專利名稱：殺菌/消毒過乙酸組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及除污染領(lǐng)域。更明確的說，本發(fā)明涉及一種殺菌劑/消毒劑，該制劑用于醫(yī)療器械和內(nèi)窺鏡等的醫(yī)療儀器、紗布及其它物品。
高濃度的過乙酸會引起皮膚騷癢并有很難聞的氣味，但是當(dāng)稀釋成實際使用的溶液(一般含有0.2-0.35％的過乙酸)時，所引起的皮膚騷癢和難聞氣味會相對減弱。過乙酸的降解產(chǎn)物是乙酸、水和過氧化氫(進(jìn)一步降解為水和氧氣)，這些降解產(chǎn)物不僅無害，而且不會造成環(huán)境污染。因此，以過乙酸為活性成分的殺菌劑/消毒劑可以替代戊二醛制劑。
過乙酸一般是過乙酸溶液的形式，在使用前稀釋。在日本，依照外國的先例，過乙酸一般在使用前配成終濃度為0.2w/v％到0.35w/v％的溶液。
美國專利5,077,008和日本專利公告7-84362中公開了一種一次性抗菌組合物，在使用前可用一種特殊的儀器STERIS SYSTEM1(Steris公司制造)稀釋成0.2w/v％的終濃度。在英國可在市場上買到的Nu-Cidex(Johnsonand Johnson medical Inc。)由過乙酸濃溶液、穩(wěn)定劑和緩沖劑組成，在使用前，用穩(wěn)定劑和緩沖劑將過乙酸濃溶液稀釋成0.35w/v％。這種稀釋好的溶液在配制后1到3天內(nèi)有效。
有各種添加劑的過乙酸制劑是已知的。
日本專利公開8-311495中公開了一種過乙酸制劑，它包含有過乙酸水溶液和一種聚醚或類似的非離子型表面活性劑。這種過乙酸制劑可用作洗碗機或類似器械的漂白劑和消毒劑。該非離子型表面活性劑作為一種“漂洗劑”在清洗后可以防止“污漬”保留在碟子或類似器皿的表面。
國際專利公開WO 88/08667中公開了一種可穩(wěn)定輸送的含過乙酸的殺微生物劑。這種殺微生物劑包括例如山梨醇酐單棕櫚酸酯和聚氧乙烯(2)十六醚這樣的表面活性劑。添加該表面活性劑是為了提高該殺微生物劑的濕度和溶解作用。
國際專利公開第WO 91/15122中公開了一種抗腐蝕殺菌劑，含有過乙酸、以及脂肪醇和五氧化二磷和氫氧化鈉的反應(yīng)產(chǎn)物或全氟烷基磺酸鉀。據(jù)此文描述，該殺菌劑在至少7天內(nèi)具有殺菌活性。添加脂肪醇和五氧化二磷和氫氧化鈉的反應(yīng)產(chǎn)物或全氟烷基磺酸鉀的目的是提高抗腐蝕的性能。
美國專利4,051,058和4,051,059公開了一種殺菌劑，包含有過乙酸以及磺酸鹽和硫酸鹽類的陽離子表面活性劑。
日本專利2523085公開了一種殺微生物劑，它包含有作為主要成分的過乙酸。這種殺微生物劑被用來在外科和牙科領(lǐng)域內(nèi)對器械進(jìn)行消毒。它具有不含表面活性劑的特點。
美國專利5,624,634公開了一種可用于含有金屬組件的醫(yī)療設(shè)備的消毒劑組合物，其中的含有過乙酸的第一水性溶液與含有腐蝕抑制劑、過氧化氫穩(wěn)定劑和/或過乙酸穩(wěn)定劑的第二水性溶液相混合。該消毒劑可防止含有金屬組件的醫(yī)療設(shè)備的腐蝕。美國專利5,624,634并未指出此消毒劑使用了非離子型表面活性劑。美國專利第5,624,634也未指出如何穩(wěn)定過乙酸工作液中過乙酸的濃度。例如，據(jù)此文描述此消毒溶液每天均由新鮮溶液替換(第5欄，第21-22行)。
美國專利5,720,983和日本國家階段PCT公開7-502988也公開了可用于含有金屬組件的醫(yī)療設(shè)備的消毒劑組合物，但并未指出使用了非離子型表面活性劑。
美國專利5,489,706公開了一種通過加入0.1-5％的脂族醇乙氧基化物穩(wěn)定過乙酸的方法。該脂族醇乙氧基化物既可以在過乙酸的生產(chǎn)過程中加入也可以在其生產(chǎn)后加入，從而可以增加過乙酸的穩(wěn)定性(第2欄，第31-33行)。美國專利5,489,706并未指出其過乙酸組合物中含有磷酸鹽。
