技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種種子的促芽方法。技術(shù)背景種子發(fā)芽年限指種子保持發(fā)芽能力的年限。各種藥用植物種子的壽命差異很大。壽命短的只有幾天或不超過(guò)1年，如肉桂種子，一經(jīng)干燥即喪失發(fā)芽力，當(dāng)歸、白芷種子的壽命不超過(guò)1年，多數(shù)藥用植物種子發(fā)芽年限為2～3年，如牛蒡、薏苡、水飛薊、桔梗、板藍(lán)根、紅花等。貯藏條件適宜可以延長(zhǎng)種子的壽命。但是一旦超過(guò)種子發(fā)芽年限過(guò)長(zhǎng)，種子的發(fā)芽率是及其低的，特別是對(duì)常溫下存儲(chǔ)超過(guò)6個(gè)月的肉桂種子，這是現(xiàn)有技術(shù)的缺陷。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種使得超過(guò)發(fā)芽年限的肉桂種子能達(dá)到比較高的發(fā)芽率的方法，也可以說(shuō)是一種應(yīng)用于干燥的肉桂種子促芽的方法。本發(fā)明的使得超過(guò)發(fā)芽年限的肉桂種子促芽的方法，包括以下步驟：1.收集在常溫下存儲(chǔ)13個(gè)月～14個(gè)月的肉桂種子，在肉桂種子存儲(chǔ)期間無(wú)任何特殊處理；2.將肉桂種子用10％--15％的鹽酸浸泡10～30分鐘，流水沖洗2小時(shí)后去掉表面碳化物質(zhì)；3.將其在常溫20～25℃下，浸泡于60％--100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液6～42小時(shí)，之后用1％次氯酸鈉消毒5～15分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH＝7；4.將肉桂種子置恒溫或變溫條件的光照培養(yǎng)箱中，用蛭石或濕沙或?yàn)V紙或海綿發(fā)芽床，或置沙質(zhì)土壤中進(jìn)行發(fā)芽。這里要說(shuō)明的是本領(lǐng)域的審查員應(yīng)當(dāng)知曉在常溫下存儲(chǔ)13個(gè)月～14個(gè)月的肉桂種子，在肉桂種子存儲(chǔ)期間無(wú)任何特殊處理，肉桂種子已經(jīng)干燥了，喪失了發(fā)芽的能力。本發(fā)明的應(yīng)用于超過(guò)發(fā)芽年限的肉桂種子促芽的方法，能有效提高對(duì)常溫下存儲(chǔ)超過(guò)6個(gè)月的肉桂種子的發(fā)芽率，打破了超過(guò)發(fā)芽年限的肉桂種子特別是一經(jīng)干燥即喪失發(fā)芽力的傳統(tǒng)偏見(jiàn)，使得在對(duì)肉桂的種植中不局限于采用新鮮種子，對(duì)于存儲(chǔ)了一定時(shí)間的肉桂種子，也可以采用，本發(fā)明具有操作簡(jiǎn)單、成本低廉、快速萌發(fā)等優(yōu)點(diǎn)，可廣泛用于肉桂的栽培和園林綠化中。具體實(shí)施方式一種種子的促芽方法，其步驟是：1.收集在常溫下存儲(chǔ)13個(gè)月～14個(gè)月的肉桂種子，在肉桂種子存儲(chǔ)期間無(wú)任何特殊處理；2.將肉桂種子用10％--15％的鹽酸浸泡10～30分鐘，流水沖洗2小時(shí)后去掉表面酸性物質(zhì)；3.將其在常溫20～25℃下，浸泡于50％--100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液6～42小時(shí)，之后用1％次氯酸鈉消毒5～15分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH＝7；4.再將肉桂種子置恒溫或變溫條件的光照培養(yǎng)箱中用濾紙發(fā)芽床進(jìn)行發(fā)芽。所述的恒溫是15、20、25、30℃，所述的變溫條件是白天25℃培養(yǎng)18小時(shí)、晚上15℃培養(yǎng)8小時(shí)，或者是白天30℃培養(yǎng)18小時(shí)、晚上20℃培養(yǎng)8小時(shí)。以下通過(guò)實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明。說(shuō)明:1.