紫海雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種紫海雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建方法及應(yīng)用。該恢復(fù)系是能使雄性不育系后代恢復(fù)雄性可育特性的海灣扇貝品系，其中紫海雜交扇貝是紫扇貝卵子與海灣扇貝精子的雜交后代。其構(gòu)建方法是選擇雄性不育系中的優(yōu)良個(gè)體，用不同的海灣扇貝連續(xù)回交，直到后代全部為雌雄同體時(shí)，即獲得該雄性不育系的恢復(fù)系。最后用恢復(fù)系與相應(yīng)的雄性不育系雜交生產(chǎn)紫海雜交扇貝商品苗種。本發(fā)明首次在動(dòng)物中建立了雄性不育系恢復(fù)系，有效克服了雌雄同體扇貝雜交中自體受精的障礙，且生產(chǎn)的紫海雜交扇貝當(dāng)年產(chǎn)量比海灣扇貝提高40％以上。
【專利說(shuō)明】紫海雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建方法與應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于貝類育種技術(shù)--雜交扇貝商品苗種培育方法，尤其是涉及一種紫海雜交扇貝(紫扇貝卵子與海灣扇貝精子的雜交后代)恢復(fù)系的構(gòu)建方法及應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]海灣扇貝(Argopecten irradians irradians)原產(chǎn)于美國(guó)大西洋沿岸，于1982年引入我國(guó)。海灣扇貝生長(zhǎng)速度快，溫度適應(yīng)范圍廣，抗逆性強(qiáng)，非常適合我國(guó)北方海域的養(yǎng)殖，目前產(chǎn)量和養(yǎng)殖面積占我國(guó)扇貝養(yǎng)殖的50%以上。但是由于引進(jìn)后長(zhǎng)期近交，海灣扇貝在養(yǎng)殖過(guò)程中種質(zhì)退化嚴(yán)重，表現(xiàn)為商品貝規(guī)格越來(lái)越小，育苗養(yǎng)殖過(guò)程中死亡率較高，因此扇貝養(yǎng)殖業(yè)迫切需要對(duì)海灣扇貝進(jìn)行遺傳改良，其中雜交育種是最有效的種質(zhì)改良方法之一。
[0003]為此，發(fā)明人自2007年首次從秘魯引進(jìn)了紫扇貝(Argopecten purpuratus)。紫扇貝是原產(chǎn)于南太平洋的一種速生型中型扇貝，與海灣扇貝都屬于Argopecten屬，染色體數(shù)相同，且都是雌雄同體，但二者在個(gè)體大小、生長(zhǎng)和溫度適應(yīng)性等方面性狀互補(bǔ)。因此發(fā)明人又通過(guò)將紫扇貝與海灣扇貝進(jìn)行種間雜交，培養(yǎng)出正交(紫扇貝卵子和海灣扇貝精子受精)和反交(海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精)兩種雜交子一代。雜交子一代的個(gè)體重比同期培育的海灣扇貝提高約100%，當(dāng)年可長(zhǎng)到7-8公分，而且第二年可繼續(xù)養(yǎng)殖達(dá)到更大規(guī)格，個(gè)體重達(dá)到200克以上，其抗逆性增強(qiáng)，特別是在山東地區(qū)能夠順利度夏和越冬，顯示出巨大的產(chǎn)業(yè)潛力(王春德等，2009.紫扇貝與海灣扇貝種間雜交的研究。海洋科學(xué)，33(10):84-87 ；Chunde Wang 等，2011.1ntroduct1n of the Peruvian scallop and itshybridizat1n with the bay scallop in China, Aquaculture, 2011，310:380-387)。
