本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)害蟲防治領(lǐng)域，尤其涉及薏米殼和薏米種皮提取物在抑制全齒復(fù)活線蟲中應(yīng)用及其組合物和制備方法。
背景技術(shù)：
：近年來，由于連作大棚蔬菜面積的不斷擴(kuò)大，以及用藥不科學(xué)，致使全齒復(fù)活線蟲發(fā)展蔓延速度較快，抗性增強(qiáng)。作物死苗率不斷增加，從而造成作物嚴(yán)重減產(chǎn)，品質(zhì)降低，已經(jīng)嚴(yán)重影響了農(nóng)作物生產(chǎn)。以黃瓜為例，根結(jié)全齒復(fù)活線蟲病發(fā)生棚室死苗率一般在20～50％，最嚴(yán)重的毀棚絕收。根結(jié)全齒復(fù)活線蟲發(fā)生的原因全齒復(fù)活線蟲大量發(fā)生原因：大量使用劇毒農(nóng)藥灌根，不但破壞了作物根系，而且還破壞了土壤中根系有益微生物的生存環(huán)境，打破土壤平衡，造成惡性循環(huán)，致使全齒復(fù)活線蟲越來越嚴(yán)重。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明提供了薏米殼和薏米種皮提取物的在抑制全齒復(fù)活線蟲中的應(yīng)用，同時(shí)提出了一種抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物及其制備方法。本發(fā)明采用的技術(shù)手段如下：薏米殼和薏米種皮提取物在抑制全齒復(fù)活線蟲中的應(yīng)用。進(jìn)一步的，應(yīng)用于一種抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物。一種抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物，包括以下重量份的原料：薏米殼15～20份和薏米種皮10～15份。進(jìn)一步的，所述抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物，包括以下重量份的原料：薏米殼18份和薏米種皮13份。所述的抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物的制備方法，包括以下步驟：S1、粉碎：將薏米殼、薏米種皮粉碎，粉末過20～100目篩；S2、浸泡：將薏米殼、薏米種皮放入3～8倍重量的有機(jī)酸溶液中浸泡，浸泡溫度為30～40度，浸泡20～24小時(shí)；S3、回流提取：薏米種皮用丙酮回流提取2～4次，每次提取3～4小時(shí)，過濾，合并薏米種皮濾液；S4、萃?。恨裁讱び萌燃淄檩腿?～3次，萃取溫度為40～50℃，每次提取2～3小時(shí)，過濾，合并薏米殼濾液；S5、調(diào)配：將薏米種皮濾液和薏米殼濾液放入攪拌鍋內(nèi)，攪拌速度為80～100r/min，攪拌30～40分鐘，得薏米殼及薏米種皮的混合液；S6、濃縮：將薏米殼及薏米種皮的混合液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮并收集濃縮液；S7、二次提?。簩饪s液溶解于鹽酸溶液中，用石油醚萃取2～4次，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即得薏米殼及薏米種皮提取物。進(jìn)一步的，所述步驟S2中，所述有機(jī)酸溶液為8～10g/L醋酸溶液。進(jìn)一步的，所述步驟S2中，浸泡溫度為35度，浸泡20小時(shí)。進(jìn)一步的，所述步驟S3中，薏米種皮用丙酮回流提取3次，丙酮的每次加入量為10倍量，每次提取3小時(shí)，過濾，合并薏米種皮濾液。進(jìn)一步的，所述步驟S4中，薏米殼用三氯甲烷萃取3次，萃取溫度為45℃，三氯甲烷的每次加入量為8倍量，每次提取2小時(shí)，過濾，合并薏米殼濾液。進(jìn)一步的，所述步驟S7中，所述鹽酸溶液濃度為1～2mol/L。有益效果：本發(fā)明的薏米殼和薏米種皮提取物對全齒復(fù)活線蟲具有較高的殺傷作用，24小時(shí)線蟲死亡率達(dá)100％；薏米殼和薏米種皮提取物能破壞全齒復(fù)活線蟲卵卵殼，對蟲卵的正常孵化有較強(qiáng)的抑制作用。本發(fā)明提供的薏米殼和薏米種皮提取物，能夠抑制土壤中的全齒復(fù)活線蟲的活性，明顯減少土壤中的全齒復(fù)活線蟲數(shù)量，改善土壤質(zhì)量，較大提高植物的產(chǎn)量。本發(fā)明的薏米殼和薏米種皮提取物能夠長期放置后，且保留強(qiáng)的殺蟲效果。且經(jīng)試驗(yàn)可知，本發(fā)明提供的薏米殼和薏米種皮提取物可在抑制全齒復(fù)活線蟲中的應(yīng)用，可應(yīng)用于一種抑制全齒復(fù)活線蟲活性的組合物。