一種純沙土育苗快捷誘發(fā)稻瘟病的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物病理學(xué)技術(shù)和微生物學(xué)技術(shù)。具體是一種純沙土育苗快捷誘發(fā)稻瘟病的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]稻瘟病是我國水稻生產(chǎn)的重大病害，大流行年曾給我國造成稻糧損失150億公斤。盡管目前對(duì)稻瘟病的認(rèn)識(shí)已相當(dāng)深入，但要實(shí)現(xiàn)持續(xù)安全高效地控防稻瘟病的危害，仍需要大量的研究投入。而稻瘟病的許多研究均離不開人工誘發(fā)病害這基本手段，即使是分子領(lǐng)域的研究，如病菌致病相關(guān)基因問題，或寄主抗病相關(guān)基因問題，往往都需要人工誘發(fā)病害的結(jié)果來解答。至今，有關(guān)稻瘟病人工誘發(fā)病害的技術(shù)已經(jīng)相當(dāng)成熟，這些誘發(fā)病害技術(shù)歸結(jié)起來，主要有水稻成株期接種發(fā)病和苗期接種發(fā)病方法兩大類。通常成株期誘發(fā)病害能獲得較為切合生產(chǎn)實(shí)際的結(jié)果，因而在水稻抗病性評(píng)比和某些生產(chǎn)試驗(yàn)中應(yīng)用較多，但在成株期誘發(fā)病害的方法體系中，存在耗時(shí)費(fèi)力；頗占空間場地；環(huán)境條件容易影響試驗(yàn)結(jié)果等突出弊??；因而限制了其在許多試驗(yàn)工作中的應(yīng)用。一般地，苗期誘發(fā)病害的方法，使用的稻苗比成株期的相對(duì)地小，試驗(yàn)占用時(shí)間和空間方面，與成株期誘發(fā)病害相比，已大有改觀。不過，目前廣為應(yīng)用的苗期誘發(fā)病害方法均是在稻苗的3?5葉期后，利用完全展開的幼苗葉片進(jìn)行接種，這種方法體系中，育苗耗時(shí)2周以上，接種觀察耗時(shí)I周以上，試驗(yàn)周期通常要跨越3周多的時(shí)長，這對(duì)某些要求短期內(nèi)獲得結(jié)果的研究工作，如分子植病研究的致病突變體鑒定，抗病基因表達(dá)，以及侵染過程的病菌-寄主互作信息傳遞等，仍有耗時(shí)過長之嫌；而且，為獲得健壯的稻苗，需要提供充分的陽光和補(bǔ)充營養(yǎng)，整個(gè)方法體系仍需使用溫室等較大的空間場地；試驗(yàn)期間的濕度、溫度、肥水等局部條件控制，也存在較大的技術(shù)難度，或者頗受裝備條件的限制等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種純沙土育苗快捷誘發(fā)稻瘟病的方法。
[0004]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下:
[0005]—種純沙土育苗快捷誘發(fā)稻瘟病的方法，是利用營養(yǎng)貧乏的純沙土作育苗基質(zhì)，在水稻幼芽階段接種稻瘟病菌而快速獲得發(fā)病結(jié)果，實(shí)施操作步驟如下:
[0006]1.準(zhǔn)備配套營養(yǎng)液:按比例制備配套營養(yǎng)液，該營養(yǎng)液組分為:硝酸鉀1.0g、磷酸二氫鉀 1.0g^7X 1000.0mlo
[0007]2.裝填育苗基質(zhì):取出潔凈的育秧盆、小方盤、大方盤和保濕罩，將育秧盆放入小方盤內(nèi)，然后取潔凈的純沙土分別平整裝滿育秧盆的所有盆穴。取步驟I配備的營養(yǎng)液注入小方盤內(nèi)，待營養(yǎng)液滲透濕潤育秧盆的全部沙土后，保持小方盤內(nèi)存在薄層營養(yǎng)液。
[0008]3.播種:按常規(guī)條件將水稻種子浸種和催芽，獲得露白萌發(fā)種子，用小鑷子夾取已露白萌發(fā)的水稻種子，分別播在步驟2育秧盆的濕潤沙土內(nèi)，每盆穴播I顆種子。
[0009]4.在封閉的小生境內(nèi)培育水稻幼芽:步驟3播種完畢后，將小方盤及其盛載的材料一起置于大方盤內(nèi)，取保濕罩將小方盤罩在大方盤內(nèi)，往大方盤內(nèi)注入薄層清水，使保濕罩內(nèi)處于封閉狀態(tài)，然后將該全套育苗器具轉(zhuǎn)到普通實(shí)驗(yàn)室內(nèi)近窗口的桌面上，在室溫為28 °C條件下培育水稻，直至第一完全葉生長露出，形成針狀幼芽。
[0010]5.準(zhǔn)備接種體孢子液:按常規(guī)方法培養(yǎng)制備稻瘟病菌的分生孢子，用清水將孢子洗脫懸浮，配成孢子濃度為I X 16個(gè)/ml的孢子液，作為接種體孢子液。
[0011]6.接種病菌:將步驟5準(zhǔn)備的接種體孢子液裝入噴霧器，取出步驟4準(zhǔn)備的水稻幼芽材料，打開罩在幼芽外面的保濕罩，把接種體孢子液對(duì)著幼芽均勻噴霧，直至針狀幼芽表面布滿一層霧滴為止，然后重新罩回保濕罩。
[0012]7.接種后培育管理:將步驟6接種后的幼芽，重新轉(zhuǎn)回原來育苗之處，保持原來育苗的溫度條件繼續(xù)培育。接種5天后，在幼小稻苗上出現(xiàn)清晰的稻瘟病壞死病斑。
