本發(fā)明屬于果樹(shù)與林木育種領(lǐng)域，具體涉及一種薄殼山核桃嫩枝扦插方法。

背景技術(shù)：

薄殼山核桃為胡桃科山核桃屬落葉喬木，又稱長(zhǎng)山核桃、美國(guó)山核桃。原產(chǎn)地為美國(guó)或墨西哥，我國(guó)將之作為一種多用途樹(shù)種引進(jìn)。扦插是較普遍的一種植物無(wú)性繁殖方法，廣泛應(yīng)用于各類苗木的繁殖中。薄殼山核桃扦插繁殖比較困難，我國(guó)在這方面的研究報(bào)道相對(duì)較少，扦插方式多使用傳統(tǒng)硬枝扦插的方法。研究發(fā)現(xiàn)，植物插穗經(jīng)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理后，能夠促進(jìn)扦插生根。專利申請(qǐng)?zhí)枮?01310247748.7，發(fā)明名稱為“一種薄殼山核桃硬枝扦插育苗方法”的發(fā)明專利，其技術(shù)方案是，選取一年生薄殼山核桃實(shí)生苗枝條長(zhǎng)度為12cm的中段和下段枝條，將剪好的枝條放在濃度為500-900mg/l的iba溶液或濃度為600-1200mg/l的naa溶液中3-5h，然后將枝條形態(tài)下端插到基質(zhì)中，基質(zhì)底部鋪電熱線，使基質(zhì)底部與外界溫度的溫差控制在15℃左右，含水量控制在30%左右。以上方法雖然在一定程度上也能解決薄殼山核桃扦插育苗的問(wèn)題，但該方法采用傳統(tǒng)的硬枝扦插方法，枝條處理時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)培養(yǎng)環(huán)境的要求復(fù)雜，扦插步驟比較繁瑣。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供“一種薄殼山核桃嫩枝扦插方法”，本發(fā)明通過(guò)采用嫩枝扦插方法，經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)激素iba溶液處理后的枝條，其發(fā)芽率可達(dá)88%，芽長(zhǎng)可超過(guò)15cm,滿足并適于大規(guī)模推廣栽培。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：

一種薄殼山核桃嫩枝扦插方法，包括如下步驟：6月下旬進(jìn)行薄殼山核桃嫩枝扦插，

（1）枝條準(zhǔn)備：

取2年生薄殼山核桃實(shí)生苗上半木質(zhì)化枝條，修剪枝條長(zhǎng)度為8-12cm，剪口上平下斜，上切口離頂部芽1-2cm，下切口離底部芽1cm以內(nèi)，留1-2葉，保留頂芽，修剪后的插穗基部保濕備用；

（2）基質(zhì)準(zhǔn)備：

將珍珠巖和蛭石按1:1的質(zhì)量比混合作為基質(zhì)，用濃度為0.3%的高錳酸鉀溶液對(duì)基質(zhì)進(jìn)行澆灌消毒；

（3）枝條處理：

將修剪后枝條的插穗基部用濃度為50-300mg/l的iba溶液浸泡1h后備用；

（4）扦插：

將經(jīng)過(guò)步驟（3）處理過(guò)的枝條的插穗基部插到步驟（2）中的基質(zhì)中；

（5）扦插后管理：

采用全自動(dòng)噴霧裝置對(duì)基質(zhì)噴水，間隔30min噴霧1次，每次持續(xù)20s，生根后減少噴霧次數(shù)，保持基質(zhì)濕潤(rùn)，見(jiàn)干見(jiàn)濕。

