本發(fā)明屬于多肉植物栽培技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蘆薈的組培快繁方法。

背景技術(shù)：

多肉植物（succulent）這一概念由瑞士植物學(xué)家瓊·鮑漢提出，最早主要指具有肥厚多汁的莖、根或葉片的一類植物，園藝上一般還稱為多肉花卉。多肉植物品種多樣，管理粗放，抗逆性強(qiáng)，加之色彩豐富，具有一定的空氣凈化功能，是深受廣大消費(fèi)者喜愛的景觀植物之一。近年來由于多肉植物需求量增加與其繁殖量小的矛盾日益凸顯，因此，高效大量的繁殖是解決上述問題的重要途徑。

蘆薈（aloeveral.）為百合科（liliaceae）蘆薈屬多年生常綠多肉質(zhì)草本植物，含有許多對人體有益的物質(zhì)，尤其對各種灼傷、燙傷、曬傷及皮膚病有明顯療效，并具有較高的觀賞價(jià)值，是集藥用、食用、美容及觀賞等于一身的熱帶植物，是一種很有開發(fā)應(yīng)用前景的經(jīng)濟(jì)作物。蘆薈植株要生長數(shù)年后才開花結(jié)實(shí)，加之雌雄花開放時(shí)間不一致，故種子很少。蘆薈種子很細(xì)小，存放一年發(fā)芽率即降低，一般是采后及時(shí)播種。但是，用種子育苗手續(xù)繁雜，生產(chǎn)上多用插枝法或分株法繁殖，這些方法繁殖速度很慢，而且容易積累病菌，影響生長，甚至造成退化。利用組織培養(yǎng)技術(shù)，通過試管繁殖可達(dá)到復(fù)壯、快繁的目的，但是如果提高可重復(fù)性和繁殖效率，需要進(jìn)一步研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有組培方法可重復(fù)性低、繁殖效率差的技術(shù)問題，提供一種蘆薈的組培快繁方法。

一種蘆薈的組培快繁方法，包括以下步驟：

步驟1，外植體的選擇與消毒：取蘆薈頂芽，用清水洗凈后進(jìn)行消毒滅菌處理；

步驟2，愈傷組織培養(yǎng)：將步驟1所得頂芽接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)形成愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng)，形成叢生苗；

步驟3，分化培養(yǎng)：將步驟2所得叢生苗接種到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)形成叢苗；

步驟4，生根培養(yǎng)：將步驟3所得叢苗接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)完成生根形成幼苗；

步驟5，移苗移栽：將步驟4所得幼苗移栽，即可；

所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基是由ms、0.3-0.9mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.04-0.12mg/l萘乙酸、0.02-0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.02-0.05wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成；

所述分化培養(yǎng)基是由ms、0.3-0.9mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.08-0.2mg/l萘乙酸、0.02-0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.02-0.05wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成；

所述生根培養(yǎng)基是由ms、0.2-0.5mg/l吲哚丁酸、0.01-0.03wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成。

優(yōu)選地，步驟1中消毒滅菌處理是將蘆薈頂芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-5min，最后用無菌水沖洗。

優(yōu)選地，步驟2中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

優(yōu)選地，步驟3中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

優(yōu)選地，步驟4中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

優(yōu)選地，步驟5中移栽采用的基質(zhì)是由泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末組成，泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末的重量比為1-2：1-2：1-2：1-2。

采用本發(fā)明的組培快繁方法，可大量快繁蘆薈，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種蘆薈的組培快繁方法，包括以下步驟：

步驟1，外植體的選擇與消毒：取蘆薈頂芽，用清水洗凈后進(jìn)行消毒滅菌處理；

步驟2，愈傷組織培養(yǎng)：將步驟1所得頂芽接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)形成愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng)，形成叢生苗；

步驟3，分化培養(yǎng)：將步驟2所得叢生苗接種到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)形成叢苗；

步驟4，生根培養(yǎng)：將步驟3所得叢苗接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)完成生根形成幼苗；

步驟5，移苗移栽：將步驟4所得幼苗移栽，即可；

所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基是由ms、0.3mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.04mg/l萘乙酸、0.02mg/l3-吲哚乙酸、0.02wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成；

所述分化培養(yǎng)基是由ms、0.3mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.08mg/l萘乙酸、0.02mg/l3-吲哚乙酸、0.02wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成；

所述生根培養(yǎng)基是由ms、0.2mg/l吲哚丁酸、0.01wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成。

其中，步驟1中消毒滅菌處理是將蘆薈頂芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-5min，最后用無菌水沖洗。

步驟2中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟3中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟4中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟5中移栽采用的基質(zhì)是由泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末組成，泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末的重量比為1：1：1：1。

采用上述方法的成活率在63%。

實(shí)施例2

一種蘆薈的組培快繁方法，包括以下步驟：

步驟1，外植體的選擇與消毒：取蘆薈頂芽，用清水洗凈后進(jìn)行消毒滅菌處理；

步驟2，愈傷組織培養(yǎng)：將步驟1所得頂芽接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)形成愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng)，形成叢生苗；

步驟3，分化培養(yǎng)：將步驟2所得叢生苗接種到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)形成叢苗；

步驟4，生根培養(yǎng)：將步驟3所得叢苗接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)完成生根形成幼苗；

步驟5，移苗移栽：將步驟4所得幼苗移栽，即可；

所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基是由ms、0.5mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.08mg/l萘乙酸、0.03mg/l3-吲哚乙酸、0.04wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成；

所述分化培養(yǎng)基是由ms、0.6mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.13mg/l萘乙酸、0.03mg/l3-吲哚乙酸、0.04wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成；

所述生根培養(yǎng)基是由ms、0.4mg/l吲哚丁酸、0.02wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成。

其中，步驟1中消毒滅菌處理是將蘆薈頂芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-5min，最后用無菌水沖洗。

步驟2中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟3中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟4中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟5中移栽采用的基質(zhì)是由泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末組成，泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末的重量比為1：2：2：1。

采用上述方法的成活率在68%。

實(shí)施例3

一種蘆薈的組培快繁方法，包括以下步驟：

步驟1，外植體的選擇與消毒：取蘆薈頂芽，用清水洗凈后進(jìn)行消毒滅菌處理；

步驟2，愈傷組織培養(yǎng)：將步驟1所得頂芽接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)形成愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng)，形成叢生苗；

步驟3，分化培養(yǎng)：將步驟2所得叢生苗接種到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)形成叢苗；

步驟4，生根培養(yǎng)：將步驟3所得叢苗接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)完成生根形成幼苗；

步驟5，移苗移栽：將步驟4所得幼苗移栽，即可；

所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基是由ms、0.9mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.12mg/l萘乙酸、0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.05wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成；

所述分化培養(yǎng)基是由ms、0.9mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.2mg/l萘乙酸、0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.05wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成；

所述生根培養(yǎng)基是由ms、0.2mg/l吲哚丁酸、0.03wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成。

其中，步驟1中消毒滅菌處理是將蘆薈頂芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-5min，最后用無菌水沖洗。

步驟2中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟3中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟4中培養(yǎng)條件為溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1000-1200lux、光照時(shí)間為12-16h/d、相對濕度50-60%。

步驟5中移栽采用的基質(zhì)是由泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末組成，泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末的重量比為1-2：1-2：1-2：1-2。

采用上述方法的成活率在66%。