[0004]上述雜交子一代雖然可以產(chǎn)生較大的雜種優(yōu)勢(shì)，但是要大面積推廣仍存在著較大的困難，這是因?yàn)楹成蓉惡妥仙蓉惗际谴菩弁w的扇貝，繁殖時(shí)同時(shí)排放精子和卵子，排放的卵子容易受到同種精子的污染，難以大量獲得未受精卵用于種間雜交，從而導(dǎo)致所獲得的商品苗種中真正的雜交后代比例大大降低，因而使其產(chǎn)量的提高幅度大大受限。
[0005]研究發(fā)現(xiàn)，上述兩種Argopecten扇貝的雌雄同體特性與許多農(nóng)作物的雌雄同株特性相似。在雌雄同株的農(nóng)作物育種中也存在著同花授粉的問(wèn)題，需要人工去雄，這一點(diǎn)與紫扇貝與海灣扇貝雜交過(guò)程中遇到的自體受精問(wèn)題相似。農(nóng)業(yè)上解決這個(gè)問(wèn)題的關(guān)鍵依賴于雄性不育植株的發(fā)現(xiàn)，利用雄性不育株與其父本連續(xù)回交，就可以選育出雄性不育系、保持系和恢復(fù)系，以此來(lái)構(gòu)建農(nóng)作物育種中的恢復(fù)系，實(shí)現(xiàn)雜交種的大規(guī)模生產(chǎn)，從而解決雜交制種難題。迄今為止，國(guó)內(nèi)外已經(jīng)在眾多的農(nóng)作物中建立了恢復(fù)系，并廣泛應(yīng)用于雜交種的生產(chǎn)中，成為大幅度提高農(nóng)作物產(chǎn)量的主要途徑。
[0006]但是在動(dòng)物育種中，國(guó)內(nèi)外迄今為止尚無(wú)發(fā)現(xiàn)雄性不育且雌性可育個(gè)體的報(bào)道，因而也無(wú)法建立類似于農(nóng)作物的雄性不育系、保持系和恢復(fù)系，用于雜交育種。顯然，如果在動(dòng)物育種中能夠構(gòu)建起類似的包括雄性不育系、保持系和恢復(fù)系的恢復(fù)系，也就可以實(shí)現(xiàn)雌雄同體型動(dòng)物的低成本、規(guī)?；N間雜交，提高雜交效率,提高育種動(dòng)物的抗逆性和產(chǎn)量，從而實(shí)現(xiàn)動(dòng)物育種技術(shù)的重大突破?；謴?fù)系是利用雄性不育系實(shí)現(xiàn)雜交扇貝苗種商品化生產(chǎn)所必需的父本品系。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是實(shí)現(xiàn)在動(dòng)物育種中，具體地說(shuō)是在雌雄同體型扇貝中首次構(gòu)建紫海雜交扇貝恢復(fù)系，以克服現(xiàn)有雜交扇貝育種技術(shù)的不足。
[0008]本發(fā)明的另一目的是利用上述恢復(fù)系與相應(yīng)的雄性不育系雜交，建立大規(guī)模、低成本生產(chǎn)紫海雜交扇貝苗種的應(yīng)用方法。
[0009]上述的雄性不育系是雄性性腺發(fā)育不正常，不能產(chǎn)生有功能的精子，但其卵子發(fā)育正常，能接受正常精子而受精，并能將其雄性不育特性遺傳給后代的品系。顯然雄性不育系是三系配套體系中的核心品系，其主要作用是在雜交苗種商業(yè)化生產(chǎn)中提供大量的未受精卵子，同時(shí)其繁育依賴于與其配套的保持系。雄性不育系是利用偶然發(fā)現(xiàn)的雄性不育且卵子可育的個(gè)體與其父本連續(xù)回交建立回交家系，當(dāng)回交家系的所有個(gè)體均為雄性不育且卵子可育時(shí)所獲得的雜交扇貝品系。
[0010]恢復(fù)系又稱雄性不育系恢復(fù)系，用它的精子給雄性不育系的卵子受精后，所產(chǎn)生的雜交后代雌性和雄性育性均恢復(fù)正常?；謴?fù)系是能夠正常繁育的雌雄同體品系，可以通過(guò)自交繁育下一代恢復(fù)系。在動(dòng)物育種中，恢復(fù)系的作用是提供精子與雄性不育系的卵子受精，以實(shí)現(xiàn)優(yōu)良商品雜交苗種的培育。