美國專利5,545,374公開了在pH6.0或更高環(huán)境下使用的殺微生物劑組合物。此殺微生物劑組合物包含過乙酸和一種化學(xué)通式為R-(OCH2CH2)n-(OCH2CH2CH3)p-OH的非離子型表面活性劑，通式中的R代表含有至少6個碳原子的烷基，n和p各代表一個整數(shù)。美國專利5,545,374并未透露或指出其過乙酸配方中含有磷酸鹽。此殺微生物劑組合物對白色念珠菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌均有效。
本發(fā)明的創(chuàng)始人通過多年積極研究解決了上述傳統(tǒng)過乙酸溶液存在的問題，從而發(fā)明了本發(fā)明的組合物，其稀釋得到的工作液中過乙酸的濃度能保持穩(wěn)定，并且其殺菌/消毒效果可長時間維持。
本發(fā)明涉及一種以過乙酸為主要成分的殺菌制劑。此殺菌制劑含有過乙酸、至少一種磷酸鹽、和至少一種非離子型表面活性劑。此制劑可被稀釋成工作液，其中的過乙酸濃度可以破壞細(xì)菌芽孢和抗酸細(xì)菌，同時可在至少7天內(nèi)維持這一濃度。
優(yōu)選的是，上述的磷酸鹽選自正磷酸鈉、正磷酸鉀、焦磷酸鈉、焦磷酸鉀、多磷酸鈉、多磷酸鉀和它們的混合物。
優(yōu)選的是，上述的非離子型表面活性劑選自聚乙烯/聚丙烯嵌段聚合物型表面活性劑、聚氧乙烯烷基苯基醚型表面活性劑、聚氧乙烯醚型表面活性劑、和聚氧乙烯山梨醇型表面活性劑。
優(yōu)選的是，上述過乙酸的濃度范圍是1％w/w到10％w/w。
優(yōu)選的是，工作液中的磷酸鹽的濃度范圍是0.01％w/w到2％w/w。
優(yōu)選的是，工作液中的非離子型表面活性劑的濃度范圍是0.01％w/w到0.5％w/w。
優(yōu)選的是，本發(fā)明提供了一種可以破壞細(xì)菌芽孢和抗酸細(xì)菌的殺菌制劑。本殺菌制劑含有第一反應(yīng)劑包括過乙酸、過氧化氫、乙酸和水，和第二反應(yīng)劑包括至少一種磷酸鹽和至少一種非離子型表面活性劑。第一反應(yīng)劑與第二反應(yīng)劑在使用前混合并以水稀釋。
優(yōu)選的是，第一反應(yīng)劑是一種含有5-7％w/w過乙酸，7-9％w/w過氧化氫，30-36％w/w乙酸和水的平衡溶液。
優(yōu)選的是，第一反應(yīng)劑包括穩(wěn)定劑。
優(yōu)選的是，該穩(wěn)定劑選自正磷酸和焦磷酸。
優(yōu)選的是，第一反應(yīng)劑包括金屬離子螯合劑或抗腐蝕劑。
優(yōu)選的是，第二反應(yīng)劑包括金屬離子螯合劑，抗腐蝕劑或色素。
優(yōu)選的是，第一反應(yīng)劑包括至少一種磷酸鹽和至少一種表面活性劑。
優(yōu)選的是，第二反應(yīng)劑是一種粉末狀物質(zhì)或固體物質(zhì)。
更適宜地，第一反應(yīng)劑和第二反應(yīng)劑均以混合物形式。
圖2顯示了在加入了不同的非離子型表面活性劑的過乙酸溶液中過乙酸的濃度隨時間的變化，此過乙酸溶液中含有磷酸二鉀并在室溫下儲存。
圖3顯示了在加入了一種非離子型表面活性劑和一種螯合劑的過乙酸溶液中過乙酸的濃度隨時間的變化，此過乙酸溶液中含有磷酸二鉀并在室溫下儲存。
圖4顯示了當(dāng)一種非離子型表面活性劑以不同濃度加入到過乙酸溶液中并且以磷酸二鉀調(diào)整過乙酸溶液pH值到4時，該溶液中過乙酸的濃度隨時間的變化，該溶液在室溫下儲存。此變化以過乙酸殘量百分比表示。
圖5顯示了當(dāng)一種非離子型表面活性劑以不同濃度加入到過乙酸溶液中并且以磷酸二鉀調(diào)整過乙酸溶液pH值到4時，該溶液中過乙酸的濃度隨時間的變化，該溶液在較高溫度儲存(50℃)。此變化以過乙酸殘量百分比表示。
圖6顯示了當(dāng)一種非離子型表面活性劑以不同濃度加入到過乙酸溶液中并且以焦磷酸鈉和乙酸鈉調(diào)整過乙酸溶液pH值到4時，該溶液中過乙酸的濃度隨時間的變化，該溶液在室溫下儲存。此變化以過乙酸殘量百分比表示。
優(yōu)選的是，上述磷酸鹽選自正磷酸鈉，正磷酸鉀、焦磷酸鈉、焦磷酸鉀、多磷酸鈉、多磷酸鉀和它們的混合物。
優(yōu)選的是，上述非離子型表面活性劑選自聚乙烯/聚丙烯嵌段聚合物型表面活性劑、聚氧乙烯烷基苯基醚型表面活性劑、聚氧乙烯醚型表面活性劑，和聚氧乙烯山梨醇型表面活性劑。
如果過乙酸的濃度低于0.01％w/w，溶液將不再有迅速有效的殺菌/消毒效果。如果過乙酸的濃度超過1％w/w，溶液的難聞氣味和其對眼睛和皮膚造成的刺激將會很明顯。
