本發(fā)明涉及一種控制和對抗線蟲的方法。本發(fā)明還涉及一種實(shí)現(xiàn)該目標(biāo)的殺線蟲組合物。

線蟲是一種幾乎透明、肉眼不可見的小型蠕蟲。線蟲的長度通常為0.3到3.0毫米。盡管線蟲尺寸較小，但其導(dǎo)致了每年約12％的農(nóng)產(chǎn)品損失，這對應(yīng)于作物上的數(shù)百萬美元的損失(sasser&freckman,1987)。線蟲通常以植物的根或枝條為食。它們減少了水分和營養(yǎng)的吸收和輸送。一系列植物可被線蟲所寄生，包括甘蔗、大豆、玉米、咖啡、和棉花之類的作物。線蟲在田地中以點(diǎn)狀/矮林形式侵害，且極少在田地中擴(kuò)散。被線蟲侵害的植物可表現(xiàn)出營養(yǎng)不良以及與健康植物相比減少或較慢成長的癥狀。確認(rèn)線蟲的存在需要對土壤和根進(jìn)行取樣和實(shí)施實(shí)驗(yàn)室分析。

現(xiàn)有的控制線蟲的方法非常有限。通常施用處理的一個例子是利用蒸汽對被感染的土壤進(jìn)行加熱。然而，蒸汽處理在技術(shù)上是困難的，且對于在該領(lǐng)域中對于一般施用而言成本太高。

蒸汽處理的替代方法是使用化學(xué)殺線蟲劑。使用化學(xué)殺線蟲劑的問題在于與生成和使用活性化學(xué)殺線蟲劑成分相關(guān)的危險性。所述活性成分可能有毒性，且可能致死。因此，許多國家已限制某些殺線蟲劑的使用，例如溴甲烷。

因此，非常需要一種控制作物中線蟲的改進(jìn)技術(shù)，尤其需要?dú)⒕€蟲組合物和控制線蟲以及其他植物害蟲和病原的方法。與現(xiàn)有的處理技術(shù)相比，若殺線蟲組合物容易被使用且以低成本使用和制造是有利的。

本發(fā)明提供一種安全且有效的控制和對抗線蟲的方式。

目前令人驚異地發(fā)現(xiàn)包含一種或多種氨基酸和一種或多種微量營養(yǎng)素的肥料組合物在控制和對抗作物中的多種線蟲上有積極的成果。特別是，上述肥料組合物在控制多種作物如甘蔗、大豆、咖啡、玉米和棉花中的玉米短體線蟲(pratylenchuszeae)、爪哇根結(jié)線蟲(meloidogynejavanica)、短尾短體線蟲(pratylenchusbrachyurus)、短小根結(jié)線蟲(meloidogyneexigua)、南方根結(jié)線蟲(meloidogyneincognita)、大豆包囊線蟲(heteroderaglycines)，腎形腎狀線蟲(rotylenchulusreniformis)上表現(xiàn)出高活性。因此，在第一方面，本發(fā)明提供一種殺線蟲肥料組合物，其包含一種或多種氨基酸和一種或多種微量營養(yǎng)素。

在另一方面，本發(fā)明提供一種在一位置控制植物中線蟲的方法，所述方法包括向該位置施用一種或多種氨基酸和一種或多種微量營養(yǎng)素。

在又一方面，本發(fā)明提供一種或多種氨基酸和一種或多種微量營養(yǎng)素的組合用于控制線蟲中的用途。

總體而言，本發(fā)明提供一種控制線蟲的方法，其包括對植物、植物部分或周圍施用有效量的包含一種或多種氨基酸和一種或多種微量營養(yǎng)素的抗線蟲組合物。本發(fā)明特別有用于控制玉米短體線蟲(pratylenchuszeae)、爪哇根結(jié)線蟲(meloidogynejavanica)、短尾短體線蟲(pratylenchusbrachyurus)、短小根結(jié)線蟲(meloidogyneexigua)、南方根結(jié)線蟲(meloidogyneincognita)、大豆包囊線蟲(heteroderaglycines)、腎形腎狀線蟲(rotylenchulusreniformis)。

