zhuǎn)倒布氏漏斗中內(nèi)抽濾，用蒸餾水洗至中性，抽干后轉(zhuǎn)移到燒杯中；然后用300ml0.5mol/LNaOH溶液浸泡30min，然后轉(zhuǎn)移到布氏漏斗中抽濾，用蒸餾水洗至中性，抽干后轉(zhuǎn)移到燒杯中，用300m10.02mol/L pH6.5磷酸鹽緩沖液浸泡片刻，脫氣后裝柱，再用2倍蒸餾水平衡，備用。
連續(xù)式梯度法洗脫將溶解好的多糖溶液(0.25％)上樣2ml，打開層析柱出口，讓多糖溶液滲入到DEAE-纖維素內(nèi)，先用蒸餾水洗脫，流速約0.2ml/min，每5分鐘收集一管，隔管用硫酸苯酚法檢測(cè)，直到出峰后再回到基線為止，這時(shí)淀粉等中性糖已被沖洗出來，再用0-1.0mol/L溶液500ml連續(xù)式梯度洗脫，流速不變，同樣方法檢測(cè)，直至500ml溶液洗完為止。
階梯式梯度洗脫采用上述同樣的方法上柱，蒸餾水洗脫，之后依次用0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L、0.4mol/LNaCl......溶液洗脫，流速同上，檢測(cè)方法同上，直至無多糖洗出為止。
實(shí)驗(yàn)材料
HPGFC條件色譜柱M-Bondapak E-linear[300*3.9mmID]流動(dòng)相甲醇∶水＝1∶9流速0 4ml/min溫度8-10℃采用高效凝膠過濾色譜法，用甲醇水作流動(dòng)相，經(jīng)M-Bondapak E-Linear柱分離，示差折光檢測(cè)器檢測(cè)，用已知平均分子量的T系列Dextra作標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)得SPPS＝II的分子量為61.16×104Da。分子量測(cè)定的線性關(guān)系良好，其相關(guān)系數(shù)為0.9830，而且大大簡(jiǎn)化了操作步驟，明顯提高了檢測(cè)效率。從SPPS＝II的HPGFC譜圖看，其譜帶分布較寬，表明DEAE一纖維素柱層析分離的SPPS＝II還有待于進(jìn)一步純化，以獲得分子量分布更窄的多糖純品。
通過計(jì)算高效凝膠過濾色譜的圖譜峰面積與標(biāo)準(zhǔn)品做對(duì)照可以得到多糖的定量含量數(shù)據(jù)。
本發(fā)明的黃酮類化合物的定量色譜分析方法可采用《食品科學(xué)》.2001，22(2).-57-61出版的“黃酮類化合物的定量色譜分析”文獻(xiàn)公開的方法測(cè)定。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1一種甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，選用甘薯葉柄藤3000公斤。甘薯葉柄藤經(jīng)常規(guī)的預(yù)處理，清洗去雜、去枝、梗、風(fēng)干搗碎機(jī)中充分搗碎葉、柄，藤，過50目篩，預(yù)處理結(jié)束后加水水提，過濾，得到濾液a和濾渣b；濾液a和濾渣b進(jìn)一步提取各有效成分，預(yù)處理后的甘薯葉柄藤與加水量之間的固液比為1∶30；水提過程中采用添加量為0.03％的果膠酶進(jìn)行酶解，果膠酶解條件PH為4.1，溫度45攝氏度，時(shí)間1小時(shí)，果膠酶解結(jié)束后還增加纖維酶解步驟，纖維酶解條件纖維酶量為1％，PH為5.2，溫度55攝氏度，時(shí)間1小時(shí)。
濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為10000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為1100的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.5mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。
濾渣b按固液比為1∶10的用量加濃度為75％的乙醇，在溫度55攝氏度條件下醇提1小時(shí)，再過濾，得到的濾液d，先超濾，超濾采用截留分子量為5000的超濾膜，截流液b1可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為1100的納濾膜，截流液b2進(jìn)一步精制得到黃酮化合物，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.5mpa，得到的截流液b3可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，反滲透的透過液含有大量的乙醇可以回收循環(huán)使用。
經(jīng)檢測(cè)，多糖(30％)的提取率達(dá)5.5％。黃酮(45％)的提取率達(dá)5.6％。所分離的多糖、黃酮樣品經(jīng)江西省食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所檢測(cè)，產(chǎn)品的質(zhì)量和衛(wèi)生指標(biāo)符合國家有關(guān)食品質(zhì)量衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。
實(shí)施例2水提過程還增加蛋白酶解步驟，蛋白酶解條件蛋白酶量為2％，PH為4.5，溫度45攝氏度，時(shí)間1小時(shí)。其余同實(shí)施例1。
經(jīng)檢測(cè)，多糖(30％)的提取率達(dá)6.8％。黃酮(45％)的提取率達(dá)6.3％。增加蛋白酶解步驟黃酮類得率，多糖的提取率有提高。
實(shí)施例3預(yù)處理結(jié)束后不添加任何酶，直接對(duì)甘薯葉柄藤加水水提。水提的浸提溫度60℃、預(yù)處理后的甘薯葉柄藤與加水水量之間的浸提固液比1∶100，浸提5.5小時(shí)后，PH值控制在6.5。
濾液a經(jīng)過濾，加熱濃縮10小時(shí)將大部分的水除去，再進(jìn)入其他步驟，其余同實(shí)施例1。黃酮(45％)得率4.062％。