如果磷酸鹽的濃度低于0.01％w/w，過乙酸水溶液的pH值將會小于或等于3。在這種情況下螯合效果會降低，不利于腐蝕性增加。如果磷酸鹽的濃度超過2％w/w，過乙酸水溶液的pH值將會大于或等于5。在這種情況下過乙酸將會不穩(wěn)定并且其殺菌效果會下降。
如果非離子型表面活性劑的濃度低于0.01％w/w，過乙酸不是足夠穩(wěn)定。如果非離子型表面活性劑的濃度超過0.5％w/w，其穩(wěn)定效果并不會顯著改善，并且泡沫消失，不利于實際應(yīng)用。
本發(fā)明以過乙酸為主要成分的殺菌制劑裝在配有密封塞子的聚乙烯容器中。
另外，本發(fā)明提供了一種可以破壞細(xì)菌芽孢和抗酸細(xì)菌的殺菌制劑。該殺菌制劑包括含有過乙酸、過氧化氫、乙酸和水的第一反應(yīng)劑，以及含有至少一種磷酸鹽和至少一種非離子型表面活性劑的第二反應(yīng)劑。第一反應(yīng)劑與第二反應(yīng)劑在使用前混合并以水稀釋。
本發(fā)明的殺菌制劑優(yōu)選應(yīng)用于以中性清潔劑或其類似物洗刷和漂洗后的目的物品，例如醫(yī)療器械或醫(yī)療裝備(例如，內(nèi)窺鏡)。例如，目的物品在以本殺菌制劑配制的工作液中浸泡5到10分鐘后將會表現(xiàn)出殺菌/消毒效果。目的物品可在清水徹底漂洗后使用。
這里使用的“細(xì)菌芽孢”是指需氧枯草芽胞桿菌、厭氧梭狀芽胞桿菌等在其生長期末形成的具抵抗能力的細(xì)胞。這里的“抗酸細(xì)菌”是指那些被專業(yè)人員熟知的抗酸染色陽性的細(xì)菌，包括分枝細(xì)菌屬的細(xì)菌。
第一反應(yīng)劑是一種含有5-7％w/w過乙酸，7-9％w/w過氧化氫，30-36％w/w乙酸和水的平衡混合物。市售低濃度過乙酸(例如，品名為“DIAPOWER”，Mitsubishi Gas Chemical Co.，Inc制造)可用來制備第一反應(yīng)劑。第一反應(yīng)劑可選擇性的加入穩(wěn)定劑。該穩(wěn)定劑可以是正磷酸和焦磷酸。該穩(wěn)定劑一般以0.2-1％w/w的濃度加入到第一反應(yīng)劑中，經(jīng)攪拌并混合后溶解。
第一反應(yīng)劑可進(jìn)一步選擇性的含有金屬離子螯合劑和抗腐蝕劑。它們一般以0.1-2％w/w的濃度分別加入到第一反應(yīng)劑中，經(jīng)攪拌并混合后溶解。
第二反應(yīng)劑可進(jìn)一步選擇性的含有金屬離子螯合劑、抗腐蝕劑和色素。金屬離子隔離劑、抗腐蝕劑和色素一般各自以0.001-0.005％w/w的濃度加入到第二反應(yīng)劑中，經(jīng)攪拌并混合后溶解。
第一反應(yīng)劑可進(jìn)一步選擇性的含有至少一種磷酸鹽和至少一種非離子型表面活性劑。
第一反應(yīng)劑一般裝在配有密封塞子的聚乙烯容器中。第二反應(yīng)劑一般裝在密封的聚乙烯容器中?；蛘撸谝缓偷诙磻?yīng)劑可以混合物的形式裝在一個單一的配有密封塞子的聚乙烯容器中。
除非另加說明，這里的“％”是指“％w/w”。
通過下述方法測定過乙酸濃度和殺菌劑/消毒劑的效果。測定過乙酸濃度的方法依照Sully，B.D.和Williams，P.L.，分析1962；87653-657所述的方法測量樣品溶液中過乙酸的濃度。
精確稱量1克樣品。樣品加入到100ml預(yù)先制備的保持在5℃或更低溫度下的0.1mol/L乙酸溶液中。在以上獲得的樣品溶液中加入10ml 15％w/v的碘化鉀測試溶液，并同時測量開始時間。在用淀粉測試溶液作為指示劑時，用0.2mol/L硫代硫酸鈉滴定直到藍(lán)色消失的方法可以測量游離碘。滴定應(yīng)在加入碘化鉀測試溶液后1到3分鐘進(jìn)行。此后，當(dāng)藍(lán)色重新出現(xiàn)時測量滴定量(X1ml)和時間(t1秒)。2-4分鐘后，重復(fù)同樣操作并測量第二滴定量(X2ml)和時間(t2秒)。此后加入3滴3.7％w/v鉬酸銨測試溶液并繼續(xù)滴定直到終點維持穩(wěn)定1分鐘。在這時測量滴定量(Xtml)。零時的滴定量、過乙酸的濃度(％)和過氧化氫的濃度(％)可通過下式計算得到
