專利名稱：細(xì)胞在常溫條件下長(zhǎng)期存活裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種細(xì)胞在常溫條件下長(zhǎng)期存活裝置。
背景技術(shù)：
目前，纖弱的哺乳動(dòng)物細(xì)胞在體外存活，或放于液氮裝置中凍存，或在哺乳動(dòng)物體外非常嚴(yán)格的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)裝置中的溫度需為36.5±0.5℃，需要氧氣、二氧化碳?xì)?，還要定期更換培養(yǎng)液等等。但在一些特殊的情況下，如長(zhǎng)途運(yùn)送、太空搭載實(shí)驗(yàn)，就很難滿足以上細(xì)胞培養(yǎng)所需要的條件，這就限制了人們對(duì)細(xì)胞的研究和應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于改進(jìn)現(xiàn)有技術(shù)之缺點(diǎn)，而提供一種簡(jiǎn)便、價(jià)廉、易操作的細(xì)胞在常溫條件下長(zhǎng)期存活裝置。所述裝置可在無(wú)電源、無(wú)熱源、無(wú)氧氣、無(wú)二氧化碳?xì)夤?yīng)，無(wú)需更換培養(yǎng)液的條件下，維持細(xì)胞在18℃～22℃常溫存活，當(dāng)細(xì)胞從18℃～22℃常溫返回36.5±0.5℃溫度后可繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下設(shè)計(jì)方案本裝置是由容器、容器內(nèi)的培養(yǎng)液和浸在培養(yǎng)液中的具孔微載體三部分組成。所述具孔微載體是球狀或其它形狀的無(wú)毒高分子化合物，其直徑為100微米～500微米；孔徑為20微米～60微米；其材質(zhì)可選用纖維素、甲殼素和膠原等。所述培養(yǎng)液可選用下述3種常用基本培養(yǎng)液，即達(dá)貝克改良型培養(yǎng)液(Dulbecco’s Modified EagleMedium，DMEM)、海穆-F12(Ham-F12)培養(yǎng)液、1640培養(yǎng)液中的任何一種按比例加入下述兩種成份1、谷氨酰胺 添加量為在每升培養(yǎng)液中加入0.5～3克；2、氫化可的松 添加量為在每升培養(yǎng)液中加入0.5～1.5毫克；所述容器為無(wú)菌、無(wú)細(xì)胞毒性的透明容器，優(yōu)先選用具有彈性的塑料材料。在細(xì)胞運(yùn)輸或太空搭載實(shí)驗(yàn)中，將實(shí)驗(yàn)細(xì)胞注入本裝置后密封，細(xì)胞進(jìn)入具孔微載體的微孔中或貼附于具孔微載體的表面，在18℃～22℃的常溫下，細(xì)胞可存活至少16天，細(xì)胞從18℃～22℃常溫返回36.5±0.5℃后可繼續(xù)生長(zhǎng)增殖。
本裝置簡(jiǎn)單，但可使哺乳動(dòng)物的細(xì)胞在本裝置內(nèi)長(zhǎng)期存活，方便了細(xì)胞的運(yùn)輸和太空科學(xué)實(shí)驗(yàn)。


圖1為本發(fā)明裝置結(jié)構(gòu)示意2為具孔微載體結(jié)構(gòu)示意3為常溫培養(yǎng)16天的小鼠黑色素細(xì)胞(B16)在37℃繼續(xù)培養(yǎng)形成的克隆(光鏡下觀察)圖4為常溫培養(yǎng)16天的人宮頸癌細(xì)胞(Caski)在36℃繼續(xù)培養(yǎng)形成的克隆(光鏡下觀察)圖5為常溫培養(yǎng)16天的人口腔癌細(xì)胞(KB)在36.5℃繼續(xù)培養(yǎng)形成的克隆(光鏡下觀察)
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1請(qǐng)參閱圖1～3所示，本裝置容器是采用由聚丙烯材料制的細(xì)胞凍存管1，其內(nèi)裝有合成培養(yǎng)液2，該合成培養(yǎng)液是由常用的達(dá)貝克改良型培養(yǎng)液(Dulbecco’s Modified Eagle Medium，DMEM)和在上述培養(yǎng)液中按每升加2克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加1毫克的比例加入的氫化可的松的合成培養(yǎng)液。在所述合成培養(yǎng)液中浸有具孔微載體3，該微載體3是瑞士Pharmacia公司產(chǎn)品，商品為Cytopore II，微粒成分為Cellulose，微粒直徑230微米，孔徑30微米，在上述裝置內(nèi)加入小鼠黑色素瘤細(xì)胞(B16)，維持細(xì)胞在18～22℃常溫下存活16天，該細(xì)胞從18～22℃常溫返回37℃后，可繼續(xù)生長(zhǎng)增殖，光鏡下觀察，細(xì)胞形態(tài)未見(jiàn)明顯變化。