本文中所用的“植物”是指所有植物和植物種群，例如需要或不需要的野生植物或作物。

本文所用的“植物部分”是指植物的所有部分和器官，例如枝條、葉、針葉、莖、干、子實(shí)體、果實(shí)、種子、根、塊莖和根莖。還包括收獲的材料，以及無性繁殖材料和有性繁殖材料，例如，插枝、塊莖、分生組織、根莖、側(cè)枝、種子、單植物細(xì)胞和多植物細(xì)胞，以及任何其它植物組織。

“周圍”一詞是指所述植物生長的地點(diǎn)、所述植物的植物繁殖材料播種的地點(diǎn)、或者所述植物的植物繁殖材料將被播種的地點(diǎn)。

本發(fā)明的抗線蟲肥料組合物包含一種或多種氨基酸和一種或多種微量營養(yǎng)素。一個優(yōu)點(diǎn)是，在控制線蟲上具有活性的抗線蟲組合物不需要額外殺線蟲劑。因此，本發(fā)明的組合物和方法優(yōu)選不采用額外殺線蟲劑、殺昆蟲劑、除草劑或殺真菌劑。

本發(fā)明的組合物包含一種或多種氨基酸。氨基酸能夠以提供抗-殺線蟲效果的任何合適的量存在于抗線蟲肥料中，并且通常以組合物的約5重量％到約70重量％、優(yōu)選組合物的約5重量％到約40重量％、更優(yōu)選組合物的約5重量％到約20重量％、進(jìn)一步優(yōu)選組合物的約10重量％到約15重量％的量存在。

在一些優(yōu)選實(shí)施方式中，氨基酸的量等于或多于組合物的約10重量％。

組合物中的氨基酸濃度優(yōu)選至少100g/l。組合物的實(shí)施方式包含濃度約120g/l的氨基酸。

多種氨基酸對控制線蟲而言有活性。合適的氨基酸包括但不限于丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、l-丙氨酸、l-精氨酸、l-天冬氨酸、l-胱氨酸、l-谷氨酸、甘氨酸、l-組氨酸、l-異亮氨酸、l-亮氨酸、l-賴氨酸、l-甲硫氨酸，l-苯丙氨酸、l-脯氨酸、l-絲氨酸、l-蘇氨酸、l-酪氨酸、和l-纈氨酸。

所述組合物可包含單一氨基酸。更優(yōu)選的是，組合物包含兩種或更多種氨基酸的混合物。

本發(fā)明的組合物還包含一種或多種微量營養(yǎng)素。所述微量營養(yǎng)素可以任何合適的量存在于所述組合物中，并且通常以如下量存在：組合物的約1重量％～約30重量％、優(yōu)選組合物的約1重量％～約20重量％、更優(yōu)選組合物的約5重量％～約15重量％。

在一些優(yōu)選實(shí)施方式中，微量營養(yǎng)素的量等于或多于抗線蟲肥料的約4重量％。

微量營養(yǎng)素優(yōu)選包含一種或多種離子型化合物，例如含有周期表ia、ib、iia、iib、iiia、via、vib、viia、viib、和viii族金屬離子的離子型化合物。優(yōu)選的離子包括鈷(co)、銅(cu)、鐵(fe)、錳(mn)、鋅(zn)、硼(b)、鹵素(優(yōu)選氯(cl)和碘(i))、鉬(mo)、堿金屬(優(yōu)選鉀(k)和鈉(na))、和硒(se)。更優(yōu)選的離子包括硫酸根、硼酸根、聚磷酸根、磷酸根和硝酸根。合適的硼酸根包括過硼酸根、五硼酸根、三硼酸根、四硼酸根、八硼酸根和偏硼酸根。

本發(fā)明優(yōu)選使用多種微量營養(yǎng)素化合物。本發(fā)明更優(yōu)選使用至少含有鋅、硫酸根、鈉、和硼酸根離子的微量營養(yǎng)素化合物。進(jìn)一步優(yōu)選微量營養(yǎng)素化合物含有銅(cu)、鐵(fe)、錳(mn)、鋅(zn)、鈉(na)、硫酸根、和硼酸根離子。

