用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置制造方法
【專利摘要】用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,培養(yǎng)箱體和觀察箱體活動(dòng)連接;所述培養(yǎng)箱體包括培養(yǎng)管托架、培養(yǎng)基托架和培養(yǎng)基蓋板,所述培養(yǎng)管托架設(shè)于培養(yǎng)箱體的上部,將培養(yǎng)基箱體分為地上部生長(zhǎng)區(qū)和根系生長(zhǎng)區(qū),培養(yǎng)管托架上設(shè)有至少一個(gè)培養(yǎng)管托槽,培養(yǎng)基托架設(shè)于根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi),培養(yǎng)基蓋板設(shè)于根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi),其板面與灌注培養(yǎng)基時(shí)的培養(yǎng)管托槽底部相切;所述觀察箱體包括通氣孔、濾光層和遮光板,濾光層設(shè)于觀察箱體的側(cè)壁,遮光板覆蓋于濾光層上,并與觀察箱體活動(dòng)連接,通氣孔設(shè)于觀察箱體上。本裝置可以使擬南芥的地上部照光而根系生長(zhǎng)在特定波長(zhǎng)光下或完全黑暗環(huán)境中且無(wú)蔗糖添加,符合植物的自然生長(zhǎng)環(huán)境。
【專利說(shuō)明】用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本申請(qǐng)屬于模式植物擬南芥的培育【技術(shù)領(lǐng)域】,特別涉及一種用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]擬南芥已成為植物科學(xué)領(lǐng)域的模式植物之一,植物研究者不僅能從擬南芥上挖掘出有價(jià)值的基因資源,還能以擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化體系來(lái)研究其它植物的基因功能。盡管可以用蛭石或泥炭等人工介質(zhì)來(lái)培養(yǎng)擬南芥植株,但是不能實(shí)時(shí)觀測(cè)分析根系生長(zhǎng)情況等,因此,一直以來(lái)植物研究者用瓊脂生長(zhǎng)板來(lái)培養(yǎng)擬南芥植物,此方法操作簡(jiǎn)單,易于觀察植物的生長(zhǎng),許多有價(jià)值的擬南芥突變體都是使用此方法篩選和鑒定出來(lái)的。然而,在這種擬南芥瓊脂生長(zhǎng)板的培養(yǎng)體系下(傳統(tǒng)培養(yǎng)裝置),植物的地上部與根系均照光,根系還生長(zhǎng)在外源蔗糖添加的環(huán)境,這與植物自然的生長(zhǎng)環(huán)境相異較大。眾所周知,在自然的生長(zhǎng)環(huán)境下,植物的地上部照光而根系生長(zhǎng)于黑暗的環(huán)境中且無(wú)外源蔗糖添加。那么,使用傳統(tǒng)培養(yǎng)裝置研究擬南芥的生理與遺傳機(jī)制會(huì)給植物研究者帶來(lái)不可靠的研究結(jié)果。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]解決的技術(shù)問題:針對(duì)上述技術(shù)缺陷,本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與實(shí)時(shí)觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,該裝置能使擬南芥的地上部照光而根系生長(zhǎng)于黑暗的環(huán)境中且無(wú)外源蔗糖添加,并保持了 “傳統(tǒng)裝置”易于操作的特點(diǎn)。新裝置給予植物較接近自然的生長(zhǎng)環(huán)境,避免研究過程中“不嚴(yán)謹(jǐn)結(jié)果”的產(chǎn)生,使植物研究者能得出“較本真的結(jié)論”。