[0013]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
[0014]I)整套方法全程時(shí)間短，從播種到典型發(fā)病一般只需要8天。
[0015]2)溫度、濕度、水肥和稻苗小環(huán)境微生物等重要發(fā)病條件均能高度一致，而且容易控制。
[0016]3)實(shí)施操作簡易，總體技術(shù)簡單，容易實(shí)現(xiàn)技術(shù)方法的標(biāo)準(zhǔn)化。
【附圖說明】
[0017]圖1是本發(fā)明水稻種子播種后示意圖。
[0018]圖中，水稻種子播種在育秧盆的沙土內(nèi)，育秧盆置于小方盤內(nèi)，小方盤置于大方盤內(nèi)。
[0019]圖2是本發(fā)明水稻種子播種后罩上保濕罩的示意圖。
[0020]圖中，水稻種子播種在育秧盆的沙土內(nèi)，育秧盆置于小方盤內(nèi)，小方盤置于大方盤內(nèi)，保濕罩將小方盤及其盤內(nèi)材料罩封在大方盤內(nèi)。
[0021]圖3是本發(fā)明播種3天后水稻種子生長形成的針狀幼芽。
[0022]圖4是本發(fā)明水稻幼芽接種病菌5天后的外觀。
[0023]圖中，A是未接種病菌對(duì)照，B是接種病菌出現(xiàn)壞死病斑。
【具體實(shí)施方式】
[0024]下面結(jié)合附圖與實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
[0025]—種純沙土育苗快捷誘發(fā)稻瘟病的方法，是利用營養(yǎng)貧乏的純沙土作育苗基質(zhì)，在水稻幼芽階段接種稻瘟病菌而快速獲得發(fā)病結(jié)果，實(shí)施操作步驟如下:
[0026]1.準(zhǔn)備配套營養(yǎng)液:按比例制備配套營養(yǎng)液，該營養(yǎng)液組分為:硝酸鉀1.0g、磷酸二氫鉀 1.0g^7X 1000.0mlo
[0027]2.裝填育苗基質(zhì):取出潔凈的育秧盆、小方盤、大方盤和保濕罩，將育秧盆放入小方盤內(nèi)，然后取潔凈的純沙土分別平整裝滿育秧盆的所有盆穴。取步驟I配備的營養(yǎng)液注入小方盤內(nèi)，待營養(yǎng)液滲透濕潤育秧盆的全部沙土后，保持小方盤內(nèi)存在薄層營養(yǎng)液。
[0028]3.播種:按常規(guī)條件將水稻種子浸種和催芽，獲得露白萌發(fā)種子，用小鑷子夾取已露白萌發(fā)的水稻種子，分別播在步驟2育秧盆的濕潤沙土內(nèi)，每盆穴播I顆種子。
[0029]4.在封閉的小生境內(nèi)培育水稻幼芽:步驟3播種完畢后，將小方盤及其盛載的材料一起置于大方盤內(nèi)，取保濕罩將小方盤罩在大方盤內(nèi)，往大方盤內(nèi)注入薄層清水，使保濕罩內(nèi)處于封閉狀態(tài)，然后將該全套育苗器具轉(zhuǎn)到普通實(shí)驗(yàn)室內(nèi)近窗口的桌面上，在室溫為28 °C條件下培育水稻，直至第一完全葉生長露出，形成針狀幼芽。
[0030]5.準(zhǔn)備接種體孢子液:按常規(guī)方法培養(yǎng)制備稻瘟病菌的分生孢子，用清水將孢子洗脫懸浮，配成孢子濃度為I X 16個(gè)/ml的孢子液，作為接種體孢子液。
[0031]6.接種病菌:將步驟5準(zhǔn)備的接種體孢子液裝入噴霧器，取出步驟4準(zhǔn)備的水稻幼芽材料，打開罩在幼芽外面的保濕罩，把接種體孢子液對(duì)著幼芽均勻噴霧，直至針狀幼芽表面布滿一層霧滴為止，然后重新罩回保濕罩。
[0032]7.接種后培育管理:將步驟6接種后的幼芽，重新轉(zhuǎn)回原來育苗之處，保持原來育苗的溫度條件繼續(xù)培育。接種5天后，在幼小稻苗上出現(xiàn)清晰的稻瘟病壞死病斑。
[0033]本發(fā)明采用如下技術(shù)解決常規(guī)苗期誘發(fā)稻瘟病的技術(shù)弊病:1)在稻苗的針狀幼芽階段接種稻瘟病菌，因而能大幅度縮短誘發(fā)稻瘟病的試驗(yàn)周期；2)將水稻育苗和接種發(fā)病技術(shù)體系，設(shè)計(jì)在一個(gè)相對(duì)獨(dú)立且封閉的微小生長空間內(nèi)，因而能較大限度地簡化技術(shù)裝備和條件。
[0034]本發(fā)明使用的小方盤和大方盤屬實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的方盤類器具，育秧盆采用水稻生產(chǎn)使用的普通育秧盆，用裁切刀將育秧盆裁切成適合置入普通小方盤內(nèi)即行，保濕罩為有機(jī)保濕罩。育苗基質(zhì)采用純沙土，取材于普通建筑用的細(xì)沙，用水洗滌三遍后曬干備用；由于純沙土的營養(yǎng)成分極為貧乏，因而育苗基質(zhì)的背景養(yǎng)分與微生物群落簡單易控。配套營養(yǎng)液的目的是改進(jìn)提高誘發(fā)稻瘟病的效果。
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