為得到4％以上的黃酮類得率，就必須用大量的水才能溶解浸出足夠的黃酮，浸提固液比高達(dá)1∶100。而為了除去大量的水，需要長時(shí)間的加熱蒸發(fā)，能量消耗大。
實(shí)施例4濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，透過液經(jīng)反滲透，再進(jìn)入濃縮步驟，其中超濾采用截留分子量為10000的超濾膜。其余同實(shí)施例1。
采用超濾膜可將大分子量的多糖和相對(duì)分子量小的黃酮類較好的分離，超濾膜與反滲透連用可以簡(jiǎn)化濃縮程序，并可減少浸提固液比，例如只需1∶30就能保證4％以上的黃酮類(45％)得率，并且可以在常溫下進(jìn)行濃縮，不需要加熱，這將大量節(jié)約能源。
實(shí)施例5
一組固液比方面的實(shí)施例(1)固液比為1∶3其余同實(shí)施例1。
(2)固液比為1∶50其余同實(shí)施例1。
(3)固液比為1∶8其余同實(shí)施例1。
(4)固液比為1∶27其余同實(shí)施例1。
(5)固液比為1∶36其余同實(shí)施例1。
(6)固液比為1∶17其余同實(shí)施例1。
(7)固液比為1∶45其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例6一組纖維素酶解方面的實(shí)施例(1)水提過程中添加量為0.01％的纖維素酶，PH為3.0，溫度30攝氏度，時(shí)間0.5小時(shí)，其余同實(shí)施例1。
(2)水提過程中添加量為0.1％的纖維素酶，PH為3.0，溫度33攝氏度，時(shí)間2小時(shí)，其余同實(shí)施例1。
(3)水提過程中添加量為0.5％的纖維素酶，PH為3.2，溫度40攝氏度，時(shí)間1小時(shí)，其余同實(shí)施例1。
(4)水提過程中添加量為0.8％的纖維素酶，PH為3.5，溫度45攝氏度，其余同實(shí)施例1。
(5)水提過程中添加量為1.0％的纖維素酶，PH為3.9，溫度55攝氏度，其余同實(shí)施例1。
(6)水提過程中添加量為1.2％的纖維素酶，PH為4.4，溫度58攝氏度，其余同實(shí)施例1。
(7)水提過程中添加量為0.3％的纖維素酶，PH為5.2，溫度60攝氏度，其余同實(shí)施例1。
(8)水提過程中添加量為0.2％的纖維素酶，PH為6.0，溫度31攝氏度，其余同實(shí)施例1。
(9)水提過程中添加量為2.0％的纖維素酶，PH為6.6，溫度30攝氏度，其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例7一組蛋白酶解方面的實(shí)施例(1)蛋白酶量為2％，PH為3.5，溫度28攝氏度，時(shí)間2小時(shí)，其余同實(shí)施例2。
(2)蛋白酶量為0.1％，PH為2.5，溫度25攝氏度，時(shí)間0.5小時(shí)，其余同實(shí)施例2。
(3)蛋白酶量為0.2％，PH為3.5，溫度30攝氏度，時(shí)間0.8小時(shí)，其余同實(shí)施例2。
(4)蛋白酶量為0.3％，PH為4.5，溫度35攝氏度，時(shí)間1.0小時(shí)，其余同實(shí)施例2。
(5)蛋白酶量為0.5％，PH為5.5，溫度40攝氏度，時(shí)間1.5小時(shí)，其余同實(shí)施例2。
(6)蛋白酶量為0.8％，PH為2.5，溫度45攝氏度，時(shí)間2.0小時(shí)，其余同實(shí)施例2。
(7)蛋白酶量為1.2％，PH為2.5，溫度50攝氏度，時(shí)間2.0小時(shí)，其余同實(shí)施例2。
實(shí)施例8一組果膠酶解方面的實(shí)施例(8)果膠酶量為2％，PH為3.5，溫度28攝氏度，時(shí)間2小時(shí)，其余同實(shí)施例1。
(9)果膠酶量為0.002％，PH為2.5，溫度25攝氏度，時(shí)間0.5小時(shí)，其余同實(shí)施例1。
(10)果膠酶量為0.008％，PH為3.5，溫度30攝氏度，時(shí)間0.8小時(shí)，其余同
(11)果膠酶量為0.01％，PH為4.5，溫度35攝氏度，時(shí)間1.0小時(shí)，其余同
(12)果膠酶量為0.02％，PH為5.5，溫度40攝氏度，時(shí)間1.5小時(shí)，其余同
(13)果膠酶量為0.03％，PH為2.5，溫度45攝氏度，時(shí)間2.0小時(shí)，其余同
(14)果膠酶量為0.05％，PH為2.5，溫度50攝氏度，時(shí)間2.0小時(shí)，其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例9一組超濾方面的實(shí)施例(1)濾渣b按固液比為1∶5的用量加濃度為85％的乙醇，在溫度60攝氏度條件下醇提1小時(shí)，再過濾，得到的濾液d，先超濾，超濾采用截留分子量為6000的超濾膜，截流液b1可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為1050的納濾膜，截流液b2進(jìn)一步精制得到黃酮化合物，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.2-6mpa，得到的截流液b3可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，反滲透的透過液含有大量的乙醇可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(2)濾渣b按固液比為1∶4的用量加濃度為85％的乙醇，在溫度25攝氏度條件下醇提1小時(shí)，再過濾，得到的濾液d，先超濾，超濾采用截留分子量為4000的超濾膜，截流液b1可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為1000的納濾膜，截流液b2進(jìn)一步精制得到黃酮化合物，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.2mpa，得到的截流液b3可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，反滲透的透過液含有大量的乙醇可以回收循環(huán)使用。。其余同實(shí)施例1。