[0011]本發(fā)明基于以下構(gòu)思和實(shí)踐:1)發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)了紫海雜交扇貝(紫扇貝卵子與海灣扇貝精子的雜交后代)子一代中存在5-10%的雄性不育個(gè)體，這些個(gè)體不產(chǎn)生有活性的精子，但其卵子可以被海灣扇貝的精子受精，且所獲得的受精卵能夠正常發(fā)育，即獲得了回交扇貝；2)用海灣扇貝精子與紫海雜交扇貝中雄性不育個(gè)體的卵子回交所培育的回交扇貝養(yǎng)成后約90%個(gè)體仍表現(xiàn)為雌雄同體，因此可以通過(guò)建立多個(gè)回交家系并進(jìn)行配合力測(cè)驗(yàn)的方法，選育出其后代全部為雌雄同體且性狀優(yōu)良的雄性不育系(母本)_海灣扇貝(父本)組合，這個(gè)組合中的海灣扇貝品系具有使雄性不育系恢復(fù)雄性育性的能力，即獲得紫海雜交扇貝雄性不育系的恢復(fù)系；3)通過(guò)將這些恢復(fù)系的精子與相應(yīng)的雄性不育種貝雜交，能實(shí)現(xiàn)方便、高效、規(guī)?；a(chǎn)紫海雜交扇貝商品苗種，且所獲得的雜交扇貝商品苗種在生長(zhǎng)、個(gè)體大小和溫度耐受性方面具有顯著的優(yōu)勢(shì)。
[0012]本發(fā)明的紫海雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建方法如下:
[0013]從紫海雜交扇貝雄性不育系中選擇大個(gè)體扇貝，促熟產(chǎn)卵后分別用性狀優(yōu)良的不同海灣扇貝精子授精，建立大量的回交家系，同時(shí)將供精的海灣扇貝自繁建立自交家系，測(cè)量雜交后代的生長(zhǎng)和存活情況并進(jìn)行配合力測(cè)驗(yàn)；從第二年起每年根據(jù)配合力測(cè)驗(yàn)結(jié)果和性腺發(fā)育情況，選擇其中性狀優(yōu)良且含有雌雄同體扇貝的回交家系，將與其相關(guān)的雄性不育家系種貝連續(xù)與供精的海灣扇貝雜交家系精子回交建立回交家系，直到回交家系全部為雌雄同體且性狀優(yōu)良，則將供精的海灣扇貝自交家系用常規(guī)的海灣扇貝育苗方法自交擴(kuò)繁，即獲得該雄性不育系的恢復(fù)系?；謴?fù)系的作用是提供精子與雄性不育系的卵子受精，以實(shí)現(xiàn)優(yōu)良商品雜交苗種的培育?；謴?fù)系為雌雄同體且正常發(fā)育的海灣扇貝品系，因此通過(guò)常規(guī)的海灣扇貝群體自交方法繁育下一代恢復(fù)系。
[0014]本發(fā)明的紫海雜交扇貝恢復(fù)系的應(yīng)用方法如下:
[0015]首先按照5:1的比例選擇紫海雜交扇貝的雄性不育系和恢復(fù)系種貝，并按常規(guī)方法促熟后分別刺激雄性不育系種貝產(chǎn)卵和恢復(fù)系種貝產(chǎn)卵排精，再將該恢復(fù)系的精卵混合液用500目篩絹過(guò)濾即獲得恢復(fù)系的精液，將恢復(fù)系的精液加入產(chǎn)卵池中并攪拌，且加入精子的量以每個(gè)卵子周圍有5-6個(gè)精子為宜，最后按常規(guī)方法孵化后即獲紫海雜交扇貝商品苗種。
[0016]本發(fā)明的恢復(fù)系構(gòu)建方法也應(yīng)用于海紫雜交扇貝(海灣扇貝卵子與紫扇貝精子的雜交后代)、紫墨雜交扇貝(紫扇貝卵子與墨西哥灣扇貝精子的雜交后代)和墨紫雜交扇貝(墨西哥灣扇貝卵子與紫扇貝精子的雜交后代)等Argopecten屬雜交扇貝的育種實(shí)踐，并且應(yīng)用于建立這些雜交扇貝商品苗種的規(guī)?；a(chǎn)方法。
[0017]本發(fā)明的方法同樣適用于其他雌雄同體型扇貝的種間雜交育種，例如Pecten屬扇貝的種間雜交，本發(fā)明的基本方法也適用于其他雌雄同體型無(wú)脊椎動(dòng)物的種間雜交育種。