實(shí)施例2請(qǐng)參閱圖1、圖2、圖4所示，本裝置容器是采用由聚丙烯材料制的細(xì)胞凍存管1，其內(nèi)裝有合成培養(yǎng)液2，該合成培養(yǎng)液是由常用的1640培養(yǎng)液和在上述培養(yǎng)液中按每升加3克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加1.5毫克的比例加入的氫化可的松的合成培養(yǎng)液。在所述合成培養(yǎng)液中浸有具孔微載體3，該微載體3是瑞士Pharmacia公司產(chǎn)品，商品為Cytopore II，微粒成分為Cellulose，微粒直徑100微米，孔徑20微米，在上述裝置內(nèi)加入人宮頸癌細(xì)胞(Caski)，維持細(xì)胞在18～22℃常溫下存活16天，該細(xì)胞從18～22℃常溫返回36℃后，可繼續(xù)生長(zhǎng)增殖，光鏡下觀察，細(xì)胞形態(tài)未見(jiàn)明顯變化。
實(shí)施例3請(qǐng)參閱圖1、圖2、圖5所示，本裝置容器是采用由聚丙烯材料制的細(xì)胞凍存管1，其內(nèi)裝有合成培養(yǎng)液2，該合成培養(yǎng)液是由常用的海穆-F12(Ham-F12)培養(yǎng)液和在上述培養(yǎng)液中按每升加0.5克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加0.5毫克的比例加入的氫化可的松的合成培養(yǎng)液。在所述合成培養(yǎng)液中浸有具孔微載體3，該微載體3是瑞士Pharmacia公司產(chǎn)品，商品為CytoporeII，微粒成分Cellulose，微粒直徑500微米，孔徑60微米，在上述裝置內(nèi)加入人口腔癌細(xì)胞(KB)，維持細(xì)胞在18～22℃常溫下存活16天，該細(xì)胞從18～22℃常溫返回36.5℃后，可繼續(xù)生長(zhǎng)增殖，光鏡下觀察，細(xì)胞形態(tài)末見(jiàn)明顯變化。
權(quán)利要求
1.一種細(xì)胞在常溫條件下長(zhǎng)期存活裝置，其特征在于本裝置是由容器、容器內(nèi)的培養(yǎng)液和浸在培養(yǎng)液中的具孔微載體三部分組成；所述具孔微載體是球狀或其它形狀的無(wú)毒高分子化合物；所述培養(yǎng)液選用下述3種常用基本培養(yǎng)液，即達(dá)貝克改良型培養(yǎng)液(Dulbeccos Modified Eagle Mediunm，DMEM)、海穆-F12(Ham-F12)培養(yǎng)液、1640培養(yǎng)液中的任何一種按比例加入下述兩種成份(1)谷氨酰胺 添加量為在每升上述基本培養(yǎng)液中加入0.5～3克；(2)氫化可的松 添加量為在每升上述基本培養(yǎng)液中加入0.5～1.5毫克；所述容器為無(wú)菌、無(wú)細(xì)胞毒性的透明容器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種細(xì)胞在常溫條件下長(zhǎng)期存活裝置，其特征在于所述具孔微載體其材質(zhì)選用纖維素、甲殼素和膠原等。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種細(xì)胞在常溫條件下長(zhǎng)期存活裝置，其特征在于所述具孔微載體其直徑為100微米～500微米，孔徑20微米～60微米。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種細(xì)胞在常溫條件下長(zhǎng)期存活裝置，其特征在于所述容器采用由聚丙烯材料制的細(xì)胞凍存管。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種細(xì)胞在常溫條件下長(zhǎng)期存活裝置，它是由容器、容器內(nèi)的培養(yǎng)液和浸在培養(yǎng)液中的具孔微載體三部分組成；所述具孔微載體是球狀或其它形狀的無(wú)毒高分子化合物；所述培養(yǎng)液選用下述3種常用基本培養(yǎng)液，即達(dá)貝克改良型培養(yǎng)液(Dulbeccos Modified Eagle Medium，DMEM)、海穆－F12(Ham－F12)培養(yǎng)液、1640培養(yǎng)液中的任何一種按比例加入下述兩種成分(1)谷氨酰胺添加量為在每升上述基本培養(yǎng)液中加入0.5～3克；(2)氫化可的松添加量為在每升上述基本培養(yǎng)液中加入0.5～1.5毫克；所述容器為無(wú)菌、無(wú)細(xì)胞毒性的透明容器；本裝置簡(jiǎn)單，但可使哺乳動(dòng)物的細(xì)胞在本裝置內(nèi)長(zhǎng)期存活，方便了細(xì)胞的運(yùn)輸和太空科學(xué)實(shí)驗(yàn)。
文檔編號(hào)C12M3/00GK1532276SQ0312090
公開(kāi)日2004年9月29日 申請(qǐng)日期2003年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月25日
發(fā)明者房青, 向青, 唐勁天, 趙天德, 徐梅, 陳志華, 房 青 申請(qǐng)人:中日友好醫(yī)院