一種文冠果的無性快繁方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種文冠果的無性快繁方法，通過合子胚的誘導(dǎo)接種、體細胞胚的繼代與增殖培養(yǎng)、不定芽的繼代培養(yǎng)、體細胞胚的萌發(fā)培養(yǎng)、不定芽旳生根培養(yǎng)、煉苗共六步驟實現(xiàn)；本發(fā)明提供一種文冠果的快速無性繁殖方法，從根本上解決文冠果種源不足的問題，實現(xiàn)快速繁殖，并能保持植株的優(yōu)良性狀，滿足文冠果在經(jīng)濟、藥用、觀賞樹種等各方面的應(yīng)用需求。
【專利說明】一種文冠果的無性快繁方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及園藝領(lǐng)域，具體涉及一種文冠果的無性快繁方法。

【背景技術(shù)】
[0002]文冠果，無患子科文冠果屬，一屬一種，又名文冠木、文官果、土木瓜等。在垂直方向上文冠果分布廣泛，原產(chǎn)于我國北方的黃土高原地區(qū)，栽培樹林范圍涉及廣泛。文冠果在城市園林綠化的應(yīng)用中，常常被培育成小喬木狀，樹型優(yōu)美。文冠果非常適合栽種在庭院之中，做觀賞樹種，由于其長壽、吉祥的寓意。文冠果具有優(yōu)美的樹型，開闊的樹冠，婆娑的干型，奇特的葉子，同時其花美，花期長，絢麗多彩。另外，經(jīng)過人工控制后，文冠果的樹形更加優(yōu)美，能夠創(chuàng)造效果出眾的奇景，從而大大的增加文冠果的觀賞價值。
[0003]現(xiàn)階段，文冠果的繁殖生產(chǎn)主要還是靠種子進行有性繁殖，浪費土地的同時也耗費種源。文冠果的種子在未經(jīng)任何處理的情況下，發(fā)芽率極低，同時，由于文冠果的坐果率非常之低，素稱之“千花一果”，從而導(dǎo)致了種源的嚴重不足。自然生長狀態(tài)下，主要靠根孽繁殖的文冠果植株后代的退化現(xiàn)象嚴重，且變異較大。嫁接、扦插等傳統(tǒng)的無性繁殖方法，繁殖的系數(shù)低，且繁殖周期長，不利于文冠果的快速繁殖，也不能滿足高速發(fā)展的生產(chǎn)和經(jīng)濟的需要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題是提供一種文冠果的無性快繁方法，從根本上解決文冠果種源不足的問題，實現(xiàn)快速繁殖，并能保持植株的優(yōu)良性狀，滿足文冠果在經(jīng)濟、藥用、觀賞樹種等各方面的應(yīng)用需求。
[0005]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的:
[0006](I)合子胚的誘導(dǎo)接種:將文冠果果實先用洗衣粉水清洗表面，多次噴洗和擦拭，用滅菌解剖刀將其切開，取出種子放在無菌培養(yǎng)皿內(nèi)(墊有無菌濾紙)；用滅菌鑷子和解剖刀去除種皮，取出其中的合子胚，切成0.3cm3小塊，接種到含有不同植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L 的 MS 培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)；
[0007](2)體細胞胚的繼代與增殖培養(yǎng):將上述誘導(dǎo)的體細胞胚按照體細胞胚的發(fā)育情況，分別進行繼代培養(yǎng):體細胞胚發(fā)育良好的，切離外植體，繼代在不含任何生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中；體細胞胚不易剝離的，連同外植體一起繼代在其誘導(dǎo)率較高的新鮮培養(yǎng)中；暗培養(yǎng)28d，觀察統(tǒng)計體細胞胚的繼代生長情況；
[0008](3)不定芽的繼代培養(yǎng):將誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的不定芽按照發(fā)育生長情況，分別進行繼代培養(yǎng):不定芽長勢較好的連同外植體切成5cm3塊小，轉(zhuǎn)移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鮮培養(yǎng)基中；不定芽長勢較弱的連同外植體切成5cm3小塊，轉(zhuǎn)移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培養(yǎng)基中；僅有芽點狀突起的外植體，直接轉(zhuǎn)入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鮮培養(yǎng)基中，繼續(xù)進行誘導(dǎo)；
[0009](4)體細胞胚的萌發(fā)培養(yǎng):將外觀形態(tài)發(fā)育成熟的了葉胚，轉(zhuǎn)入不加任何植物生長調(diào)節(jié)劑的1/2MS和MS培養(yǎng)基中進行萌發(fā)；
[0010](5)不定芽旳生根培養(yǎng):選取生長較整齊一致的不定芽，切取2.5cm,接種在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA(0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根；
[0011](6)煉苗:選取生根的不定芽，在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的條件下，暗培養(yǎng)。
[0012]本發(fā)明的有益效果是:從體細胞胚發(fā)生這種途徑，建立出一個成熟穩(wěn)定的文冠果無性快繁再生技術(shù)，繼代周期短，增殖倍數(shù)高。

【具體實施方式】
[0013]下面對本發(fā)明的較佳實施例進行詳細闡述，以使本發(fā)明的優(yōu)點和特征能更易于被本領(lǐng)域技術(shù)人員理解，從而對本發(fā)明的保護范圍做出更為清楚明確的界定。
[0014]本發(fā)明實施例包括:
[0015]一種文冠果的無性快繁方法，其特征在于，包括以下步驟:
[0016](I)合子胚的誘導(dǎo)接種:將文冠果果實先用洗衣粉水清洗表面，多次噴洗和擦拭，用滅菌解剖刀將其切開，取出種子放在無菌培養(yǎng)皿內(nèi)(墊有無菌濾紙)；用滅菌鑷子和解剖刀去除種皮，取出其中的合子胚，切成0.3cm3小塊，接種到含有不同植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L 的 MS 培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)；
[0017](2)體細胞胚的繼代與增殖培養(yǎng):將上述誘導(dǎo)的體細胞胚按照體細胞胚的發(fā)育情況，分別進行繼代培養(yǎng):體細胞胚發(fā)育良好的，切離外植體，繼代在不含任何生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中；體細胞胚不易剝離的，連同外植體一起繼代在其誘導(dǎo)率較高的新鮮培養(yǎng)中；暗培養(yǎng)28d，觀察統(tǒng)計體細胞胚的繼代生長情況；
[0018](3)不定芽的繼代培養(yǎng):將誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的不定芽按照發(fā)育生長情況，分別進行繼代培養(yǎng):不定芽長勢較好的連同外植體切成5cm3塊小，轉(zhuǎn)移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鮮培養(yǎng)基中；不定芽長勢較弱的連同外植體切成5cm3小塊，轉(zhuǎn)移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培養(yǎng)基中；僅有芽點狀突起的外植體，直接轉(zhuǎn)入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鮮培養(yǎng)基中，繼續(xù)進行誘導(dǎo)；
[0019](4)體細胞胚的萌發(fā)培養(yǎng):將外觀形態(tài)發(fā)育成熟的了葉胚，轉(zhuǎn)入不加任何植物生長調(diào)節(jié)劑的1/2MS和MS培養(yǎng)基中進行萌發(fā)；
[0020](5)不定芽旳生根培養(yǎng):選取生長較整齊一致的不定芽，切取2.5cm,接種在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA(0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根；
[0021](6)煉苗:選取生根的不定芽，在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的條件下，暗培養(yǎng)。
[0022]以上所述僅為本發(fā)明的實施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運用在其他相關(guān)的【技術(shù)領(lǐng)域】，均同理包括在本發(fā)明的專利保護范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種文冠果的無性快繁方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)合子胚的誘導(dǎo)接種:將文冠果果實先用洗衣粉水清洗表面，多次噴洗和擦拭，用滅菌解剖刀將其切開，取出種子放在無菌培養(yǎng)皿內(nèi)(墊有無菌濾紙)；用滅菌鑷子和解剖刀去除種皮，取出其中的合子胚，切成0.3cm3小塊，接種到含有不同植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L的MS培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)； (2)體細胞胚的繼代與增殖培養(yǎng):將上述誘導(dǎo)的體細胞胚按照體細胞胚的發(fā)育情況，分別進行繼代培養(yǎng):體細胞胚發(fā)育良好的，切離外植體，繼代在不含任何生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中；體細胞胚不易剝離的，連同外植體一起繼代在其誘導(dǎo)率較高的新鮮培養(yǎng)中；暗培養(yǎng)28d，觀察統(tǒng)計體細胞胚的繼代生長情況； (3)不定芽的繼代培養(yǎng):將誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的不定芽按照發(fā)育生長情況，分別進行繼代培養(yǎng):不定芽長勢較好的連同外植體切成5cm3塊小，轉(zhuǎn)移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鮮培養(yǎng)基中；不定芽長勢較弱的連同外植體切成5cm3小塊，轉(zhuǎn)移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培養(yǎng)基中；僅有芽點狀突起的外植體，直接轉(zhuǎn)入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鮮培養(yǎng)基中，繼續(xù)進行誘導(dǎo)； (4)體細胞胚的萌發(fā)培養(yǎng):將外觀形態(tài)發(fā)育成熟的了葉胚，轉(zhuǎn)入不加任何植物生長調(diào)節(jié)劑的1/2MS和MS培養(yǎng)基中進行萌發(fā)； (5)不定芽旳生根培養(yǎng):選取生長較整齊一致的不定芽，切取2.5cm，接種在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA (0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根； (6)煉苗:選取生根的不定芽，在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的條件下，暗培養(yǎng)。
【文檔編號】A01H4/00GK104160957SQ201410355211
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年7月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月25日
【發(fā)明者】吳義師 申請人:合肥德美畜牧技術(shù)有限公司