進(jìn)一步的，枝條處理包括如下步驟：將修剪后枝條的插穗基部用濃度為100-250mg/l的iba溶液浸泡1h后備用。

進(jìn)一步的，枝條處理包括如下步驟：將修剪后枝條的插穗基部用濃度為150-200mg/l的iba溶液浸泡1h后備用。

進(jìn)一步的，枝條處理包括如下步驟：將修剪后枝條的插穗基部用濃度為200mg/l的iba溶液浸泡1h后備用。

本發(fā)明的有益效果：

1、本發(fā)明采用嫩枝扦插的方法繁育，在薄殼山核桃生長(zhǎng)季扦插，樹(shù)體生長(zhǎng)旺盛，插穗生理活性高，可隨采隨接，扦插成活率高；同時(shí)省去了傳統(tǒng)硬枝扦插插穗需要貯存的過(guò)程，省工省力。

2、本發(fā)明采用低濃度iba溶液浸泡嫩枝，有效縮短了浸泡時(shí)間，通過(guò)保證扦插基部中超氧化物歧化酶、吲哚乙酸氧化酶、過(guò)氧化物酶的積累，從而為不定根系的生長(zhǎng)提供保障，促進(jìn)薄殼山核桃嫩枝扦插苗的生根，大大提高了扦插后的生根率。

3、本發(fā)明采用的扦插方法步驟簡(jiǎn)單，對(duì)扦插后的管理環(huán)境要求低，適合推廣普及。

附圖說(shuō)明

圖1為iba濃度對(duì)扦插生根的影響示意圖；

圖2為扦插生根過(guò)程中sod活性變化圖；

圖3為扦插生根過(guò)程中pod活性變化圖；

圖4為扦插生根過(guò)程中iaao活性變化圖。

具體實(shí)施方式

一種薄殼山核桃嫩枝扦插方法，包括如下步驟：6月下旬進(jìn)行薄殼山核桃嫩枝扦插，

（1）枝條準(zhǔn)備：

取2年生薄殼山核桃實(shí)生苗上生長(zhǎng)健壯、沒(méi)有病蟲(chóng)危害、生長(zhǎng)基本一致的半木質(zhì)化枝條，修剪枝條長(zhǎng)度為8-12cm，剪口上平下斜，上切口離頂部芽1-2cm，下切口離底部芽1cm以內(nèi)，留1-2葉，保留頂芽，修剪后的插穗基部保濕備用；

（2）基質(zhì)準(zhǔn)備：

將珍珠巖和蛭石按1:1的質(zhì)量比混合作為基質(zhì)，用濃度為0.3%的高錳酸鉀溶液對(duì)基質(zhì)進(jìn)行澆灌消毒；

（3）枝條處理：

分別配置濃度為50、100、150、200、250、300mg/l的iba溶液，將修剪后的枝條分別放入其中浸泡1h，每個(gè)濃度中浸泡60根作為一組，各濃度重復(fù)3組，同時(shí)設(shè)3組未浸泡iba溶液（即清水）的枝條作為對(duì)照組；

（4）扦插：

將步驟（3）中的枝條的插穗基部插到步驟（2）中的基質(zhì)中，

（5）扦插后管理：

采用全自動(dòng)噴霧裝置對(duì)基質(zhì)噴水，間隔30min噴霧1次，每次持續(xù)20s，生根后減少噴霧次數(shù)，保持基質(zhì)濕潤(rùn)，見(jiàn)干見(jiàn)濕；

記錄扦插42天后該批枝條的生根率、平均生根數(shù)和平均生根長(zhǎng)，制成圖1。如圖1所示，采用iba溶液浸泡過(guò)的枝條，其生根率、平均生根數(shù)、平均生根長(zhǎng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于清水對(duì)照組，溶液濃度在50-200mg/l期間，其生根率、平均生根數(shù)、平均生根長(zhǎng)穩(wěn)步增長(zhǎng)，在200mg/l達(dá)到最高值，在濃度超過(guò)200mg/l后，生根率、平均生根數(shù)、平均生根長(zhǎng)逐步下降。

將浸泡iba溶液濃度為200mg/l的枝條和清水對(duì)照組的枝條扦插前進(jìn)行采樣，扦插后每隔7天進(jìn)行一次采樣，共計(jì)采樣7次，采樣后及時(shí)放入零下60℃冰柜中保存?zhèn)溆谩?/p>

