一種厚殼貽貝人工催產(chǎn)及授精的方法
【專利摘要】厚殼貽貝人工催產(chǎn)及授精的方法，包括以下步驟：親本培育池：室外培育水泥池規(guī)格為10m×1.5m×1m，備有充氣石，水泥池上方遮蓋帆布，可防雨防曬，四周用黑布遮擋，以調(diào)節(jié)光照的強度；選擇殼表新鮮、完整，無破損，雙殼閉合有力，性腺飽滿，鰓完整，卵巢呈淺紅色，精巢呈白色的貽貝以人工培養(yǎng)的鹽藻(Dunaliellaviridis)、亞心形扁藻(Platymonassubcordiformis)及角毛藻(Chaetoceros)單胞藻活餌料為主，輔以人工配合餌料螺旋藻粉、綠藻粉及干酵母片；把經(jīng)促熟性腺發(fā)育好的親貝,先經(jīng)6~8h的陰干,再經(jīng)1h流水刺激后。
【專利說明】一種厚殼貽貝人工催產(chǎn)及授精的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖的方法，尤其是一種一種厚殼貽貝人工催產(chǎn)及授精的方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]貽貝隸屬軟體動物門(Mollusca)雙殼綱(Bivalvia)，是我國沿海習(xí)見的經(jīng)濟貝類。我國養(yǎng)殖的貽貝主要有紫貽貝(Mytilus edulis)、厚殼貽貝(M Moruscus)和翡翠貽貝(Perna viridis)。浙江省嵊泗縣是我國厚殼貽貝的原產(chǎn)地和紫貽貝的集中養(yǎng)殖區(qū)，2005年貽貝養(yǎng)殖面積為I 130 hm2,產(chǎn)量達(dá)到了 48 800，t其中厚殼貽貝養(yǎng)殖面積85hm2，產(chǎn)量4 900，t貽貝養(yǎng)殖已成為該縣海水養(yǎng)殖的支柱產(chǎn)業(yè)。近年來，由于厚殼貽貝的市場價格看漲，經(jīng)濟效益高于紫貽貝廣3倍，為追求更高的養(yǎng)殖經(jīng)濟效益和適應(yīng)市場化的需要，養(yǎng)殖單位紛紛開始轉(zhuǎn)向養(yǎng)殖經(jīng)濟效益更高的厚殼貽貝，這對該種貽貝的苗種供應(yīng)提出了更高的要求。過去厚殼貽貝的苗種供應(yīng)，主要來源為海區(qū)半人工采苗，但近年來，由于酷漁濫捕以及保護(hù)不力，厚殼貽貝自然資源枯竭，天然苗種已經(jīng)非常稀少，苗種問題已經(jīng)成為抑制厚殼貽貝養(yǎng)殖大規(guī)模發(fā)展的瓶頸，因此，大力發(fā)展厚殼貽貝苗種全人工苗種生產(chǎn)已成為當(dāng)務(wù)之急。早在20世紀(jì)60-70年代，國內(nèi)許多科研院所都對厚殼貽貝繁殖生物學(xué)進(jìn)行過詳細(xì)的研究，但至今大規(guī)模生產(chǎn)性苗種生產(chǎn)還缺乏系統(tǒng)的研究，文獻(xiàn)資料報道少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種避免了對實驗動物的傷害，突破了厚殼貽貝貝的全人工繁育中關(guān)鍵技術(shù)瓶頸，為開展厚殼貽貝多倍體育種、家系選育研究提供基本條件的一種厚殼賭貝人工催廣及授精的方法。
[0004]按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，厚殼貽貝人工催產(chǎn)及授精的方法，包括以下步驟:
1)親本培育池:室外培育水泥池規(guī)格為10mX1.5 mXl m，備有充氣石，水泥池上方遮蓋帆布，可防雨防曬，四周用黑布`遮擋，以調(diào)節(jié)光照的強度；
2)培育用水處理:從外海沙濾井抽上來的海水,經(jīng)沉淀、砂濾三級過濾后直接用于親本
培育；
3 )親貝蓄養(yǎng):選擇殼表新鮮、完整，無破損，雙殼閉合有力，性腺飽滿，鰓完整，卵巢呈淺紅色，精巢呈白色的貽貝；入池后穩(wěn)定5d，入池時水溫為15°C，以后每天以1°C升溫速度升至22°C，恒溫待產(chǎn)；
