一種四季桂組培快繁方法
【專利摘要】本發(fā)明為一種四季桂組培快繁的方法。該方法通過組織培養(yǎng)離體的四季桂外植體，誘導(dǎo)其在培養(yǎng)瓶中生長發(fā)根，從而大大提高其增殖系數(shù)，縮短育苗周期，達(dá)到快速繁育的目的。本技術(shù)的實施包括以下具體步驟：取四季桂當(dāng)年生半木質(zhì)化或木質(zhì)化莖尖，用75％的酒精和0.1％的升汞進(jìn)行消毒；將消毒后的外植體接種于初代培養(yǎng)基中；培養(yǎng)10～20天后，將長勢健壯未染菌的外植體轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)；待腋芽萌發(fā)生長至1～2cm左右，將外植體轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基；將誘發(fā)出不定根的無菌苗進(jìn)行3-5天的煉苗后，移栽至含營養(yǎng)土的塑料缽內(nèi)，溫室培養(yǎng)后獲得成苗。
【專利說明】一種四季桂組培快繁方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于農(nóng)林業(yè)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種四季桂組培快繁的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]桂花的常規(guī)扦插因受季節(jié)時間、地區(qū)環(huán)境差異和桂花生長速度等因素的限制，存在生根慢、生長慢、擴繁周期長和擴繁倍數(shù)低等缺陷，尤其對于一些珍貴的優(yōu)良品種，由于來源稀缺而導(dǎo)致遲遲不能推廣。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)來彌補常規(guī)育苗的不足，對于來源稀缺的珍貴桂花品種的推廣具有極大的應(yīng)用價值。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于利用植物離體再生的特性，通過組織培養(yǎng)構(gòu)建四季桂的離體再生系統(tǒng)，從而達(dá)到增加桂花擴繁增殖倍數(shù)，減少生根所需時間，提高產(chǎn)量。
[0004]本技術(shù)的實施包括以下具體步驟:
[0005](I)外植體的選取和消毒:取四季桂當(dāng)年生的莖尖，剪成小段后，用酒精和升汞進(jìn)行消毒；
[0006](2)初代培養(yǎng):配制初代培養(yǎng)基并滅菌，將消毒后的外植體在無菌操作臺上接種于初代培養(yǎng)基中，在光照培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照14小時，溫度控制在為20?26°C ；
[0007](3)增殖繼代培養(yǎng):初代培養(yǎng)10?20天后，將未染菌的外植體轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)；
[0008](4)生根培養(yǎng):繼代培養(yǎng)I個月左右，將腋芽萌發(fā)長度超過Icm的外植體轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)；
[0009](5)煉苗移栽:生根20天后，將生根的培養(yǎng)瓶移至大棚并敞開瓶口，煉苗3?5天后，將瓶苗移出培養(yǎng)瓶洗凈附著的培養(yǎng)基，最后移至裝有營養(yǎng)土的塑料缽中。

【具體實施方式】
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[0010](I)外植體的選取和消毒:選取當(dāng)年生半木質(zhì)化或木質(zhì)化的四季桂莖尖，取回后用肥皂清洗2?3遍，再用流水沖洗0.5?I小時，之后在無菌操作臺上用消過毒的鑷子和解剖刀將外植體切成I?2厘米長的小段，每段至少含一個腋芽，用消毒的紗布包裹住以75%的酒精處理10?30秒，再用0.1 %的升汞處理3?10分鐘，最后用無菌水漂洗3?6遍。
[0011](2)初代培養(yǎng):將消毒處理后的外植體在無菌操作臺上接入初代培養(yǎng)基中，在光照培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照14小時，溫度控制在為20?26°C ;培養(yǎng)基成份為B5基礎(chǔ)培養(yǎng)基+3%的蔗糖+0.7%的瓊脂粉，pH為5.8，并添加10%的桂花葉浸出物，培養(yǎng)基配制好后進(jìn)行高壓滅菌；所述桂花葉浸出物用新鮮桂花葉1g在研缽中研磨碎后，加入10ml水混合后用濾紙過濾，取濾液。
[0012](3)增殖繼代培養(yǎng):初代培養(yǎng)10?20天后，將未染菌的外植體轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，每兩周更新一次培養(yǎng)基，繼代時截去底端褐化部分I?2mm ;繼代培養(yǎng)基的成份是在初代培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加I?2mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.2?0.5mg/L的吲哚丁酸。
