本發(fā)明屬于魚(yú)類雌核發(fā)育的，具體涉及一種由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法。

背景技術(shù)：

1、彭澤鯽(carassius?auratus?var.pengze)隸屬鯉形目、鯉科、鯉亞科、鯽屬，是一種三倍體雌核發(fā)育生殖的魚(yú)類，具有肉味鮮美、生長(zhǎng)快、耐低氧、抗病力強(qiáng)和耐長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)葍?yōu)良特點(diǎn)。但由于自然環(huán)境破壞導(dǎo)致野生彭澤鯽種群減少和近親繁殖造成彭澤鯽種質(zhì)退化，彭澤鯽的抗病力、生長(zhǎng)速度與養(yǎng)殖效益逐漸降低。因此，進(jìn)一步通過(guò)人工育種，培育出生長(zhǎng)快、抗病力強(qiáng)的良種是當(dāng)前亟待解決的問(wèn)題。

2、豐產(chǎn)鯽，是以彭澤鯽做母本，通過(guò)雌核發(fā)育得到的一個(gè)全雌性的鯽魚(yú)新品種。豐產(chǎn)鯽，外形勻稱優(yōu)美，與東北銀鯽的體形相似，體背介于彭澤鯽和高背鯽之間，肉質(zhì)較為結(jié)實(shí)，味道鮮甜，而且具有個(gè)體大、生長(zhǎng)快、食性雜、抗病力強(qiáng)、群體產(chǎn)量高的特點(diǎn)；總的來(lái)說(shuō)，它是鯽魚(yú)養(yǎng)殖品種中綜合性能最優(yōu)的一個(gè)品種，在中國(guó)很多地區(qū)均有大面積的養(yǎng)殖。

3、然而，發(fā)明人卻發(fā)現(xiàn)豐產(chǎn)鯽在鯽魚(yú)養(yǎng)殖的高溫季節(jié)，一般在5～8月，容易發(fā)生孢子蟲(chóng)病，且容易暴發(fā)于魚(yú)苗時(shí)期。孢子蟲(chóng)病，是威脅魚(yú)類養(yǎng)殖的一大寄生蟲(chóng)病，尤其在鯽魚(yú)、鯉魚(yú)的養(yǎng)殖中非常常見(jiàn)；一方面，孢子蟲(chóng)病難以在早期被發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致錯(cuò)過(guò)治療時(shí)機(jī)，另一方面孢子蟲(chóng)寄生于魚(yú)體組織內(nèi)，且成熟孢子蟲(chóng)具有堅(jiān)硬的外殼，普通的藥物對(duì)其殺滅效果不佳；所以，一旦爆發(fā)孢子蟲(chóng)病，會(huì)導(dǎo)致豐產(chǎn)鯽的較高死亡率，給養(yǎng)殖戶造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

4、異源四倍體彭澤鯽，是彭澤鯽(♀)與興國(guó)紅鯉(♂)雜交所得的魚(yú)種，其體質(zhì)量、體長(zhǎng)的增長(zhǎng)速度均顯著高于彭澤鯽。不過(guò)四倍體彭澤鯽體色偏白，而在市場(chǎng)上消費(fèi)者更青睞于體色偏黑的鯽魚(yú)，因此若能對(duì)其體色進(jìn)行改良則更受市場(chǎng)歡迎，有利于推廣。

5、此外，鰓出血病是危害鯽魚(yú)養(yǎng)殖最為嚴(yán)重的一種疾病，該病暫無(wú)藥可治，只能采取措施控制死亡數(shù)量，所以有必要研究抗鰓出血病的魚(yú)種。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，得到一種具有抗孢子蟲(chóng)病能力的四倍體鯽鯉。

2、本發(fā)明采取以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)目的。

3、一種由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，包括以下步驟：

4、(1)在以彭澤鯽為母本、興國(guó)紅鯉為父本的雜交后代中挑選四倍體彭澤鯽；

5、(2)將四倍體彭澤鯽放入親魚(yú)池內(nèi)強(qiáng)化培養(yǎng)；

6、(3)進(jìn)行強(qiáng)化培育后，在四倍體彭澤鯽中選取無(wú)病態(tài)、發(fā)育良好、性成熟特征明顯的雌性個(gè)體作為母本親魚(yú)，以及選取無(wú)病態(tài)、發(fā)育良好、性成熟特征明顯的雄性黑錦鯉作為父本親魚(yú)；對(duì)母本親魚(yú)和父本親魚(yú)進(jìn)行人工催產(chǎn)；