零時的滴定量X0＝X1－t1(X2－X1/t2－t1)過乙酸的濃度(％)＝X0×0.2×f×E/(10×W1)過氧化氫的濃度(％)＝0.2×f×(X1－X0)×17.01/(10×W1)其中X0零時的滴定量f0.2mol/L硫代硫酸鈉溶液的指數(shù)W1樣品量(g)E過乙酸的當(dāng)量P過乙酸的濃度(％)測定殺菌/消毒的效果的方法使用枯草桿菌的芽孢測定過乙酸的消毒效果。
枯草桿菌(ATCC 6633)在液體肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時。依照Sterlinin，J.M.和Mandelstem，J.，生物化學(xué)雜志1969；11329描述的方法制備芽孢。在無菌蒸餾水中懸浮芽孢。懸浮液在85℃加熱10分鐘以破壞植物細(xì)胞。獲得的懸浮液在5℃保存。將該芽孢以106-107CFU/ml密度懸浮在無菌蒸餾水中制成芽孢樣品懸浮液。測試溶液以1/10倍比稀釋鋪于肉湯瓊脂培養(yǎng)基上，芽孢的數(shù)量可通過培養(yǎng)板上克隆的數(shù)目計算得到。
殺菌/消毒測試中，測試溶液以1/10倍比稀釋鋪于肉湯瓊脂培養(yǎng)基上，芽孢的數(shù)量可通過該培養(yǎng)板上克隆的數(shù)目計算得到。
(實施例)此后，將以實施例的方式描述本發(fā)明。以下實施例用于說明本發(fā)明。但本發(fā)明并不局限于這些實施例。
(實施例1)制備0.33％的過乙酸水溶液(pH 4.0)，溶液中含有1％硫代硫酸鈉和0.05％表1中非離子型表面活性劑中的一種。過乙酸水溶液置于玻璃燒杯中并于室溫(25℃)下儲存2周。在儲存過程中按時間抽取過乙酸水溶液樣本，并依照Sully，B.D.和Williams，P.L.，分析1962；87653-657所述的方法測量樣品溶液中過乙酸的濃度。
表1非離子型表面活性添加劑1.Newdet PE85(聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段聚合物，Sanyo Chemical Industries Co.，Ltd.)2.Ionet T-60C(聚氧乙烯山梨醇脂肪酸，Sanyo Chemical Industries Co，Ltd.)3 Emulmin 70(聚氧乙烯基烷基醚，Sanyo Chemical Industries Co，Ltd.)4.Nonipole 100(聚氧乙烯壬基苯基醚，Sanyo Chemical Industries Co.，Ltd.)5.Noygen ET-190(聚乙烯月桂基苯基醚，Daiichi Kogyo Seiyaku，Co.，Ltd.)6.Pluronic F-68(聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段聚合物，Adeka)7.Nonion OT-221(聚氧乙烯山梨醇單油酸酯，NOF Corporation)8.Nonion S-230 (聚氧乙烯油基醚，NOF Corporation)9 Nonion S-207(聚氧乙烯硬脂基醚，NOF Corporation)


圖1表示了每份樣品中過乙酸濃度的測量結(jié)果。
如
圖1所示，1周后，不含非離子型表面活性劑的過乙酸溶液(對照)中的過乙酸濃度低于0.2％，但含有非離子型表面活性劑(1到9)的過乙酸溶液中過乙酸濃度可維持于0.2％或更高，只有加入Nonion S-207例外。
2周后，不含非離子型表面活性劑的過乙酸溶液(對照)中的過乙酸濃度低于0.05％，但含有非離子型表面活性劑(1到9)的過乙酸溶液中過乙酸濃度可維持于0.1％或更高。
(實施例2)在0.3％過乙酸溶液中加入磷酸氫二鉀使其終濃度為0.296％(pH3.5)。制得的溶液分為6份，每份各加入表面活性劑、反應(yīng)劑和其混合物(表2中①到⑥)請成測試溶液。測試溶液在室溫下儲存(25℃)。每天測量該測試溶液過乙酸的濃度和該測試溶液對細(xì)菌芽孢的作用效果。
表2添加劑①無添加劑(對照1)② Newdet PE85 0.05％③Newpole PE64 0.05％④Nonipole 100 0.05％⑤Newdet PE85 0.05％+EDTA2Na 0.025％+EDTA4Na 0.025％⑥EDTA2Na 0.025％+EDTA4Na 0.025％(對照2)圖2和3表示了每份樣品中過乙酸濃度的測量結(jié)果。