[0004]技術(shù)方案:用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與實(shí)時(shí)觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,包括培養(yǎng)箱體、觀察箱體和培養(yǎng)管,培養(yǎng)箱體和觀察箱體活動(dòng)連接;所述培養(yǎng)箱體包括培養(yǎng)管托架、培養(yǎng)基托架和培養(yǎng)基蓋板,所述培養(yǎng)管托架設(shè)于培養(yǎng)箱體的上部,將培養(yǎng)箱體分為地上部生長(zhǎng)區(qū)和根系生長(zhǎng)區(qū),培養(yǎng)管托架上設(shè)有至少一個(gè)培養(yǎng)管托槽,培養(yǎng)基托架設(shè)于根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi),與培養(yǎng)箱體內(nèi)壁貼合,培養(yǎng)基蓋板設(shè)于根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi),其板面與灌注培養(yǎng)基時(shí)的培養(yǎng)管托槽底部相切;所述觀察箱體包括通氣孔、濾光層和遮光板,濾光層設(shè)于觀察箱體的側(cè)壁,遮光板覆蓋于濾光層上,并與觀察箱體活動(dòng)連接,通氣孔設(shè)于觀察箱體上。
[0005]所述培養(yǎng)基托架上設(shè)有用于將其從根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi)移出的受力裝置。
[0006]所述培養(yǎng)基蓋板上設(shè)有至少一個(gè)通孔。
[0007]所述觀察箱體側(cè)壁上設(shè)有供遮光板滑動(dòng)的滑槽。
[0008]還包括增氧泵,所述通氣孔與增氧泵連接。
[0009]培養(yǎng)管為上粗下細(xì)的倒圓臺(tái)貫通結(jié)構(gòu),上沿管口設(shè)有防止培養(yǎng)管轉(zhuǎn)動(dòng)的固定裝置,下沿管口與培養(yǎng)基蓋板相切,所述固定裝置為凸起結(jié)構(gòu)。
[0010]所述培養(yǎng)管托槽設(shè)有與培養(yǎng)管固定裝置配合的限位裝置,所述限位裝置為凹槽。
[0011]所述濾光層為綠色濾光片,綠色濾光片能僅僅讓可見光的綠光進(jìn)入,這是因?yàn)榫G光對(duì)根系生長(zhǎng)無(wú)影響,紅光和藍(lán)光對(duì)根系生長(zhǎng)有影響,在綠光下觀察根系,可以避免紅光和藍(lán)光對(duì)根系的影響,因此使根系觀測(cè)更精確。
[0012]有益效果:與傳統(tǒng)裝置相比,本申請(qǐng)裝置可以使擬南芥的地上部照光而根系生長(zhǎng)在特定波長(zhǎng)光(綠光)下或完全黑暗環(huán)境中且無(wú)蔗糖添加,較符合植物的自然生長(zhǎng)環(huán)境(圖1)。本申請(qǐng)裝置可與增氧泵聯(lián)用,可以根據(jù)所培養(yǎng)的植物生長(zhǎng)要求實(shí)時(shí)調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件,培養(yǎng)箱蓋板上設(shè)有的坐標(biāo)系可以方便實(shí)驗(yàn)者觀測(cè)根系的生長(zhǎng)細(xì)節(jié),準(zhǔn)確定位每個(gè)培養(yǎng)箱蓋板上的種苗,箱體由兩種透光性能的材料組成,需要與箱體連接的設(shè)備均可以通過下層的不透光材料進(jìn)行連接,避免了接口處漏光對(duì)植物根系生長(zhǎng)造成的不良影響,透光材料部分可以方便實(shí)驗(yàn)者觀察植物根系的生長(zhǎng),從而判斷植物的長(zhǎng)勢(shì),透光材料部分還附加有遮光板,遮光板有自己獨(dú)立滑槽,當(dāng)實(shí)驗(yàn)人員觀察完畢后,可以還原根系生長(zhǎng)所需的黑暗環(huán)境,盡可能的減少光對(duì)植物的影響。我們進(jìn)一步比較了擬南芥在這兩種培養(yǎng)裝置下的生長(zhǎng)與響應(yīng)變化,研究結(jié)果表明:和傳統(tǒng)的裝置相比,本申請(qǐng)裝置能自然真實(shí)地反映擬南芥的地上部與根系的生長(zhǎng)(表I);本申請(qǐng)裝置能自然真實(shí)地反映根系對(duì)重力的響應(yīng);本申請(qǐng)裝置能自然真實(shí)地反映根尖生長(zhǎng)素的極性分布。同時(shí),該裝置在使用完畢后,清理更加方便,培養(yǎng)基托架無(wú)間隙貼合于培養(yǎng)箱體內(nèi)壁,培養(yǎng)基可灌注在托架內(nèi),因此可以通過培養(yǎng)基托架將使用過的培養(yǎng)基整體清除。此外,通過培養(yǎng)基蓋板與培養(yǎng)管托槽底部相切,以及培養(yǎng)管為上粗下細(xì)的貫通結(jié)構(gòu),保證了擬南芥根系生長(zhǎng)到培養(yǎng)基界面時(shí),能與培養(yǎng)基更自然的貼合,也解決了每次實(shí)驗(yàn)時(shí)灌注培養(yǎng)基的使用量問題,通過培養(yǎng)基蓋板上的一個(gè)通孔注入培養(yǎng)基,另一個(gè)通孔排氣,保證了順利灌膠,且完全排除氣泡保證培養(yǎng)基表面平整。
