一種鐵皮石斛組織培養(yǎng)培養(yǎng)基及其鐵皮石斛組織培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種鐵皮石斛組織培養(yǎng)培養(yǎng)基，包括第一階段--種子萌發(fā)形成綠色的原球莖階段所用的培養(yǎng)基a，第二階段--原球莖成長為小植株階段所用的培養(yǎng)基b，第三階段--原球莖成長為小植株階段所用的培養(yǎng)基三個(gè)階段的不同培養(yǎng)基，并用此培養(yǎng)基培養(yǎng)鐵皮石斛組織的方法。本發(fā)明的培養(yǎng)基能高效提高鐵皮石斛種子組培萌發(fā)率及促進(jìn)原球莖分化，培養(yǎng)基中不含激素，培養(yǎng)成本低，培養(yǎng)處的石斛組織品質(zhì)高。
【專利說明】一種鐵皮石斛組織培養(yǎng)培養(yǎng)基及其鐵皮石斛組織培養(yǎng)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中草藥培養(yǎng)領(lǐng)域，具體涉及鐵皮石斛組織培養(yǎng)培養(yǎng)基及其組織培養(yǎng)方 法

【背景技術(shù)】
[0002] 鐵皮石斛
[0003] 鐵皮石斛（學(xué)名：Dendrobium officinale Kimura et Migo)屬微子目，蘭科多年 生附生草本植物。莖直立，圓柱形，長9-35厘米，粗2-4毫米，萼片和花瓣黃綠色，近相似， 長圓狀披針形，長約I. 8cm，寬4?5mm，花期3?6月，分布于我國秦嶺、淮河以南諸省區(qū)， 生長在高山峻嶺懸崖峭壁和巖石縫隙或深山古樹上，鐵皮石斛的功能與主治："益胃生津， 滋陰清熱。用于陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明。"《中華人民共和國藥 典》2010年版第一部收載作為石斛藥用。鐵皮石斛為我國傳統(tǒng)珍貴藥材，《道藏》、《神農(nóng)本 草經(jīng)》、《本草綱目》、《現(xiàn)代中藥大辭典》等均有記載，享有"中國九大仙草之首"的美譽(yù)，屬于 國家優(yōu)先發(fā)展【技術(shù)領(lǐng)域】的重點(diǎn)新產(chǎn)品，是推動(dòng)中藥產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)優(yōu)化升級和提高中藥產(chǎn)業(yè)競爭 力的有力品種，因其資源緊缺、用量大，所以鐵皮石斛是珍稀瀕危、高附加值野生藥材規(guī)模 化野生變家種品種。
[0004] 植物組織培養(yǎng)技術(shù)
[0005] 植物組織培養(yǎng)是以植物生理學(xué)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的一項(xiàng)新興的應(yīng)用型現(xiàn)代生物技 術(shù)。植物組織培養(yǎng)的概念分為廣義概念和狹義概念兩種，廣義上的植物組織培養(yǎng)是指在無 菌和人工控制條件下，將離體的植物器官（根、莖、葉、花、果實(shí)、種子等）、組織（分生組織、 花藥組織、胚乳等）、細(xì)胞（體細(xì)胞和生殖細(xì)胞）或原生質(zhì)體等接種到人工配制的培養(yǎng)基上 進(jìn)行培養(yǎng)，使之再生新細(xì)胞或生長發(fā)育成完整再生植株的過程。狹義上的植物組織培養(yǎng)是 指對植物各種組織進(jìn)行培養(yǎng)，并使其生長發(fā)育成完整再生植株的過程。由于植物組織培養(yǎng) 中的培養(yǎng)材料脫離了植物母體，所以又稱為植物離體培養(yǎng)。
[0006] 組織培養(yǎng)技術(shù)是農(nóng)業(yè)高新技術(shù)中最重要、最活躍的領(lǐng)域之一，它不僅是農(nóng)業(yè)持續(xù) 發(fā)展的基礎(chǔ)，而且是生物技術(shù)中應(yīng)用最廣、最具現(xiàn)實(shí)意義的領(lǐng)域，被譽(yù)為農(nóng)業(yè)發(fā)展史上的第 4次綠色革命。其對解決經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展所面臨的人口增長、農(nóng)業(yè)資源匱乏、環(huán)境污染等重 大問題，具有戰(zhàn)略意義。我國植物快速繁殖和無病毒種苗生產(chǎn)的研究始于20世紀(jì)70年代。 組織培養(yǎng)技術(shù)在藥用植物培養(yǎng)、突變體選育及種質(zhì)資源保存等方面也有了新的進(jìn)展。有研 究表明，全世界有75 %的人口以植物作為治療、預(yù)防疾病的藥物來源。
[0007] 培養(yǎng)基
[0008] 在植物組織培養(yǎng)過程中，新陳代謝是培養(yǎng)物生命存在和形態(tài)建成的基礎(chǔ)。培養(yǎng)基 是培養(yǎng)物生長發(fā)育的基質(zhì)，一方面它為培養(yǎng)物的生長發(fā)育提各種營養(yǎng)需求，另一方面還控 制調(diào)節(jié)著培養(yǎng)物生長的速度和細(xì)胞分化的方向。
[0009] 經(jīng)過多年的研究，目前人們已經(jīng)比較清楚地了解了培養(yǎng)植物所需要的培養(yǎng)基主要 由水、無機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)、有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)、植物生長調(diào)節(jié)劑、凝固劑等幾類物質(zhì)構(gòu)成。
[0010] 培養(yǎng)基是決定植物組培成敗的關(guān)鍵因素之一。培養(yǎng)基的種類和成分直接影響著培 養(yǎng)物的生長和分化，不同的植物材料對培養(yǎng)基的要求不一樣，且不同的培養(yǎng)階段需要加入 的添加物也不同。因此，根據(jù)培養(yǎng)物的種類、部位以及不同培養(yǎng)目的篩選適宜的培養(yǎng)基，是 植物離體培養(yǎng)工作的重要環(huán)節(jié)。
[0011] 現(xiàn)有技術(shù)主要是采用石斛的根、莖、葉作為外植體，本發(fā)明通過對種子進(jìn)行組培， 保證了種源的地道性。
[0012] 現(xiàn)有的石斛組織培養(yǎng)基，基培養(yǎng)方法成本高，效率底，耗時(shí)間等類似問題，大多含 有激素，所培養(yǎng)出來的石斛品質(zhì)不是特別好。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 一種鐵皮石斛組織培養(yǎng)培養(yǎng)基及其組織培養(yǎng)方法，本發(fā)明的培養(yǎng)基能高效提高鐵 皮石斛種子組培萌發(fā)率及促進(jìn)原球莖分化，培養(yǎng)基中不含激素，培養(yǎng)成本低，培養(yǎng)處的石斛 組織品質(zhì)商。
[0014] 本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
[0015] 一種鐵皮石斛組織培養(yǎng)培養(yǎng)基，其特征在于，包括第一階段--種子萌發(fā)形成綠色 的原球莖階段所用的培養(yǎng)基a，第二階段--原球莖成長為小植株階段所用的培養(yǎng)基b，第三 階段一原球莖成長為小植株階段所用的培養(yǎng)基三個(gè)階段的不同培養(yǎng)基，三個(gè)培養(yǎng)基的配 方如下：
[0016] 培養(yǎng)基a的配方為：

