非洲爪蟾室內(nèi)飼養(yǎng)和繁殖的方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明涉及動物飼養(yǎng)技術(shù)領域，尤其涉及一種非洲爪蟾室內(nèi)飼養(yǎng)和繁殖的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]兩棲類動物是水生生態(tài)系統(tǒng)中的重要生物類群，又是聯(lián)系水生和陸生環(huán)境的代表。近20年來，世界范圍內(nèi)兩棲類動物種群呈現(xiàn)出顯著的衰退現(xiàn)象。非洲爪蟾雖為水陸兩棲動物，但可終生生活在水中，其卵、鰓、皮膚均具有滲透性，對環(huán)境污染物敏感。此外，非洲爪蟾體外受精、繁殖，產(chǎn)卵量大，一年四季均可通過人工誘導排卵，幼體生長速度快，在性別分化早期，其性腺發(fā)育對雌激素和具有雌激素活性的內(nèi)分泌干擾物十分敏感。因此，非洲爪蟾廣泛應用于農(nóng)藥毒性檢測、環(huán)境雌激素檢測等試驗中，是生態(tài)毒理學研宄中的模式物種。我國《化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則》(GB/T 31270.18-2014)推薦使用非洲爪蟾作為試驗物種，用于評價農(nóng)藥對天敵兩棲類生物的毒性。
[0003]目前，國內(nèi)沒有規(guī)?；B(yǎng)殖非洲爪蟾的機構(gòu)，試驗用非洲爪蟾主要依賴于國外進口。專利號為201310071450.5的《一種誘導非洲爪蟾自然產(chǎn)卵及孵化的人工方法》主要建立了一種通過人工注射促黃體素釋放激素A3促進非洲爪蟾抱對產(chǎn)卵的方法，此方法對非洲爪蟾的損傷較大，每次注射后的爪蟾需恢復2?3個月才能繼續(xù)用于繁殖。國內(nèi)相關(guān)試驗單位均出現(xiàn)非洲爪蟾自然抱對次數(shù)少，人工注射后受精卵孵化率低的問題。因此，提供一種可操作的非洲爪蟾室內(nèi)飼養(yǎng)方法，實現(xiàn)非洲爪蟾在室內(nèi)自然抱對產(chǎn)卵，對獲取高質(zhì)量的生物試材、保證藥物安全性評估順利開展、有效評估藥物的環(huán)境毒性等具有重要作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種可操作的、實現(xiàn)非洲爪蟾在室內(nèi)自然抱對產(chǎn)卵的非洲爪蟾室內(nèi)飼養(yǎng)方法。
[0005]為解決上述技術(shù)問題，提供了一種非洲爪蟾室內(nèi)飼養(yǎng)和繁殖的方法，包括以下步驟:
51、成蟾飼養(yǎng):在養(yǎng)殖缸內(nèi)加飼養(yǎng)用水至水面高度為0.1?0.2m，然后放入非洲爪蟾成蟾，每2天喂食一次；
52、抱對產(chǎn)卵:在養(yǎng)殖缸中放入濾網(wǎng)，將雌性與雄性親蟾按照1:1的比例放入同一個養(yǎng)殖缸的濾網(wǎng)上，使雌性和雄性親蟾抱對產(chǎn)卵得到受精卵，待排卵結(jié)束后，將雌性與雄性親蟾移至其他養(yǎng)殖缸飼養(yǎng)；
53、受精卵孵化:在養(yǎng)殖缸中加入飼養(yǎng)用水至水面高度為0.3 m，使受精卵孵化出蝌蚪；
54、蝌蚪飼養(yǎng):蝌蚪孵出7d后，每天喂食一次，在飼養(yǎng)中采用空氣增氧泵持續(xù)增氧，使蝌蚪成長為幼蟾；
S5、幼蟾飼養(yǎng):將幼蟾置于養(yǎng)殖缸內(nèi)，加飼養(yǎng)用水至水面高度為0.1 m，每天喂食一次，每2天更換一次飼養(yǎng)用水。
[0006]上述的方法，優(yōu)選的，養(yǎng)殖缸為體積約70 L (長X寬X高為0.6 mX0.3 mX0.4m)的方形玻璃缸。
[0007]上述的方法，優(yōu)選的，養(yǎng)殖缸初次使用前用20 mg/L高錳酸鉀溶液或40 mg/L次氯酸鈉溶液浸泡養(yǎng)殖缸30 min，再用清水沖洗干凈。
[0008]上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟SI中所述非洲爪蟾成蟾的飼養(yǎng)密度為2?4只/缸，飼養(yǎng)水溫為18?26°C。
[0009]上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟SI中喂食的餌料為豬肝、黃粉蟲或飼料，豬肝、飼料的飼喂量以15min內(nèi)吃完為度，黃粉蟲的喂食量為3?5條/只爪蟾。