微量營養(yǎng)素能夠以鹽的形式使用。合適的鹽包括無水鹽和/或水合物。合適的鹽的例子包括但不限于鈷硫酸鹽、銅硫酸鹽、鐵硫酸鹽、錳硫酸鹽、鋅硫酸鹽、鈷鹽酸鹽、銅鹽酸鹽、鐵鹽酸鹽、錳鹽酸鹽、鋅鹽酸鹽、鈷鉬酸鹽、銅鉬酸鹽、鐵鉬酸鹽、錳鉬酸鹽、鋅鉬酸鹽、鈷硝酸鹽、銅硝酸鹽、鐵硝酸鹽、錳硝酸鹽、鋅硝酸鹽和鈉硼酸鹽，所述鈉硼酸鹽包括四硼酸鈉、四硼酸二鈉、硼砂、五硼酸鈉、三硼酸鈉、偏硼酸鈉、八硼酸二鈉和過硼酸鈉。

微量營養(yǎng)素的鹽可以是水合物。

在一個優(yōu)選的實(shí)施方式中，微量營養(yǎng)素含有鋅和硼的鹽。在這樣的情況下，鋅和硼鹽可以以組合物的約1重量％～約30重量％、優(yōu)選約1重量％～約20重量％、更優(yōu)選約2重量％～約10重量％的量存在。

所述組合物優(yōu)選包含至少20g/l，更優(yōu)選至少50g/l，進(jìn)一步優(yōu)選至少75g/l的總量的微量營養(yǎng)化合物。在許多實(shí)施方式中，約100g/l的微量營養(yǎng)素的濃度是合適的。

特別優(yōu)選的微量營養(yǎng)素包含硼酸鈉和鋅鹽中的一種或兩者，所述硼酸鈉尤其為八硼酸二鈉、優(yōu)選表現(xiàn)為四水合八硼酸二鈉的形式，所述鋅鹽尤其為硫酸鋅。

在使用硼酸鈉和鋅鹽的優(yōu)選實(shí)施方式中，所述硼酸鈉和鋅鹽優(yōu)選以1:6到4:1，更優(yōu)選以1:5到2:1，進(jìn)一步優(yōu)選以1:4到1:1的重量比存在。在許多實(shí)施方式中，特別優(yōu)選約1:3的重量比。

例如，在某實(shí)施方式中，所述組合物包含10到40g/l八硼酸二鈉，優(yōu)選20到30g/l八硼酸二鈉，更優(yōu)選24到28g/l八硼酸二鈉。類似地，在某實(shí)施方式中，所述組合物包含50到100g/l硫酸鋅，優(yōu)選60到90g/l硫酸鋅，更優(yōu)選70到80g/l硫酸鋅，進(jìn)一步優(yōu)選72到75g/l硫酸鋅。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述組合物包含25.5g/l八硼酸二鈉和73.5g/l硫酸鋅。

在另一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述微量營養(yǎng)素包括含有鋅、硼酸鹽、銅、錳和鐵離子的鹽。

在另一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述組合物包括鋅鹽，所述鋅鹽的濃度為5到30g/l，優(yōu)選10到20g/l，更優(yōu)選15到20g/l。優(yōu)選的鋅鹽為硫酸鋅。

類似地，在另一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述組合物包含硼酸鹽，所述硼酸鹽的濃度為5到50g/l，優(yōu)選10到30g/l，更優(yōu)選20到25g/l。優(yōu)選的硼酸鹽為八硼酸二鈉。

類似地，在另一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述組合物包含鐵鹽，所述鐵鹽的濃度為5到30g/l，優(yōu)選10到25g/l，更優(yōu)選15到25g/l。優(yōu)選的鐵鹽為硫酸鐵。

類似地，在另一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述組合物包含錳鹽，所述錳鹽的濃度為5到50g/l，優(yōu)選10到30g/l，更優(yōu)選15到25g/l。優(yōu)選的錳鹽為硫酸錳。

類似地，在另一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述組合物包含銅鹽，所述銅鹽的濃度為5到30g/l，優(yōu)選10到20g/l，更優(yōu)選15到20g/l。優(yōu)選的銅鹽為硫酸銅。

在某個優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述組合物包含17.5g/l硫酸鋅、19.9g/l硫酸鐵、24g/l八硼酸二鈉、23g/l一水合硫酸錳和15.7g/l硫酸銅。

氨基酸和微量營養(yǎng)素可一起以任意合適的量存在于組合物中，且氨基酸和微量營養(yǎng)素的總量通常以組合物的約5重量％到約95重量％存在，優(yōu)選約10重量％到約75重量％，更優(yōu)選約10重量％到約50重量％，且進(jìn)一步優(yōu)選約15重量％到約40重量％。

