一種野生環(huán)柄菇人工馴化栽培的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食用菌栽培技術(shù)領(lǐng)域，更具體的，本發(fā)明涉及一種野生環(huán)柄菇人工馴化栽培的技術(shù)領(lǐng)域。一種野生環(huán)柄菇人工馴化栽培的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]中國是最早研宄食用菌栽培的國家之一，曾經(jīng)在世界上率先馴化栽培了木耳、香菇、銀耳、草菇等野生食用菌。近年來我國食用菌業(yè)煥發(fā)出一片蓬勃發(fā)展的生機(jī)，栽培食用菌的產(chǎn)量迅猛增加，栽培種類也日漸增多。至上世紀(jì)八十年代末，各地普遍栽培的食用菌種類已達(dá)20多種。
[0003]環(huán)柄菇，子實(shí)體中等至較大，菌蓋近圓形，臍狀至漏斗狀，薄，革質(zhì)，直徑3cm-15cm，生長在闊葉樹倒木上，群生或單生。幼嫩時(shí)可食用，成長后柔韌不可食?？茖贋楹趥阒参锬⒐降淖訉?shí)體。別名為蘑菇、麻菇、蘑菇草、肉蕈等。性味歸經(jīng)，性平，味甘；人腸、胃經(jīng)。功效主治為益神開胃，化痰理氣。主治精神不振，食欲大減，痰核凝聚，上嘔下瀉，尿濁不禁等癥?，F(xiàn)有文獻(xiàn)記載環(huán)柄菇具有大量不可替代的功效:
1.提高機(jī)體免疫力蘑菇的有效成分可增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞功能，從而提高機(jī)體抵御各種疾病的免疫功能。
2.鎮(zhèn)痛，鎮(zhèn)靜巴西某研宄所從蘑菇中提取到一種物質(zhì)Act— 2，具鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜功效，其鎮(zhèn)痛效果可代替嗎啡。
3.止咳化痰蘑菇提取液用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其有明顯的鎮(zhèn)咳、稀化痰液的作用。
4.抗癌日本研宄人員在蘑葫有效成分中分析出一種分子量為288的超強(qiáng)力抗癌物質(zhì)，能抑制癌細(xì)胞的生長，其作用比綠茶中的抗癌物質(zhì)強(qiáng)1000倍。蘑菇中還含有一種毒蛋白，能有效地阻止癌細(xì)胞的蛋白合成。
5.通便排毒蘑菇中所含的人體很難消化的粗纖維、半粗纖維和木質(zhì)素，可保持腸內(nèi)水分，并吸收余下的膽固醇、糖分，將其排出體外，對預(yù)防便秘、腸癌、動(dòng)脈硬化。糖尿病等都十分有利。
目前，環(huán)柄菇主要處于野生狀態(tài)，未見有關(guān)野生環(huán)柄菇人工馴化栽培的有效方法，如何有效利用現(xiàn)代生物技術(shù)，實(shí)現(xiàn)高效的野生環(huán)柄菇人工馴化栽培的方法具有重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對目前現(xiàn)有技術(shù)未見有關(guān)野生環(huán)柄菇人工馴化栽培的有效方法的技術(shù)現(xiàn)狀，本發(fā)明旨在于提供一種野生環(huán)柄菇人工馴化栽培的方法，通過野生環(huán)柄菇子實(shí)體組織分離獲得環(huán)柄菇菌絲體，在母種培養(yǎng)基上進(jìn)行菌絲體培養(yǎng)和一級種擴(kuò)繁，在麥粒培養(yǎng)基上進(jìn)行二級種和三級種的制備，采用發(fā)酵料床式覆土栽培方式進(jìn)行出菇，利用該栽培方法可以成功實(shí)現(xiàn)野生環(huán)柄菇的人工代料栽培和出菇，具有現(xiàn)實(shí)的意義和作用。
