一種工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法
【專(zhuān)利摘要】一種工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法，包括以下步驟：（1）保存菌種準(zhǔn)備；（2）保護(hù)劑準(zhǔn)備；（3）保存操作步驟：1）用無(wú)菌操作用接種針將母種種源帶菌絲的瓊脂切成黃豆大小的切片，裝入無(wú)菌試管中，每個(gè)無(wú)菌試管裝4-6個(gè)瓊脂切片，然后加入保護(hù)劑，至覆蓋瓊脂切片，封蓋，用記號(hào)筆作好標(biāo)記；2）在塑料瓶底、蓋和側(cè)壁打孔，將裝有瓊脂切片的無(wú)菌試管放入塑料瓶中，然后將所述塑料瓶放入超低溫冰柜，按照每1分鐘降低1±0.1℃的速度，降低溫度至-80～-150℃。本發(fā)明工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法，使杏鮑菇菌種處于極緩慢生理代謝狀態(tài)，一般保存3～5年，其優(yōu)良遺傳特性仍可保持不變。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種杏鮑菇菌種保存方法，尤其是涉及一種工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法。
【背景技術(shù)】
[0002]杏鮑菇菌種是杏鮑菇工廠化生產(chǎn)的重要因素。菌種內(nèi)在質(zhì)量的高低及遺傳性狀的優(yōu)劣決定著食用菌的生產(chǎn)能力，是內(nèi)因。在相同的栽培條件下，良種比一般品種可增產(chǎn)三成以上，甚至成倍增長(zhǎng)。但選擇出的優(yōu)良菌種，如果管理不好，就會(huì)引起衰退，或被雜菌污染，造成減產(chǎn)，因此，保藏菌種和選育菌種具有同等重要的意義。在生產(chǎn)中，由于原種和栽培種數(shù)量大，不易保藏，菌種生產(chǎn)者通常以母種形式保藏，栽培前再進(jìn)行擴(kuò)接用于生產(chǎn)。杏鮑菇菌種通過(guò)保藏，適當(dāng)控制其生長(zhǎng)環(huán)境，使優(yōu)良菌種不衰退，不變異，不死亡，不被雜菌污染，以保證其在生產(chǎn)上可以長(zhǎng)期應(yīng)用。
[0003]現(xiàn)有菌種的保藏方法很多，常用的有低溫保藏法、液體石蠟保藏法、麥粒保藏法、鹽水保藏法等，對(duì)于生理特性變異快的蘑菇菌糸(2η)采用以上保藏方法需反復(fù)地斜面繼代培養(yǎng)，保藏菌株遺傳特性容易發(fā)生變化(劣化)，長(zhǎng)期保存非常困難，保存效果差，不適合用于工廠化杏鮑菇生產(chǎn)用菌種長(zhǎng)期保存。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是，提供一種可不改變遺傳特性，能長(zhǎng)期保存且保存效果好的工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法。
[0005]本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:一種工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法，包括以下步驟:`
(1)保存菌種準(zhǔn)備
將菌種常規(guī)接種于普通培養(yǎng)基上，經(jīng)25±l°c 3~5天培養(yǎng)后生長(zhǎng)出典型菌落待用；杏鮑菇的菌種根據(jù)離接種源的位置不同培養(yǎng)特性就有差異，為保證培養(yǎng)特性一致性，接種菌塊在同心圓上切取；
(2)保護(hù)劑準(zhǔn)備
采用甘油或二甲基亞砜作為保護(hù)劑，使用前用蒸餾水將甘油或二甲基亞砜稀釋成體積濃度為10~12%的甘油水溶液或二甲基亞砜水溶液，裝入三角瓶，瓶口塞好棉塞，高壓滅菌冷卻后使用；
(3)保存操作步驟
1)用無(wú)菌操作用接種針將母種種源帶菌絲的瓊脂切成黃豆大小的切片，裝入無(wú)菌試管中，每個(gè)無(wú)菌試管裝4-6個(gè)瓊脂切片，然后加入步驟(2)所述保護(hù)劑，至覆蓋瓊脂切片，封蓋，用記號(hào)筆作好標(biāo)記；
2)在塑料瓶底、蓋和側(cè)壁打孔，將裝有瓊脂切片的無(wú)菌試管放入塑料瓶中，然后將所述塑料瓶放入超低溫冰柜，按照每I分鐘降低1±0.1°C的速度，降低溫度至-80~-150°C。[0006]需要使用菌種時(shí)，將裝有瓊脂切片的無(wú)菌試管取出，放入38~40°C的水浴中來(lái)回漂蕩，直至冰塊融化，打開(kāi)試管，取出載有種源帶菌絲的瓊脂切片，轉(zhuǎn)管移植。
[0007]本發(fā)明工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法，使杏鮑菇菌種處于極緩慢生理代謝狀態(tài)，一般保存3~5年，其優(yōu)良遺傳特性仍可保持不變。
[0008]在_80°C~_150°C狀態(tài)下，杏鮑菇可保存36個(gè)月~60個(gè)月。因此，超低溫保存菌種法，可滿(mǎn)足科研與生產(chǎn)的需要，且簡(jiǎn)便可行。
