本發(fā)明涉及一種8×9蘋(píng)果多品種高接獲得雜交種子的方法，尤其涉及一種蘋(píng)果單株多品種高接自然雜交培育實(shí)生育種的雜交后代方法，屬于果樹(shù)育種領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

隨著我國(guó)蘋(píng)果栽培面積迅速擴(kuò)大，市場(chǎng)上對(duì)蘋(píng)果的品質(zhì)要求顯著提高，無(wú)論是出于消費(fèi)者還是栽培者的角度，蘋(píng)果品種創(chuàng)新顯得尤為重要。

目前蘋(píng)果育種的方法有很多，雜交育種雖然古老依然占有統(tǒng)治地位，如目前我國(guó)廣為栽培的蘋(píng)果主栽品種‘富士’、‘嘎啦’、‘秦冠’、‘華冠’、‘喬納金’，歐美廣泛栽培的主栽品種‘布瑞本’、‘粉紅佳人’、‘密脆’、‘太平洋玫瑰’等都是通過(guò)人工雜交手段獲得的，這些雜交后選育出的蘋(píng)果品種，普遍表現(xiàn)出前所未有的優(yōu)良品質(zhì)，受到市場(chǎng)追捧，占目前栽培面積的70％以上。因此在目前階段，通過(guò)雜交手段選育蘋(píng)果新品種依然具有極大的現(xiàn)實(shí)意義。

但是傳統(tǒng)的人工雜交實(shí)生方法，獲得雜交種子，是十分瑣碎的艱辛的工作。人工雜交需要耗費(fèi)大量的人力進(jìn)行人工授粉，包括采粉、去雄、雜交、套袋等種種程序，費(fèi)時(shí)又費(fèi)力。僅僅雜交一個(gè)環(huán)節(jié)，一個(gè)熟練的操作者，一天大約可以授粉300朵，按照目前的育種規(guī)律，每個(gè)組合至少應(yīng)該取得1000粒上的種子才能捕獲足夠變異，以座果率30％計(jì)算，每個(gè)果實(shí)獲得5粒正常種子計(jì)算，需要工作兩天。由于花期有限，往往一個(gè)生長(zhǎng)季只能完成2-3個(gè)組合的雜交工作。工作環(huán)境惡劣，工作量大，生產(chǎn)成本不斷增加，制約了大規(guī)模雜交育種的進(jìn)行，這也導(dǎo)致了我國(guó)育種效率不高、突出品種較少的現(xiàn)狀。急需一種節(jié)約人力物力、組合多樣、變異豐富的雜交技術(shù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有生產(chǎn)中蘋(píng)果品種人工雜交繁瑣的不足，提供一種方便操作、變異類型多、易于選擇的8×9蘋(píng)果多品種高接獲得雜交種子的方法。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下方案：

1)選取3-5年生長(zhǎng)勢(shì)健壯的蘋(píng)果樹(shù)作為母株，所述母株品種選用龍富短枝；

2)在蘋(píng)果母株上同時(shí)分別多頭高接金帥、美國(guó)8號(hào)、蜜脆(Honey crisp)、秦冠、首紅(Red chief)、紅愛(ài)(red love)、粉紅佳人(pink lady)和龍紅蜜八個(gè)品種作為母本；嫁接時(shí)，將首紅嫁接在母株頂端高處，其余八個(gè)品種均勻嫁接在母株四周，每株母株上嫁接20-30個(gè)位點(diǎn)，每個(gè)品種嫁接2-3頭，每個(gè)品種之間互不臨接；嫁接完成后對(duì)未嫁接的枝條全部重剪，使之和嫁接后的枝條一同生長(zhǎng)；期間按常規(guī)管理；一般2年即可恢復(fù)樹(shù)冠，3年完全可以豐產(chǎn)結(jié)實(shí)；

3)結(jié)果后，根據(jù)母本分類采摘果實(shí)，得到多品種雜交蘋(píng)果種子；第二年春天層積播種，便于下一年進(jìn)一步播種觀察；

4)步驟3)中播種的種子出苗結(jié)果后，采用常規(guī)實(shí)生育種程序，發(fā)現(xiàn)豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的優(yōu)系以后，取嫩葉或新梢通過(guò)SSR或AFLP技術(shù)鑒定其父本來(lái)源，用做進(jìn)一步研究的優(yōu)系。