7、(4)人工催產(chǎn)后進(jìn)行人工干法授精，得到受精卵；然后進(jìn)行人工孵化和魚(yú)苗培育，得到由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉。

8、所述黑錦鯉為全身體色為黑色的錦鯉(cyprinus?carpio)，具體為鯉形目(cypriniformes)、鯉科(cyprinidae)、鯉屬(cyprinus)魚(yú)類。

9、本發(fā)明以彭澤鯽與興國(guó)紅鯉雜交得到的四倍體彭澤鯽作為母本親魚(yú)、黑錦鯉作為父本親魚(yú)，通過(guò)異精雌核發(fā)育，得到一種具有抗孢子蟲(chóng)病能力的四倍體鯽鯉。本發(fā)明繁育得到的四倍體鯽鯉還保留了彭澤鯽及其與興國(guó)紅鯉雜交所得的四倍體彭澤鯽的肉質(zhì)鮮美、生長(zhǎng)快的優(yōu)點(diǎn)。

10、作為本發(fā)明的一種具體實(shí)施方式，在步驟(1)中，從雜交后代中挑選出四倍體彭澤鯽的方法為：首先從外形上初步挑選出嘴尖，吻端像鯉魚(yú)的子代；然后利用腎細(xì)胞染色體制備方法檢測(cè)其染色體倍性，確定其是否為四倍體彭澤鯽。進(jìn)一步地，還可以利用流式細(xì)胞儀測(cè)定dna含量、利用血細(xì)胞涂片法測(cè)量血細(xì)胞大小中的至少一種來(lái)判定初步挑選出的子代是否為四倍體彭澤鯽。

11、在步驟(1)中，彭澤鯽為母本親魚(yú)、興國(guó)紅鯉為父本親魚(yú)的雜交方法為本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)，本發(fā)明對(duì)其沒(méi)有具體限制。

12、作為本發(fā)明的一種具體實(shí)施方式，在步驟(2)中，即在進(jìn)行人工催產(chǎn)前，四倍體彭澤鯽和黑錦鯉在親魚(yú)池內(nèi)人工強(qiáng)化培養(yǎng)3～4個(gè)月，水溫維持在18～23℃。

13、作為本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，在步驟(3)中，對(duì)母本親魚(yú)采用一針注射催產(chǎn)法進(jìn)行人工催產(chǎn)，具體注射的催產(chǎn)藥劑為促黃體釋放激素a2、絨毛膜促性腺激素、地歐酮的組合藥劑。作為本發(fā)明的具體實(shí)施方式，促黃體釋放激素a2和地歐酮的注射量分別為5mg/kg，絨毛膜促性腺激素的注射量為500mg/kg。本發(fā)明對(duì)于父本親魚(yú)同樣采用一針注射催產(chǎn)法進(jìn)行人工催產(chǎn)，催產(chǎn)藥劑的量為母本親魚(yú)的一半，即，促黃體釋放激素a2和地歐酮的注射量分別為2.5mg/kg，絨毛膜促性腺激素的注射量為250mg/kg。

14、作為本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，在步驟(4)中，在母本親魚(yú)進(jìn)行人工催產(chǎn)8～10小時(shí)后，每隔30分鐘檢查其的卵巢發(fā)育情況，當(dāng)輕壓母本親魚(yú)的腹部，生殖孔中有卵粒流出時(shí)，立即進(jìn)行人工干法授精；人工干法授精后將受精卵放入孵化桶中，在20～25℃下進(jìn)行流水孵化。

15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

16、對(duì)本發(fā)明繁育得到的四倍體鯽鯉與豐產(chǎn)鯽置于一個(gè)大規(guī)模爆發(fā)孢子蟲(chóng)病的池塘中進(jìn)行養(yǎng)殖對(duì)比實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)30天后，豐產(chǎn)鯽死亡率為80％，而本發(fā)明方法繁育的鯽鯉死亡率僅為5％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明由黑錦鯉誘導(dǎo)四倍體鯽鯉雌核發(fā)育所獲得的子代群體具有較強(qiáng)的抗孢子蟲(chóng)病能力。而且在養(yǎng)殖期間未發(fā)現(xiàn)本發(fā)明繁育得到的四倍體鯽鯉感染鰓出血病，說(shuō)明其具有抗鰓出血病能力。所以，本發(fā)明的四倍體鯽鯉在生產(chǎn)應(yīng)用方面具有巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