在一些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含(i)組合物的約5重量％到約40重量％的氨基酸；和(ii)組合物的約1重量％到約20重量％的微量營養(yǎng)素。

在某些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含(i)組合物的至少10重量％的氨基酸；和(ii)組合物的至少約4重量％的微量營養(yǎng)素。

在某些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含(i)組合物的至少10重量％的氨基酸；和(ii)組合物的至少約4重量％的微量營養(yǎng)素；其中所述微量營養(yǎng)素包含鋅(zn)、硫酸根、鈉(na)、和硼酸根離子。

在某些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含(i)組合物的至少約10重量％的氨基酸；和(ii)組合物的至少約4重量％的微量營養(yǎng)素；其中所述微量營養(yǎng)素包含銅(cu)、鐵(fe)、錳(mn)、鋅(zn)、鈉(na)、硫酸根、和硼酸根離子。

如上所述，本發(fā)明提供一種或多種氨基酸和一種或多種微量營養(yǎng)素的組合用于對抗線蟲的用途。所述氨基酸和微量營養(yǎng)素可一起施用，例如以本發(fā)明的組合物的形式、或可分別對所要處理的植物或其周圍施用。如果分別施用，則所述成分可同時或連續(xù)施用。

氨基酸和微量營養(yǎng)素能夠以相對于彼此足以實(shí)現(xiàn)控制線蟲的任意的量施用。特別地，施用的氨基酸和微量營養(yǎng)素的重量比優(yōu)選在約20:1到約1:20的范圍內(nèi)，更優(yōu)選約10:1到約1:10，進(jìn)一步優(yōu)選約5:1到約1:5，進(jìn)一步更優(yōu)選約1.5:1到約1:1.5。在一些實(shí)施方式中，施用的氨基酸和微量營養(yǎng)素的重量比為約1.2:1。

本發(fā)明的組合物還可包含一種或多種助劑?？咕€蟲肥料所用的助劑將取決于制劑類型和/或最終使用者對所述制劑的施用方式。后文描述納入了本發(fā)明的組合物的制劑。可包含在根據(jù)本發(fā)明的組合物中的合適助劑均為常規(guī)佐劑或組分，例如增量劑、載劑、溶劑、表面活性劑、穩(wěn)定劑、消泡劑、抗凍劑、防腐劑、抗氧化劑、著色劑、增稠劑、固體粘附劑和惰性填料。這樣的助劑是本領(lǐng)域中已知的且市售可得。其在本發(fā)明的組合物的制劑中的用途對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見。此外，取決于制劑，本發(fā)明的組合物也可包含水。所述組合物可被配制為液體或干燥制劑。

本發(fā)明的組合物和方法可用于農(nóng)業(yè)領(lǐng)域和應(yīng)用于在控制和對抗寬范圍的線蟲上相關(guān)的領(lǐng)域，所述線蟲例如但不限于：

玉米短體線蟲、爪哇根結(jié)線蟲、短尾短體線蟲、短小根結(jié)線蟲、南方根結(jié)線蟲、大豆包囊線蟲、腎形腎狀線蟲。

本發(fā)明的組合物和方法適合保護(hù)大范圍作物的植物，包括谷類例如小麥、大麥、黑麥、燕麥、玉米、水稻、高粱、黑小麥和相關(guān)作物；果實(shí)如梨果、核果和無核小水果例如蘋果、葡萄、梨子、李子、桃子、杏、開心果、和櫻桃，以及漿果例如草莓、樹莓、和黑莓；豆科植物例如豆、小扁豆、豌豆和大豆；甘蔗；油料植物例如油菜、芥菜、和向日葵；葫蘆科例如葫蘆、黃瓜和西瓜；纖維植物例如棉花、亞麻、大麻、和黃麻；柑橘例如四季橘、香櫞(citruscitron)、柑橘雜交體(包括柚橙、橘柚、和橘橙)、柚子、金橘、檸檬、酸橙、柑橘(桔子)、苦橙、甜橙、文旦和溫州蜜柑；蔬菜例如菠菜、萵苣、蘆筍、甘藍(lán)、胡蘿卜、洋蔥、番茄、馬鈴薯、和紅辣椒；咖啡；以及觀賞植物包括花例如玫瑰、灌木、闊葉樹和常綠植物例如松柏類。本發(fā)明的組合物和方法當(dāng)施用于豆科植物、甘蔗、纖維植物、谷類、大豆、玉米、棉花和咖啡時尤其有利。