[0018]本發(fā)明構(gòu)建的紫海雜交扇貝恢復(fù)系是首次在動(dòng)物界中建立的扇貝的恢復(fù)系，應(yīng)屬于動(dòng)物育種技術(shù)中的重大突破。本發(fā)明有效克服了雌雄同體扇貝雜交過(guò)程中自體受精的障礙，實(shí)現(xiàn)了低成本和規(guī)?；@得完全的雜交后代，因此可充分利用雜種優(yōu)勢(shì)，達(dá)到了使所培育的紫海雜交扇貝商品苗種同時(shí)具有海灣扇貝和紫扇貝的特性，在生長(zhǎng)、個(gè)體大小和溫度耐受性方面比海灣扇貝具有顯著優(yōu)勢(shì)，因此能在北方海區(qū)如青島、大連等海域成功養(yǎng)殖，且當(dāng)年產(chǎn)量可比海灣扇貝提高40 %以上。

【具體實(shí)施方式】
[0019]本發(fā)明構(gòu)建了紫海雜交扇貝的恢復(fù)系，并建立了用恢復(fù)系與相應(yīng)的雄性不育系雜交生產(chǎn)紫海雜交扇貝商品苗種的方法，具體步驟如下:
[0020]實(shí)施例1
[0021]1)紫海雜交扇貝恢復(fù)系的選育:選擇紫海雜交扇貝雄性不育系中的大個(gè)體扇貝50個(gè)，促熟產(chǎn)卵后分別用不同海灣扇貝的精子受精，建立至少20個(gè)回交家系，同時(shí)將供精的海灣扇貝自繁建立自交家系，測(cè)量回交后代的生長(zhǎng)和存活情況并進(jìn)行配合力測(cè)驗(yàn)；從第二年起每年根據(jù)配合力測(cè)驗(yàn)結(jié)果和性腺發(fā)育情況選擇其中性狀優(yōu)良且含有雌雄同體扇貝的回交家系，將與其相關(guān)的雄性不育家系種貝連續(xù)與供精的海灣扇貝雜交家系精子回交建立回交家系，直到回交家系全部為雌雄同體且性狀優(yōu)良，則將供精的海灣扇貝家系自交擴(kuò)繁，即獲得該紫海雜交扇貝雄性不育系的恢復(fù)系，用于紫海雜交扇貝商品苗種的規(guī)?；a(chǎn)。
[0022]2)用恢復(fù)系生產(chǎn)紫海雜交扇貝商品苗種的方法:春季育苗時(shí)按照5:1的比例選擇雄性不育系和恢復(fù)系種貝促熟后，在產(chǎn)卵池中刺激雄性不育系種貝產(chǎn)卵，在水桶中刺激恢復(fù)系種貝排精，并用500目篩絹過(guò)濾獲得不含卵子的恢復(fù)系海灣扇貝精液；將恢復(fù)系的精液均勻潑灑到產(chǎn)卵池中并立即攪拌，隨時(shí)取樣在顯微鏡下觀察受精情況，精液加入量以每個(gè)卵子周圍有5-6個(gè)精子為宜；受精卵按照常規(guī)方法孵化，發(fā)育后即獲得紫海雜交扇貝商業(yè)苗種。
[0023]實(shí)施例2
[0024]2008年3月底，取性腺發(fā)育成熟的紫扇貝，經(jīng)溫度刺激后獲得紫扇貝卵子，用海灣扇貝的精子授精后獲得紫扇貝與海灣扇貝雜交子一代苗種并養(yǎng)成。2009年春天，將上述雜交子一代扇貝促熟后從中選擇個(gè)體大且僅雌區(qū)發(fā)育的扇貝，陰干30分鐘后將扇貝置于盛有23°C海水的容器中刺激產(chǎn)卵，以來(lái)自多個(gè)海灣扇貝的精子混合授精，培育出子一代紫海雜交扇貝與海灣扇貝的回交群體。該回交群體在2010年春季促熟后大部分表現(xiàn)為雌雄同體，但還有〈10%的個(gè)體仍表現(xiàn)為雄性不育。
[0025]繼續(xù)將上述雄性不育的個(gè)體用其父本海灣扇貝自交后代的精子回交，經(jīng)過(guò)一代至多代選育就可獲得后代全部為雄性不育且卵子可育的雄性不育系(母本)_保持系(父本)組合，從而分別獲得雄性不育系和保持系。性腺促熟后用常規(guī)海灣扇貝產(chǎn)卵誘導(dǎo)方法催產(chǎn)雄性不育系扇貝可獲得大量未受精的卵子，將其用保持系的精子受精，就可大規(guī)模獲得用于紫海雜交扇貝商品苗種生產(chǎn)的雄性不育系種貝。
[0026]將上述組合中的雄性不育系扇貝的卵子用不同的非相關(guān)海灣扇貝的精子受精，建立至少20個(gè)回交家系并進(jìn)行配合力測(cè)驗(yàn)，選擇后代含有雌雄同體扇貝的家系，將其母本雄性不育系種貝繼續(xù)用供精的海灣扇貝自交家系的精子受精，并根據(jù)生長(zhǎng)性狀和性腺發(fā)育情況連續(xù)選育，直到回交后代全部為雌雄同體且性狀優(yōu)良，就獲得受精后使雄性不育系后代均為雌雄同體且性狀優(yōu)良的恢復(fù)系海灣扇貝家系。
