一種提高樟子松苗木抗逆性的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種提高樟子松苗木抗逆性的方法，(1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng)，(2)菌劑制作，(3)種子處理，(4)無菌土制備，(5)播種，(6)菌劑接種。本發(fā)明提高樟子松苗木生長及抗逆水平，采用打孔灌根及間隔接種的方式，對出苗1個月的樟子松苗木接種褐環(huán)乳牛肝菌發(fā)酵液，生長1個月后，采用同樣的方式接種綠木霉發(fā)酵液。180天苗木高生長提高42.3％，地徑提高66.7％，過氧化物酶提高268.3％，超氧化物歧化酶提高66.18％，接種苗木無病害發(fā)生。CGMCC No:924620140604CGMCC No：926420140604
【專利說明】一種提高樟子松苗木抗逆性的方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種提高樟子松苗木抗逆性的方法。

【背景技術】
[0002]樟子松是北方主要的造林樹種，其良好的耐旱抗逆性使其在植被恢復、生態(tài)修復和園林綠化方面都發(fā)揮了重要作用。苗木質(zhì)量是造林成功與否的關鍵。引入植物根際有益微生物(如菌根菌和木霉菌)有利于改善苗圃土壤環(huán)境，可以有效促進苗木生長、增強苗木抗逆性和預防病害的發(fā)生。以多種微生物復合接種來提高苗木的抗逆性可以得到良好的效果，提高苗木的成活率。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于克服上述技術中存在的不足之處，提供一種提高樟子松苗木生長和抗逆性的根際益生菌的接種方法。
[0004]為了達到上述目的，本發(fā)明采用的技術方案是:
[0005](1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯180-2508，葡萄糖18-20&磷酸二氫鉀38，硫酸鎂1.58，水10000匕將制作好的培養(yǎng)基裝入500此的三角瓶中，裝液量200-3001111/5001111，置于1211:高壓滅菌鍋中滅菌20-11,在無菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量10% -15%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速120-14017^111,溫度2500 -271:的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌20(1-30(1，綠木霉3(1-5(1,
[0006](2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無菌條件下粉碎，加入無菌水配成發(fā)酵液:無菌水濃度為1: 5，
[0007](3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30-1清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于251:下催芽，每天早晚用無菌水各沖洗一次，直至出芽，
[0008](4)無菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: 1: 1的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中1211下滅菌2卜，裝入直徑巧挪※高13(^1營養(yǎng)缽中，
[0009](5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2挪厚無菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進行常規(guī)的日常管護，
[0010](6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30(1進行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑404-5()111匕待苗木生長30(1后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
[0011]本發(fā)明的優(yōu)點是:
[0012](1)提高樟子松苗木生長及抗逆水平；
[0013](2)采用打孔灌根及間隔接種的方式，對出苗1個月的樟子松苗木接種褐環(huán)乳牛肝菌發(fā)酵液，生長1個月后，采用同樣的方式接種綠木霉發(fā)酵液。180天苗木高生長提高42.3%^地徑提高66.7 %，過氧化物酶提高268.3 %，超氧化物歧化酶提高66.18 %，接種苗木無病害發(fā)生。 保藏單位:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研宄所保藏日期:2014年6月4日保藏編號:9246 ⑶94) 9264 (143)
分類命名:褐環(huán)乳牛肝菌，811111118 1111:6118 ；綠木霉

【具體實施方式】
[0014]下面對本發(fā)明的實施例作進一步詳細描述。
[0015]實施例1、
[0016](1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯1808，葡萄糖188，磷酸二氫鉀38，硫酸鎂1.58，水10000匕將制作好的培養(yǎng)基裝入50011^的三角瓶中，裝液量2001111/5001111，置于121。0高壓滅菌鍋中滅菌20111111，在無菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量10%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速12017111111，溫度251:的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌20(1，綠木霉3(1，
[0017](2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無菌條件下粉碎，加入無菌水配成發(fā)酵液:無菌水濃度為1: 5，
[0018](3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30-1清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于251:下催芽，每天早晚用無菌水各沖洗一次，直至出芽，
[0019]⑷無菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: 1: 1的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中1211下滅菌2卜，裝入直徑巧挪※高13(^1營養(yǎng)缽中，
[0020](5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2挪厚無菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進行常規(guī)的日常管護，
[0021](6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30(1進行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑400匕待苗木生長30(1后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
[0022]實施例2、
[0023](1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯2108，葡萄糖198，磷酸二氫鉀38，硫酸鎂1.58，水10000匕將制作好的培養(yǎng)基裝入50011^的三角瓶中，裝液量2601111/5001111，置于121。0高壓滅菌鍋中滅菌20111111，在無菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量12%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速13017111111，溫度261:的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌25(1，綠木霉4(1，
[0024](2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無菌條件下粉碎，加入無菌水配成發(fā)酵液:無菌水濃度為1: 5，
[0025](3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30-1清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于251:下催芽，每天早晚用無菌水各沖洗一次，直至出芽，
[0026]⑷無菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: 1: 1的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中1211下滅菌2卜，裝入直徑巧挪※高13(^1營養(yǎng)缽中，
[0027](5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2挪厚無菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進行常規(guī)的日常管護，
[0028](6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30(1進行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑450匕待苗木生長30(1后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
[0029]實施例3、
[0030](1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯2508，葡萄糖208，磷酸二氫鉀38，硫酸鎂1.58，水10000匕將制作好的培養(yǎng)基裝入50011^的三角瓶中，裝液量3001111/5001111，置于121。0高壓滅菌鍋中滅菌20111111，在無菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量15%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速14017111111，溫度271:的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌30(1，綠木霉5(1，
[0031](2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無菌條件下粉碎，加入無菌水配成發(fā)酵液:無菌水濃度為1: 5，
[0032](3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30-1清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于251:下催芽，每天早晚用無菌水各沖洗一次，直至出芽，
[0033]⑷無菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: 1: 1的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中1211下滅菌2卜，裝入直徑巧挪※高13(^1營養(yǎng)缽中，
[0034](5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2挪厚無菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進行常規(guī)的日常管護，
[0035](6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30(1進行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑500匕待苗木生長30(1后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
【權利要求】
1.一種提高樟子松苗木抗逆性的方法，其特征在于: (1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯180-250g，葡萄糖18-20g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，水lOOOmL，將制作好的培養(yǎng)基裝入500mL的三角瓶中，裝液量200-300mL/500mL，置于121°C高壓滅菌鍋中滅菌20min，在無菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量10% -15%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速120-140r/min，溫度25°C -27°C的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌20d-30d，綠木霉3d-5d， (2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無菌條件下粉碎，加入無菌水配成發(fā)酵液:無菌水濃度為1: 5， (3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30min，清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于25°C下催芽，每天早晚用無菌水各沖洗一次，直至出芽， (4)無菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: I: I的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中121°C下滅菌2h，裝入直徑15cmX高13cm營養(yǎng)缽中， (5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2cm厚無菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進行常規(guī)的日常管護， (6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30d進行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑40mL-50mL，待苗木生長30d后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
【文檔編號】A01C1/00GK104396707SQ201410275883
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年6月19日 優(yōu)先權日:2014年6月19日
【發(fā)明者】宋瑞清, 尹大川, 鄧勛 申請人:東北林業(yè)大學, 宋瑞清, 尹大川