[0010]上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟S2中所述濾網(wǎng)的孔徑為2 Cm，高為5?10cm。
[0011]上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟S2中所述抱對產(chǎn)卵的時間為4?6h，抱對產(chǎn)卵過程的飼養(yǎng)水溫為24?26°C。
[0012]上述的方法，優(yōu)選的，步驟S2中雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾的分辨方法為:同齡雌性個體大于雄性；雌性泄殖腔上方有瓣膜，產(chǎn)卵前泄殖腔唇明顯突出且變成紅色；而性成熟的雄性爪蟾前肢內(nèi)側(cè)有黑色粗條紋的“婚墊”，泄殖腔上方無瓣膜。
[0013]上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟S3中所述受精卵孵化過程的飼養(yǎng)水溫為24?26。。。
[0014]上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟S3中正常發(fā)育的胚胎黑色動物極向上，植物極向下，植物極為淡綠色，色澤均勻，受精卵I?3d后孵化出蝌蚪。
[0015]上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟S4中所述喂食的飼料為蛋黃或豐年蟲，蛋黃飼喂量為20?50mg/尾蝌蚪，豐年蟲投喂量以I d內(nèi)吃完為宜。
[0016]上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟S4中所述蝌蚪的飼養(yǎng)水溫為24?26°C ;
上述的方法，優(yōu)選的，所述步驟S5中所述幼蟾飼喂的餌料為豬肝和黃粉蟲，豬肝的飼喂量以I5min內(nèi)吃完為度，黃粉蟲的喂食量為3?5條/只爪蟾，飼養(yǎng)水溫為18?26°C。
[0017]上述的方法，優(yōu)選的，步驟S4中蝌蚪經(jīng)5?6周飼養(yǎng)可完成變態(tài)發(fā)育，成長為幼蟾。
[0018]上述的方法，優(yōu)選的，所述飼養(yǎng)用水為存放24 h以上并經(jīng)曝氣處理的自來水，pH為6.5?7.5，溶解氧含量不低于空氣飽和值的60%，水質(zhì)硬度為100?300mg/L。
[0019]上述的方法，優(yōu)選的，非洲爪蟾飼養(yǎng)采用全波長熒光燈照明，所述S4步驟中所述蝌蚪飼養(yǎng)過程中，水面光照強度為600?1200LX ;所述SI步驟中所述成蟾、所述S5步驟中所述幼蟾飼養(yǎng)過程中，養(yǎng)殖缸的水面光照強度為200?300Lx。
[0020]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于:
(I)本發(fā)明提供了一種非洲爪蟾室內(nèi)飼養(yǎng)和繁殖方法，操作簡單易行，成本低，該方法可保證非洲爪蟾在繁殖季節(jié)頻繁抱對產(chǎn)卵，且受精卵的孵化率和子代存活率高，符合非洲爪蟾的生活規(guī)律，可為藥物安全性評價提供高質(zhì)量的生物試材，可實現(xiàn)非洲爪蟾的批量培養(yǎng)，適用于商業(yè)養(yǎng)殖。
[0021](2)本發(fā)明提供了一種非洲爪蟾室內(nèi)飼養(yǎng)和繁殖方法，非洲爪蟾的繁殖期為11月至翌年5月，繁殖期內(nèi)，非洲爪蟾可自然抱對并產(chǎn)卵受精，若采用本發(fā)明的室內(nèi)飼養(yǎng)方法，受精卵孵化率可達80%以上。
[0022](3 )本發(fā)明在抱對產(chǎn)卵過程中，放入濾網(wǎng)，可以避免親蟾吞食或損壞受精卵。
【具體實施方式】
[0023]以下結(jié)合具體優(yōu)選的實施例對本發(fā)明作進一步描述，但并不因此而限制本發(fā)明的保護范圍。
實施例
[0024]以下實施例中所采用的材料和儀器均為市售。
[0025]其中采用的飼養(yǎng)用水為:存放24 h以上并經(jīng)曝氣處理的自來水，pH為6.5?7.5，溶解氧含量為空氣飽和值的80?88%，水的硬度(以CaCCU+)為125 mg/L。
[0026]實施例1:
成年非洲爪蟾的飼養(yǎng)方法:
1、用20 mg/L高錳酸