本發(fā)明屬于魚類繁殖領(lǐng)域，具體涉及一種棘頭梅童魚的人工繁育方法。
背景技術(shù)：
棘頭梅童魚(collichthyslucidus)屬鱸形目，石首魚科，梅童魚屬，是我國(guó)近海常見的底棲性小型經(jīng)濟(jì)魚類，主要分布在東海和黃海，以東海產(chǎn)量最大。棘頭梅童魚為短距離洄游的淺海魚類，喜棲息在河口咸淡水交匯處，生長(zhǎng)速度快，適溫、適鹽范圍廣，其肉質(zhì)細(xì)嫩而鮮美，為沿海居民喜食的高檔水產(chǎn)品之一。近年來，由于過度捕撈、近海污染嚴(yán)重等原因，導(dǎo)致棘頭梅童魚的自然資源量大幅減少，其人工繁殖技術(shù)和養(yǎng)殖技術(shù)的需求應(yīng)運(yùn)而生，但目前仍未形成一整套有效的棘頭梅童魚人工繁育技術(shù)，無法實(shí)現(xiàn)人工培育魚苗的量化生產(chǎn)，使其人工養(yǎng)殖業(yè)也無法發(fā)展。棘頭梅童魚人工育苗的主要瓶頸有，一是棘頭梅童魚的個(gè)體較小，雌性懷卵量不高，雄性的精液量更少，且雌雄魚性腺發(fā)育不同步，使得大量獲得受精卵非常困難；二是棘頭梅童魚卵的受精率和孵化率比較低；三是孵化的仔魚生長(zhǎng)到稚魚的過程中會(huì)出現(xiàn)大量的死亡，這可能與其開口餌料系列有關(guān)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種受精率、孵化率、育苗成活率高的棘頭梅童魚的人工繁育方法。
為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明提供了一種棘頭梅童魚的人工繁育方法，其特征在于，包括以下步驟：
捕撈野生或人工養(yǎng)殖的成魚作為親本：將體長(zhǎng)大于10cm、活力好、無損傷、體格健壯、性腺發(fā)育成熟的棘頭梅童魚雌雄個(gè)體作為親本；親本用濃度為0.5ppm的高錳酸鉀溶液浸泡5分鐘。
人工授精：采用半干法人工授精，分別采集棘頭梅童魚的精液和卵子，精液用hank’s液稀釋后與卵子充分混合，再加入干凈海水，靜置沉淀1～2min，取上浮卵用干凈海水清洗后放入孵化池中孵化；所述上浮卵即為受精卵；
魚苗培育：將孵化出來的魚苗進(jìn)行培育，魚苗培育水溫為23～25℃，魚苗培育密度為1～2萬尾/m3；孵化后第3d開始全池吸污，換水，吸污時(shí)出水口用80目篩絹網(wǎng)收集殘餌、死苗、糞便；
第4d開始投喂經(jīng)裂壺藻強(qiáng)化培育的輪蟲，育苗池中輪蟲的密度為5～10ind/ml，連續(xù)投喂8～15d，每天投喂3～5次；并從第4d開始，每天在育苗池中加入適量裂壺藻液以維持水色，保持水體中裂壺藻的濃度為104～105cell/ml；
第12d開始投喂經(jīng)裂壺藻強(qiáng)化培育的豐年蟲，育苗池中豐年蟲的密度為3～5ind/ml，連續(xù)投喂3～6d，每天投喂2～4次；
第15d開始投喂橈足類，育苗池中橈足類密度為1～3ind/ml，橈足類投喂時(shí)間為10～20d，每天投喂4～6次；
第24d開始投喂配合飼料，每天投喂2～4次；日投喂量為育苗池中總魚苗量體重的3％～6％。
進(jìn)一步的，所述捕撈野生或人工養(yǎng)殖的成魚作為親本步驟中，親本雌雄個(gè)體的比例為1:2。
進(jìn)一步的，所述人工授精步驟中，采集棘頭梅童魚的精液的方法為：擦干魚體，擠壓雄魚腹部，同時(shí)用注射器將生殖孔處流出的精液吸入注射器，連續(xù)吸入4～6尾雄魚的精液后，將精液擠入容器中，記錄精液的體積，然后加入10～20倍于精液體積的hank’s液，混合均勻，4℃低溫保存；任選的，采集棘頭梅童魚的卵子的方法為：擦干魚體，輕輕擠壓雌魚腹部，使排出的卵流入容器中，連續(xù)擠出2～3尾雌魚的卵子后，就進(jìn)行人工授精操作。
