飼料添加劑、其制備方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明是有關(guān)于一種飼料添加劑、其制備方法及應(yīng)用，其是由以下重量份的組分混合配制而成：杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物40～60份，構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20～30份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物10～30份；其中，杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是糞腸球菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入杜仲葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是枯草桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入構(gòu)樹葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是地衣芽孢桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入蘋果渣經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成。其是一種無毒，無殘留，無耐藥性，多功能的純天然綠色飼料添加劑。
【專利說明】飼料添加劑、其制備方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種飼料添加劑，特別是涉及一種純天然綠色飼料添加劑。
【背景技術(shù)】
[0002]飼料添加劑抗生素的危害日益顯現(xiàn)，受到社會的廣泛關(guān)注，尋求一種替代品和替代技術(shù)，既能保證畜牧業(yè)的生產(chǎn)效益不受影響，又能達(dá)到人類食品安全的標(biāo)準(zhǔn)是亟需研究的課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明從理論和實(shí)踐兩個方面出發(fā)，從我國農(nóng)業(yè)部2003年12月發(fā)布的第318號公告15中益生菌品種中，篩選出糞腸球菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌。根據(jù)這三種益生菌的生化特征，針對性的選擇杜仲葉，構(gòu)樹葉和蘋果渣這些可再生植物資源不同的營養(yǎng)成分，同時滿足合適各個物質(zhì)的最佳發(fā)酵條件，分別經(jīng)液體和固體雙重發(fā)酵，最終獲得更為豐富的活菌菌體和各種代謝產(chǎn)物。
[0004]糞腸球菌通常為兼性厭氧菌，特別適宜在豐富的碳水化合物環(huán)境中生長繁殖，產(chǎn)生大量的乳酸及代謝物質(zhì)，它在PH值為4.5以下時仍可生。杜仲葉中碳水化合物含量可達(dá)50.2%，恰好滿足了糞腸球菌生長繁殖的需要。研究發(fā)現(xiàn)其代謝產(chǎn)物甘露聚糖肽和活菌體對革蘭氏陽性菌，革蘭氏陰性菌都有很強(qiáng)的抑菌效果，隨著PH值得降低，抑菌作用逐漸變強(qiáng)，活菌體內(nèi)和代謝產(chǎn)物中含有較高的超氧化物歧化酶(SOD)能增強(qiáng)動物的體液免疫和細(xì)胞免疫。
[0005]芽孢桿菌是一種能夠產(chǎn)生芽孢的好氧菌，能耐受高溫、高壓和酸堿，生命力強(qiáng)，構(gòu)樹葉以及蘋果渣中的維生素、碳水化合物、微量元素等營養(yǎng)成分。極大地滿足了芽孢桿菌生長繁殖的需要。芽孢桿菌能夠耐受胃酸和消化道上段膽鹽和消化液的破壞，在達(dá)到消化道下段以后出芽生長繁殖，芽孢桿菌是好氧菌，在腸道內(nèi)消耗大量的氧氣，維持腸道厭氧環(huán)境，從而促進(jìn)糞腸球菌等厭氧菌的生長，抑制需氧致病菌的生長，維持動物腸道和菌體平衡。芽孢桿菌還能夠產(chǎn)生維生素B1、B2、B6等B族維生素、維生素C、蛋白酶、淀粉酶和脂肪酸等酶以及多種代謝產(chǎn)物，對飼料的降解消化吸收和動物的營養(yǎng)代謝起到促進(jìn)作用。
[0006]杜仲葉，是我國特有樹種杜仲樹的葉子，杜仲葉2005被列入中國藥典，屬于藥食兩用規(guī)定范圍，我國栽植面積廣達(dá)40萬畝，占世界總量的98%以上，主要分布在我國貴州、陜西、四川、河南、湖北等地。杜仲葉每年9?10月份采摘，曬干殺青通風(fēng)保存。杜仲葉具有強(qiáng)筋骨，補(bǔ)肝腎功效，服之輕身耐勞，為中藥之上品，主要成分碳水化合物含量50.2%，蛋白質(zhì)14.5%，還含有硒、鍺等15種微量元素和15種游離氨基酸，且人體和動物必須氨基酸齊全。
[0007]構(gòu)樹葉(又名構(gòu)桃樹、構(gòu)乳樹等):構(gòu)樹具有速生適應(yīng)性強(qiáng)，分布廣，易繁殖，熱量高，萌發(fā)期短的特點(diǎn)。功能:補(bǔ)腎利尿、強(qiáng)筋骨。構(gòu)樹葉蛋白質(zhì)含量高達(dá)20?30%，氨基酸、維生素、碳水化合物及微量元素等益生菌必需的營養(yǎng)都十分豐富。[0008]蘋果渣:我國年產(chǎn)蘋果近2000萬噸，蘋果加工中每年產(chǎn)生蘋果渣近100多萬噸，主要成分為可溶性碳水化合物、果膠、除脂肪酸以外的有機(jī)酸和半纖維素，用于發(fā)酵益生菌，可解決我國蛋白資源的缺乏和提高水果種植和加工業(yè)的質(zhì)量，減少污染具有重大意義。
