本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種雷丸的人工栽培方法。

背景技術(shù)：
雷丸是白蘑科真菌雷丸(OmphalialapidescensSchroet.)的干燥菌核，與茯苓、豬苓并列為“三苓”。雷丸又稱竹苓、雷實(shí)、雷矢、竹林子、朱鈴芝、木蓮子等，春、秋、冬皆可采收，但以秋季為多，選擇枝葉枯黃的病竹，挖取根部菌核。其子實(shí)體的壽命很短，常見者為菌核。雷丸歷來為野生，系統(tǒng)的人工栽培研究罕見報(bào)道，并且基于以下幾點(diǎn)原因，導(dǎo)致雷丸人工栽培的現(xiàn)有技術(shù)不足以指導(dǎo)生產(chǎn)，①原種的制作使用大米作為培養(yǎng)基質(zhì)，菌絲生長緩慢，且不容易觀察菌絲生長情況及污染情況；②栽培種采用椴木屑與麥麩的比例為3：1，菌絲最高生長速度僅為1.8mm/d，生長速度過慢；③直接使用栽培種誘導(dǎo)形成菌核較慢，產(chǎn)量極低；④雷丸種源稀少，使用新鮮的小雷丸作為種源進(jìn)行栽培，不利于擴(kuò)大規(guī)模，且對木質(zhì)原料需求量大，影響生態(tài)環(huán)境。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種雷丸的人工栽培方法，本發(fā)明所述方法解決了原種培養(yǎng)過程中菌絲生長緩慢的問題，提高了雷丸人工種植產(chǎn)量，降低了生產(chǎn)成本，有利于雷丸人工栽培的推廣。本發(fā)明采取的技術(shù)方案具體如下：1、雷丸的人工栽培方法，包括如下步驟：(1)原種制備a.原種基質(zhì)制備：將玉米粒水煮，過濾，按玉米粒的質(zhì)量百分比計(jì)，加入1～3％的石膏，0.05～0.2％的MgSO4和0.1～0.3％的KH2PO4，攪拌混勻，裝入原種瓶中于121～126℃，103～115kPa滅菌1.5h，冷卻；b.接種：從母種試管中挑取雷丸菌種接入原種瓶內(nèi)；c.培養(yǎng)：將接種后的原種瓶于22～25℃條件下避光培養(yǎng)至雷丸菌絲長滿原種瓶；(2)栽培種制備a.培養(yǎng)料制備：取柞木屑，按柞木屑重量百分比計(jì)，加入2～10％的麥麩、2～10％的玉米粉、0.5～2％的豆粕，1％的石膏，0.2％的KH2PO4和0.1％的MgSO4，混勻后加水至培養(yǎng)料中含水質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)60～80％，拌勻；b.裝袋：按300g/袋計(jì)，將拌勻后的培養(yǎng)料裝入料袋中；c.滅菌：將料袋置于103-115kPa下121～126℃滅菌1.5h，或常壓下100～105℃滅菌10～12h；d.接種：從原種瓶中取2g雷丸菌種轉(zhuǎn)入料袋內(nèi)；e.培養(yǎng)：將接種后的料袋于22～25℃條件下避光培養(yǎng)至雷丸菌絲長滿料袋；(3)室內(nèi)或室外覆土栽培室內(nèi)覆土栽培步驟為：對培養(yǎng)室消毒后，地上鋪以5～6cm厚砂土，然后鋪蓋玉米稈或芭茅桿，將培養(yǎng)好的栽培種保持原樣取出，每平方米均勻排放8包栽培種，再將玉米桿或芭茅桿蓋于其上，最后覆蓋5～7cm厚的砂土，澆水，培養(yǎng)；室外覆土栽培步驟為：首先進(jìn)行消毒，然后鋪蓋玉米稈或者芭茅桿，將培養(yǎng)好的栽培種保持原樣取出，每平方米均勻排放8包栽培種，然后將玉米桿或芭茅桿蓋于其上，最后覆蓋5～7cm厚的砂土，澆水，培養(yǎng)。優(yōu)選的，所述步驟(1)中原種基質(zhì)制備中，按玉米粒的質(zhì)量百分比計(jì)，加入1.5～2.5％的石膏，0.1～0.15％的MgSO4和0.2～0.25％的KH2PO4。優(yōu)選的，所述步驟(1)中原種基質(zhì)制備中，按玉米粒的質(zhì)量百分比計(jì)，加入2％的石膏，0.1％的MgSO4和0.2％的KH2PO4。優(yōu)選的，所述步驟(2)中培養(yǎng)料制備中，按柞木屑重量百分比計(jì)，加入4～8％的麥麩、2～5％的玉米粉、1～1.5％的豆粕、1％的石膏、0.2％的KH2PO4和0.1％的MgSO4。優(yōu)選的，所述步驟(2)中培養(yǎng)料制備中，按柞木屑重量百分比計(jì)，加入6％的麥麩、5％的玉米粉、1％的豆粕、1％的石膏，0.2％的KH2PO4和0.1％的MgSO4。