17、本發(fā)明方法以彭澤鯽與興國(guó)紅鯉雜交得到的四倍體彭澤鯽作為母本親魚(yú)、黑錦鯉作為父本親魚(yú)進(jìn)行異精雌核發(fā)育，兩者適配性好，可操作性強(qiáng)，受精率可達(dá)72.1％，孵化率可達(dá)52.0％，出苗率可達(dá)74.7％，與豐產(chǎn)鯽相比生長(zhǎng)速度大約快30％。此外，本發(fā)明繁育得到的四倍體鯽鯉雌核發(fā)育的子代與母本相比，具有較黑的體色，與市面上豐產(chǎn)鯽的體型體色相近，更有利于在市場(chǎng)上推廣。

18、本發(fā)明提供一種由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，得到的魚(yú)種性狀優(yōu)良、遺傳穩(wěn)定、生長(zhǎng)快、受精率和孵化率高、抗孢子蟲(chóng)病和鰓出血病能力強(qiáng)，因此本發(fā)明對(duì)魚(yú)類遺傳育種具有重要意義。

技術(shù)特征：

1.一種由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，其特征是，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，其特征是，在步驟(2)中，即在進(jìn)行人工催產(chǎn)前，四倍體彭澤鯽和黑錦鯉在親魚(yú)池內(nèi)人工強(qiáng)化培養(yǎng)3～4個(gè)月，水溫維持在18～23℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，其特征是，在步驟(3)中，對(duì)母本親魚(yú)采用一針注射催產(chǎn)法進(jìn)行人工催產(chǎn)，具體注射的催產(chǎn)藥劑為促黃體釋放激素a2、絨毛膜促性腺激素、地歐酮的組合藥劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，其特征是，促黃體釋放激素a2和地歐酮的注射量分別為5mg/kg，絨毛膜促性腺激素的注射量為500mg/kg。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，其特征是，對(duì)于父本親魚(yú)同樣采用一針注射催產(chǎn)法進(jìn)行人工催產(chǎn)，催產(chǎn)藥劑的量為母本親魚(yú)的一半。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，其特征是，在步驟(4)中，在母本親魚(yú)進(jìn)行人工催產(chǎn)8～10小時(shí)后，每隔30分鐘檢查其的卵巢發(fā)育情況，當(dāng)輕壓母本親魚(yú)的腹部，生殖孔中有卵粒流出時(shí)，立即進(jìn)行人工干法授精；人工干法授精后將受精卵放入孵化桶中，在20℃～25℃下進(jìn)行流水孵化。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，其特征是，在步驟(1)中，從雜交后代中挑選出四倍體彭澤鯽的方法為：首先從外形上初步挑選出嘴尖，吻端像鯉魚(yú)的子代；然后利用腎細(xì)胞染色體制備方法檢測(cè)其染色體倍性，確定其是否為四倍體彭澤鯽。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，其特征是，利用流式細(xì)胞儀測(cè)定dna含量、利用血細(xì)胞涂片法測(cè)量血細(xì)胞大小中的至少一種來(lái)判定初步挑選出的子代是否為四倍體彭澤鯽。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉的繁育方法，包括以下步驟：(1)在以彭澤鯽為母本、興國(guó)紅鯉為父本的雜交后代中挑選四倍體彭澤鯽；(2)將四倍體彭澤鯽放入親魚(yú)池內(nèi)強(qiáng)化培養(yǎng)；(3)進(jìn)行強(qiáng)化培育后，在四倍體彭澤鯽中選取無(wú)病態(tài)、發(fā)育良好、性成熟特征明顯的雌性個(gè)體作為母本親魚(yú)，以及選取無(wú)病態(tài)、發(fā)育良好、性成熟特征明顯的雄性黑錦鯉作為父本親魚(yú)；對(duì)母本親魚(yú)和父本親魚(yú)進(jìn)行人工催產(chǎn)；(4)人工催產(chǎn)后進(jìn)行人工干法授精，得到受精卵；然后進(jìn)行人工孵化和魚(yú)苗培育，得到由黑錦鯉誘導(dǎo)的雌核發(fā)育四倍體鯽鯉。通過(guò)本發(fā)明方法得到的四倍體鯽鯉魚(yú)種生長(zhǎng)快、受精率和孵化率高、抗孢子蟲(chóng)病和鰓出血病能力強(qiáng)。

技術(shù)研發(fā)人員：張勇,廖書(shū)嘉,梁洪海,宋紅光,李水生
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中山大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/11/18