本發(fā)明的組合物和方法在控制和對抗甘蔗、大豆、咖啡、玉米和棉花中的玉米短體線蟲、爪哇根結(jié)線蟲、短尾短體線蟲、短小根結(jié)線蟲、南方根結(jié)線蟲、大豆包囊線蟲、腎形腎狀線蟲上表現(xiàn)出驚人的高效。

在一個實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物和方法也特別有效于控制和對抗大豆和甘蔗中的玉米短體線蟲、爪哇根結(jié)線蟲、短尾短體線蟲、短小根結(jié)線蟲、南方根結(jié)線蟲、大豆包囊線蟲、腎形腎狀線蟲。所述方法和組合物可施用于植物部分和/或周圍，特別是藉由施用包含如下組分的組合物：(i)等于或多于組合物的10重量％的氨基酸；和(ii)等于或多于組合物的約4重量％微量營養(yǎng)素；其中微量營養(yǎng)素包括鋅、硫酸根、鈉、和硼酸根離子。

在另一個實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物和方法也特別有效于控制和對抗甘蔗、大豆、咖啡、玉米和棉花中的玉米短體線蟲、爪哇根結(jié)線蟲、短尾短體線蟲、短小根結(jié)線蟲、南方根結(jié)線蟲、大豆包囊線蟲、腎形腎狀線蟲。所述方法和組合物可施用于植物部分和/或周圍，特別是藉由施用包含如下組分的組合物：(i)等于或多于組合物的10重量％的氨基酸；和(ii)等于或多于組合物的約4重量％微量營養(yǎng)素；其中微量營養(yǎng)素包括銅(cu)、鐵(fe)、錳(mn)、鋅(zn)、鈉(na)、硫酸根、和硼酸根離子。

本發(fā)明的應(yīng)用中，氨基酸和微量營養(yǎng)素的組合的施用率可以根據(jù)例如使用類型、植物類型、溫度、濕度、所要控制的線蟲類型、土壤類型和土壤ph等因素而變化。用于一組給定條件的氨基酸和微量營養(yǎng)素的組合的施用率能夠藉由常規(guī)試驗(yàn)容易地確定。用本領(lǐng)域中已知的方法將其施用于植物、植物部分和/或周圍，包括噴灑、澆灌、浸漬、注射、沖洗、浸泡等。

通常，一種或多種氨基酸和一種或多種微量營養(yǎng)素的組合能夠以一范圍的施用率施用于所要處理的位置。所述施用將取決于所要施用的處理類型等因素。

例如，當(dāng)經(jīng)由噴灑的方式施用氨基酸和微量營養(yǎng)素時，噴灑的施用率優(yōu)選0.1到10升每公頃(l/ha)，更優(yōu)選0.5到5l/ha。

在噴灑處理中，氨基酸能夠以5克每公頃(g/ha)到2000g/ha的施用率進(jìn)行施用，更優(yōu)選10g/ha到1000g/ha，進(jìn)一步優(yōu)選10到600g/ha。類似地，微量營養(yǎng)素可以以1g/ha到2000g/ha的施用率進(jìn)行施用，更優(yōu)選2g/ha到1000g/ha，進(jìn)一步優(yōu)選2g/ha到600g/ha。

當(dāng)氨基酸和微量營養(yǎng)素作為種子處理施用時，施用率可為每100kg種子10ml到1000ml。

在種子處理中，氨基酸能夠以每100kg種子0.5到200g的比率施用，更優(yōu)選每100kg種子1到100g，進(jìn)一步優(yōu)選每100kg種子1到80g。類似地，微量營養(yǎng)素能夠以每100kg種子0.1到200g的施用率施用，更優(yōu)選每100kg種子0.2到100g，進(jìn)一步優(yōu)選每100kg種子0.2到80g。

氨基酸和微量營養(yǎng)素可施用于需要控制的植物、植物部分和/或周圍，同時或短間隔內(nèi)連續(xù)施用，例如在同一天中。氨基酸和微量營養(yǎng)素可以以任意順序?qū)χ参?、植物部分或周圍施用。氨基酸和微量營養(yǎng)素可僅單次或多次施用，例如2到5次，更優(yōu)選3次。