進(jìn)一步的，所述人工授精步驟中，所述孵化池中有深1士0.2m的干凈海水；任選的，干凈海水是經(jīng)過暗沉淀、砂濾處理的海水。孵化池總深度為1.4～1.6m時(shí)，初始水深1士0.2m比較適宜，方便操作，且不會(huì)導(dǎo)致受精卵因存在無水流區(qū)域而聚集而導(dǎo)致缺氧，能取得良好效果。
進(jìn)一步的，所述人工授精步驟中，所述孵化是指受精卵在水溫23～25℃，鹽度為26～30的條件下微充氣孵化，孵化密度為1～2萬粒/m3；優(yōu)選的，微充氣是指控制水面水花直徑為20cm左右。
進(jìn)一步的，所述魚苗培育步驟中，經(jīng)裂壺藻強(qiáng)化培育的輪蟲和豐年蟲，強(qiáng)化培育時(shí)裂壺藻密度為107cell/ml，強(qiáng)化時(shí)間不少于12h。
進(jìn)一步的，所述魚苗培育步驟中，所述強(qiáng)化的方法為：過濾海水與裂壺藻乳化10min，后倒入用高錳酸鉀消毒的容器中攪拌均勻，用100目篩絹網(wǎng)收集剛孵化的輪蟲或豐年蟲投于容器中，投放密度為300～500ind/ml。過濾海水的標(biāo)準(zhǔn)為gb11607-89漁業(yè)用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。乳化時(shí)過濾海水與裂壺藻的比例為10:1。
進(jìn)一步的，所述魚苗培育步驟中，所述換水為第3～10d每天換水量為池內(nèi)水體量的20％，第11～15d每天換水量為池內(nèi)水體量的30％，之后每天換水量為池內(nèi)水體量的50％。
本發(fā)明用高錳酸鉀溶液處理剛捕撈上來的棘頭梅童魚親魚或成魚是為了殺滅棘頭梅童魚體表攜帶的有害微生物；當(dāng)高錳酸鉀溶液濃度大于0.5ppm時(shí)，棘頭梅童魚的應(yīng)激反應(yīng)更強(qiáng)烈，嚴(yán)重時(shí)會(huì)出現(xiàn)死亡，而小于0.5ppm時(shí)，消毒殺菌的效果會(huì)大大降低；高錳酸鉀放出氧的速度慢，浸泡時(shí)間達(dá)到5min才可以有效殺滅細(xì)菌等有害微生物。
由于棘頭梅童魚雄魚個(gè)體較小，精液量很少，有些雄魚只能擠出幾滴精液，不利于人工授精，本發(fā)明用hank’s液稀釋精液，使其達(dá)到一定的量，便于進(jìn)行人工授精，提高受精率。
在棘頭梅童魚魚苗培育過程中水溫控制為23～25℃能夠取得比較好的效果。當(dāng)溫度高于25℃時(shí)，魚苗畸形率會(huì)明顯提高；而當(dāng)溫度低于23℃時(shí)，魚苗生長(zhǎng)的速度下降，增加了培養(yǎng)周期和育苗成本。
魚苗培育密度小于1萬尾/m3時(shí)，影響到育苗的效率和效益，魚苗培育密度大于2萬尾/m3時(shí)會(huì)對(duì)魚苗造成擁擠脅迫，導(dǎo)致魚苗生長(zhǎng)速度和成活率下降，育苗效果變差。
本發(fā)明魚苗培育步驟中，第3d開始吸污是為了吸掉池底的未孵化的受精卵，配合進(jìn)行排換水，以維持水質(zhì)干凈清潔，保障魚苗健康，同時(shí)也有刺激魚苗開口攝食的作用。
棘頭梅童魚繁殖和生長(zhǎng)的最適鹽度為26～30，在此范圍內(nèi)受精卵孵化率最高，育苗效果最好。