如圖2和3所示，室溫儲存10天后，對照組1和2中的過乙酸濃度下降到約等于0.2％，但含有表面活性劑、反應(yīng)劑和其混合物(1到9)的測試溶液中過乙酸濃度可維持于0.2％或更高。
金屬離子對過乙酸的穩(wěn)定性有負(fù)性的影響。因此，可加入金屬離子螯合劑以去除實際情況中可能混入溶液中的金屬離子。然而，金屬離子螯合劑本身也會降低過乙酸稀釋液的穩(wěn)定性。但如圖3所示，⑤比⑥更穩(wěn)定。由此可知，由于添加了非離子型表面活性劑，即使有金屬離子螯合劑存在，過乙酸仍趨于穩(wěn)定。
測量了每個樣品中對于細(xì)菌芽孢的殺菌/消毒效果。結(jié)果由表3顯示。為測定殺菌/消毒效果檢測了含有如表2中所述②Newdet PE85 0.05％，④Nonipole 100 0.05％，和(⑤ Newdet PE85 0.05％+EDTA2Na 0.025％+EDTA4Na0.025％三種樣品對于枯草桿菌芽孢的抗微生物活性。
表3過乙酸溶液的殺菌/消毒效果測試溶液 ②④ ⑤作用時間5分鐘 10分鐘 5分鐘 10分鐘 5分鐘 10分鐘制備后瞬間 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.013天 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.017天 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.0110天＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01 ＞6.01表中的數(shù)值代表芽孢數(shù)目減去5到10分鐘內(nèi)各樣品的接觸芽孢數(shù)目后的對數(shù)值。
如表3所示各樣品溶液均具有抗微生物活性致使儲存10天后枯草桿菌減少106-ml或更多。
(實施例3)制備了以下兩種制劑第一反應(yīng)劑過乙酸 6％過氧化氫8％乙酸32％磷酸鹽型穩(wěn)定劑 0.2％水 平衡量第二反應(yīng)劑磷酸二鉀 6％Newdet PE85(Sanyo Chemical Industries Co.，Ltd.) 1％EDTA2Na0.5％EDTA4Na0.5％水 平衡量第一和第二反應(yīng)劑以相同量混合，并以10倍體積稀釋制成測試溶液。該溶液含有約0.33％的過乙酸。
測試溶液用來滅菌和消毒內(nèi)窺鏡，此內(nèi)窺鏡使用了新近用于此目的的內(nèi)窺鏡自動清洗器。
使用于上消化道的柔軟內(nèi)窺鏡的活檢鉗(Olympus GIF型XQ240；Olympus Optical Industries，Co.，Ltd.)由自動內(nèi)窺鏡清洗器(OlympusEW-30；Olympus Optical Industries，Co.，Ltd.)以下述方式清洗并消毒。設(shè)置自動內(nèi)窺鏡清洗器使得活栓鉗能用自來水清洗5分鐘，用水漂洗1次，此后再用上述測試溶液于20℃清洗并消毒10分鐘。將該測試溶液保留在自動內(nèi)窺鏡清洗器的液體消毒劑貯存池中。1天清洗并消毒6副內(nèi)窺鏡(每天6次循環(huán))。對于第6副內(nèi)窺鏡，活檢鉗槽內(nèi)壁污染了枯草桿菌芽孢以測試該溶液的殺菌/消毒效果。將100μl含107到109CFU/ml芽孢的枯草桿菌芽孢樣品懸浮液應(yīng)用于內(nèi)窺鏡活檢鉗槽內(nèi)壁，并干燥。
每天6次循環(huán)后，抽取清洗器液體消毒劑貯存池內(nèi)測試溶液的樣品。通過計數(shù)測定樣品中過乙酸的濃度和芽孢的數(shù)量。在起始天以后的7天內(nèi)每天重復(fù)上述測定。以下述方法測定芽孢數(shù)量。用浸有5ml無菌復(fù)蘇液的無菌棉填料擦拭活栓鉗槽內(nèi)壁以復(fù)蘇細(xì)菌。用5塊無菌填料重復(fù)此過程。收集的復(fù)蘇的細(xì)菌以1/10倍比稀釋。稀釋液鋪板于Triptosoy瓊脂培養(yǎng)基上。37℃培養(yǎng)24小時后，通過計數(shù)測量存活細(xì)菌數(shù)目。本測定進(jìn)行2次。