在本發(fā)明中，所選用的龍富為短枝蘋(píng)果芽變新品種，是山東農(nóng)業(yè)大學(xué)選育的性狀優(yōu)良品種，具有樹(shù)冠比較緊湊，更新能力強(qiáng)，不易早衰，葉片肥大而厚，同化能力強(qiáng)，成花容易，豐產(chǎn)性和穩(wěn)定性極好，連續(xù)結(jié)果能力強(qiáng)，果實(shí)整齊度高，著色速度快，優(yōu)質(zhì)果多，香味濃厚，口感品質(zhì)優(yōu)良等優(yōu)點(diǎn)，其綜合性狀明顯優(yōu)于目前栽培的煙富6等晚熟蘋(píng)果品種，發(fā)展前景廣闊。它既能體現(xiàn)富士傳統(tǒng)的優(yōu)良口感，又具有緊湊的樹(shù)形何易于成花的優(yōu)良特性，所以選擇它作為嫁接母體；金帥后代容易出現(xiàn)多倍體，豐產(chǎn)性能好；首紅具有濃郁的香氣，是培育香味品種的重要資源；美國(guó)8號(hào)外觀好，果形優(yōu)美，遺傳效率高；蜜脆質(zhì)地細(xì)膩，口味酸甜，是現(xiàn)在歐美育種的重要親本；秦冠豐產(chǎn)性極佳，尤其在粗放管理?xiàng)l件下，無(wú)出其右；紅愛(ài)果肉具有花色苷，有較高的保健價(jià)值；粉紅佳人果形指數(shù)高，含酸量高，耐貯藏性強(qiáng)；龍紅蜜果實(shí)蠟質(zhì)厚，表光特別好，口味甜；特別是這幾個(gè)品種在以往的雜交育種中都有著較好的表現(xiàn)，是從外觀、風(fēng)味、豐產(chǎn)性綜合考量最具育種潛力的雜交組合。

綜上所述，本發(fā)明的有益效果：

1、一次嫁接，可保證多年收獲雜交種子，成本低廉，極大地節(jié)約了人力物力資源；

2、龍富為短枝品種，多品種嫁接后可以給其他果樹(shù)授粉，具有授粉樹(shù)的作用；

3、果園中長(zhǎng)期多品種果樹(shù)長(zhǎng)期混合，有利于獲得更多的變異品種的后代；

4、理論上建立72個(gè)雜交組合，一畝地栽植55棵，以2000千克普通生產(chǎn)水平計(jì)，年可獲種子60000粒，育種效率極大提高。

5、本發(fā)明利用蘋(píng)果具有異花授粉的特性，多品種花近距離接觸，在授粉過(guò)程中，使其自然授粉，不需要借助人力即可形成具有不同親本的果實(shí)，操作簡(jiǎn)單。

附圖說(shuō)明

圖1、3-5年生龍富短枝樹(shù)體示意圖；

圖2、＝為示高接換頭短截部位；

圖3、高接換頭嫁接示意圖，其中1為嫁接首紅的枝條，2-9為可隨機(jī)嫁接金帥、美國(guó)8號(hào)、蜜脆、秦冠、紅愛(ài)、粉紅佳人和龍紅蜜八個(gè)品種的枝條，注意間歇性保留不嫁接枝條，因?yàn)槟钢瓯旧硪彩且粋€(gè)雜交親本；

圖4、樹(shù)冠恢復(fù)和結(jié)果示意圖。

具體實(shí)施方式

1、接穗準(zhǔn)備

如果想在春季時(shí)枝接，應(yīng)該在前一年冬季修剪時(shí)，在剪下的一年生枝條中，選取長(zhǎng)勢(shì)好、無(wú)病蟲(chóng)害、粗度適宜的枝條保留，剪取這些枝條的中間一段，作為下一年枝接的接穗使用。

分別將剪取好的八個(gè)蘋(píng)果品種(即金帥、美國(guó)8號(hào)、蜜脆、秦冠、首紅、紅愛(ài)、粉紅佳人和龍紅蜜)的接穗分類束成捆，做好標(biāo)記，埋在陰涼微濕的沙土中，防止水分蒸發(fā)，以保持接穗的生命力，而且可以延遲枝條的萌發(fā)時(shí)間。在埋入沙土前，將每條接穗的兩端涂上石蠟，更好的防止水分的蒸干。埋入沙土?xí)r，務(wù)必做好埋入地址的記錄，便于來(lái)年尋找。第二年春天嫁接時(shí)，將埋在沙土中的接穗取出使用，取出后用濕布包裹，防止水分流失。

