一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物細(xì)胞組織技術(shù)，具體涉及一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]金線蓮別名金線蘭、金絲草，為蘭科開唇植物花葉蘭屬多年生珍稀中草藥，1990年被主產(chǎn)該藥材的福建省省政府列為瀕危藥用植物。它在民間使用非常廣泛，有清熱涼血、祛風(fēng)利濕、解毒、止痛、鎮(zhèn)咳等功效，主治咯血、支氣管炎、腎炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎腫瘤等疑難病癥，在小孩急驚風(fēng)、去胎毒、保肝護(hù)肝、治療糖尿病、乳癌、胃癌方面效果顯著。素有“藥王”、“金草”、“神藥”、“鳥人參”等美稱。經(jīng)有關(guān)部門測定發(fā)現(xiàn)，金絲蓮中氨基酸組成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于國產(chǎn)和野生西洋參。幾百年來為歷代皇宮的專用御品?，F(xiàn)為賓館、酒家及不少家庭的高檔煲湯材料。
[0003]金線蓮性喜陰涼、潮濕，尤其喜歡生長在有常綠闊葉樹木的溝邊、石壁、土質(zhì)松散的潮濕地帶，最忌陽光直射。由于其對生態(tài)環(huán)境要求嚴(yán)格，加之近年自然環(huán)境遭受嚴(yán)重破壞，野生金線蓮越來越少?，F(xiàn)有無性繁殖培養(yǎng)出來苗，所形成的根系不具備吸收土壤中營養(yǎng)成分能力，移植土壤時需要經(jīng)過比較長滯長階段，種植移栽培過程需要洗苗去除基部無機培養(yǎng)基，造成根莖損傷，病原菌侵入，成活率低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法，解決了現(xiàn)有技術(shù)中金線蓮培養(yǎng)不易成活等缺點。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法，包括如下步驟:
(1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經(jīng)表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.%升汞滅菌7-10分鐘，用無菌水沖洗4-5次；
(2)在無菌條件下，將莖切成1-2cm長帶1-2腋芽的節(jié)段，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過繼代培養(yǎng)的莖切成1-2cm移入有機固化基質(zhì)中，在每天連續(xù)光照12 h，光照強度1500 -3000 lx，培養(yǎng)溫度25 ±1 °C，培養(yǎng)120-125天，形成有效根，促進(jìn)芽徑增粗和莖、葉的分化；誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基中附加6-BA 1.0m g/L,NAA 0.1m g/L和ZT 0.02m g/L。
[0006]所述的有機固化基質(zhì)含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3 g/L、瓊脂粉3.5g/L。
[0007]本發(fā)明的優(yōu)點在于:本發(fā)明培養(yǎng)出高質(zhì)量的金線蓮有機苗，具有比較完整根系和莖、葉。實現(xiàn)在無菌條件下快繁和栽培磨合適應(yīng)，這樣培養(yǎng)出來高質(zhì)量的有機苗，所形成的根系具備吸收土壤中營養(yǎng)成分能力，移植土壤時無需經(jīng)過滯長階段(傳統(tǒng)培養(yǎng)基成移植土壤時滯長天數(shù)在30天左右)，減少種植移栽培過程損傷造成病害侵入，提高成活率(傳統(tǒng)培養(yǎng)基成活率40-50%，有機固化基質(zhì)成活率90-95%)。解決組織培養(yǎng)金線蓮發(fā)根難成活率低，提1?效率，廣品成色好、質(zhì)量1? O
【附圖說明】
[0008]圖1在有機固化基質(zhì)中培養(yǎng)的苗。
圖2與有基質(zhì)融為一體的根系。
[0009]圖3移植土壤的苗。
圖4形成比較完整根系。
【具體實施方式】
[0010]實施例1
一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法，包括如下步驟:
(1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經(jīng)表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.%升汞滅菌7分鐘，用無菌水沖洗4次；
(2)在無菌條件下，將莖切成Icm長帶I腋芽的節(jié)段，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過繼代培養(yǎng)的莖切成I cm移入有機固化基質(zhì)中，在每天連續(xù)光照12 h，光照強度1500 lx，培養(yǎng)溫度25 ±1 °C，培養(yǎng)120天，形成有效根，促進(jìn)芽徑增粗和莖、葉的分化;誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。
[0011]所述的有機固化基質(zhì)含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3 g/L、瓊脂粉3.5g/L。
[0012]實施例2
一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法，包括如下步驟:
(1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經(jīng)表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.%升汞滅菌10分鐘，用無菌水沖洗5次；