測(cè)定時(shí)將插穗韌皮部和木質(zhì)部分離，取基部2cm處的韌皮部切下來(lái)并剪碎待測(cè)。

通過(guò)研究外源iba對(duì)薄殼山核桃嫩枝扦插及其生根過(guò)程中相關(guān)酶活性的調(diào)控效應(yīng)，從而深入了解薄殼山核桃嫩枝扦插生根的有關(guān)生理調(diào)控機(jī)制。

采用nbt光化還原法測(cè)定超氧化物歧化酶（sod）的活性，薄殼山核桃嫩枝扦插生根過(guò)程中，超氧化物歧化酶（sod）活性動(dòng)態(tài)變化如圖2所示。清水對(duì)照插穗中sod酶活性隨著扦插后天數(shù)的推移呈現(xiàn)持續(xù)下降的趨勢(shì)。用200mg/l的iba浸泡處理過(guò)的插穗中sod酶活性先逐步上升，在21天達(dá)到峰值，之后逐漸下降。iba浸泡處理過(guò)的插穗中sod酶活性要明顯高于清水對(duì)照，并且在扦插21天之后，經(jīng)過(guò)iba浸泡處理的插穗相比清水對(duì)照，sod活性水平仍然處于較高水平，表明iba處理后可以保證插穗中sod積累，活性升高，從而減弱自由基對(duì)植物細(xì)胞的傷害，延緩插穗老化，為其不定根形成提供了保障，一定程度上促進(jìn)了薄殼山核桃嫩枝扦插苗的生根。

采用愈創(chuàng)木酚比色法測(cè)定過(guò)氧化物酶（pod）的活性，薄殼山核桃嫩枝扦插生根過(guò)程中，過(guò)氧化物酶（pod）活性變化趨勢(shì)如圖3所示。清水對(duì)照插穗中pod活性先緩慢下降，21天之后逐步上升，但變化幅度較小。而用200mg/l的iba浸泡處理過(guò)的插穗中pod活性大幅上升，28天達(dá)到峰值，之后有所下降，但一直處于較高的水平，表明iba浸泡處理能夠明顯的提高插穗pod活性，插穗基部細(xì)胞活躍，有利于插穗基部的愈傷組織形成，從而促進(jìn)不定根根系的生長(zhǎng)。

采用二氯酚比色法測(cè)定吲哚乙酸氧化酶（iaao）的活性，薄殼山核桃嫩枝扦插生根過(guò)程中，吲哚乙酸氧化酶（iaao）活性變化趨勢(shì)如圖4所示。清水處理插穗中iaao活性呈上升-下降-上升趨勢(shì)，iba處理后的薄殼山核桃插穗中iaao活性在扦插后呈下降趨勢(shì)，之后略有回升，總體而言活性水平較低?？赡苁莍ba經(jīng)切開(kāi)進(jìn)入插穗組織內(nèi)部，快速轉(zhuǎn)化成iaa，從而抑制了iaao活性，這對(duì)于不定根的生成是有利的，后期大量不定根形成后，iaa合成減弱，致使iaao活性又略有上升。

綜上所述，經(jīng)過(guò)低濃度iba浸泡處理過(guò)的薄殼山核桃插穗，其處理時(shí)間段，生根率、平均生根數(shù)和平均生根長(zhǎng)都比對(duì)照高，其效果具體表現(xiàn)為200mg/l>250mg/l>150mg/l>300mg/l>100mg/l>50mg/l>清水，因此，低濃度iba溶液大大提高了薄殼山核桃嫩枝的扦插成活率，200mg/l的iba浸泡處理后的插條生根效果最佳，生根率達(dá)88.26%，平均生根數(shù)為6.22條，平均生根長(zhǎng)15.73cm，適合大規(guī)模推廣栽培。