[0005]本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
通過野生環(huán)柄菇子實(shí)體組織分離獲得環(huán)柄菇菌絲體，在母種(PDA或PSA)培養(yǎng)基上進(jìn)行菌絲體培養(yǎng)和一級種擴(kuò)繁，在麥粒培養(yǎng)基上進(jìn)行二級種和三級種的制備，采用發(fā)酵料床式覆土栽培方式進(jìn)行出菇。利用該栽培技術(shù)可以成功實(shí)現(xiàn)野生環(huán)柄菇的人工代料栽培和出菇，菌絲體在母種培養(yǎng)基和麥粒培養(yǎng)基上能夠正常生長，且菌絲長勢好，濃密，子實(shí)體能夠正常現(xiàn)蕾、發(fā)育和成熟，其形態(tài)特征和口感也與野生環(huán)柄菇相似，獲得類似野生環(huán)柄菇的營養(yǎng)、外形特征和口感，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
[0006]本發(fā)明具體提供一種野生環(huán)柄菇人工馴化栽培的方法，所述的方法具體步驟如下:
1、野生環(huán)柄菇菌種分離馴化、擴(kuò)繁:
(I)野生環(huán)柄菇子實(shí)體組織分離:在無菌微環(huán)境中將野生環(huán)柄菇的子實(shí)體從中央分開，然后用滅過菌的分離鑷子迅速從子實(shí)體菌蓋與菌柄交界處取出黃豆粒大小的菌肉組織接種到常規(guī)PDA或PSA母種培養(yǎng)基斜面中部，置25°C恒溫暗培養(yǎng)至菌絲長滿整個(gè)斜面，然后對菌絲進(jìn)行純化培養(yǎng)，方法為:從菌落邊緣挑取尖端菌絲體，移植到常規(guī)PDA或PSA培養(yǎng)基斜面上，置25 °C恒溫暗培養(yǎng)至菌絲長滿整個(gè)斜面。
[0007](2) 一級種擴(kuò)繁:將上述步驟分離篩選保藏的菌種轉(zhuǎn)管擴(kuò)繁至常規(guī)PDA或PSA母種培養(yǎng)基斜面上，置25 °C恒溫暗培養(yǎng)至菌絲長滿整個(gè)培養(yǎng)基斜面，備用。
[0008](3) 二級種、三級種的制備:將擴(kuò)繁好的一級種轉(zhuǎn)接至常規(guī)麥粒培養(yǎng)基中，置溫度25°C，濕度60%的黑暗環(huán)境進(jìn)行培養(yǎng)，至菌絲長滿整個(gè)麥粒培養(yǎng)基后稱為二級種；再將二級種轉(zhuǎn)接到常規(guī)麥粒培養(yǎng)基中，置溫度25°C，濕度60%的黑暗環(huán)境進(jìn)行培養(yǎng)，至菌絲長滿整個(gè)麥粒培養(yǎng)基后稱為三級種。
[0009]2、野生環(huán)柄菇人工馴化栽培:
(I)栽培發(fā)酵料培養(yǎng)基配方由棉籽殼50.4%、干牛糞44.1%、尿素0.6%、碳酸鈣0.5%、石膏1.3%、過磷酸鈣1.3%、油渣0.5%和石灰1.3%組成。
[0010](2)培養(yǎng)料發(fā)酵方法:
建堆:先在地面上鋪一層20cm-25cm厚預(yù)濕好的棉籽殼，在棉籽殼上撒一層干牛糞、過磷酸鈣、尿素、油渣、石灰，其上再鋪20cm-25cm厚的棉籽殼，再撒一層干牛糞、過磷酸鈣、尿素、油渣、石灰，依次逐漸上堆，當(dāng)堆至第三、六、十層棉籽殼時(shí)，均勻淋水，至堆底有水溢出為止；建好的發(fā)酵培養(yǎng)料堆寬250cm-350cm，高150cm-180cm，長度不限，在建好的發(fā)酵料堆頂部覆蓋1-2層塑料薄膜以利于保濕。