4)培育館料:以人工培養(yǎng)的鹽藻(Dunaliellaviridis)、亞心形扁藻(Platymonassubcordiformis)及角毛藻(Chaetoceros)單胞藻活館料為主，輔以人工配合館料螺旋藻粉、綠藻粉及干酵母片；每天投喂8-12次，日投喂量由2*104 / d,逐漸增至4* IO4Cell/d,:每天換水3- 4次，每次I/ 3的培育水體，每3天移池I次；
5)促熟:升溫刺激法:把經(jīng)促熟性腺發(fā)育好的親貝，先經(jīng)(TSh的陰干，再經(jīng)Ih流水刺激后，直接放入事先準(zhǔn)備好的升溫海水中，高出恒溫培育時:T 40C，經(jīng)f 2h的適應(yīng)期后，親貝能自行排放精、卵，親貝排放率為80%，采集的親貝沖洗干凈后放養(yǎng)到室內(nèi)水泥池，采取散養(yǎng)和單層網(wǎng)箱養(yǎng)殖兩種方式，放入親貝0.8萬~1.0萬粒，每池放入親貝200萬~300萬粒，親貝放養(yǎng)密度在370- 560粒/ m2放入上遮黑布簾的暫養(yǎng)水泥池，光照強度在500 Ix以下，加入經(jīng)過沉淀處理的自然海水，池水深50~80 cm,每天換水2~3次，換水量100%，換水時清除池底和池壁上的污物，檢查親貝，及時挑出死亡個體，入池后保持自然水溫一周，待親貝適應(yīng)池養(yǎng)環(huán)境后開始升溫，日升溫0.5~1°C，直至25°C時保持恒溫，經(jīng)常觀測水質(zhì)變化情況，每周檢測一次水質(zhì)指標(biāo)，根據(jù)實際情況調(diào)整換水量，保證親貝培育用水水質(zhì)優(yōu)良；或者將親本從培育池中撈出，并置于陰涼的地方干露刺激促熟；或者將親本放入玻璃缸或水桶中，注入海水并用加熱棒加熱，使水溫升高約:TC，再用準(zhǔn)備好的冰袋降至常溫，連續(xù)2~3次促熟；藻液刺激法:把親本放入容積約為 500 L 的塑料盆中，注入 120 X IO4 cells /mL 金藻(Isochrysis zhanjiangensis)及100 X IO4 cells /mL亞心形扁藻液，約40 min后，藻液顏色逐漸變清，親本排放大量條狀的糞便；流水刺激法:打開誘導(dǎo)池排水閥門，用小型抽水泵往池壁處橫向沖水，并控制好水流壓力，使水能均勻地流過誘導(dǎo)池池底并對親本進(jìn)行刺激:異性產(chǎn)物誘導(dǎo)法:解剖數(shù)個達(dá)到成熟期的親本，取其精子及卵子加入誘導(dǎo)池中，以誘導(dǎo)其它待排放的親本；
6)授精:將用于人工授精的雄貝及分泌物立即移入人工授精組的待孕雌貝培育池中，用于人工授精的雌貝數(shù)量與待孕雄貝數(shù)量的比為4:1，培育池內(nèi)暫停流動水，采用氣泵增氧，使得培育池中溶氧達(dá)到51毫克/升，用于人工授精的雄貝的分泌物移入人工授精組的待孕雌貝培育池10-30分鐘，人工授精完成。
[0005]7)稚貝培育:將餌料密度增加至(8~10)X104Cell/mL，若餌料不充足，可適當(dāng)投喂部分替代餌料如酵母等，前期每天換水3次，每次換水量為1/2;后期將換水量增至育苗水體的1.5^2.0倍，待稚貝平均殼長達(dá)0.4 mm以上時，開始裝袋出池下海。出池前對稚貝進(jìn)行流水刺激，以減少下海后的脫落率，下海7 d內(nèi)
本發(fā)明的方法與已有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點:` 采用微流水培育技術(shù)，使雌貝、雄貝性腺快速完全發(fā)育；通過雌雄親本隔離培育，防止自然受精的發(fā)生，并使雌雄親本性腺發(fā)育同步，為提高人工授精的成功率奠定了基礎(chǔ)；自然受精組作為對照，通過檢查待孕雌貝累計受精比例，精確確定雄貝的人工催產(chǎn)時間，提高了雄貝催產(chǎn)效率及成熟精子比例。
【具體實施方式】
[0006]以下將對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進(jìn)行詳細(xì)的描述；應(yīng)當(dāng)理解，優(yōu)選實施例僅為了說明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0007]—種厚殼貽貝人工催產(chǎn)及授精的方法，包括以下步驟:
親本培育池:室外培育水泥池規(guī)格為10 mX1.5 mXl m，備有充氣石，水泥池上方遮蓋帆布，可防雨防曬，四周用黑布遮擋，以調(diào)節(jié)光照的強度；
培育用水處理:從外海沙濾井抽上來的海水，經(jīng)沉淀、砂濾三級過濾后直接用于親本培
育；
親貝蓄養(yǎng):選擇殼表新鮮、完整，無破損，雙殼閉合有力，性腺飽滿，鰓完整，卵巢呈淺紅色，精巢呈白色的貽貝；入池后穩(wěn)定5d，入池時水溫為15°C，以后每天以1°C升溫速度升至22°C，恒溫待產(chǎn)；培育館料:以人工培養(yǎng)的鹽藻(Dunaliella viridis)、亞心形扁藻(Platymonassubcordiformis)及角毛藻(Chaetoceros)單胞藻活館料為主，輔以人工配合館料螺旋藻粉、綠藻粉及干酵母片；每天投喂8-12次，日投喂量由2*104 / d,逐漸增至4* IO4Cell/d,:每天換水3- 4次，每次I/ 3的培育水體，每3天移池I次；
促熟:升溫刺激法:把經(jīng)促熟性腺發(fā)育好的親貝，先經(jīng)6~Sh的陰干，再經(jīng)Ih流水刺激后，直接放入事先準(zhǔn)備好的升溫海水中，高出恒溫培育時:T 40C，經(jīng)f 2h的適應(yīng)期后，親貝能自行排放精、卵，親貝排放率為80%，采集的親貝沖洗干凈后放養(yǎng)到室內(nèi)水泥池，采取散養(yǎng)和單層網(wǎng)箱養(yǎng)殖兩種方式，放入親貝0.8萬~1.0萬粒，每池放入親貝200萬~300萬粒，親貝放養(yǎng)密度在370- 560粒/ m2放入上遮黑布簾的暫養(yǎng)水泥池，光照強度在500 Ix以下，加入經(jīng)過沉淀處理的自然海水，池水深50~80 cm,每天換水2~3次，換水量100%，換水時清除池底和池壁上的污物，檢查親貝，及時挑出死亡個體，入池后保持自然水溫一周，待親貝適應(yīng)池養(yǎng)環(huán)境后開始升溫，日升溫0.5~1°C，直至25°C時保持恒溫，經(jīng)常觀測水質(zhì)變化情況，每周檢測一次水質(zhì)指標(biāo)，根據(jù)實際情況調(diào)整換水量，保證親貝培育用水水質(zhì)優(yōu)良；或者將親本從培育池中撈出，并置于陰涼的地方干露刺激促熟；或者將親本放入玻璃缸或水桶中，注入海水并用加熱棒加熱，使水溫升高約:TC，再用準(zhǔn)備好的冰袋降至常溫，連續(xù)2~3次促熟；藻液刺激法:把親本放入容積約為 500 L 的塑料盆中，注入 120 X IO4 cells /mL 金藻(Isochrysis zhanjiangensis)及100 X IO4 cells /mL亞心形扁藻液，約40 min后，藻液顏色逐漸變清，親本排放大量條狀的糞便；流水刺激法:打開誘導(dǎo)池排水閥門，用小型抽水泵往池壁處橫向沖水，并控制好水流壓力，使水能均勻地流過誘導(dǎo)池池底并對親本進(jìn)行刺激:異性產(chǎn)物誘導(dǎo)法:解剖數(shù)個達(dá)到成熟期的親本，取其精子及卵子加入誘導(dǎo)池中，以誘導(dǎo)其它待排放的親本；
授精:將用于人工授精的雄貝及分泌物立即移入人工授精組的待孕雌貝培育池中，用于人工授精的雌貝數(shù)量與待孕雄貝數(shù)量的比為4:1，培育池內(nèi)暫停流動水，采用氣泵增氧，使得培育池中溶氧達(dá)到51毫克/升，用于人工授精的雄貝的分泌物移入人工授精組的待孕雌貝培育池10-30分鐘，人工授精完成。
[0008]稚貝培育:將餌料密度增加至(8~10)X104Cell/mL，若餌料不充足，可適當(dāng)投喂部分替代餌料如酵母等，前期每天換水3次，每次換水量為1/2;后期將換水量增至育苗水體的1.5^2.0倍，待稚貝平均殼長達(dá)0.4 mm以上時，開始裝袋出池下海。出池前對稚貝進(jìn)行流水刺激，以減少下海后的脫落率，下海7 d內(nèi)不動網(wǎng)袋，以后每隔5 d左右刷袋一次，下海15~20 d左右、殼長2~3 mm時進(jìn)行分袋。
【權(quán)利要求】