[0009]本發(fā)明選擇三種純天然益生菌和三種天然可再生植物資源，在不使用抗生素和有害化學(xué)物質(zhì)的前提下，選取了先分后合的培養(yǎng)發(fā)酵制備方法，既實(shí)現(xiàn)三者的優(yōu)勢，又可以實(shí)現(xiàn)三者之間的優(yōu)勢互補(bǔ)，開創(chuàng)了具有中國特色的生態(tài)健康型飼料添加劑的新思路。
[0010]本發(fā)明從我國飼料添加劑規(guī)定可以使用的15種益生菌品種中篩選出糞腸球菌、枯草桿菌、地衣芽孢桿菌這三種人用藥理長期應(yīng)用的益生菌，根據(jù)此三種益生菌的生化特征針對性選擇杜仲葉、構(gòu)樹葉和蘋果渣三種天然可再生植物資源的營養(yǎng)成分，優(yōu)選適合三種益生菌自身特點(diǎn)的最佳培育發(fā)酵條件，分別采取液體和固體的雙重發(fā)酵并超前將人用藥品生產(chǎn)和質(zhì)量管理GMP環(huán)境和手段，運(yùn)用和貫徹到本發(fā)明生產(chǎn)的全過程之中，同時將益生菌發(fā)酵技術(shù)融匯了微生物學(xué)、動物營養(yǎng)學(xué)、飼料學(xué)和藥物制劑學(xué)等學(xué)科的知識，結(jié)合先進(jìn)的不銹鋼制藥制劑設(shè)備，使三種益生菌和三種天然可再生植物資源的營養(yǎng)成分和生物功效得到充分的釋放產(chǎn)品中豐富的活性菌體和代謝產(chǎn)物，極大地增強(qiáng)了產(chǎn)品在實(shí)際應(yīng)用上的效果O
[0011]本發(fā)明的主要目的在于提供一種無毒，無殘留，無耐藥性，多功能的純天然綠色飼料添加劑。
[0012]本發(fā)明的另一目的在于提供一種上述飼料添加劑的制備方法。
[0013]本發(fā)明的再一目的在于提供一種上述飼料添加劑添加到畜禽飼料中的用途。
[0014]本發(fā)明的目的及解決其技術(shù)問題是采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。依據(jù)本發(fā)明提出的飼料添加劑，其是由以下重量份的組分混合配制而成:杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物40-60份，構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20-30份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物10-30份；其中，杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是糞腸球菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入杜仲葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是枯草桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入構(gòu)樹葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是地衣芽孢桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入蘋果渣經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成。
[0015]本發(fā)明的目的及解決其技術(shù)問題還可采用以下技術(shù)措施進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)。
[0016]較優(yōu)地，前述的飼料添加劑，其中形成所述蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的固體發(fā)酵步驟中還引入麩皮和杜仲葉中至少一種。本發(fā)明人經(jīng)過試驗(yàn)證明，引入麩皮和/或杜仲葉后效果會更好，因?yàn)樘O果渣里面的主要成分在制備蘋果汁等產(chǎn)品的時候損失的比較多，麩皮中含有較高的碳水化合物和有效成分，在微生物發(fā)酵過程中提供能量；而杜仲葉粉也可輔助性地增加能量和有效成分。
[0017]較優(yōu)地，前述的飼料添加劑，其中每克所述飼料添加劑含糞腸球菌至少2個億、枯草桿菌至少I個億、地衣芽孢桿菌至少I個億，甘露聚糖肽> 200mg/kg、綠原酸> 0.4%、京尼平苷酸≥0.4%、總黃酮≥4.0%、含總糖≥12%、含蛋白質(zhì)≥12%。