【專利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1為用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置的結(jié)構(gòu)示意圖;
[0014]圖2為培養(yǎng)管結(jié)構(gòu)示意圖;
[0015]圖中培養(yǎng)箱體1、觀察箱體2、培養(yǎng)管托架3、培養(yǎng)管托槽4、培養(yǎng)基托架5、培養(yǎng)基蓋板6、通孔7、通氣孔8、濾光層9、遮光板10、滑槽11、固定裝置12。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合具體實(shí)例和附圖,進(jìn)一步闡述本申請(qǐng)。應(yīng)理解,這些實(shí)施例僅用于對(duì)本申請(qǐng)進(jìn)行說(shuō)明,并不構(gòu)成對(duì)權(quán)利要求范圍的限制,本領(lǐng)域技術(shù)人員可以想到的其他替代手段,均在本申請(qǐng)權(quán)利要求范圍內(nèi)。
[0017]實(shí)施例1:
[0018]用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,包括培養(yǎng)箱體1、觀察箱體2和培養(yǎng)管,培養(yǎng)箱體I和觀察箱體2活動(dòng)連接;所述培養(yǎng)箱體I包括培養(yǎng)管托架3、培養(yǎng)基托架5和培養(yǎng)基蓋板6,所述培養(yǎng)管托架3設(shè)于培養(yǎng)箱體的上部,將培養(yǎng)箱體分為地上部生長(zhǎng)區(qū)和根系生長(zhǎng)區(qū),培養(yǎng)管托架上設(shè)有至少一個(gè)培養(yǎng)管托槽4,培養(yǎng)基托架5設(shè)于根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi),培養(yǎng)基蓋板6設(shè)于根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi),其板面與灌注培養(yǎng)基時(shí)的培養(yǎng)管托槽4底部相切;所述觀察箱體2包括通氣孔8、濾光層9和遮光板10,濾光層9設(shè)于觀察箱體2的側(cè)壁,遮光板10覆蓋于濾光層上,并與觀察箱體活動(dòng)連接,通氣孔8設(shè)于觀察箱體2上。所述培養(yǎng)基托架5上設(shè)有用于將其從根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi)移出的受力裝置。所述培養(yǎng)基蓋板上設(shè)有一對(duì)通孔7,向其中一個(gè)通孔內(nèi)注入培養(yǎng)基時(shí),另一個(gè)通孔用于排氣。所述觀察箱體2側(cè)壁上設(shè)有供遮光板10滑動(dòng)的滑槽11。還包括增氧泵,所述通氣孔8與增氧泵連接。培養(yǎng)管為上粗下細(xì)的貫通結(jié)構(gòu),上沿管口設(shè)有防止培養(yǎng)管轉(zhuǎn)動(dòng)的固定裝置12,下沿管口與培養(yǎng)基蓋板相切。培養(yǎng)管托槽4設(shè)有與培養(yǎng)管固定裝置配合的限位裝置。所述固定裝置為凸起結(jié)構(gòu)。所述限位裝置為凹槽。所述濾光層9為綠色濾光片,綠色濾光片能僅僅讓可見光的綠光進(jìn)入,這是因?yàn)榫G光對(duì)根系生長(zhǎng)無(wú)影響,紅光和藍(lán)光對(duì)根系生長(zhǎng)有影響,在綠光下觀察根系,可以避免紅光和藍(lán)光對(duì)根系的影響,因此使根系觀測(cè)更精確。
[0019]傳統(tǒng)的擬南芥裝置缺點(diǎn)是根系見光且系統(tǒng)密閉,這樣使空氣中的CO2進(jìn)不去,擬南芥不能進(jìn)行以CO2為底料的光合作用,所以板上添加了 l%wt-3%wt的蔗糖,以補(bǔ)充植物對(duì)碳水化合物所需,不符合植物的自然生長(zhǎng)狀態(tài)(根系見光且生長(zhǎng)于蔗糖添加的環(huán)境,地上部不能進(jìn)行正常的光合作用)。因此,我們?cè)O(shè)計(jì)了在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的新裝置。