優(yōu)選的，所述步驟(2)培養(yǎng)料制備中培養(yǎng)料含水量為68～72％。優(yōu)選的，所述步驟(3)中室內(nèi)栽培時(shí)土壤使用含水量40～60％的粗顆粒河沙，室外培養(yǎng)時(shí)選擇山坡下背陰且疏松透氣的土壤作為栽培地。優(yōu)選的，所述步驟(3)中鋪蓋的玉米稈或芭茅桿長度為7-8cm。優(yōu)選的，所述步驟(3)中培養(yǎng)時(shí)通過澆水保持玉米桿或芭茅桿和砂土濕度在40～60％之間，溫度在24～26℃之間。本發(fā)明所用母種通過采集野生雷丸菌核經(jīng)常規(guī)菌種培養(yǎng)方法獲得。本發(fā)明優(yōu)選在每年3月份種植，7月份和11月份收獲兩次。本發(fā)明的有益效果在于：(1)本發(fā)明采用玉米為主要原料制備雷丸原種，解決原種培養(yǎng)過程中菌絲生長緩慢的問題，且不易污染，易觀察菌絲生長情況。(2)本發(fā)明以柞木屑為主料，豆粕、麥麩、玉米粉為輔料，KH2PO4、石膏等為礦質(zhì)元素作為栽培種，使雷丸菌絲生長速度加快，大大縮短了生產(chǎn)周期，降低了生產(chǎn)成本。(3)本發(fā)明所用的栽培材料為玉米稈和芭茅桿，均廉價(jià)、易得，成本低，減少了對木質(zhì)原料的需求，對森林和生態(tài)環(huán)境不會產(chǎn)生破壞作用，對生態(tài)環(huán)境保護(hù)具有一定意義。(4)本發(fā)明采用雷丸袋料菌種作為人工種植的菌種源，使用覆土栽培的方式獲得雷丸菌核，操作簡便易行，且產(chǎn)量高，大大降低了勞動力成本，提高雷丸生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益。附圖說明為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果更加清楚，本發(fā)明提供如下附圖：圖1大米原種培養(yǎng)基和玉米原種培養(yǎng)基培養(yǎng)效果對比圖，其中A圖為大米原種培養(yǎng)基培養(yǎng)，B圖為玉米原種培養(yǎng)基培養(yǎng)；圖2栽培種培養(yǎng)基雷丸菌種培養(yǎng)效果，其中A圖為實(shí)施例1中雷丸栽培種的培養(yǎng)，B圖為實(shí)施例2中雷丸栽培種的培養(yǎng)；圖3室內(nèi)覆土栽培圖片；圖4用芭茅稈生產(chǎn)的雷丸圖片；圖5收獲的雷丸圖片。具體實(shí)施方式下面對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。實(shí)施例1(一)原種制備a.原種基質(zhì)制備選擇無霉?fàn)€無蟲蛀的玉米粒加水煮至胚乳存一線白心，過濾，按玉米粒的質(zhì)量百分比計(jì)，加入2％的石膏，0.1％的MgSO4，0.2％的KH2PO4，攪拌混勻，裝入650mL原種瓶中，121℃、103-115kPa下滅菌1.5h，冷卻至室溫即得。b.接種接種需在潔凈臺上操作。接種前，接種室應(yīng)進(jìn)行紫外燈滅菌，先用75％酒精對雙手及接種針消毒，接種針、試管口及棉塞都需用酒精燈火焰進(jìn)行滅菌。選擇生長旺盛、菌齡較短、菌絲層尚未出現(xiàn)色素分泌物的菌種進(jìn)行接種，用接種針在母種試管中勾取1cm2大小的菌塊轉(zhuǎn)入原種瓶內(nèi)。c.培養(yǎng)將接種后的原種瓶轉(zhuǎn)移到避光的培養(yǎng)室于22～25℃溫度條件下培養(yǎng)至雷丸菌絲長滿原種瓶后即可。(二)栽培種制備a.稱料：稱取主料柞木屑，然后按柞木屑重量百分比計(jì)稱取下列輔料：8％的麥麩，5％的玉米粉，1％的豆粕，1％的石膏，0.2％的KH2PO4，0.1％的MgSO4。b.拌料：將各料混勻后加入水至培養(yǎng)料中含水量達(dá)60％，拌勻。c.裝袋：將拌勻后的培養(yǎng)料按300g/袋裝入12cm×25cm的聚丙烯折角袋中，邊裝邊壓，至緊實(shí)，松緊需均勻，最后在菌袋口部套上套環(huán)支撐，并蓋上無棉蓋。d.滅菌：將料袋置于103-115kPa、121-126℃滅菌1.5小時(shí)，滅菌后自然冷卻至室溫。e.接種：于超凈工作臺或經(jīng)殺菌后的接種箱內(nèi)接種，接種前用75％消毒酒精擦拭手、槍鑷，再將槍鑷置于酒精燈火焰上灼燒，冷卻后從原種瓶里取雷丸菌種2g轉(zhuǎn)入料袋內(nèi)。f.