一種美國紅葉紫薇的組培快繁方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物的組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種美國紅葉紫薇的組培快繁方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紫薇是千屈菜科(Lythraceae)紫薇屬落葉小喬木或灌木，又名百日紅、癢癢樹，滿堂紅等，樹形優(yōu)美，在炎夏開花，花色艷麗，花期長，是我國優(yōu)良的園林觀賞樹種。美國紅葉紫薇(Lagerstroemia indica ‘Pink Velour’)是由湖南省林科院于2003年從美國引進的紫薇新優(yōu)品種，其新葉和嫩梢為酒紅色，具有良好的觀葉效果；花深粉紅色，花序長可達70cm，繁密而高雅，具有極高的觀賞價值?；ㄆ诹律涎?0月底，長達5個月。其適應(yīng)性強，耐旱，可耐_23°C的低溫。使用于園林綠化中的花帶、花叢及其他配植，也可制作樹粧或盆景，是綠化美化環(huán)境和家庭養(yǎng)花的優(yōu)良園林植物，應(yīng)用前景巨大。
[0003]紫薇常規(guī)可采用種子繁殖，但實生苗花色分化大，不穩(wěn)定。目前美國紅葉紫薇生產(chǎn)上主要靠扦插繁殖，插穗木質(zhì)化程度對紅葉紫薇扦插生根影響很大，采用木質(zhì)化程度較高的插穗，其扦插成活率高。由于美國紅葉紫薇為落葉樹種，新枝萌發(fā)后，較好扦插時間為7?8月份，扦插生產(chǎn)時間有限，擴繁速度慢，導(dǎo)致其苗木價格居高不下，制約了其快速推廣應(yīng)用。本研宄建立的美國紅葉紫薇組培快繁技術(shù)體系為其規(guī)?；苣晟a(chǎn)提供了有效途徑，具有重要的理論和應(yīng)用價值。目前尚未見美國紅葉紫薇的組培快繁報道。
[0004]經(jīng)文獻檢索，目前尚未見任何關(guān)于美國紅葉紫薇組培快繁的報道。僅見少量對紫薇(Lagerstroemia indica)離體培養(yǎng)的相關(guān)研宄。若參照現(xiàn)有的紫薇組培培養(yǎng)基對美國紅葉紫薇進行組培快繁，會出現(xiàn)組培芽發(fā)黃掉葉，芽小而弱，伸長生長慢，最后出現(xiàn)枯黃現(xiàn)象，有效芽數(shù)少等情況，導(dǎo)致增殖系數(shù)小，成苗質(zhì)量差，繁殖速度慢，生產(chǎn)成本高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點與不足，提供一種美國紅葉紫薇的組培快繁方法。該方法具有不定芽誘導(dǎo)快、增殖倍率高、生長快、生根率高、生根苗根系發(fā)達健壯、移栽成活率高、生產(chǎn)成本低等特點。
[0006]本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn):一種美國紅葉紫薇的組培快繁方法，包括如下步驟:
[0007](I)外植體采集:選取株型優(yōu)美、生長速度快、無病蟲害的優(yōu)良單株為母本，剪取樹干半木質(zhì)化枝條，去葉后用純凈水清洗干凈，備用；
[0008](2)外植體消毒和腋芽誘導(dǎo):將枝條用無菌水清洗一遍，再依次用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒，用無菌水沖洗后接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基，放到培養(yǎng)室培養(yǎng)，得到腋芽；
[0009](3)增殖培養(yǎng):將步驟(2)的腋芽切下并轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，得到增殖苗；
[0010](4)生根培養(yǎng):從步驟(3)得到的增殖苗中切取芽轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，得到組培生根苗；
[0011](5)煉苗與移栽:將步驟(4)組培生根苗移到溫室進行煉苗移栽，得到容器苗。
[0012]步驟(I)中，所述的剪取樹干基部萌枝采用半木質(zhì)化枝條；采集外植體前，每隔1d用多菌靈、百菌清交替噴灑萌枝4?5次；采集后的枝條除葉，用純凈水清洗干凈，低溫保濕備用。
[0013]步驟(2)中:
[0014]所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ZW 培養(yǎng)基 +0.5 ?1.5mg/L 6-BA+0.05 ?0.2mg/L IBA+30g/L鹿糖+8g/L卡拉膠；pH為5.8-6.0 ；
[0015]所述的ZW 培養(yǎng)基含有如下成分:1200mg/L NH4N03+400mg/L KN03+450mg/L K2S04+440mg/L Ca (NO3) 2.2H20+76mg/L CaCl2.4H20+260mg/L MgSO4.7H20+170mg/LKH2P04+8.6mg/L ZnSO4.7Η20+6.2mg/L H3B03+0.83mg/L KI+22.3mg/L MnSO4.4Η20+0.025mg/L CoC12+27.8mg/L FeSO4.7H20+37.3mg/L Na2.EDTA.H20+100mg/L 肌醇 +4.0mg/L 甘氨酸+1.2mg/L鹽酸硫胺素+2.5mg/L煙酸+1.2mg/L鹽酸卩比卩多醇+2.4mg/L D-泛酸1? +2.0mg/L抗壞血酸，pH 5.8、121°C滅菌20分鐘。
