專(zhuān)利名稱(chēng)：豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及病毒的免疫學(xué)表位及其應(yīng)用，特別是豬瘟病毒的免疫學(xué)表位及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
豬瘟(classical swine fever，CSF)是由豬瘟病毒(classical swine fever virus，CSFV)引發(fā)的的惡性傳染性疾病，一旦爆發(fā)往往在短時(shí)間內(nèi)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。20世紀(jì)50年代中國(guó)研制出的豬瘟兔化弱毒疫苗(C-strain，C株)是一種減毒后的豬瘟活病毒疫苗，它能夠在豬體內(nèi)誘導(dǎo)免疫防護(hù)，有效地控制豬瘟的大規(guī)模流行和散發(fā)。但是由于疫苗株C株免疫與野毒株在豬體內(nèi)的感染不能通過(guò)血清學(xué)方法鑒定與區(qū)分，從而給疫情監(jiān)測(cè)和計(jì)劃免疫帶來(lái)了很大不便，大大限制了疫苗株C株的廣泛推廣和應(yīng)用。尤其在對(duì)于豬瘟施行撲滅政策(stamping-out policy)的國(guó)家，包括C株在內(nèi)的弱化毒疫苗也已被禁止使用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一組能有效鑒別和診斷豬瘟病毒毒株的特征免疫學(xué)表位。
本發(fā)明所提供的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，選自由序列表中序列1-19及其變異表位所組成的免疫學(xué)表位家族。
其中，序列表中的序列1-13及其變異表位是豬瘟病毒強(qiáng)毒株特征免疫學(xué)表位，中國(guó)豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株石門(mén)株、國(guó)外豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株Brescia、ALD、Glentorf、Alfort/T和CAP均具有這些特征免疫學(xué)表位。序列表中的序列14-19及其變異表位是豬瘟病毒疫苗株C株特征免疫學(xué)表位。
本發(fā)明的發(fā)明人通過(guò)對(duì)已知豬瘟強(qiáng)毒株和疫苗株C株序列的比對(duì)，進(jìn)行了大量深入細(xì)致的分析和總結(jié)，得到了豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，具有重要的理論及現(xiàn)實(shí)意義，在豬瘟病毒強(qiáng)毒株(如中國(guó)豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株石門(mén)株和國(guó)外豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株Brescia以及其他幾種強(qiáng)毒株)與疫苗株C株的鑒別和診斷以及表位特異性單克隆抗體的研制中將有廣泛應(yīng)用。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、多種豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位比對(duì)比對(duì)了包括中國(guó)豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株石門(mén)株和國(guó)外豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株Brescia在內(nèi)的6個(gè)豬瘟病毒強(qiáng)毒株和疫苗株C株的六個(gè)免疫學(xué)表位HLATDVE(aa311-317)、NWHNID(aa350-355)、TVIESP(aa426-421)、QPHDEP(aa580-585)、VIRTEG(aa936-941)和KNRYYE(aa992-997)aaamino acid，結(jié)果如表1所示表1病毒株aa311-317 aa350-355 aa426-421 aa580-585 aa936-941 aa992-997C-株 HLATDVENWHNID TVIESP QPHDEP VIRTEG KNRYYE石門(mén)株 Y----T---Y--- -I--G- -SYE-- --SA-- --K---BresciaY----T---Y--- ----G- -S-E-- --S--- R-----ALD Y----T---Y--- ----G- -S-E-- --S--- --K---Glentorf -----T---Y--- -I--G- -S-E-- --S-D- --K---Alfort/T -----T---Y--- ----G- ------ --S--- R-K---CAP -----T---Y--- -I--G- -S-E-- --S-D- --K---從表1中可以看出，豬瘟病毒強(qiáng)毒株和疫苗株C株在六個(gè)免疫學(xué)表位上存在顯著的序列差異，因此，這些特征免疫學(xué)表位能夠被應(yīng)用于豬瘟病毒強(qiáng)毒(如中國(guó)豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株石門(mén)株和國(guó)外豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株Brescia以及其他幾種強(qiáng)毒株)與疫苗株C株的鑒別和診斷以及表位特異性單克隆抗體的研制。
序列表<160>19<210>1<211>7<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>1Tyr Leu Ala Thr Asp Thr Glu1 5 7<210>2<211>7<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>2His Leu Ala Thr Asp Thr Glu1 5 7<210>3<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>3Asn Trp Tyr Asn Ile Asp1 5 6<210>4<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)