(3)濾渣b按固液比為1∶20的用量加濃度為85％的乙醇，在溫度85攝氏度條件下醇提2小時(shí)，再過濾，得到的濾液d，先超濾，超濾采用截留分子量為7000的超濾膜，截流液b1可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為900的納濾膜，截流液b2進(jìn)一步精制得到黃酮化合物，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為6mpa，得到的截流液b3可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，反滲透的透過液含有大量的乙醇可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。(4)濾渣b按固液比為1∶15的用量加濃度為85％的乙醇，在溫度50攝氏度條件下醇提1小時(shí)，再過濾，得到的濾液d，先超濾，超濾采用截留分子量為5000的超濾膜，截流液b1可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為1050的納濾膜，截流液b2進(jìn)一步精制得到黃酮化合物，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.2-6mpa，得到的截流液b3可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，反滲透的透過液含有大量的乙醇可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例10一組超濾方面的實(shí)施例(1)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為8000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為1100的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.2mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(2)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為9000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為400的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為6mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(3)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為12000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為8000的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為3mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(4)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為10500的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為7000的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為1mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(5)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為10000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為4000的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為3mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(6)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為12000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為3000的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為3mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(7)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為10000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為2000的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為4mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(8)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為12000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為500的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為3mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(9)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為12000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為700的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為3mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