在本發(fā)明中同時施用氨基酸和微量營養(yǎng)素的情況下，它們可以作為同時含有氨基酸和微量營養(yǎng)素的組合物而被施用，該情況下氨基酸和微量營養(yǎng)素可獲自分開的制劑來源并混合在一起，本領(lǐng)域中稱為罐混型(tank-mix)、即用型、噴湯型(spraybroth)或漿料型(slurry)，或者氨基酸和微量營養(yǎng)素可獲自單一制劑混合物來源，本領(lǐng)域中稱為預(yù)混型、濃縮型或配方產(chǎn)品。這樣的配方產(chǎn)品的示例，有如上所述以及下述的組合物。

根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于植物耐受度特別良好，且對環(huán)境友好。

藉由以下僅為示例性目的的實(shí)施例描述本發(fā)明的實(shí)施方式。除非特別說明，本說明書和權(quán)利要求中，百分比以重量計(jì)。

實(shí)施例1–玉米短體線蟲-甘蔗

線蟲接種物由回收自位于巴西圣保羅pacaembú州的甘蔗作物的玉米短體線蟲(pratylenchuszeae)的純亞群制備。該純亞群由溫室中的粘土容器內(nèi)的玉米植物(zeamaysl.)“dkb390pro”繁殖。該亞群藉由采用santos等(2005)創(chuàng)造的二分法鑰匙(dicotomickey)基于臨時玻片中固定的成年雌性的形貌特征于先前鑒定。

將以下表1中匯總的組合物的3ml樣品以2l/ha的比率均勻施用在土壤上以及根的附近。之后，所述甘蔗的根用以含有不同發(fā)育階段的玉米短體線蟲的10ml懸浮液接種，接著接著用土壤將根覆蓋。重復(fù)進(jìn)行5次。

表1

15天和30天后，對該處理的植物毒性進(jìn)行評價。沒有在甘蔗植物上觀察到植物毒性癥狀。

在施用45天和90天后對根中的不同發(fā)育階段的玉米短體線蟲數(shù)量和10克根物質(zhì)中的不同發(fā)育階段的玉米短體線蟲的數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果列于下表2。

表2

由此可見，與對照組相比，用包含氨基酸和微量營養(yǎng)素的抗線蟲組合物對甘蔗植物進(jìn)行的處理顯著降低植物根中存在的線蟲數(shù)量。

實(shí)施例2-玉米短體線蟲和爪哇根結(jié)線蟲-甘蔗

線蟲接種物由保留自溫室中的粘土容器中的大豆植物(glycinemaxl.)的爪哇根結(jié)線蟲(meloidogynejavanica)的純亞群制備。該亞群基于taylor和netscher(1974)制備的會陰表樣的形貌特點(diǎn)，基于雄性口部區(qū)域的形貌(eisenback等，1981)，并且基于藉由esbenshade和triantaphyllou(1990)的技術(shù)采用傳統(tǒng)垂直電泳系統(tǒng)，即伯樂公司(bio-rad)的miniproteanii獲得的酯酶的同工酶表型，于先前被鑒定。

將以下表3中匯總的組合物的3ml樣品以2l/ha的比率均勻施用在土壤上以及根的附近。接著，將甘蔗植物的根以含有5000枚卵(玉米短體線蟲和爪哇根結(jié)線蟲)和二期幼年型爪哇根結(jié)線蟲的10ml的懸浮液接種，接著用土壤覆蓋根。重復(fù)進(jìn)行5次。分析顯示爪哇根結(jié)線蟲和玉米短體線蟲存在于在提取根的懸浮液中。

表3

15天和30天后，對該處理的植物毒性進(jìn)行評價。沒有在甘蔗植物上觀察到植物毒性癥狀。

在施用100天和150天后對植物根中的不同發(fā)育階段的爪哇根結(jié)線蟲和玉米短體線蟲的數(shù)量；10克根物質(zhì)中的不同發(fā)育階段的爪哇根結(jié)線蟲和玉米短體線蟲的數(shù)量；植物根中的卵(玉米短體線蟲和爪哇根結(jié)線蟲)數(shù)量；和10克根物質(zhì)中的卵(玉米短體線蟲和爪哇根結(jié)線蟲)數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果列于下表4到6。