輪蟲和豐年蟲的營(yíng)養(yǎng)尤其是多不飽和脂肪酸的含量不能夠完全滿足棘頭梅童魚仔稚魚生長(zhǎng)發(fā)育的需要，因而需要強(qiáng)化。裂壺藻dha的含量達(dá)到其干物質(zhì)的26％，而小球藻中dha的含量較低，只有5％左右；同樣條件下，用裂壺藻強(qiáng)化輪蟲或鹵蟲比用小球藻強(qiáng)化所需的時(shí)間要短，強(qiáng)化效果更好。由于輪蟲個(gè)體小、數(shù)量大、密度高，需要用濃縮的裂壺藻液強(qiáng)化，才能夠達(dá)到滿意的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化效果。豐年蟲可以用濃縮的、也可用未經(jīng)濃縮的裂壺藻液強(qiáng)化。
在魚苗培育步驟中，強(qiáng)化輪蟲的裂壺藻濃度為107cell/ml，強(qiáng)化時(shí)間不少于12h；強(qiáng)化豐年蟲的裂壺藻液濃度為0.5g/l。因?yàn)榱褖卦宓臐舛鹊陀?07cell/ml時(shí)，輪蟲強(qiáng)化時(shí)間要更長(zhǎng)，強(qiáng)化效果也會(huì)變差；強(qiáng)化時(shí)間小于12h，會(huì)降低輪蟲強(qiáng)化效果，即輪蟲體內(nèi)不飽和脂肪酸的蓄積不能達(dá)到理想值，進(jìn)而影響魚苗生長(zhǎng)發(fā)育。
棘頭梅童魚親本中，一般雌魚的體重為雄魚的1～3倍，而雄魚的精液量較少，如果雄魚太少(例如雌魚:雄魚＝1:1)，將難以保證卵子的受精率。本發(fā)明親本的雌雄比為1:2，保證了卵子充分受精，提高受精率。
棘頭梅童魚的繁殖季節(jié)在4～6月份，5月份捕撈棘頭梅童魚親本為最佳時(shí)間，捕撈過程中盡量帶水操作，保證棘頭梅童魚存活且無損傷。
本發(fā)明在吸污時(shí)出水口用80目篩絹網(wǎng)收集，檢查殘餌、死苗、糞便，以便及時(shí)了解魚苗攝食情況以及健康狀況，作為調(diào)節(jié)水質(zhì)、餌料投喂量的依據(jù)。
本發(fā)明提高了棘頭梅童魚的受精率、孵化率和魚苗成活率，為棘頭梅童魚人工養(yǎng)殖提供足夠的苗種。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下突出優(yōu)點(diǎn)：
1)本發(fā)明技術(shù)方案中通過控制棘頭梅童魚精液的提取及稀釋濃度，精卵混合的比例及授精時(shí)間，顯著提高了受精率、孵化率和育苗成活率；
2)使用裂壺藻作為輪蟲強(qiáng)化劑，比用小球藻強(qiáng)化效果好，大大提高育苗成活率。
具體實(shí)施方式
下面詳細(xì)描述本發(fā)明的實(shí)施例，所述實(shí)施例的示例旨在用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購(gòu)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
實(shí)施例1：用野生棘頭梅童魚的成魚進(jìn)行人工繁育
捕撈野生成魚作為親本：在四月下旬，于福建省寧德市下白石海域，在當(dāng)?shù)貪O民捕魚作業(yè)時(shí)，從底拖網(wǎng)中收集活力好、無損傷、體格健壯、性腺發(fā)育成熟的棘頭梅童魚864尾，運(yùn)至育苗場(chǎng)，用遮陽網(wǎng)遮住活水船船艙，以防強(qiáng)光刺激造成棘頭梅童魚過度應(yīng)激而死亡。將運(yùn)回的棘頭梅童魚用濃度為0.5ppm的高錳酸鉀溶液浸泡5分鐘，然后放入育苗池中，微充氣。
在捕撈上來的棘頭梅童魚中挑選活力好、無損傷、體格健壯、性腺發(fā)育成熟的雌雄個(gè)體作為親本，雌魚挑選標(biāo)準(zhǔn)：腹部飽滿，膨脹，柔軟有彈性，生殖孔淡紅色，微突；雄魚挑選標(biāo)準(zhǔn)：腹部柔軟有彈性，輕壓后腹部，有精液流出，遇水即散，雌雄比為1:2。