[0027]最后將上述獲得的紫海雜交扇貝的雄性不育系種貝性腺促熟后，用常規(guī)的海灣扇貝催產(chǎn)方法獲得大量未受精的卵子，將其用恢復(fù)系的精子受精，就可大規(guī)模生產(chǎn)紫海雜交扇貝商品苗種。
[0028]實(shí)施例3
[0029]2010年春天，選擇2009年建立的紫扇貝卵子與海灣扇貝精子雜交子一代中雄性不育的個(gè)體，經(jīng)促熟后刺激產(chǎn)卵，用海灣扇貝的精子受精，建立了 12個(gè)回交家系并養(yǎng)成。2011年春天促熟后發(fā)現(xiàn)，其中的11個(gè)家系大部分個(gè)體表現(xiàn)為雌雄同體，而其中的1個(gè)家系的大部分個(gè)體僅雌區(qū)發(fā)育，少量個(gè)體性腺不發(fā)育。
[0030]依此方法，將其中的單個(gè)雄性不育個(gè)體的卵子與單個(gè)海灣扇貝的精子回交建立若干回交家系，并將供精的海灣扇貝自交建立相應(yīng)的自交家系。第二年檢查回交家系的性腺發(fā)育情況，若回交家系全部為雌雄同體的扇貝，則僅需選擇一代就獲得了雄性不育系-恢復(fù)系組合；若回交家系僅有部分為雌雄同體，則用雄性不育扇貝繼續(xù)與相應(yīng)的海灣扇貝自交家系的精子回交建立回交家系，同時(shí)繼續(xù)建立父本海灣扇貝的自交家系，進(jìn)行下一代選育；經(jīng)一代或多代選育后，當(dāng)回交后代全部為雌雄同體時(shí)，就獲得了該雄性不育系的恢復(fù)系。
[0031]實(shí)施例4
[0032]2012年用紫海雜交子一代家系中僅卵區(qū)發(fā)育的雄性不育個(gè)體，經(jīng)刺激后其中有11個(gè)雄性不育個(gè)體產(chǎn)卵，將這些卵子與單個(gè)海灣扇貝的精子回交，大部分個(gè)體的卵子不能正常受精，少數(shù)雖能夠受精但大部分發(fā)育不正常，僅僅發(fā)育出帶纖毛的畸形胚胎。但產(chǎn)卵的11個(gè)個(gè)體中有1個(gè)個(gè)體的卵子能夠正常發(fā)育，從而培育出回交家系并養(yǎng)殖到成體階段。在2012年11月中旬收獲時(shí)，與同期的海灣扇貝比較，回交家系的殼高、殼長(zhǎng)、殼寬和體重分別提高34.1%、29.8%、23.0%和111.5%，雜種優(yōu)勢(shì)極其顯著。2013年春季將回交扇貝促熟后，發(fā)現(xiàn)后代全部為雌雄同體，證明通過(guò)用海灣扇貝精子與雄性不育個(gè)體回交完全能成功選育出紫海雜交扇貝雄性不育系的恢復(fù)系。
[0033]實(shí)施例5
[0034]2013年和2014年，利用引進(jìn)的紫扇貝與海灣扇貝共建立了紫扇貝卵子與海灣扇貝精子的雜交子一代家系18個(gè)，并建立了供精海灣扇貝的自交家系，按照實(shí)施例1的方法，可在1-3年內(nèi)選育出紫海雜交扇貝的雄性不育家系及其相應(yīng)的恢復(fù)系，實(shí)現(xiàn)紫海雜交扇貝苗種的商業(yè)化生產(chǎn)。
[0035]實(shí)施例6
[0036]本發(fā)明用于海紫雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建及應(yīng)用
[0037]本發(fā)明建立的恢復(fù)系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于海紫雜交扇貝(海灣扇貝卵子與紫扇貝精子的雜交后代)的育種，并且應(yīng)用于建立海紫雜交扇貝商品苗種的規(guī)模化生產(chǎn)方法。
[0038]首先選擇海紫雜交扇貝雄性不育系中的若干大個(gè)體扇貝，刺激產(chǎn)卵后用多個(gè)非相關(guān)紫扇貝的精子受精，若回交家系全部為雌雄同體的扇貝，則僅需選擇一代就獲得了雄性不育系-恢復(fù)系組合；若回交家系僅有部分為雌雄同體，則用雄性不育扇貝繼續(xù)與相應(yīng)的紫扇貝自交家系的精子回交建立回交家系，同時(shí)繼續(xù)建立父本紫扇貝的自交家系，進(jìn)行下一代選育；經(jīng)一代或多代選育后，當(dāng)回交后代全部為雌雄同體時(shí)，就獲得了海紫雜交扇貝雄性不育系的恢復(fù)系。