[0011]翻堆:每次翻堆需把下面的發(fā)酵培養(yǎng)料翻到上面，四周翻到中間，中間翻到外邊，把干料和濕料充分拌和均勻，促使培養(yǎng)料發(fā)酵均勻一致，同時(shí)盡可能將發(fā)酵培養(yǎng)料抖松、抖散，排盡其中廢氣；由于經(jīng)過發(fā)酵，每次翻堆時(shí)，發(fā)酵培養(yǎng)料堆體積都會(huì)縮小，再次建堆時(shí)，在不改變堆高、寬的前提下，可縮短堆的長度；第一次翻堆時(shí)加入石膏、碳酸鈣，用石灰調(diào)解酸堿度至pH值7-8，并澆水調(diào)節(jié)濕度，第二次翻堆加入石灰調(diào)解酸堿度至pH值7-8，再根據(jù)干濕情況適當(dāng)調(diào)節(jié)水分；檢查發(fā)酵培養(yǎng)料含水量:抓一把發(fā)酵培養(yǎng)料輕輕一捏，有1-2滴水滴下為標(biāo)準(zhǔn)，不可太濕或過干；經(jīng)翻堆4-5次，培養(yǎng)料發(fā)酵結(jié)束；發(fā)酵好的培養(yǎng)料標(biāo)準(zhǔn):培養(yǎng)料顏色呈咖啡色，無氨臭味，培養(yǎng)料中均勻分布有白色高溫菌落，質(zhì)地松軟，富有彈性，含水量60%-65%，pH值7-8 ;達(dá)到以上標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)酵培養(yǎng)料即可進(jìn)棚播種。
[0012](3)發(fā)酵料進(jìn)棚和菇棚消毒:發(fā)酵培養(yǎng)料要趁熱進(jìn)棚，每間菇棚進(jìn)料要當(dāng)天完成；鋪料厚度要求均勻一致，厚度采用20cm-30cm ;發(fā)酵培養(yǎng)料進(jìn)棚前和進(jìn)棚后都要對菇棚進(jìn)行消毒；消毒方法:密閉菇棚，按每立方米空間用甲醛10ml、高錳酸鉀5g進(jìn)行氣化消毒，悶24h后打開門窗，排出甲醛氣體，無味時(shí)預(yù)備播種。
[0013](4)播種:播種前應(yīng)檢查栽培發(fā)酵培養(yǎng)料中的溫度、氨氣濃度、料含水量；當(dāng)栽培發(fā)酵培養(yǎng)料溫度低于30°C、無氨臭味，含水量達(dá)到60%-65%時(shí)方可播種；播種時(shí)將菌種從菌種瓶中取出稍加揉散呈顆粒狀，均勻撒播于栽培發(fā)酵培養(yǎng)料表面，用消過毒的木板輕壓培養(yǎng)料表面，使菌種與栽培發(fā)酵培養(yǎng)料緊密接觸，以利菌絲恢復(fù)和長入栽培發(fā)酵培養(yǎng)料。播種后要及時(shí)覆膜，以便保溫保濕，以利菌種萌發(fā)。
[0014](5)菌絲培養(yǎng):這一時(shí)期主要是促進(jìn)菌絲生長，防止雜菌發(fā)生，溫度控制在25°C左右，適當(dāng)通風(fēng)，每天為料床抖膜I次增氧；播種3d-5d后菌種萌發(fā)成雪花狀，及時(shí)揭膜，并適當(dāng)給菇棚通風(fēng)，5d-7d后菌絲長入培養(yǎng)料，加大通風(fēng)量，促使料表干燥，抑制雜菌發(fā)生，同時(shí)保持新鮮空氣，促進(jìn)菌絲向料縱深生長；播種20d后，菌絲長入培養(yǎng)料內(nèi)2/3以上至長透培養(yǎng)料時(shí)，就可以覆土。菌絲長滿培養(yǎng)料時(shí)覆土最為理想，能使菌絲上土齊整有力。
[0015](6)覆土的選擇與處理:選用吸水性強(qiáng)，保水性好，不易板結(jié)，有適當(dāng)肥質(zhì)的中性粘壤土或中壤土為覆土材料；采挖回來的覆土材料要充分暴曬，然后用加有一定濃度福爾馬林和施百功的清水將土浸透，蓋膜堆悶5d以上，讓藥物氣體充分穿透土層消毒，5d后揭膜，散去農(nóng)藥氣味；使用前均勻加入石灰粉，將覆土酸堿度調(diào)至pH值7-8方可使用。
[0016]覆土分兩次覆土，頭遍土覆蓋厚度2.5_3cm，要求厚薄均勾一致，覆土后在3d_5d時(shí)間內(nèi)用細(xì)噴勤噴的方法調(diào)好含水量，調(diào)水時(shí)和調(diào)水后一天，要加強(qiáng)通風(fēng)，隨后減少通風(fēng)2d_3d，促進(jìn)菌絲迅