(2)在無菌條件下，將莖切成2cm長帶2腋芽的節(jié)段，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過繼代培養(yǎng)的莖切成2cm移入有機固化基質(zhì)中，在每天連續(xù)光照12 h，光照強度3000 lx，培養(yǎng)溫度25 ±1 °C，培養(yǎng)125天，形成有效根，促進(jìn)芽徑增粗和莖、葉的分化;誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。
[0013]所述的有機固化基質(zhì)含有白糖5g/L、木肩lOOg/L(木肩粗約3毫米見方)、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3 g/L、瓊脂粉3.5g/L。
[0014]實施例3
一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法，包括如下步驟:
(1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經(jīng)表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 Wt.%升汞滅菌9分鐘，用無菌水沖洗4次；
(2)在無菌條件下，將莖切成Icm長帶1-2腋芽的節(jié)段，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過繼代培養(yǎng)的莖切成1-2cm移入有機固化基質(zhì)中，在每天連續(xù)光照12 h，光照強度25001x，培養(yǎng)溫度25 ±1 °C，培養(yǎng)122天，形成有效根，促進(jìn)芽徑增粗和莖、葉的分化;誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。
[0015]所述的有機固化基質(zhì)含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3 g/L、瓊脂粉3.5g/L。
[0016]本發(fā)明以野生金線蓮為外植體經(jīng)過繼代培養(yǎng)移入有機固化基質(zhì)，形成比較完整根系和莖、葉(如圖1)。實現(xiàn)在無菌條件下快繁和栽培磨合適應(yīng)，這樣培養(yǎng)出來高質(zhì)量的有機苗，所形成的根系具備吸收土壤中營養(yǎng)成分能力(如圖4)，移植土壤時無需經(jīng)過滯長階段，減少種植移栽培過程損傷造成病害侵入，提高成活率(如圖3)，成活率達(dá)到90%以上。解決組織培養(yǎng)金線蓮發(fā)根難成活率低，提高效率，產(chǎn)品成色好、質(zhì)量高.以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【主權(quán)項】
1.一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法，其特征在于:所述方法包括如下步驟: (1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經(jīng)表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.%升汞滅菌7-10分鐘，用無菌水沖洗4-5次； (2)在無菌條件下，將莖切成1-2cm長帶1-2腋芽的節(jié)段，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過繼代培養(yǎng)的莖切成1-2cm移入有機固化基質(zhì)中，在每天連續(xù)光照12 h，光照強度1500 -3000 lx，培養(yǎng)溫度25 ±1 °C，培養(yǎng)120-125天，形成有效根，促進(jìn)芽徑增粗和莖、葉的分化；誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基中附加6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L和ZT 0.02m g/L。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法，其特征在于:所述的有機固化基質(zhì)含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3 g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3g/L、瓊脂粉 3.5g/L。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種有機固化機質(zhì)組培金線蓮的方法，以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經(jīng)表面清洗后，放入75％乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.％升汞滅菌7?10分鐘，用無菌水沖洗4?5次；在無菌條件下，將莖切成l?2 cm長帶1?2腋芽的節(jié)段，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在每天連續(xù)光照12 h，光照強度1500?3000 lx，培養(yǎng)溫度25 ±1℃，培養(yǎng)120?125天，形成有效根，促進(jìn)芽徑增粗和莖、葉的分化。培養(yǎng)出高質(zhì)量的有機苗，具有比較完整根系和莖、葉，成活率高。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105706936
【申請?zhí)枴緾N201610145418
【發(fā)明人】林成輝, 吳祖建, 俞超維
【申請人】福建農(nóng)林大學(xué)