[0039]用上述海紫雜交扇貝的雄性不育系卵子與保持系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方便、規(guī)?；a(chǎn)海紫雜交扇貝雄性不育種貝；用海紫雜交扇貝雄性不育種貝與恢復(fù)系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方便、規(guī)模化生產(chǎn)海紫雜交扇貝苗種。
[0040]實(shí)施例7
[0041 ] 本發(fā)明用于紫墨雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建及應(yīng)用
[0042]本發(fā)明建立的恢復(fù)系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于紫墨雜交扇貝(紫扇貝卵子與墨西哥灣扇貝精子的雜交后代)育種，并且應(yīng)用于建立紫墨雜交扇貝商品苗種的規(guī)?；a(chǎn)方法。
[0043]首先選擇紫墨雜交扇貝雄性不育系中的若干大個(gè)體扇貝，刺激產(chǎn)卵后用多個(gè)非相關(guān)墨西哥灣扇貝的精子受精，若回交家系全部為雌雄同體的扇貝，則僅需選擇一代就獲得了雄性不育系-恢復(fù)系組合；若回交家系僅有部分為雌雄同體，則用雄性不育扇貝繼續(xù)與相應(yīng)的墨西哥灣扇貝自交家系的精子回交建立回交家系，同時(shí)繼續(xù)建立父本墨西哥灣扇貝的自交家系，進(jìn)行下一代選育；經(jīng)一代或多代選育后，當(dāng)回交后代全部為雌雄同體時(shí)，就獲得了紫墨雜交扇貝雄性不育系的恢復(fù)系。
[0044]用上述紫墨雜交扇貝的雄性不育系卵子與保持系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方便、規(guī)?；a(chǎn)紫墨雜交扇貝雄性不育種貝；用紫墨雜交扇貝雄性不育種貝與恢復(fù)系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方便、規(guī)?；a(chǎn)紫墨雜交扇貝苗種。
[0045]實(shí)施例8
[0046]本發(fā)明用于墨紫雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建及應(yīng)用
[0047]本發(fā)明建立的恢復(fù)系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于墨紫雜交扇貝(墨西哥灣扇貝卵子與紫扇貝精子的雜交后代)育種實(shí)踐，并且應(yīng)用于建立墨紫雜交扇貝商品苗種的規(guī)模化生產(chǎn)方法。
[0048]首先選擇墨紫雜交扇貝雄性不育系中的若干大個(gè)體扇貝，刺激產(chǎn)卵后用多個(gè)非相關(guān)紫扇貝的精子受精，若回交家系全部為雌雄同體的扇貝，則僅需選擇一代就獲得了雄性不育系-恢復(fù)系組合；若回交家系僅有部分為雌雄同體，則用雄性不育扇貝繼續(xù)與相應(yīng)的紫扇貝自交家系的精子回交建立回交家系，同時(shí)繼續(xù)建立父本紫扇貝的自交家系，進(jìn)行下一代選育；經(jīng)一代或多代選育后，當(dāng)回交后代全部為雌雄同體時(shí)，就獲得了墨紫雜交扇貝雄性不育系的恢復(fù)系。
[0049]用上述墨紫雜交扇貝的雄性不育系卵子與保持系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方便、規(guī)?；a(chǎn)墨紫雜交扇貝雄性不育種貝；用墨紫雜交扇貝雄性不育種貝與恢復(fù)系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方便、規(guī)模化生產(chǎn)墨紫雜交扇貝苗種。