具體實(shí)施方式中所采用的發(fā)芽試驗(yàn)(除實(shí)施例5外)均為紙床發(fā)芽試驗(yàn)法，具體如下:直徑為9cm的培養(yǎng)皿內(nèi)放置濾紙，用水濕透，將多余的水倒掉，以保濕不積水為度，選取100粒肉桂種子均勻放入培養(yǎng)皿內(nèi)的紙上，再將培養(yǎng)皿蓋好后放入微電腦控制光照培養(yǎng)箱(LRH-250-Gll；廣東省醫(yī)療器械廠生產(chǎn)),按照各個(gè)試驗(yàn)例所設(shè)計(jì)的特定溫度(恒溫或變溫)條件進(jìn)行發(fā)芽，整個(gè)發(fā)芽過(guò)程中均進(jìn)行光照；發(fā)芽過(guò)程中每天檢測(cè)1～2次，并適當(dāng)補(bǔ)足水分，肉桂種子開(kāi)始發(fā)芽后，每天計(jì)數(shù)1次。發(fā)現(xiàn)有腐敗的種子應(yīng)隨時(shí)揀出,若霉變種子≥5％，應(yīng)及時(shí)更換培養(yǎng)皿內(nèi)的濾紙，并將種子用蒸餾水清洗后再放入培養(yǎng)皿內(nèi)繼續(xù)令其發(fā)芽。2.參照《國(guó)際種子檢驗(yàn)規(guī)程》(1985)、《農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程》(1995)等作為評(píng)定種子是否發(fā)芽的標(biāo)準(zhǔn)(以長(zhǎng)出1cm為發(fā)芽)。3.氫溴酸右美沙芬口服溶液，又名聯(lián)邦克立停，其生產(chǎn)廠家為珠海聯(lián)邦制藥股份有限公司中山分公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20013204。4.種子發(fā)芽率是指發(fā)芽試驗(yàn)終期，在規(guī)定的日期內(nèi)發(fā)芽的全部種子數(shù)占供試種子的百分率。發(fā)芽率(％)＝規(guī)定日期內(nèi)發(fā)芽種子/供試種子粒數(shù)×100％。本試驗(yàn)中的發(fā)芽日期均為自將發(fā)芽紙床放入箱中起的20天。5.本實(shí)驗(yàn)試圖通過(guò)多種方法對(duì)超過(guò)發(fā)芽年限的肉桂種子促芽，但只有氫溴酸右美沙芬口服溶液能提高肉桂種子的出芽率，其它方法如濕沙層積、生長(zhǎng)素、鹽酸等均不能明顯提高肉桂種子的出芽率。實(shí)驗(yàn)材料：本實(shí)驗(yàn)所用的肉桂種子為2013年10月份在江西省安義縣采收的在常溫下存儲(chǔ)13月～14月的肉桂種子，在肉桂種子存儲(chǔ)期間無(wú)任何特殊處理，肉桂種子用牛皮紙袋常溫儲(chǔ)藏。實(shí)施例1一、實(shí)驗(yàn)方法將肉桂種子分為兩組，一組用10％--15％的鹽酸浸泡一定時(shí)間，一組空白對(duì)照。然后把肉桂種子分別浸泡于60％、70％、80％、90％、100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液中18小時(shí)后，用1％次氯酸鈉消毒15分鐘，無(wú)菌水漂洗5次至pH＝7。每個(gè)濃度平行四組，每組100粒置于30℃恒溫培養(yǎng)箱全光照培養(yǎng)，每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1表明，不同濃度氫溴酸右美沙芬口服溶液下10％--15％的鹽酸浸泡后和未浸泡的肉桂種子對(duì)其發(fā)芽率均有明顯提高。因此10％--15％的鹽酸浸泡處理可以對(duì)超過(guò)發(fā)芽年限的肉桂種子起到提高其出芽率的作用。表1不同濃度氫溴酸右美沙芬口服溶液下10％--15％的鹽酸浸泡后和未浸泡與發(fā)芽率的關(guān)系實(shí)施例2一、實(shí)驗(yàn)方法用10％--15％的鹽酸分別浸泡成熟的肉桂種子1、5、10、15、20、30分鐘后，慢慢傾倒掉鹽酸酸，用清水沖洗2小時(shí)，再將肉桂種子分別浸泡于100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液中18小時(shí)后，用1％次氯酸鈉消毒15分鐘，無(wú)菌水漂洗5次至pH＝7。每個(gè)處理平行四組，每組100粒，置于30℃恒溫培養(yǎng)箱全光照培養(yǎng)。每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。表210％--15％的鹽酸處理后不同濃度氫溴酸右美沙芬口服溶液處理與肉桂種子發(fā)芽率的關(guān)系二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2結(jié)果表明：隨浸泡時(shí)間的增加，發(fā)芽率有所提高，其中以20分鐘最佳，浸泡30分鐘時(shí)則下降。浸泡處理提高萌發(fā)率可能與鹽酸軟化果皮有關(guān)。