【具體實(shí)施方式】
[0009]以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
[0010]本實(shí)施例包括以下步驟:
(1)保存菌種準(zhǔn)備
將菌種常規(guī)接種于普通培養(yǎng)基上，經(jīng)25±l°c 4天培養(yǎng)后生長(zhǎng)出典型菌落，在同心圓上切取接種囷塊；
(2)保護(hù)劑準(zhǔn)備
采用甘油作為保護(hù)劑，使用前用蒸餾水將甘油稀釋成體積濃度為10%的甘油水溶液，裝入三角瓶，瓶口塞好棉塞，高壓滅菌冷卻后使用；
(3)保存操作步驟
1)用無(wú)菌操作用接種針將母種種源帶菌絲的瓊脂切成黃豆大小的切片，裝入無(wú)菌試管中，每個(gè)無(wú)菌試管裝5個(gè)瓊脂切片，然后加入步驟(2)所述保護(hù)劑，至覆蓋瓊脂切片，封蓋，用記號(hào)筆作好標(biāo)記；
2)在塑料瓶底、蓋和側(cè)壁打孔，將裝有瓊脂切片的無(wú)菌試管放入塑料瓶中，然后將所述塑料瓶放入超低溫冰柜，按照每I分鐘降低1±0.1°C的速度，降低溫度至_80°C。
[0011]需要使用菌種時(shí)，將裝有瓊脂切片的無(wú)菌試管取出，放入38~40°C的水浴中來(lái)回漂蕩，直至冰塊融化，打開(kāi)試管，取出載有種源帶菌絲的瓊脂切片，轉(zhuǎn)管移植。
[0012]本發(fā)明工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法，使杏鮑菇菌種處于極緩慢生理代謝狀態(tài)，保存4年，其優(yōu)良遺傳特性仍保持不變。
[0013]實(shí)施例2
本實(shí)施例包括以下步驟:
(1)保存菌種準(zhǔn)備
將菌種常規(guī)接種于普通培養(yǎng)基上，經(jīng)25±1°C 3天培養(yǎng)后生長(zhǎng)出典型菌落，在同心圓上切取接種囷塊；
(2)保護(hù)劑準(zhǔn)備
采用二甲基亞砜作為保護(hù)劑，使用前用蒸餾水將二甲基亞砜稀釋成體積濃度為12%的二甲基亞砜水溶液，裝入三角瓶，瓶口塞好棉塞，高壓滅菌冷卻后使用；
(3)保存操作步驟
1)用無(wú)菌操作用接種針將母種種源帶菌絲的瓊脂切成黃豆大小的切片，裝入無(wú)菌試管中，每個(gè)無(wú)菌試管裝5個(gè)瓊脂切片，然后加入步驟(2)所述保護(hù)劑，至覆蓋瓊脂切片，封蓋，用記號(hào)筆作好標(biāo)記； 2)在塑料瓶底、蓋和側(cè)壁打孔，將裝有瓊脂切片的無(wú)菌試管放入塑料瓶中，然后將所述塑料瓶放入超低溫冰柜，按照每I分鐘降低1±0.1°C的速度，降低溫度至-140°c。
[0014]需要使用菌種時(shí)，將裝有瓊脂切片的無(wú)菌試管取出，放入38~40°C的水浴中來(lái)回漂蕩，直至冰塊融化，打開(kāi)試管，取出載有種源帶菌絲的瓊脂切片，轉(zhuǎn)管移植。
[0015]本發(fā)明工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法，使杏鮑菇菌種處于極緩慢生理代謝狀態(tài)，保存5年，其優(yōu)良遺傳特性仍保持不變。`
【權(quán)利要求】
1.一種工廠化生產(chǎn)用杏鮑菇菌種超低溫保存方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)保存菌種準(zhǔn)備 將菌種常規(guī)接種于普通培養(yǎng)基上，經(jīng)25±l°c 3~5天培養(yǎng)后生長(zhǎng)出典型菌落待用；杏鮑菇的菌種根據(jù)離接種源的位置不同培養(yǎng)特性就有差異，為保證培養(yǎng)特性一致性，接種菌塊在同心圓上切??； (2)保護(hù)劑準(zhǔn)備 采用甘油或二甲基亞砜作為保護(hù)劑，使用前用蒸餾水將甘油或二甲基亞砜稀釋成體積濃度為10~12%的甘油水溶液或二甲基亞砜水溶液，裝入三角瓶，瓶口塞好棉塞，高壓滅菌冷卻后使用； (3)保存操作步驟 1)用無(wú)菌操作用 接種針將母種種源帶菌絲的瓊脂切成黃豆大小的切片，裝入無(wú)菌試管中，每個(gè)無(wú)菌試管裝4-6個(gè)瓊脂切片，然后加入步驟(2)所述保護(hù)劑，至覆蓋瓊脂切片，封蓋，用記號(hào)筆作好標(biāo)記； 2)在塑料瓶底、蓋和側(cè)壁打孔，將裝有瓊脂切片的無(wú)菌試管放入塑料瓶中，然后將所述塑料瓶放入超低溫冰柜，按照每I分鐘降低1±0.1°C的速度，降低溫度至-80~-150°C。
【文檔編號(hào)】A01G1/04GK103718830SQ201310734527
【公開(kāi)日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年12月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月27日
【發(fā)明者】夏志蘭, 陽(yáng)國(guó)秀, 易恢滿(mǎn) 申請(qǐng)人:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)