測試結(jié)果如表4所示表4過乙酸溶液的殺菌/消毒效果
a)少于測量極限(＜5.0×100)在測試進(jìn)行的7天中隨時間的推移，過乙酸的濃度由0.35％降到0.13％。由于設(shè)備結(jié)構(gòu)的原因造成的漂洗水稀釋效果部分地導(dǎo)致了濃度的下降。
在第一次測試中直到4天后，在第二次測試中直到3天后，芽孢數(shù)目少于或等于測量極限(＜5.0×100)。在第一次測試的第5和6天和第二次測試的第4、5、7天，每ml中有幾十到一百個芽孢。因此在測試進(jìn)行的全部數(shù)天內(nèi)芽孢已減到1/106至1/107。這表明溶液維持了有效的過乙酸濃度。
上述載菌試驗中，測試溶液對芽孢的殺菌/消毒效果表明在實際醫(yī)療診斷中，此測試溶液可以用來充分清洗和消毒內(nèi)窺鏡。這是因為芽孢是對殺菌劑/消毒劑抵抗力最強的微生物，并且可以認(rèn)為，在應(yīng)用于實際醫(yī)療診斷和治療中內(nèi)窺鏡并不會污染如上述試驗的大量芽孢。
(實施例4)在0.3％w/v過乙酸水溶液中加入兩種非離子型表面活性劑(Nonipole100和Newdet PE85)，使其濃度為0-0.5％，再用磷酸二氫鉀調(diào)節(jié)pH值到4，從而制成測試溶液。測試溶液在室溫(25℃)和高溫(50℃)儲存。測量過乙酸濃度隨時間的變化。
在室溫儲存的情況下過乙酸濃度的變化由圖4表示。高溫儲存下過乙酸濃度的變化由圖5表示。
當(dāng)各份測試溶液在室溫儲存時，第一天各份測試溶液中的過乙酸濃度均維持在約90％或更高。第4天，不含表面活性劑的對照測試溶液中過乙酸的濃度下降至原濃度的約74％，但是所有含有表面活性劑的測試溶液中的過乙酸濃度均維持在原濃度的約75％或更高。1周后，不含表面活性劑的對照測試溶液中過乙酸的濃度下降至原濃度的約61％，但是所有含有表面活性劑的測試溶液中的過乙酸濃度均維持在原濃度的約62％或更高。
當(dāng)各份測試溶液在高溫儲存時，第一天各份測試溶液中的過乙酸濃度均維持在約74％或更高。第4天，不含表面活性劑的對照測試溶液中過乙酸的濃度下降至原濃度的約31％，但是所有含有表面活性劑的測試溶液中的過乙酸濃度均維持在原濃度的約34％或更高。1周后，不含表面活性劑的對照測試溶液中過乙酸的濃度下降至原濃度的約16％，但是所有含有表面活性劑的測試溶液中的過乙酸濃度均維持在原濃度的約17％或更高。
如上所述，無論在室溫或高溫下加入非離子型表面活性劑均可維持和穩(wěn)定過乙酸的濃度。
(實施例5)在0.3％w/v過乙酸水溶液中加入兩種非離子型表面活性劑(NewdetPE85100和Nonipole PE64(聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段聚合物，Sanyo ChemicalIndustries Co.，Ltd.))，使其濃度為0.05％，再用焦磷酸鈉或乙酸鈉調(diào)節(jié)pH值到4，從而制成測試溶液。測試溶液在室溫(25℃)儲存。測量過乙酸濃度隨時間變化。
過乙酸濃度隨時間的變化由圖6表示。
當(dāng)用乙酸鈉調(diào)節(jié)pH值到4時，即使溶液中有非離子型表面活性劑存在，7天后過乙酸濃度仍然降低到原濃度的一半左右。當(dāng)用焦磷酸鈉調(diào)節(jié)pH值到4時，在非離子型表面活性劑存在下，7天后約有80％的過乙酸存留。而不含非離子型表面活性劑，7天后約有75％的過乙酸存留。
(實施例6)測試了本發(fā)明的過乙酸制劑對結(jié)核分枝桿菌和非典型分枝桿菌的殺菌效果。
試驗中制備并使用了以下兩種制劑第一反應(yīng)劑過乙酸 6％過氧化氫 8％乙酸 32％水 平衡量第二反應(yīng)劑磷酸二鉀 6％Newdet PE85(Sanyo Chemical Industries Co.，Ltd.) 1％水 平衡量第一和第二反應(yīng)劑以相同量混合，并用無菌蒸餾水稀釋成濃度分別為0.3％、0.2％和0.1％的過乙酸工作液。