1.一種厚殼貽貝人工催產(chǎn)及授精的方法，包括以下步驟: 親本培育池:室外培育水泥池規(guī)格為10 mX1.5 mXl m，備有充氣石，水泥池上方遮蓋帆布，可防雨防曬，四周用黑布遮擋，以調(diào)節(jié)光照的強度； 培育用水處理:從外海沙濾井抽上來的海水，經(jīng)沉淀、砂濾三級過濾后直接用于親本培育； 親貝蓄養(yǎng):選擇殼表新鮮、完整，無破損，雙殼閉合有力，性腺飽滿，鰓完整，卵巢呈淺紅色，精巢呈白色的貽貝；入池后穩(wěn)定5d，入池時水溫為15°C，以后每天以1°C升溫速度升至22°C，恒溫待產(chǎn)； 培育館料:以人工培養(yǎng)的鹽藻(Dunaliella viridis)、亞心形扁藻(Platymonassubcordiformis)及角毛藻(Chaetoceros)單胞藻活館料為主，輔以人工配合館料螺旋藻粉、綠藻粉及干酵母片；每天投喂8-12次，日投喂量由2*104 / d,逐漸增至4* IO4Cell/d,:每天換水3- 4次，每次I/ 3的培育水體，每3天移池I次； 促熟:升溫刺激法:把經(jīng)促熟性腺發(fā)育好的親貝，先經(jīng)6~Sh的陰干，再經(jīng)Ih流水刺激后，直接放入事先準(zhǔn)備好的升溫海水中，高出恒溫培育時:T 40C，經(jīng)f 2h的適應(yīng)期后，親貝能自行排放精、卵，親貝排放率為80%，采集的親貝沖洗干凈后放養(yǎng)到室內(nèi)水泥池，采取散養(yǎng)和單層網(wǎng)箱養(yǎng)殖兩種方式，放入親貝0.8萬~1.0萬粒，每池放入親貝200萬~300萬粒，親貝放養(yǎng)密度在370- 560粒/ m2放入上遮黑布簾的暫養(yǎng)水泥池，光照強度在500 Ix以下，加入經(jīng)過沉淀處理的自然海水，池水深50~80 cm,每天換水2~3次，換水量100%，換水時清除池底和池壁上的污物，檢查親貝，及時挑出死亡個體，入池后保持自然水溫一周，待親貝適應(yīng)池養(yǎng)環(huán)境后開始升溫，日升溫0.5~1°C，直至25°C時保持恒溫，經(jīng)常觀測水質(zhì)變化情況，每周檢測一次水質(zhì)指標(biāo)，根據(jù)實際情況調(diào)整換水量，保證親貝培育用水水質(zhì)優(yōu)良；或者將親本從培育池中撈出，并置于陰涼的地方干露刺激促熟；或者將親本放入玻璃缸或水桶中，注入海水并用加熱棒加熱，使水溫升高約:TC，再用準(zhǔn)備好的冰袋降至常溫`，連續(xù)2~3次促熟；藻液刺激法:把親本放入容積約為 500 L 的塑料盆中，注入 120 X IO4 cells ZmT,金藻(Isochrysis zhanjiangensis)及100 X IO4 cells /mL亞心形扁藻液，約40 min后，藻液顏色逐漸變清，親本排放大量條狀的糞便；流水刺激法:打開誘導(dǎo)池排水閥門，用小型抽水泵往池壁處橫向沖水，并控制好水流壓力，使水能均勻地流過誘導(dǎo)池池底并對親本進(jìn)行刺激:異性產(chǎn)物誘導(dǎo)法:解剖數(shù)個達(dá)到成熟期的親本，取其精子及卵子加入誘導(dǎo)池中，以誘導(dǎo)其它待排放的親本； 授精:將用于人工授精的雄貝及分泌物立即移入人工授精組的待孕雌貝培育池中，用于人工授精的雌貝數(shù)量與待孕雄貝數(shù)量的比為4:1，培育池內(nèi)暫停流動水，采用氣泵增氧，使得培育池中溶氧達(dá)到51毫克/升，用于人工授精的雄貝的分泌物移入人工授精組的待孕雌貝培育池10-30分鐘，人工授精完成。
2.稚貝培育:將餌料密度增加至(8~10)X104Cell/mL，若餌料不充足，可適當(dāng)投喂部分替代餌料如酵母等，前期每天換水3次，每次換水量為1/2;后期將換水量增至育苗水體的1.5^2.0倍，待稚貝平均殼長達(dá)0.4 mm以上時，開始裝袋出池下海。
3.出池前對稚貝進(jìn)行流水刺激，以減少下海后的脫落率，下海7d內(nèi)不動網(wǎng)袋，以后每隔5 d左右刷袋一次，下海15~20 d左右、殼長2~3 mm時進(jìn)行分袋。
【文檔編號】A01K61/00GK103548720SQ201310485293
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年10月17日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月17日
【發(fā)明者】張偉 申請人:蘇州市陽澄湖漁業(yè)科技中心有限公司