具體實(shí)施方式以下對本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)施例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1一種抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物，包括以下重量份的原料：薏米殼15份和薏米種皮10份。實(shí)施例2一種抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物，包括以下重量份的原料：薏米殼20份和薏米種皮15份。實(shí)施例3一種抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物，包括以下重量份的原料：薏米殼18份和薏米種皮13份。上述實(shí)施例1～3所述的抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物的制備方法，包括以下步驟：所述的抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物的制備方法，包括以下步驟：S1、粉碎：將薏米殼、薏米種皮粉碎，粉末過50目篩；S2、浸泡：將薏米殼、薏米種皮粉末放入5倍重量的10g/L醋酸溶液中浸泡，浸泡溫度為35度，浸泡20小時(shí)。S3、回流提?。簩⒉襟ES2薏米種皮浸泡液用丙酮回流提取3次，每次提取3小時(shí)，過濾，合并薏米種皮濾液；S4、萃?。簩⒉襟ES2薏米殼浸泡液用三氯甲烷萃取3次，萃取溫度為45℃，每次萃取2小時(shí)，過濾，合并薏米殼濾液；S5、調(diào)配：將薏米種皮濾液和薏米殼濾液放入攪拌鍋內(nèi)，攪拌速度為90r/min，攪拌35分鐘，得薏米殼及薏米種皮的混合液；S6、濃縮：將薏米殼及薏米種皮的混合液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮并收集濃縮液；S7、二次提?。簩饪s液溶解于1mol/L鹽酸溶液中，用石油醚萃取3次，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即得薏米殼及薏米種皮提取物。實(shí)施例4一種抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物，包括以下重量份的原料：薏米殼18份和薏米種皮13份。S1、粉碎：將薏米殼、薏米種皮粉碎，粉末過20目篩；S2、浸泡：將薏米殼、薏米種皮粉末放入8倍重量的8g/L醋酸溶液中浸泡，浸泡溫度為30度，浸泡24小時(shí)。S3、回流提取：將步驟S2薏米種皮浸泡液用丙酮回流提取2次，每次提取4小時(shí)，過濾，合并薏米種皮濾液；S4、萃?。簩⒉襟ES2薏米殼浸泡液用三氯甲烷萃取3次，萃取溫度為40℃，每次萃取3小時(shí)，過濾，合并薏米殼濾液；S5、調(diào)配：將薏米種皮濾液和薏米殼濾液放入攪拌鍋內(nèi)，攪拌速度為80r/min，攪拌30分鐘，得薏米殼及薏米種皮的混合液；S6、濃縮：將薏米殼及薏米種皮的混合液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮并收集濃縮液；S7、二次提?。簩饪s液溶解于1mol/L鹽酸溶液中，用石油醚萃取2次，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即得薏米殼及薏米種皮提取物。實(shí)施例5一種抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物，包括以下重量份的原料：薏米殼18份和薏米種皮13份。所述的抑制全齒復(fù)活線蟲的組合物的制備方法，包括以下步驟：S1、粉碎：將薏米殼、薏米種皮粉碎，粉末過100目篩；S2、浸泡：將薏米殼、薏米種皮粉末放入3倍重量的10g/L醋酸溶液中浸泡，浸泡溫度為40度，浸泡22小時(shí)。S3、回流提?。簩⒉襟ES2薏米種皮浸泡液用丙酮回流提取4次，每次提取3小時(shí)，過濾，合并薏米種皮濾液；S4、萃取：將步驟S2薏米殼浸泡液用三氯甲烷萃取2次，萃取溫度為50℃，每次萃取2小時(shí)，過濾，合并薏米殼濾液；S5、調(diào)配：將薏米種皮濾液和薏米殼濾液放入攪拌鍋內(nèi)，攪拌速度為100r/min，攪拌40分鐘，得薏米殼及薏米種皮的混合液；S6、濃縮：將薏米殼及薏米種皮的混合液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮并收集濃縮液；S7、二次提取：將濃縮液溶解于2mol/L鹽酸溶液中，用石油醚萃取4次，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即得薏米殼及薏米種皮提取物。對比例1對比例1與實(shí)施例3的區(qū)別在于，所述步驟S1粉碎后未經(jīng)浸泡，直接回流提取或者萃取。