表4

表5

表6

由此可見，與對照組相比，用包含氨基酸和微量營養(yǎng)素的抗線蟲組合物對甘蔗植物進(jìn)行的處理顯著降低植物根中存在的線蟲數(shù)量。

實(shí)施例3爪哇根結(jié)線蟲–大豆

線蟲接種物由保留自溫室中的粘土容器中的番茄(solanumlycopersicoml.)的爪哇根結(jié)線蟲(meloidogynejavanica)的純亞群制備。該亞群基于taylor和netscher(1974)制備的會陰表樣的形貌特點(diǎn)，基于雄性的口區(qū)域的形貌(eisenback等，1981)，并且基于藉由esbenshade和triantaphyllou(1990)的技術(shù)采用傳統(tǒng)垂直電泳系統(tǒng)，即伯樂公司(bio-rad)的miniproteanii獲得的酯酶的同工酶表型，于先前被鑒定。

從番茄的根部制備包含卵和二期幼年型(j2)的懸浮液。將10ml的懸浮液與茄子一同接種持續(xù)并靜置22天。接著，將茄子移植至罐，并保持在溫室中。100天后，將所述茄子的根清洗并在混合器中用0.5％的次氯酸鈉碾碎。然后，使所述懸浮液通過500(0.025mm開口)上的200目(0.074mm開口)的篩網(wǎng)。將保留在500目網(wǎng)篩上的卵和幼年型收集并清洗。

用下表7所示的組合物對大豆種子進(jìn)行處理。然后，種子以含有如上所述回收的5000枚卵和二期幼年型爪哇根結(jié)線蟲的3ml懸浮液接種。

表7

播種19天后，對該處理的植物毒性進(jìn)行評價。沒有在大豆植物上觀察到植物毒性癥狀。

播種52天后對植物根上的蟲癭和10克根物質(zhì)中的蟲癭數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果列于下表8。

表8

在播種52天和90天后對植物根中的卵和爪哇根結(jié)線蟲以及10克根物質(zhì)中的卵和爪哇根結(jié)線蟲進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果列于下表9。

表9

由此可見，與對照組相比，用包含氨基酸和微量營養(yǎng)素的抗線蟲組合物對甘蔗植物進(jìn)行的處理顯著降低植物根中存在的線蟲數(shù)量。

實(shí)施例4-短尾短體線蟲-咖啡

線蟲接種物由保留自溫室中的粘土容器中的大豆植物(glycinemaxl.)的短尾短體線蟲(pratylenchusbrachyurus)的純亞群制備。該亞群基于會陰表樣的形貌特點(diǎn)、基于口區(qū)域的形貌、并且基于酯酶的同工酶表型，于先前被鑒定。

將以下表10中匯總的組合物的3ml樣品以2l/ha的比率均勻施用在土壤上以及根的附近。之后，所述咖啡幼株植物的根以含有不同發(fā)育階段的短尾短體線蟲的10ml懸浮液接種，接著接著用土壤將根覆蓋。重復(fù)進(jìn)行5次。

表10

15天和30天后，對該處理的植物毒性進(jìn)行評價。沒有在咖啡植物上觀察到植物毒性癥狀。

在施用后45天對植物根部中的不同發(fā)育階段的短尾短體線蟲的數(shù)量計(jì)數(shù)。結(jié)果列于下表11。

表11

由此可見，與對照組相比，用包含氨基酸和微量營養(yǎng)素的抗線蟲組合物對咖啡植物進(jìn)行的處理顯著降低植物根中存在的線蟲數(shù)量。

實(shí)施例5-短小根結(jié)線蟲-咖啡

線蟲接種物由溫室中的粘土容器中的番茄(solanumlycopersicoml.)中的短小根結(jié)線蟲(meloidogyneexigua)的純亞群制備。該亞群基于會陰表樣的形貌特點(diǎn)、基于口區(qū)域的形貌、并且基于酯酶的同工酶表型，于先前被鑒定。

將以下表12中匯總的組合物的3ml樣品以2l/ha的比率均勻施用在土壤上以及根的附近。之后，所述咖啡幼株植物的根以含有不同發(fā)育階段的短小根結(jié)線蟲的10ml懸浮液接種，接著接著用土壤將根覆蓋。重復(fù)進(jìn)行5次。

