本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,尤其是一種天麻的組培快繁方法。
背景技術(shù):
天麻,學名為Gastrodia elata Bl.,又名赤箭、獨搖芝、離母、合離草、神草、鬼督郵、木浦、明天麻、定風草、白龍皮等,是蘭科天麻屬多年生草本植物。根狀莖肥厚,無綠葉,蒴果倒卵狀橢圓形,常以塊莖或種子繁殖,其根莖入藥用以治療頭暈目眩、肢體麻木、小兒驚風等癥,是名貴中藥,與瓊珍靈芝合用治療頭痛失眠。
天麻的繁殖方式主要為塊莖繁殖、種子繁殖,生產(chǎn)上一般采用塊莖繁殖。
但塊莖繁殖效率很低,難以滿足天麻植物規(guī)?;a(chǎn)的需求。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是提供一種天麻的組培快繁方法,這種方法可以解決繁殖率低的問題。
為了解決上述問題,本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
這種天麻的組培快繁方法,其特征在于包括以下步驟:
A、配置培養(yǎng)基:包括愈傷組織誘導培養(yǎng)基、分化培養(yǎng)基、生根壯苗培養(yǎng)基;
愈傷組織誘導培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.3毫克/升~0.5毫克/升2,4-二氯苯氧醋酸、5克/升~10克/升香蕉汁、1克/升~2克/升殼聚糖;
分化培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.25毫克/升~0.3毫克/升赤霉素、0.1毫克/升~0.2毫克/升萘乙酸、2克/升~5克/升活性炭、3克/升~6克/升黃瓜汁;
生根壯苗培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.3毫克/升~0.5毫克/升萘乙酸、0.1毫克/升~0.3毫克/升天冬氨酸、0.3毫克/升~0.45毫克/升半胱氨酸0.2毫克/升~0.25毫克/升檸檬酸;
B、選取天麻腋芽作為外植體,將所述腋芽浸泡于濃度為1%的次氯酸鈉溶液中浸泡10分鐘~20分鐘,用無菌水清洗3次~5次;
C、接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基,控制光照為1600LUX~1900LUX,溫度為23℃~25℃,培養(yǎng)至產(chǎn)生愈傷組織;
D、接種于分化培養(yǎng)基,控制光照為1700LUX~1900LUX,溫度為22℃~26℃,培養(yǎng)至產(chǎn)生原球莖;
E、接種于生根壯苗培養(yǎng)基,控制光照為1500LUX~1780LUX,溫度為22℃~26℃,培養(yǎng)至長出3~5片葉子,并且苗高3厘米~5厘米;
F、煉苗培養(yǎng),移栽入大田。
由于采用了上述技術(shù)方案,本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下有益效果:
本發(fā)明以腋芽作為外植體進行快速繁殖,培養(yǎng)周期短,生根壯苗率高達92.5%;可大規(guī)模繁殖天麻苗,具有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳述:
實施例1
本實施例天麻的組培快繁方法包括以下步驟:
選取天麻腋芽作為外植體,將所述腋芽浸泡于濃度為1%的次氯酸鈉溶液中浸泡10分鐘,用無菌水清洗4次;接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基,控制光照為1600LUX~1650LUX,溫度為23℃~25℃,培養(yǎng)至產(chǎn)生愈傷組織;接種于分化培養(yǎng)基,控制光照為1790LUX~1830LUX,溫度為22℃~26℃,培養(yǎng)至產(chǎn)生原球莖;接種于生根壯苗培養(yǎng)基,控制光照為1500LUX~1523LUX,溫度為22℃~26℃,培養(yǎng)至長出3片葉子,并且苗高4厘米;煉苗培養(yǎng),移栽入大田。
愈傷組織誘導培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.3毫克/升2,4-二氯苯氧醋酸、7.5克/升香蕉汁、1克/升殼聚糖;
分化培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.25毫克/升赤霉素、0.1毫克/升萘乙酸、4克/升活性炭、3克/升黃瓜汁;
生根壯苗培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.5毫克/升萘乙酸、0.1毫克/升天冬氨酸、0.45毫克/升半胱氨酸、0.23毫克/升檸檬酸。
采用本實施例方法培養(yǎng)天麻,生根壯苗率為91.8%。
實施例2
本實施例天麻的組培快繁方法包括以下步驟:
選取天麻腋芽作為外植體,將所述腋芽浸泡于濃度為1%的次氯酸鈉溶液中浸泡15分鐘,用無菌水清洗5次;接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基,控制光照為1780LUX~1815LUX,溫度為23℃~25℃,培養(yǎng)至產(chǎn)生愈傷組織;接種于分化培養(yǎng)基,控制光照為1700LUX~1715LUX,溫度為22℃~26℃,培養(yǎng)至產(chǎn)生原球莖;接種于生根壯苗培養(yǎng)基,控制光照為1765LUX~1780LUX,溫度為22℃~26℃,培養(yǎng)至長出4片葉子,并且苗高5厘米;煉苗培養(yǎng),移栽入大田。
愈傷組織誘導培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.4毫克/升2,4-二氯苯氧醋酸、10克/升香蕉汁、1.5克/升殼聚糖;
分化培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.3毫克/升赤霉素、0.15毫克/升萘乙酸、4克/升活性炭、5克/升黃瓜汁;
生根壯苗培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.3毫克/升萘乙酸、0.2毫克/升天冬氨酸、0.4毫克/升半胱氨酸、0.25毫克/升檸檬酸。
采用本實施例方法培養(yǎng)天麻,生根壯苗率為92.5%。
實施例3
本實施例天麻的組培快繁方法包括以下步驟:
選取天麻腋芽作為外植體,將所述腋芽浸泡于濃度為1%的次氯酸鈉溶液中浸泡20分鐘,用無菌水清洗3次;接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基,控制光照為1860LUX~1900LUX,溫度為23℃~25℃,培養(yǎng)至產(chǎn)生愈傷組織;接種于分化培養(yǎng)基,控制光照為1870LUX~1900LUX,溫度為22℃~26℃,培養(yǎng)至產(chǎn)生原球莖;接種于生根壯苗培養(yǎng)基,控制光照為1500LUX~1520LUX,溫度為22℃~26℃,培養(yǎng)至長出5片葉子,并且苗高3厘米;煉苗培養(yǎng),移栽入大田。
愈傷組織誘導培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.5毫克/升2,4-二氯苯氧醋酸、5克/升香蕉汁、2克/升殼聚糖;
分化培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.25毫克/升赤霉素、0.2毫克/升萘乙酸、2克/升活性炭、6克/升黃瓜汁;
生根壯苗培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加0.4毫克/升萘乙酸、0.3毫克/升天冬氨酸、0.3毫克/升半胱氨酸、0.2毫克/升檸檬酸。
采用本實施例方法培養(yǎng)天麻,生根壯苗率為92.2%。