2、嫁接時(shí)間

選取春季枝接時(shí)間在早春樹(shù)液流動(dòng)，芽眼萌發(fā)時(shí)或萌發(fā)后進(jìn)行。

3、嫁接方法

選取3-5年生長(zhǎng)勢(shì)健壯的龍富短枝蘋(píng)果樹(shù)作為母株。

采用枝接的嫁接方法，具體方法如下：選取接穗枝條的一段在砧木樹(shù)的骨干枝或者中央領(lǐng)導(dǎo)枝干上進(jìn)行枝接。嫁接前先對(duì)砧木修剪整形，以便留出更好的位置嫁接其他的品種。選取剪鋸口下2-3cm直徑的幼齡枝條嫁接，太粗的枝條愈合慢；骨干枝和側(cè)枝用舌接等方法。

4、嫁接數(shù)量

將八個(gè)品種分別均勻嫁接在母株四周，3-5年生母株樹(shù)可嫁接部位約有40個(gè)左右，選擇20個(gè)左右位點(diǎn)嫁接，每個(gè)品種嫁接2-3頭，品種之間互不臨接。嫁接后對(duì)未嫁接枝條全部重剪，使之和嫁接枝條一同生長(zhǎng)，精心管理，一般2年即可恢復(fù)樹(shù)冠，3年完全可以豐產(chǎn)結(jié)實(shí)。

5、嫁接后管理

(1)、澆水

砧木樹(shù)高接后要澆水兩次左右，供給水分，提高樹(shù)木成活率。

(2)、選取合適時(shí)間解開(kāi)捆綁物

枝接當(dāng)新梢長(zhǎng)到30-40cm時(shí)，解除捆綁物，發(fā)現(xiàn)未成活的接芽時(shí)及時(shí)補(bǔ)接。

(3)、新梢綁護(hù)

為了防止高接的新品種枝條風(fēng)吹后損毀，要用小木棍延伸著新梢生長(zhǎng)的方向捆綁固定。

(4)、新梢摘心

當(dāng)枝接新梢長(zhǎng)到40-50cm時(shí)，摘除新梢嫩尖，當(dāng)二次新梢長(zhǎng)出時(shí)留2葉或3葉摘心。

(5)、病蟲(chóng)害防治

嫁接后的病蟲(chóng)害以防為主，防治結(jié)合。早春樹(shù)液開(kāi)始流動(dòng),芽眼萌發(fā)前對(duì)母株骨干枝、主干枝杈及全樹(shù)冠均勻噴一次波美3°～5°石灰硫磺合劑,殺死各種病菌和越冬蟲(chóng)卵。在枝條長(zhǎng)出新葉時(shí)每隔半月噴一次1∶1.5∶200倍波爾多液,在新梢葉片旺長(zhǎng)時(shí)及時(shí)噴霧溴氰菊酯和殺螨類菌劑等防治紅蜘蛛的發(fā)生。

(6)、根外追肥

當(dāng)新梢長(zhǎng)出3～5片葉時(shí)，交替噴施尿素0.2％水溶液或磷酸二氫鉀0.2％水溶液，10～15d噴1次，以葉片滴水為度。增加葉片營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)新梢長(zhǎng)勢(shì)，加速愈合。

6、果實(shí)和種子的獲取

秋季果實(shí)成熟后，按照不同的接穗分類采摘果實(shí)，做好標(biāo)記分類存放。將果肉吃掉，保留種子，得到雜交種子，洗凈陰暗，避光干燥存放。

7、后續(xù)工作

嫁接后形成多種長(zhǎng)期共存，互相授粉，產(chǎn)生較多雜交組合。保存的種子等第二年春天層積播種，出苗結(jié)果后，采用常規(guī)實(shí)生育苗程序，對(duì)豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)有希望的優(yōu)系，確定進(jìn)入復(fù)選階段的，采用現(xiàn)有SSR或AFLP等分子方法鑒定其父本并做好記錄，進(jìn)入下一步育種程序。