【權(quán)利要求】
1.一種紫海雜交扇貝恢復(fù)系，其特征在于該恢復(fù)系是能使雄性不育系后代恢復(fù)雄性可育特性的海灣扇貝品系，其中紫海雜交扇貝是紫扇貝卵子與海灣扇貝精子的雜交后代。
2.權(quán)利要求1的紫海雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建方法，其特征在于: 選擇紫海雜交扇貝雄性不育系中的優(yōu)良個(gè)體，促熟產(chǎn)卵后分別用來(lái)自不同個(gè)體的海灣扇貝精子授精，建立20個(gè)以上回交家系，同時(shí)將供精的海灣扇貝自繁建立自交家系，測(cè)量雜交后代的生長(zhǎng)和存活情況并進(jìn)行配合力測(cè)驗(yàn)；從第二年起每年根據(jù)配合力測(cè)驗(yàn)結(jié)果和性腺發(fā)育情況，選擇其中性狀優(yōu)良且含有雌雄同體扇貝的回交家系，將與回交家系相關(guān)的雄性不育家系種貝連續(xù)與供精的海灣扇貝雜交家系精子回交，建立回交家系，直到回交家系全部為雌雄同體且性狀優(yōu)良，則將供精的海灣扇貝自交家系用常規(guī)的扇貝育苗方法自交擴(kuò)繁，即獲得該雄性不育系的恢復(fù)系。
3.上述權(quán)利要求1和權(quán)利要求2的紫海雜交扇貝雄性不育系恢復(fù)系應(yīng)用于生產(chǎn)紫海雜交扇貝商品苗種，即用恢復(fù)系的精子與相應(yīng)的紫海雜交扇貝雄性不育系的卵子雜交，獲得紫海雜交扇貝商品苗種。
4.權(quán)利要求2建立的紫海雜交扇貝恢復(fù)系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于以下各雜交扇貝的育種: (1)用海灣扇貝卵子與紫扇貝精子受精培育的海紫雜交扇貝； (2)用紫扇貝卵子與墨西哥灣扇貝精子受精培育的紫墨雜交扇貝； (3)用墨西哥灣扇貝卵子與紫扇貝精子受精培育的墨紫雜交扇貝。
5.權(quán)利要求3建立的紫海雜交扇貝雄性不育系恢復(fù)系的應(yīng)用方法也應(yīng)用于以下各雜交扇貝的育種: (1)用海灣扇貝卵子與紫扇貝精子受精培育的海紫雜交扇貝； (2)用紫扇貝卵子與墨西哥灣扇貝精子受精培育的紫墨雜交扇貝； (3)用墨西哥灣扇貝卵子與紫扇貝精子受精培育的墨紫雜交扇貝。
6.權(quán)利要求2建立的紫海雜交扇貝雄性不育系恢復(fù)系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型扇貝，例如Argopecten屬和Pecten屬扇貝的種間雜交育種。
7.權(quán)利要求3建立的紫海雜交扇貝雄性不育系恢復(fù)系應(yīng)用方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型扇貝，例如Argopecten屬和Pecten屬扇貝的種間雜交育種。
8.權(quán)利要求2建立的紫海雜交扇貝雄性不育系恢復(fù)系的基本構(gòu)建方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型無(wú)脊椎動(dòng)物的種間雜交育種。
9.權(quán)利要求3建立的紫海雜交扇貝雄性不育系恢復(fù)系的應(yīng)用方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型無(wú)脊椎動(dòng)物的種間雜交育種。
【文檔編號(hào)】A01K61/00GK104304098SQ201410429017
【公開日】2015年1月28日 申請(qǐng)日期:2014年8月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月27日
【發(fā)明者】王春德, 孫奎府, 馬斌 申請(qǐng)人:青島海弘達(dá)生物科技有限公司