培養(yǎng)：將接種后的料袋轉(zhuǎn)移到避光的培養(yǎng)室于22～25℃溫度條件下培養(yǎng)至雷丸菌絲長滿料袋后即可，結(jié)果見圖2中A圖。(三)室內(nèi)覆土栽培室內(nèi)栽培地如圖3所示，將室內(nèi)墻角、周邊撒石灰消毒，以砂土鋪地至砂土厚度5-6cm，鋪蓋玉米稈，將培養(yǎng)好的栽培種保持原樣整體從菌種袋中取出，每平方米均勻排放8包栽培種，然后將玉米稈蓋在上面，最后覆蓋5-7cm厚的砂土，澆水培養(yǎng)，將土壤濕度控制在40％-60％，溫度控制在24～26℃。結(jié)果描述：原種32天即長滿650mL菌種瓶，且菌絲潔白、濃密；栽培種接種3天左右可見新生菌絲從原種塊長出，吃料快，氣生菌絲濃密，菌絲日生長量達(dá)到7.44±0.42mm/d，37天長滿整個(gè)料袋；室內(nèi)栽種3個(gè)月每平方米即可收獲1523g(干重)，收獲的雷丸如圖4所示，雷丸粒徑可達(dá)4.5cm。如果原種培養(yǎng)基采用大米制備，其結(jié)果見圖1中A圖，可見，與原種培養(yǎng)基采用玉米制備的B圖結(jié)果相比，菌絲纖細(xì)、生長緩慢、分枝少，不易觀察。實(shí)施例2(一)原種制備a.原種基質(zhì)制備選擇無霉?fàn)€無蟲蛀的玉米粒加水煮至胚乳存一線白心，過濾，按玉米粒的質(zhì)量百分比計(jì)加入1％的石膏，0.15％的MgSO4，0.3％的KH2PO4，攪拌混勻，裝入650mL原種瓶中，121℃、103-115kPa滅菌1.5h過濾，冷卻至室溫。b.接種接種需在潔凈臺上操作。接種前，接種室應(yīng)進(jìn)行紫外燈滅菌，先用75％酒精對雙手及接種針消毒，接種針、試管口及棉塞都需用酒精燈火焰進(jìn)行滅菌。選擇生長旺盛、菌齡較短、菌絲層尚未出現(xiàn)色素分泌物的菌種進(jìn)行接種，用接種針從母種試管中勾取1cm2大小的菌塊轉(zhuǎn)入原種瓶內(nèi)。c.培養(yǎng)：將接種后的原種瓶轉(zhuǎn)移到避光的培養(yǎng)室于22～25℃溫度條件下培養(yǎng)至雷丸菌絲長滿原種瓶后即可。(二)栽培種制備a.稱料：稱取主料柞木屑，按柞木屑重量百分比稱取以下輔料：麥麩6％、玉米粉5％、豆粕1％、石膏2％、KH2PO40.2％、MgSO40.1％。b.拌料：先將組分中的玉米粉、石膏、豆粕、MgSO4、KH2PO4充分混勻，再轉(zhuǎn)入麥麩中，充分混拌至勻，最后轉(zhuǎn)至木屑中，混勻后加入水至培養(yǎng)料中含水量達(dá)68％，拌勻。c.裝袋：將拌勻后的培養(yǎng)料按300g/袋裝入12cm×25cm聚乙烯或聚丙烯的折角袋中，邊裝邊壓，至緊實(shí)，松緊需均勻，最后在菌袋口部套上套環(huán)支撐，并蓋上無棉蓋。d.滅菌：將料袋置于103-115kPa、121-126℃滅菌1.5小時(shí)，滅菌后自然冷卻至室溫。e.接種：于超凈工作臺或經(jīng)殺菌后的接種箱內(nèi)接種，接種前用75％消毒酒精擦拭手、槍鑷，再將槍鑷置于酒精燈火焰上灼燒，冷卻后從原種瓶里夾取雷丸菌種2g轉(zhuǎn)入料袋內(nèi)。f.培養(yǎng)：將接種后的料袋轉(zhuǎn)移到避光的培養(yǎng)室于22～25℃條件下培養(yǎng)至雷丸菌絲長滿料袋后即可，結(jié)果見圖2中B圖。(三)室外覆土栽培整地，周邊撒石灰，鋪蓋芭茅桿，將培養(yǎng)好的栽培種保持原樣整體從菌種袋中取出，每平方米均勻排放8包栽培種，然后將芭茅桿蓋在上面，最后在上面覆蓋5-7cm厚的砂土，澆水培養(yǎng)，控制砂土濕度40％-60％，溫度24～26℃。結(jié)果描述：原種34天長滿菌種瓶(650mL)，菌絲潔白、濃密；栽培種接種2天后，新生雷丸菌絲長入培養(yǎng)料內(nèi)，長至料內(nèi)后迅速多級分叉，致密，色白，36天左右菌絲即長滿料袋。室外栽種3個(gè)月每平方米可收獲1217g(干重)，圖5為利用芭茅桿栽種獲得的雷丸。最后說明的是，以上優(yōu)選實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過上述優(yōu)選實(shí)施例已經(jīng)對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的描述，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以在形式上和細(xì)節(jié)上對其作出各種各樣的改變，而不偏離本發(fā)明權(quán)利要求書所限定的范圍。