新裝置培養(yǎng)箱體I尺寸是(12.5X3.5X12.5cm,LXWXH),培養(yǎng)箱體I的培養(yǎng)管托槽內(nèi)用于放置培養(yǎng)管,此培養(yǎng)管可裝溶解的瓊脂膠,待瓊脂膠凝固和冷卻后可將擬南芥種子播于培養(yǎng)管上,擬南芥種子可在裝有瓊脂膠的培養(yǎng)管上生長(zhǎng),其根系能通過瓊脂膠穿過培養(yǎng)管,培養(yǎng)箱體I內(nèi)也裝了些瓊脂膠,待其凝固后,與培養(yǎng)管底部水平相切,那么從培養(yǎng)管伸出的擬南芥根正好也能貼著培養(yǎng)箱體I中凝固后的瓊脂膠生長(zhǎng);如圖1所示,培養(yǎng)箱體I和觀察箱體2 —樣大小,兩者可合成一個(gè)整體,觀察箱體側(cè)面的通氣孔可與增氧泵聯(lián)用,觀察箱體上有坐標(biāo)系和帶有獨(dú)立滑槽的遮光板,增氧泵可不斷向培養(yǎng)箱中充氧,這樣可以使擬南芥根系生長(zhǎng)環(huán)境氧氣充足以維持生長(zhǎng)所需,當(dāng)需要監(jiān)測(cè)擬南芥根系生長(zhǎng)時(shí),拉開遮光板就可以直接觀察擬南芥的根系生長(zhǎng)情況并根據(jù)坐標(biāo)系上的刻度讀出根系的長(zhǎng)度,遮光板之后的綠色濾光片能僅僅讓綠光進(jìn)入,綠光不會(huì)影響根系生長(zhǎng),那么我們可在觀察根系的同時(shí),避免可見光中的紅光和藍(lán)光對(duì)根系的影響,讓我們的觀測(cè)更準(zhǔn)確。因此,通過這樣的設(shè)計(jì),新裝置可使擬南芥根系生長(zhǎng)于黑暗環(huán)境(觀測(cè)時(shí)處于綠光環(huán)境)而無(wú)蔗糖添加,另外地上部生長(zhǎng)于開放的空氣中,可以空氣中的CO2為底料進(jìn)行正常的光合作用。
[0020]新裝置可在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與實(shí)時(shí)觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)中的應(yīng)用,具體方法為:將加熱融解的含有0.6%瓊脂(w/v,g/mL)的MS培養(yǎng)基灌入培養(yǎng)管和培養(yǎng)箱體I,通過培養(yǎng)基蓋板6保證裝置內(nèi)的培養(yǎng)基凝固后與培養(yǎng)管托槽底部相切,待冷卻后將培養(yǎng)管放入培養(yǎng)箱體I的培養(yǎng)管托槽內(nèi),然后將觀察箱體2與培養(yǎng)箱體I合成一個(gè)整體;然后,將擬南芥種子播于培養(yǎng)管表面;出苗后,具有綠葉的擬南芥地上部生長(zhǎng)于開放的空氣中(可進(jìn)行正常的光合作用),從小管伸出的擬南芥的根系正好也能貼著培養(yǎng)箱體I中凝固后的瓊脂膠生長(zhǎng)(生長(zhǎng)與黑暗的環(huán)境中且無(wú)蔗糖添加),在觀測(cè)期間濾光層可以在完全自然光照射下僅僅讓綠光進(jìn)入,不干擾根系的生長(zhǎng)發(fā)育,方便實(shí)驗(yàn)者觀察,同時(shí),也可以使用遮光板保證其擬南芥在完全黑暗的情況下生長(zhǎng),需要觀察時(shí),拉開遮光板,監(jiān)測(cè)擬南芥根系長(zhǎng)度,以判斷擬南芥的生長(zhǎng)情況,并開通增氧泵調(diào)控培養(yǎng)箱中的氧氣含量。試驗(yàn)完成后,可以通過培養(yǎng)基托架將使用過的培養(yǎng)基整體清除,方便后續(xù)清理使用。
[0021]實(shí)施例2:
[0022]采用實(shí)施例1的裝置進(jìn)行如下試驗(yàn)
[0023]植物生長(zhǎng)分析
[0024]植物于取樣后立即測(cè)量,干重、總根長(zhǎng)、側(cè)根長(zhǎng)、主根向重性的彎曲角度和基于綠色熒光蛋白(GFP)的激光共聚焦測(cè)定方法見我們發(fā)表的文章(Xu and Shi,Plant andSoil, 2007, 301:17-28 ;Xu et al., New Phytologist, 2013, 197:139-50)。
[0025]統(tǒng)計(jì)分析
[0026]用SPSS13.0Duncan,s Multiple Range Test 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析(Ρ〈0.05)。
[0027]結(jié)果與討論
[0028]根系的生長(zhǎng)與響應(yīng)