【權(quán)利要求】
1. 一種鐵皮石斛組織培養(yǎng)培養(yǎng)基，其特征在于，包括第一階段--種子萌發(fā)形成綠色的 原球莖階段所用的培養(yǎng)基a，第二階段一原球莖成長為小植株階段所用的培養(yǎng)基b，第三階 段一原球莖成長為小植株階段所用的培養(yǎng)基三個(gè)階段的不同培養(yǎng)基，三個(gè)培養(yǎng)基的配方 如下：

2. -種采用權(quán)利要求1的培養(yǎng)基培養(yǎng)鐵皮石斛組織的方法，其特征在于，包括以下步 驟： (1) 第一階段：將引進(jìn)的石斛蒴果進(jìn)行消毒處理，采用1%。HgCl浸泡9-llmin，處理好 的蒴果在無菌條件下，將其內(nèi)部的種子接種到培養(yǎng)基a上，培養(yǎng)一個(gè)月，萌發(fā)形成綠色的原 球莖，培養(yǎng)溫度23-27°C，光照度1500-20001x，光照時(shí)間10-12h/d ; (2) 第二階段：將第一階段種子萌發(fā)生成的原球莖，接種到培養(yǎng)基b上，誘導(dǎo)培養(yǎng)2-3 個(gè)月，原球莖成長為小植株，培養(yǎng)溫度23-27°C，光照度1500-20001X，光照時(shí)間10-12h/d。 (3) 第三階段：將已經(jīng)由原球莖分化成的小植株接種到生根培養(yǎng)基c上，培養(yǎng)3-4個(gè) 月，培育出高5cm的大苗，隨進(jìn)行煉苗移栽，煉苗時(shí)保證在75 % -80 %的含水量，保證空氣濕 潤，溫度不宜過高，在25°C左右；培養(yǎng)溫度23-27°C，光照度1500-20001X，光照時(shí)間10-12h/ d〇
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鐵皮石斛組織培養(yǎng)的方法，其特征在于：所述的石斛蒴果為 霍山石斛蒴果。
【文檔編號】A01H4/00GK104322371SQ201410598370
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2014年10月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月29日
【發(fā)明者】王夢云, 王國旗, 姚偉, 宋志威, 黃學(xué)文, 徐飛 申請人:安徽牧龍山生態(tài)旅游開發(fā)股份有限公司