<400>4Thr Ile Ile Glu Gly Pro1 5 6<210>5<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>5Thr Val Ile Glu Gly Pro1 56<210>6<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>6Gln Ser Tyr Glu Glu Pro1 5 6<210>7<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>7Gln Ser His Glu Glu Pro1 5 6<210>8<211>6<212>PRT
<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>8Val Ile Ser Ala Glu Gly1 5 6<210>9<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>9Val Ile Ser Thr Asp Gly1 5 6<210>10<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>10Val Ile Ser Thr Glu Gly1 5 6<210>11<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>11Lys Asn Lys Tyr Tyr Glu1 5 6<210>12<211>6
<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>12Arg Asn Arg Tyr Tyr Glu1 5 6<210>13<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>13Arg Asn Lys Tyr Tyr Glu1 5 6<210>14<211>7<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>14His Leu Ala Thr Asp Val Glu1 5 7<210>15<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>15Asn Trp His Asn Ile Asp1 5 6<210>16
<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>16Thr Val Ile Glu Ser Pro1 5 6<210>17<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>17Gln Pro His Asp Glu Pro1 5 6<210>18<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>18Val Ile Arg Thr Glu Gly1 5 6<210>19<211>6<212>PRT<213>瘟病毒屬豬瘟病毒(Pestivirus Flaviviridae)<400>19Lys Asn Arg Tyr Tyr Glu1 5 權(quán)利要求
1.豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，選自由序列表中序列1-19及其變異表位所組成的免疫學(xué)表位家族。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，其特征在于所述序列表中的序列1-13及其變異表位是豬瘟病毒強(qiáng)毒株特征免疫學(xué)表位。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，其特征在于所述序列表中的序列1-13是豬瘟病毒強(qiáng)毒株特征免疫學(xué)表位。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，其特征在于所述豬瘟病毒強(qiáng)毒株為中國(guó)豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株石門(mén)株、豬瘟病毒標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株Brescia、ALD、Glentorf、Alfort/T或CAP。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，其特征在于所述序列表中的序列14-19及其變異表位是豬瘟病毒疫苗株C株特征免疫學(xué)表位。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，其特征在于所述序列表中的序列14-19是豬瘟病毒疫苗株C株特征免疫學(xué)表位。
7.權(quán)利要求1-6所述的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位在鑒定豬瘟病毒毒株中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1-6所述的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位在判定豬瘟病毒感染株中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1-6所述的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位在表位特異性單克隆抗體準(zhǔn)備中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一組豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位及其應(yīng)用，目的是提供一組能有效鑒別和診斷豬瘟病毒毒株的特征免疫學(xué)表位。本發(fā)明所提供的豬瘟病毒特征免疫學(xué)表位，選自由序列表中序列1－19及其變異表位所組成的免疫學(xué)表位家族。其中，序列表中的序列1－13及其變異表位是豬瘟病毒強(qiáng)毒株特征免疫學(xué)表位；序列14－19及其變異表位是豬瘟病毒疫苗株C株特征免疫學(xué)表位。本發(fā)明的特征免疫學(xué)表位在豬瘟病毒強(qiáng)毒株與疫苗株C株的鑒別和診斷以及表位特異性單克隆抗體的研制中將有廣泛應(yīng)用。
文檔編號(hào)C12N7/01GK1504566SQ02153720
公開(kāi)日2004年6月16日 申請(qǐng)日期2002年12月2日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月2日
發(fā)明者陳應(yīng)華, 董曉楠 申請(qǐng)人:清華大學(xué), 北京飛凱生物技術(shù)有限公司