[0016]所述的用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒采用如下方法進行:用濃度70?75%酒精溶液浸泡時間為20?30s，倒掉酒精溶液后無菌水沖洗I?2次，然后加入0.1 %升汞溶液，浸泡3?lOmin，其間不斷搖動，倒掉升未溶液后用無菌水沖洗5?6次。
[0017]所述的培養(yǎng)采用如下方法進行:于25±2°C、60ymol.m_2.s—1光照ia/d ;誘導(dǎo)培養(yǎng)20d，將長度多1.5cm的腋芽切下轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)；連續(xù)繼代2?3次，腋芽分化形成新芽叢，將芽高多2.0cm幼嫩枝條切割成1.0cm的莖段轉(zhuǎn)接入增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)；
[0018]所述的腋芽為芽高為I?2cm的腋芽。
[0019]步驟(3)中，
[0020]所述的增殖培養(yǎng)基為ZW 培養(yǎng)基 +0.5 ?1.5mg/L 6-BA+0.05 ?0.2mg/L IBA+30g/L鹿糖+8g/L卡拉膠；pH為5.8-6.0 ；
[0021]所述的培養(yǎng)采用如下方法進行:于25±2°C、60ymol.nT2.s—1光照ia/d ;連續(xù)繼代2?3次，腋芽分化形成芽叢，將芽高多1.5cm的嫩莖切下，接入生根培養(yǎng)基。
[0022]步驟⑷中，
[0023]所述的生根培養(yǎng)基為ZW培養(yǎng)基+0.1?0.5mg/L NAA+15g/L蔗糖+8g/L卡拉膠；pH 為 5.8-6.0 ；
[0024]所述的培養(yǎng)采用如下方法進行:于25±2°C、60 μπιο?.πΓ2.s—1光照12h/d ;
[0025]所述的芽為2cm芽。
[0026]步驟(5)中，
[0027]所述的組培生根苗為生根培養(yǎng)15d的生根瓶苗。
[0028]所述的培養(yǎng)采用如下方法進行:生根培養(yǎng)15d后，將生根瓶苗移到溫室中適應(yīng)外界環(huán)境5?7d,然后將組培瓶蓋從半開到全開煉苗ld，將組培苗取出，洗凈粘于根上的培養(yǎng)基，移栽到泥炭土:珍珠巖=3:1混合基質(zhì)上，移栽后前15d采用蓋膜保濕，然后揭開薄膜按常規(guī)幼苗管理。
[0029]本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點及效果:
[0030](I)本發(fā)明以生長速度快、株型優(yōu)美、花色艷麗，抗逆性強的美國紅葉紫薇的成年優(yōu)良單株為母本，以萌枝為外植體，通過基本培養(yǎng)基設(shè)計、激素種類、濃度及其配比的優(yōu)化，建立其高效的離體植株再生技術(shù)，達到增殖芽健壯伸長、生長快、增殖率高、生根率高、生根苗健壯、移栽成活率高的目的。本發(fā)明具有不定芽誘導(dǎo)快、芽粗壯、伸長生長快、有效芽多，增殖倍率高、生根率高、生根苗根系發(fā)達健壯、移栽成活率高等特點，整個技術(shù)體系穩(wěn)定，生產(chǎn)成本低，通過規(guī)?；纾a(chǎn)出健壯、整齊一致的紅葉紫薇幼苗，為實現(xiàn)紅葉紫薇快速推廣、滿足市場的需求提供技術(shù)支撐及良種保障，應(yīng)用前景廣闊。
[0031](2)本發(fā)明的美國紅葉紫薇組培快繁方法，外植體的腋芽誘導(dǎo)速度快；誘導(dǎo)率高、達88% ;增殖系數(shù)大、達5?6，增殖芽伸長生長快，培養(yǎng)25d芽高達3?4cm ;生根率可達100%,平均根數(shù)為4.54根/株；組培生根苗健壯、移栽成活率高達95%以上。
【附圖說明】
[0032]圖1為實施例1的無菌材料的腋芽誘導(dǎo)結(jié)果圖；
[0033]圖2為實施例1的增殖叢芽圖；
[0034]圖3為實施例1的增殖瓶苗圖；
[0035]圖4為實施例1的生根培養(yǎng)基中的生根苗圖；
[0036]圖5為實施例1的生根苗根系圖；
[0037]圖6是實施例1的移栽苗生長情況圖。
【具體實施方式】
[0038]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
[0039]實施例1
[0040]一種美國紅葉紫薇的組培快繁方法，包括如下步驟:
[0041](I)外植體采集:選取株型優(yōu)美、生長速度快、無病蟲害的優(yōu)良單株為母本，優(yōu)樹樹齡15年以上，于天氣晴朗的上午10時左右，剪取樹干半木質(zhì)化枝條，去葉后用純凈水清洗干凈，備用；
[0042](2)外植體消毒和腋芽誘導(dǎo):在超凈工作臺上，將枝條用無菌水清洗一遍，再用濃度70?75%酒精溶液浸泡時間為20?30s，倒掉酒精溶液后無菌水沖洗I?2次，然后加入0.1 %升未溶液，浸泡3?lOmin，其間不斷搖動，倒掉升未溶液后用無菌水沖洗5?6次，用無菌水沖洗后，無菌濾紙吸干無菌材料表面水珠，將莖段切成2cm帶葉腋切并接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基(誘導(dǎo)培養(yǎng)基:ZW培養(yǎng)基+0.5?1.5mg/L 6-BA+0.05?0.2mg/L IBA+30g/L蔗糖+8g/L卡拉膠;pH為5.8-6.0 (激素購自Sigma-Aldrich公司))，放到培養(yǎng)室，于25±2°C、60ymol.m_2.s—1光照12h/d ;誘導(dǎo)培養(yǎng)15d，將長度大于2cm的腋芽切下轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)；培養(yǎng)30d，腋芽分化形成新芽叢，將芽高多3cm幼