對比例2對比例1與實(shí)施例3的區(qū)別在于，所述步驟S5調(diào)配后未經(jīng)濃縮，直接進(jìn)行二次提取。一、薏米殼和薏米種皮提取物抑制全齒復(fù)活線蟲活性試驗(yàn)1、制備全齒復(fù)活線蟲：將全齒復(fù)活線蟲接種于固體培養(yǎng)基上，經(jīng)活化處理后保存于4℃冰箱備用；將所需線蟲用貝曼漏斗法洗出，置于5ml離心管內(nèi)，加5ml無菌水洗滌，瞬時(shí)離心，棄上清，重復(fù)5次得到潔凈供試線蟲，用無菌水將線蟲稀釋為含量為15條/μl的線蟲懸浮液；2、制備薏米殼和薏米種皮提取物的水溶液：將實(shí)施例1～6與對比例1～2的薏米殼和薏米種皮提取物按10g/L溶解于水；3、殺全齒復(fù)活線蟲試驗(yàn)：選擇無污染線蟲的土壤，分為7份土壤，每份土壤1m3，接入全齒復(fù)活線蟲約500條，分別取實(shí)施例1～5和對比例1～2相應(yīng)1L薏米殼和薏米種皮提取物的水溶液均勻?yàn)⑷敫鞣?m3土壤中；12h觀察一次，連續(xù)觀察24h，每次隨機(jī)選取100條線蟲計(jì)算死亡率。4、薏米殼和薏米種皮提取物對全齒復(fù)活線蟲的殺傷效果見表1：上述試驗(yàn)表明，24小時(shí)實(shí)施例1～5的死亡率都達(dá)100％，表明本發(fā)明的薏米殼和薏米種皮提取物對全齒復(fù)活線蟲具有較強(qiáng)的抑制作用，殺傷效果佳，薏米殼和薏米種皮提取物能破壞全齒復(fù)活線蟲卵卵殼，對蟲卵的正常孵化有較強(qiáng)的抑制作用，其中，實(shí)施例3制得薏米殼和薏米種皮提取物對全齒復(fù)活線蟲的抑制效果最佳。當(dāng)殺蟲時(shí)間相同，實(shí)施例3的死亡率大大高于對比例1～2，說明實(shí)施例3的抑制效果明顯優(yōu)于對比例1～2，表明浸泡和濃縮這兩個(gè)步驟對薏米殼和薏米種皮提取物的抑制效果有明顯的提升，浸泡使得薏米殼和薏米種皮提取物的抑制線蟲的活性成分更好溶出，濃縮使得薏米殼和薏米種皮提取物中的的抑制線蟲的活性成分更好融合而起到更佳的抑制全齒復(fù)活線蟲的作用。二、薏米殼和薏米種皮提取物在田間試驗(yàn)選取9塊同樣面積大小、土壤等生長環(huán)境相同、生長狀況相同的花生種植地作為實(shí)驗(yàn)田，每塊為1畝，第1～5塊農(nóng)田分別使用本發(fā)明實(shí)施例1～5所得的薏米殼和薏米種皮提取物，第6～7塊農(nóng)田使用對比例1～2所得的薏米殼和薏米種皮提取物，第8塊農(nóng)田使用傳統(tǒng)殺蟲劑，第9塊農(nóng)田不使用任何殺蟲劑，其他管理均一致，一年后觀察花生的實(shí)驗(yàn)。結(jié)果見下表2：項(xiàng)目產(chǎn)量(Kg/畝)花生根際每100g干土全齒復(fù)活線蟲數(shù)量(條)實(shí)施例132813實(shí)施例233115實(shí)施例333410實(shí)施例431814實(shí)施例532113對比例123225對比例222620傳統(tǒng)殺蟲劑18632空白試驗(yàn)15453從表中結(jié)果表明，不使用任何殺蟲劑，全齒復(fù)活線蟲數(shù)量多、產(chǎn)量低；使用傳統(tǒng)殺蟲劑，全齒復(fù)活線蟲數(shù)量也較多、產(chǎn)量也較低；相對于對比例1～2，實(shí)施例1～5殺蟲后，花生的產(chǎn)量有較高的提升，花生根際每100g干土全齒復(fù)活線蟲數(shù)量有明顯減少，其中，實(shí)施例3的線蟲數(shù)量最少、產(chǎn)量最高，說明實(shí)施例3制得薏米殼和薏米種皮提取物對土壤中全齒復(fù)活線蟲的抑制效果最佳。表明本發(fā)明提供的薏米殼和薏米種皮提取物，對土壤中的全齒復(fù)活線蟲有明顯的抑制作用，顯著改善土壤的質(zhì)量。將實(shí)施例1～3的薏米殼和薏米種皮提取物放置于倉庫中，室溫20～28℃、70％RH濕度條件下存放12個(gè)月，取出后，重復(fù)上述的試驗(yàn)，結(jié)果如下表3：項(xiàng)目產(chǎn)量(Kg/畝)花生根際每100g干土全齒復(fù)活線蟲數(shù)量(條)實(shí)施例128813實(shí)施例228116實(shí)施例328411空白試驗(yàn)15656從表中可以看出，實(shí)施例1和2中的薏米殼和薏米種皮提取物在長期放置后，花生產(chǎn)量稍有下降，但殺蟲效果還是依舊。上述試驗(yàn)表明，薏米殼和薏米種皮提取物可在抑制全齒復(fù)活線蟲中的應(yīng)用，亦可應(yīng)用于一種抑制全齒復(fù)活線蟲活性的組合物。上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明保護(hù)的范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3