[0013](4)生根培養(yǎng):繼代培養(yǎng)I個月左右，將腋芽萌發(fā)長度超過Icm的外植體轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，生根培養(yǎng)時，先進(jìn)行5?10天左右的暗培養(yǎng)，再移至光照培養(yǎng)室進(jìn)行正常培養(yǎng)；生根培養(yǎng)基的成份是在初代培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加I?2mg/L的萘乙酸和2?3mg/L的B引哚丁酸。
[0014](5)煉苗移栽:生根20天后，將生根的培養(yǎng)瓶移至大棚并敞開瓶口進(jìn)行煉苗，煉苗時在瓶內(nèi)噴灑10%的多菌靈，保持其濕度不低于70%，煉苗3?5天后，將瓶苗移出培養(yǎng)瓶洗凈附著的培養(yǎng)基，最后移至裝有營養(yǎng)土的塑料缽中；營養(yǎng)土宜采用肥沃的黃土并添加少量陶粒，移栽前的營養(yǎng)土要用多菌靈澆透。
[0015]需要說明，根據(jù)上述說明書的闡述，本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員還可以對上述實施方式進(jìn)行變更和修改。因此，本發(fā)明并不局限于上面所述的【具體實施方式】，對本發(fā)明的一些等同修改和變更也應(yīng)當(dāng)在本發(fā)明的權(quán)利要求的保護(hù)范圍。同時，本說明書中使用的一些特定的術(shù)語并不對本發(fā)明構(gòu)成任何限制。
【權(quán)利要求】
1.一種四季桂組培快繁的方法，其主要技術(shù)實施步驟為: (1)外植體的選取和消毒:取四季桂當(dāng)年生的莖尖，剪成小段后，用酒精和升汞進(jìn)行消毒； (2)初代培養(yǎng):配制初代培養(yǎng)基并滅菌，將消毒后的外植體在無菌操作臺上接種于初代培養(yǎng)基中，在光照培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照14小時，溫度控制在為20?26°C ； (3)增殖繼代培養(yǎng):初代培養(yǎng)10?20天后，將未染菌的外植體轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)； (4)生根培養(yǎng):繼代培養(yǎng)1個月左右，將腋芽萌發(fā)長度超過1cm的外植體轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)； (5)煉苗移栽:生根20天后，將生根的培養(yǎng)瓶移至大棚并敞開瓶口，煉苗3-5天后，將瓶苗移出培養(yǎng)瓶洗凈附著的培養(yǎng)基，最后移至裝有營養(yǎng)土的塑料缽中。
2.如權(quán)利要求1所述的四季桂組織培養(yǎng)快繁方法，其特征在于:選取當(dāng)年生半木質(zhì)化或木質(zhì)化的四季桂莖尖，取回后用肥皂清洗2?3遍，在用流水沖洗0.5?1小時，之后在無菌操作臺上用75%的酒精處理10?30秒，再用0.1%的升汞處理3?10分鐘，最后用無菌水漂洗3?6遍。
3.如權(quán)利要求1所述的四季桂組織培養(yǎng)快繁方法，其特征在于:初代培養(yǎng)基成份為B5基礎(chǔ)培養(yǎng)基+3%的蔗糖+0.7%的瓊脂粉，pH為5.8，并添加10%的桂花葉浸出物，培養(yǎng)基配制好后進(jìn)行高壓滅菌。
4.如權(quán)利要求1所述的四季桂組織培養(yǎng)快繁方法，其特征在于:繼代培養(yǎng)基的成份是在初代培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加1?2mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.2?0.5mg/L的吲哚丁酸；生根培養(yǎng)基的成份是在初代培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加1?2mg/L的萘乙酸和2?3mg/L的吲哚丁酸。
5.如權(quán)利要求1所述的四季桂組織培養(yǎng)快繁方法，其特征在于:在生根培養(yǎng)時，先進(jìn)行5?10天的暗培養(yǎng)，再移至光照培養(yǎng)室進(jìn)行正常培養(yǎng)。
6.如權(quán)利要求1所述的四季桂組織培養(yǎng)快繁方法，其特征在于:煉苗時在瓶內(nèi)噴灑10%多菌靈，保持其濕度不低于70%，移栽前的營養(yǎng)土要用多菌靈澆透。
【文檔編號】A01H4/00GK104351048SQ201410556952
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月14日
【發(fā)明者】王迅, 蔡金術(shù), 謝云軍, 向盈, 曹莉 申請人:深圳文科園林股份有限公司