實(shí)施例3一、實(shí)驗(yàn)方法將10％--15％的鹽酸浸泡15分鐘后的肉桂種子分別浸泡于60％、70％、80％、90％、100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液中18小時(shí)后，用1％次氯酸鈉消毒15分鐘，無(wú)菌水漂洗5次至至pH＝7。每個(gè)濃度平行四組，每組100粒，置于30℃恒溫培養(yǎng)箱全光照培養(yǎng)。每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。表3不同濃度的氫溴酸右美沙芬口服溶液與肉桂種子的發(fā)芽率的關(guān)系二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3結(jié)果表明對(duì)超過(guò)發(fā)芽年限的肉桂種子促芽的最佳濃度為60％--100％，本實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)發(fā)芽率沒(méi)有顯著性差異。實(shí)施例4一、實(shí)驗(yàn)方法將10％--15％的鹽酸浸泡15分鐘后的肉桂種子分別浸泡于100％氫溴酸右美沙芬口服溶液中，浸泡的時(shí)間為浸泡的時(shí)間為6、12、18、24、36、42小時(shí)。用次氯酸鈉消毒15分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH＝7。每個(gè)濃度平行四組，每組100粒，置于30℃恒溫培養(yǎng)箱全光照培養(yǎng)。每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4(A，B表示有顯著性差異)。表4不同浸泡時(shí)間與肉桂種子的發(fā)芽率的關(guān)系浸泡時(shí)間(h)發(fā)芽率顯著性5％663％A1264％A1868％B2469％B3667％B4267％B二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表4結(jié)果表明：氫溴酸右美沙芬口服溶液浸泡時(shí)間并不是影響肉桂種子發(fā)芽率的主要因數(shù)，但以18小時(shí)的發(fā)芽率最高，浸泡18、24、36、42小時(shí)的發(fā)芽率沒(méi)有顯著性差異(P﹥0.05)，故浸泡時(shí)間為18小時(shí)。表4為氫溴酸右美沙芬口服溶液浸泡時(shí)間與肉桂種子發(fā)芽率實(shí)施例5一、實(shí)驗(yàn)方法(1)打破種子休眠的恒溫處理將10％--15％的鹽酸浸泡15分鐘后的肉桂種子置于100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液常溫(20℃)浸泡18小時(shí)后恒溫培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度分別為15、20、25、30℃，每個(gè)溫度分別用蛭石、濕沙、濾紙、海綿四種培養(yǎng)床，每個(gè)處理平行四組，每組100粒種子。結(jié)果見(jiàn)表5。(2)打破種子休眠的變溫處理將10％--15％的鹽酸浸泡15分鐘后的肉桂種子置100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液常溫(20℃)浸泡18小時(shí)后變溫培養(yǎng)。變溫條件為：白天25℃培養(yǎng)16小時(shí)，夜晚15℃培養(yǎng)8小時(shí)或者白天30℃培養(yǎng)16小時(shí)，夜晚20℃培養(yǎng)8小時(shí)。每個(gè)變溫分別用蛭石、濕沙、濾紙、海綿四種培養(yǎng)床，每個(gè)處理平行四組，每組100粒種子。結(jié)果見(jiàn)表6。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果表明：在溫度相同時(shí)，不同培養(yǎng)床的種子發(fā)芽率無(wú)顯著性差異。在蛭石培養(yǎng)床上不同溫度的SNK比較的同類(lèi)子集結(jié)果如表6所示：20、25、30、30/20℃四者之間無(wú)顯著性差異，與15、25/15℃之間存在顯著性差異。如表3所示肉桂種子發(fā)芽勢(shì)以30℃最高，因此采用30℃恒溫光照培養(yǎng)。溫度低于20℃不適合肉桂種子的萌發(fā)。表5不同溫度的SNK(Student-Newman-Keuls)比較表6不同發(fā)芽介質(zhì)和溫度對(duì)肉桂種子發(fā)芽率的影響當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3