使用市售戊二醛制劑，Stelihide(Maruishi Pharmaceutical Co.，Ltd.)作為對照。依照廠家說明書，在戊二醛制劑中加入緩沖劑制成2％戊二醛溶液，作為測試的對照。
同殺菌/消毒效果試驗一樣，使用以下結(jié)核分枝桿菌和非典型分枝桿菌作為實驗對象結(jié)核分枝桿菌H37Rv、鳥分枝桿菌ATCC 15769、細(xì)胞內(nèi)分枝桿菌ATCC13950、Kansasii分枝桿菌ATCC 25414、結(jié)核分枝桿菌1號臨床分離株、和結(jié)核分枝桿菌2號臨床分離株。
上述樣品細(xì)菌各自培養(yǎng)在1％ Ogawa培養(yǎng)基上(Eiken Chemical Co.，Ltd.制造)(此后均成為Ogawa培養(yǎng)基)。將長出細(xì)菌斑的白金環(huán)放入一個帶螺扣帽的試管中，試管中有5個直徑為5mm的無菌玻璃珠和2滴無菌10％Tween80。使用自動混合器搖動混合試管內(nèi)容物15秒。在試管中加入4ml 7H9肉湯培養(yǎng)基(Difco制造)制成各個樣品細(xì)菌的均一懸液。使用分光光度計(Miniphoto518，TAITEC)在660nm的波長下測量懸液的吸光度。此后，以無菌水稀釋懸液到0.30。制成的稀釋液作為接種液。接種液中活細(xì)菌的數(shù)目估計如下。以1/102、1/103、1/101、1/105和1/106稀釋接種液。接種100μl各稀釋液于Ogawa培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)。使用計數(shù)的方法測量生長克隆的數(shù)目。
于500μl上述過乙酸工作液或500μl對照的戊二醛溶液中加入并混合20μ1接種液，并在室溫靜置一預(yù)定時間(30秒、1分鐘、2.5分鐘(3分鐘)、5分鐘和10分鐘)從而使制劑與細(xì)菌接觸。用定量白金環(huán)(Bioloop，ELKAY Co.，Ltd.制造)接種10μl制成的混合液于7H9肉湯培養(yǎng)上，37℃培養(yǎng)。4周后可觀察到有無細(xì)菌生長。有細(xì)菌生長的樣品定義為生長陽性(+)，而沒有細(xì)菌生長的樣品定義為生長陰性(-)。
結(jié)果由圖5表示。如圖5所示，雖然各抗酸菌型和菌株的敏感性各有不同，但在0.3％過乙酸溶液中所有的樣品細(xì)菌均在30秒內(nèi)被殺死。相反地，用2％戊二醛即使暴露10分鐘后，仍有部分細(xì)菌未被殺死。因此，2％戊二醛的殺菌活性低于0.1％過乙酸溶液。
因此，正如以上觀察到的，本發(fā)明的過乙酸制劑對載菌芽孢具有殺菌/消毒效果，并且即使在相對低濃度下仍有比戊二醛制劑更大的殺菌率。表5過乙酸溶液對抗酸菌的殺菌/消毒效果過乙酸濃度0.3％菌株 對照 15秒 30秒 1分 2.5分 5分 10分結(jié)核分枝桿菌H37Rv +-∽+ --- - -鳥分枝桿菌ATCC 15769 + + --- - -細(xì)胞內(nèi)分枝桿菌ATCC 13950 +-∽+ --- - -Kansasii分枝桿菌ATCC 25414 + - --- - -結(jié)核分枝桿菌1號臨床分離株 + + --- - -結(jié)核分枝桿菌2號臨床分離株 NTNTNT NT NT NTNT過乙酸濃度0.2％菌株 對照 15秒 30秒 1分 2.5分 5分 10分結(jié)核分枝桿菌H37Rv + +-∽+ -- - -鳥分枝桿菌ATCC 15769 + +- -- - -細(xì)胞內(nèi)分枝桿菌ATCC 13950 + +- -- - -Kansasii分枝桿菌ATCC 25414 + -- -- - -結(jié)核分枝桿菌1號臨床分離株 + ++ -- - -結(jié)核分枝桿菌2號臨床分離株 + ++ -- - -