[0029]我們研究了在傳統(tǒng)裝置(根系見光及生長(zhǎng)于蔗糖添加環(huán)境,地上部處于密閉的裝置中不能進(jìn)行以CO2為底料的光合作用)與新裝置(根系生長(zhǎng)于黑暗和蔗糖不添加的環(huán)境,地上部處于開放的環(huán)境中能進(jìn)行以CO2為底料的光合作用)培養(yǎng)系統(tǒng)下擬南芥的生長(zhǎng)與響應(yīng)。首先,與傳統(tǒng)裝置培養(yǎng)下的擬南芥植株相比,新裝置培養(yǎng)下的擬南芥主根較長(zhǎng)、側(cè)根短、地上部與根系干重均有所減少(表1)。第二,與傳統(tǒng)裝置培養(yǎng)下的擬南芥主根的向重性相t匕,新裝置培養(yǎng)下的擬南芥主根對(duì)重力的響應(yīng)沒有那么強(qiáng)烈。第三,與傳統(tǒng)裝置培養(yǎng)下的擬南芥根尖生長(zhǎng)素的分布情況比較,新裝置培養(yǎng)下的擬南芥根尖生長(zhǎng)素展示了極性分布。因此,上述結(jié)果顯示新裝置能給予植物較接近自然的生長(zhǎng)環(huán)境,避免研究過程中“不嚴(yán)謹(jǐn)結(jié)果”的產(chǎn)生,使植物研究者能得出“較本真的結(jié)論”。
[0030]表1兩種裝置下野生型擬南芥(Ws)的生長(zhǎng)情況
[0031]
【權(quán)利要求】
1.用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于:包括培養(yǎng)箱體(I)、觀察箱體(2)和培養(yǎng)管,培養(yǎng)箱體(I)和觀察箱體(2)活動(dòng)連接;所述培養(yǎng)箱體(I)包括培養(yǎng)管托架(3 )、培養(yǎng)基托架(5 )和培養(yǎng)基蓋板(6 ),所述培養(yǎng)管托架(3 )設(shè)于培養(yǎng)箱體的上部,將培養(yǎng)箱體分為地上部生長(zhǎng)區(qū)和根系生長(zhǎng)區(qū),培養(yǎng)管托架上設(shè)有至少一個(gè)培養(yǎng)管托槽(4),培養(yǎng)基托架(5)設(shè)于根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi),與培養(yǎng)箱體內(nèi)壁貼合,培養(yǎng)基蓋板(6)設(shè)于根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi),其板面與灌注培養(yǎng)基時(shí)的培養(yǎng)管托槽(4)底部相切;所述觀察箱體(2)包括通氣孔(8)、濾光層(9)和遮光板(10),濾光層(9)設(shè)于觀察箱體(2)的側(cè)壁,遮光板(10)覆蓋于濾光層上,并與觀察箱體活動(dòng)連接,通氣孔(8)設(shè)于觀察箱體(2)上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于所述培養(yǎng)基托架(5)上設(shè)有用于將其從根系生長(zhǎng)區(qū)內(nèi)移出的受力裝置。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于所述培養(yǎng)基蓋板上設(shè)有至少一個(gè)通孔(J)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于所述觀察箱體(2 )側(cè)壁上設(shè)有供遮光板(10 )滑動(dòng)的滑槽(11)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于還包括增氧泵,所述通氣孔(8)與增氧泵連接。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于所述培養(yǎng)管為上粗下細(xì)的倒圓臺(tái)貫通結(jié)構(gòu),上沿管口設(shè)有防止培養(yǎng)管轉(zhuǎn)動(dòng)的固定裝置(12),下沿管口與培養(yǎng)基蓋板相切。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于所述培養(yǎng)管托槽(4 )設(shè)有與培養(yǎng)管固定裝置配合的限位裝置。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于所述固定裝置為凸起結(jié)構(gòu)。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于所述限位裝置為凹槽。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于在近自然狀態(tài)下培養(yǎng)與觀測(cè)擬南芥生長(zhǎng)的裝置,其特征在于所述濾光層(9)為綠色濾光片。
【文檔編號(hào)】A01G31/02GK203748376SQ201420068912
【公開日】2014年8月6日 申請(qǐng)日期:2014年2月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月18日
【發(fā)明者】許衛(wèi)鋒, 施衛(wèi)明 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院南京土壤研究所