表12

15天和30天后，對該處理的植物毒性進(jìn)行評價。沒有在咖啡植物上觀察到植物毒性癥狀。

施用45天后對植物根中的不同發(fā)育階段的短小根結(jié)線蟲進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果列于下表13。

表13

由此可見，與對照組和單獨(dú)施用氨基酸和微量營養(yǎng)素相比，氨基酸和微量營養(yǎng)素的組合在植物根中控制線蟲明顯更有效。該結(jié)果顯示了氨基酸和微量營養(yǎng)素之間的協(xié)同效果。

實(shí)施例6-南方根結(jié)線蟲-棉花

線蟲接種物由溫室中的粘土容器中的番茄(solanumlycopersicoml.)中的南方根結(jié)線蟲(meloidogyneincognita)的純亞群制備。該亞群基于會陰表樣的形貌特點(diǎn)、基于口區(qū)域的形貌、并且基于酯酶的同工酶表型，于先前被鑒定。

將以下表14中匯總的組合物的3ml樣品以2l/ha的比率均勻施用在土壤上以及根的附近。之后，所述棉花的根以含有不同發(fā)育階段的南方根結(jié)線蟲的10ml懸浮液接種，接著用土壤將根覆蓋。重復(fù)進(jìn)行5次。

表14

15天和30天后，對該處理的植物毒性進(jìn)行評價。沒有在棉花植物上觀察到植物毒性癥狀。

在施用后45天檢測10克根物質(zhì)上的蟲癭數(shù)量。結(jié)果列于下表15。

表15

由此可見，與對照組相比，氨基酸和微量營養(yǎng)素的組合在植物根中控制線蟲明顯更有效。

實(shí)施例7-大豆包囊線蟲–大豆

線蟲接種物由保留自溫室中的粘土容器中的大豆植物(glycinemaxl.)的大豆包囊線蟲(heteroderaglycines)的純亞群制備。該亞群基于會陰表樣的形貌特點(diǎn)、基于口區(qū)域的形貌、并且基于酯酶的同工酶表型，于先前被鑒定。

從番茄的根部制備包含卵和二期幼年型(j2)的懸浮液。將10ml的懸浮液與茄子一同接種持續(xù)并靜置22天。之后，將茄子移植至罐，并保持在溫室中。100天后，將所述茄子的根清洗并在混合器中用0.5％的次氯酸鈉碾碎。然后，使所述懸浮液通過500(0.025mm開口)上的200目(0.074mm開口)的篩網(wǎng)。將保留在500目網(wǎng)篩上的卵和幼年型收集并清洗。

用下表16所示的組合物對大豆種子進(jìn)行處理。然后，種子以含有如上所述回收的5000枚卵和二期幼年型大豆包囊線蟲的3ml懸浮液接種。

表16

19天后，對該處理的植物毒性進(jìn)行評價。沒有在大豆植物上觀察到植物毒性癥狀。

在播種45天后檢測10克根物質(zhì)上的蟲癭數(shù)量。結(jié)果列于下表17。

表17

由此可見，與對照組相比，氨基酸和微量營養(yǎng)素的組合在植物根中控制線蟲明顯更有效。

實(shí)施例8-腎形腎狀線蟲-玉米

線蟲接種物由保留自溫室中的粘土容器中的大豆植物(glycinemaxl.)的腎形腎狀線蟲(rotylenchulusreniformis)的純亞群制備。該亞群基于會陰表樣的形貌特點(diǎn)、基于口區(qū)域的形貌、并且基于酯酶的同工酶表型，于先前被鑒定。

將以表18中匯總的組合物的3ml樣品以2l/ha的比率均勻施用在土壤上以及根的附近。之后，所述玉米植物的根以含有不同發(fā)育階段的腎形腎狀線蟲的10ml懸浮液接種，接著用土壤將根覆蓋。重復(fù)進(jìn)行5次。

表18

15天和30天后，對該處理的植物毒性進(jìn)行評價。沒有在玉米植物上觀察到植物毒性癥狀。

在施用后45天檢測10克根物質(zhì)上的蟲癭數(shù)量。結(jié)果列于下表19。

表19.

能夠看到，與對照組相比，氨基酸和微量營養(yǎng)素的組合在植物根中控制線蟲明顯更有效。