人工授精：采用半干法人工授精，取出雄魚，用紙巾將魚體表的水擦拭干凈，輕輕擠壓雄親魚腹部，同時(shí)用1ml的注射器將生殖孔處排出的精液吸入注射器(由于棘頭梅童魚的精液量非常少，幾乎不能擠出一滴完整的精液)，如果精液不理想(量少而又呈透明色)，則重新挑選雄魚，連續(xù)吸入4～6尾雄魚后將精液擠入一次性塑料杯中，記錄精液的體積，然后加入hank’s液，棘頭梅童魚精子與hank’s液的體積比例為1:10～20，輕輕晃動(dòng)塑料杯使二者混合均勻，放入事先準(zhǔn)備好的干冰降溫到4℃低溫的密閉塑料泡沫箱中；取出雌魚，用紙巾將魚體表的水擦拭干凈，輕輕擠壓雌親魚腹部，使排出的卵淌入一次性塑料杯中，由于卵量不多，一般連續(xù)擠出2～3尾的雌魚后，加入經(jīng)過稀釋的精液，精卵的體積比例為1:10～20，輕輕晃動(dòng)塑料杯，使精卵有充分接觸的機(jī)會(huì)，充分混勻后加入干凈海水，沉淀1～2min后，取上浮卵用干凈海水清洗一次，最后放入水泥池內(nèi)微充氣孵化。育苗池周圍光線用遮陽網(wǎng)調(diào)節(jié)至200～500lux，并保持安靜；
所述干凈海水為育苗場(chǎng)內(nèi)經(jīng)過暗沉淀、砂濾的海水，水溫為23～24℃，鹽度為28；
所述hank’s液的配方為：kcl0.4g/l,nacl8.01g/l,cacl20.14g/l,nahco30.35g/l,kh2po40.06g/l,glucose0.34g/l,ph8.0。
魚苗培育：棘頭梅童魚受精卵從20h開始孵出，至30h全部孵化出來，魚苗培育水溫控制在23～25℃之間，魚苗培育密度為1～2萬尾/m3；孵化后第3d開始全池吸污，換水，吸污時(shí)出水口用80目篩絹網(wǎng)收集，檢查殘餌、死苗、糞便，以便及時(shí)了解魚苗攝食情況以及健康狀況，作為調(diào)節(jié)水質(zhì)、餌料投喂量的依據(jù)；換水為第3～10d每天換水量為池內(nèi)水體量的20％，第11～15d每天換水量為池內(nèi)水體量的30％，之后每天換水量為池內(nèi)水體量的50％；孵化后第4d開始投喂經(jīng)濃縮的裂壺藻強(qiáng)化的輪蟲，育苗池中輪蟲密度為5～10ind/ml，每天投喂4～6次，育苗池中自輪蟲開始投喂起，每天加入裂壺藻液以維持水色，保持水質(zhì)穩(wěn)定；第12d開始投喂經(jīng)裂壺藻液強(qiáng)化的豐年蟲，育苗池中豐年蟲密度為3～5ind/ml，每天投喂2～4次；第15d開始投喂橈足類，育苗池中橈足類密度為1～3ind/ml，每天投喂4～6次；第24d開始投喂配合飼料，每天投喂4～6次，日投喂量為育苗池中總魚苗量體重的3％～6％。
至60d時(shí)，魚苗平均全長(zhǎng)2.2cm。總共用693尾棘頭梅童魚親魚采集精卵，進(jìn)行人工授精，受精率達(dá)到74.5％，孵化率達(dá)到86.6％，2.2cm的魚苗成活率達(dá)到58.6％，因此本發(fā)明的技術(shù)方案提高了棘頭梅童魚的受精率、孵化率和魚苗成活率，為棘頭梅童魚全人工繁育奠定基礎(chǔ)，為棘頭梅童魚人工養(yǎng)殖提供足夠的苗種。
盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，可以理解的是，上述實(shí)施例是示例性的，不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的原理和宗旨的情況下在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對(duì)上述實(shí)施例進(jìn)行變化、修改、替換和變型。