過乙酸濃度0.1％菌株 對照 15秒 30秒 1分 2.5分 5分 10分結(jié)核分枝桿菌H37Rv ++-∽+ - - - -鳥分枝桿菌ATCC 15769++ +-∽+ - - -細(xì)胞內(nèi)分枝桿菌ATCC 13950++ + - - - -Kansasii分枝桿菌ATCC 25414 ++-∽+ - - - -結(jié)核分枝桿菌1號臨床分離株 ++ + - - - -結(jié)核分枝桿菌2號臨床分離株 ++ + - - - -2％戊二醛菌株 對照 15秒 30秒 1分 2.5分 5分 10分結(jié)核分枝桿菌H37Rv ++ +-∽+ -∽+ -∽+ -鳥分枝桿菌ATCC 15769 ++ + +-∽+ -∽+ -∽+細(xì)胞內(nèi)分枝桿菌ATCC13950++ + + - - -Kansasii分枝桿菌ATCC 25414 ++-∽+ - - - -結(jié)核分枝桿菌1號臨床分離株 ++ + + - - -結(jié)核分枝桿菌2號臨床分離株 NT NTNTNTNTNTNT工業(yè)實用性本發(fā)明提供了一種過乙酸制劑，可用于對醫(yī)療器械和例如內(nèi)窺鏡，紗布等類似的醫(yī)療裝備的殺菌或消毒。本發(fā)明的過乙酸制劑以稀釋后工作液的形式在至少7天內(nèi)，能穩(wěn)定地維持有效破壞細(xì)菌芽孢的過乙酸濃度。本制劑可以替代以戊二醛為活性成分的制劑。
權(quán)利要求
1.一種包括過乙酸為主要成分的殺菌制劑，含有過乙酸；至少一種磷酸鹽；和至少一種非離子型表面活性劑，其中的殺菌制劑稀釋成含有過乙酸的工作液，其中的過乙酸濃度可以破壞細(xì)菌芽孢和抗酸性細(xì)菌，同時在至少7天內(nèi)維持該工作液濃度。
2.權(quán)利要求1的殺菌制劑，其中的磷酸鹽選自正磷酸鈉、正磷酸鉀、焦磷酸鈉、焦磷酸鉀、多磷酸鈉、多磷酸鉀、和它們的混合物。
3.權(quán)利要求1的殺菌制劑，其中的非離子型表面活性劑選自聚乙烯/聚丙烯嵌段聚合物型表面活性劑，聚氧乙烯烷基苯基醚型表面活性劑，聚氧乙烯醚型表面活性劑，和聚氧乙烯山梨醇型表面活性劑。
4.權(quán)利要求1的殺菌制劑，其中的過乙酸的濃度范圍為1％w/w至10％w/w。
5.權(quán)利要求1的殺菌制劑，其中工作液中的磷酸鹽的濃度范圍為0.01％w/w至2％w/w。
6.權(quán)利要求1的殺菌制劑，其中工作液中的非離子型表面活性劑的濃度范圍為0.01％w/w至0.5％w/w。
7.一種能破壞細(xì)菌芽孢和抗酸細(xì)菌的殺菌制劑，包含含有過乙酸、過氧化氫、乙酸、和水的第一反應(yīng)劑；和含有至少一種磷酸鹽和至少一種非離子型表面活性劑的第二反應(yīng)劑，其中的第一反應(yīng)劑與第二反應(yīng)劑在使用前混合并用水稀釋。
8.權(quán)利要求7的殺菌制劑，其中的第一反應(yīng)劑是一種含有5-7％w/w過乙酸、7-9％w/w過氧化氫、30-36％w/w乙酸、和水的平衡溶液。
9.權(quán)利要求7的殺菌制劑，其中的第一反應(yīng)劑含有穩(wěn)定劑。
10.權(quán)利要求7的殺菌制劑，其中的穩(wěn)定劑選自正磷酸和焦磷酸。
11.權(quán)利要求7的殺菌制劑，其中的第一反應(yīng)劑含有金屬離子螯合劑或抗腐蝕劑。
12.權(quán)利要求7的殺菌制劑，其中的第二反應(yīng)劑含有金屬離子螯合劑、抗腐蝕劑、或色素。
13.權(quán)利要求7的殺菌制劑，其中的第一反應(yīng)劑含有至少一種磷酸鹽和至少一種表面活性劑。
14.權(quán)利要求11的殺菌制劑，其中的第一反應(yīng)劑含有至少一種磷酸鹽和至少一種表面活性劑。
15.權(quán)利要求7的殺菌制劑，其中的第二反應(yīng)劑是一種粉末狀物質(zhì)或固體物質(zhì)。
16.權(quán)利要求12的殺菌制劑，其中的第二反應(yīng)劑是一種粉末狀物質(zhì)或固體物質(zhì)。
17.權(quán)利要求7的殺菌制劑，其中的第一反應(yīng)劑和第二反應(yīng)劑以混合物的形式提供。
全文摘要
一種以過乙酸為主要成分的殺菌制劑,含有過乙酸、至少一種磷酸鹽和至少一種非離子型表面活性劑。本殺菌制劑可稀釋成含有過乙酸的工作液,其中的過乙酸濃度可以破壞細(xì)菌芽孢和抗酸性細(xì)菌,同時在至少7天內(nèi)維持工作液濃度。
文檔編號A01N37/16GK1327367SQ98814338
公開日2001年12月19日 申請日期1998年10月19日 優(yōu)先權(quán)日1998年10月19日
發(fā)明者安原亨, 吉田惠美子 申請人:更家株式會社