(10)濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為12000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為800的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為3mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例11粉碎處理將甘薯葉柄藤粉碎為4目的細(xì)粉，其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例12粉碎處理將甘薯葉柄藤粉碎為200目的細(xì)粉，其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例13粉碎處理將甘薯葉柄藤粉碎為100目的細(xì)粉，其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例14粉碎處理將甘薯葉柄藤粉碎為150目的細(xì)粉，其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例15粉碎處理將甘薯葉柄藤粉碎為60目的細(xì)粉，其余同實(shí)施例1。
實(shí)施例16粉碎處理將甘薯葉柄藤粉碎為15目的細(xì)粉，其余同實(shí)施例1。
權(quán)利要求
1.一種甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，甘薯葉柄藤經(jīng)常規(guī)的預(yù)處理，加水水提，過濾，得到濾液a和濾渣b；濾液a和濾渣b進(jìn)一步提取各有效成分，其特征在于預(yù)處理后的甘薯葉柄藤與加水量之間的固液比為1∶3-50；水提過程中采用添加量為0.002-0.05％的果膠酶進(jìn)行酶解，果膠酶解條件PH為3.0-6.0，溫度40-60攝氏度，時(shí)間0.2-2小時(shí)，果膠酶解結(jié)束后還增加纖維酶解步驟，纖維酶解條件纖維酶量為0.1-2％，PH為3.0-6.0，溫度30-60攝氏度，時(shí)間0.5-2小時(shí)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，其特征在于水提過程還增加蛋白酶解步驟，蛋白酶解條件蛋白酶量為0.1-2％，PH為2-5.5，溫度25-50攝氏度，時(shí)間0.3-2小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，其特征在于濾液a經(jīng)過濾步驟，具體為先超濾，超濾采用截留分子量為8000-12000的超濾膜，截流液a1真空或噴霧干燥，得到多糖，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為400-8000的納濾膜，截流液a2可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.2-6mpa，得到的截流液a3含有氨基酸，反滲透的透過液水可以回收循環(huán)使用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，其特征在于預(yù)處理還包括粉碎處理，粉碎處理將甘薯葉柄藤粉碎為4-200目的細(xì)粉。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，其特征在于濾渣b按固液比為1∶2-20的用量加濃度為50％-95％的乙醇，在溫度25-85攝氏度條件下醇提0.3-2小時(shí)，再過濾，得到的濾液d，先超濾，超濾采用截留分子量為4000-7000的超濾膜，截流液b1可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，超濾得到的透過液，經(jīng)納濾，納濾采用截留分子量為400-1100的納濾膜，截流液b2進(jìn)一步精制得到黃酮化合物，經(jīng)納濾得到的透過液經(jīng)反滲透濃縮，反滲透壓力為0.2-6mpa，得到的截流液b3可進(jìn)一步回收有用物質(zhì)，反滲透的透過液含有大量的乙醇可以回收循環(huán)使用。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法，其特征在于納濾采用截留分子量為400-1100的納濾膜，截流液a2含有黃酮化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植物有效成分的提取方法，尤其是一種甘薯葉柄藤中有效成分的提取方法甘薯葉柄藤經(jīng)常規(guī)的預(yù)處理，加水水提，過濾，得到濾液a和濾渣b；濾液a和濾渣b進(jìn)一步提取各有效成分，預(yù)處理后的甘薯葉柄藤與加水量之間的固液比為1∶3－50；本發(fā)明的水提過程中添加果膠酶、纖維酶解，與不加酶解劑的常規(guī)水提相比，用水量小，從而節(jié)約蒸發(fā)大量水所消耗的能源。該法還有提取效率高，產(chǎn)品得率較高，產(chǎn)品純度高的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明容易實(shí)施，生產(chǎn)過程中不存在三廢污染，符合環(huán)保要求。
文檔編號(hào)C12P17/06GK1641038SQ20041001580
公開日2005年7月20日 申請(qǐng)日期2004年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月8日
發(fā)明者高蔭榆, 陳芩, 游海, 阮榕生, 陳才水, 羅麗萍, 陳鋼, 何小立, 楊柏云 申請(qǐng)人:南昌大學(xué)