[0018]較優(yōu)地，前述的飼料添加劑，其中:所述糞腸球菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨2-4%，牛肉膏0.1-0.5%，氯化鈉0.1-0.5%，葡萄糖2-4%，碳酸鈣0.5-1.5%，接種量3-5%，其余為純凈水，pH6.8-7.2，發(fā)酵溫度37°C-40°C，發(fā)酵時間:一、二級20-22小時，三級12-14小時；所述枯草桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨0.5?2%，牛肉膏0.1?0.5%，氯化鈉0.1?0.5%，硫酸鹽0.03%，接種量5?8%，其余為純凈水，pH7.0，發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間18?20小時；所述地衣芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨I?3%，牛肉膏0.1?0.5%，氯化鈉0.1?0.5%，接種量6?10%，其余為純凈水，pH7.0?7.2，培養(yǎng)發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間24?30小時；所述糞腸球菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:杜仲葉40目粗粉100份，碳酸鈣I?1.5%，純凈水是杜仲葉粗粉的60%，混合均勻，置蒸汽滅菌器115?121°C，滅菌25?30min，冷卻降溫至37?40°C，接種糞腸球菌三級發(fā)酵液，接種量10%，分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8?10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37?42°C，發(fā)酵時間36?42小時，沸騰干燥，溫度40?44°C ;所述枯草桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:構(gòu)樹葉40目粗粉100份，碳酸鈣I?1.5%，純凈水是構(gòu)樹葉粗粉的60%，拌勻后置蒸汽滅菌器115?121°C，滅菌25?30min，冷卻降溫37?40°C，接種枯草桿菌三級發(fā)酵液，接種量8?10%，混合均勻后分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8?10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間24?30小時，沸騰干燥，溫度40?44°C ;所述地衣芽孢桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:蘋果渣40目粗粉100份，麩皮15%，杜仲葉40目粗粉8-10%，無機(jī)鹽0.5?2.0%，加入純凈水量是蘋果渣粗粉的60%，混合后，置蒸汽滅菌，控制滅菌溫度115?121°C，滅菌時間30?60min，冷卻至室溫，接種地衣芽孢桿菌三級發(fā)酵液，接種量10?12%，拌合均勻，分裝置預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器控制厚度8?10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度30?40°C，發(fā)酵時間40?48小時，沸騰干燥40?44°C ；以上三種固體發(fā)酵干燥產(chǎn)物按比例混合，置V型混合機(jī)，混合20?35min，按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格后，即得該飼料添加劑。
[0019]較優(yōu)地，前述的飼料添加劑，其中所述糞腸球菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌在進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)時，培養(yǎng)基配方中含有杜仲葉提取濃縮液，其是將合格的杜仲新鮮干葉，按1:6的比例，加純凈水浸泡提取2h，控溫70?80°C，再進(jìn)行膜分離濃縮，控制比重1.20?
1.28而得。據(jù)本發(fā)明人研究，杜仲葉提取濃縮液的加入可使發(fā)酵后益生菌的數(shù)量增加，同時縮短發(fā)酵周期。
[0020]本發(fā)明的目的及解決其技術(shù)問題還采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。依據(jù)本發(fā)明提出的飼料添加劑的制備方法，其是由以下重量份的組分混合配制而成:杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物40?60份，構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20?30份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物10?30份；其中，杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是糞腸球菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入杜仲葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是枯草桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入構(gòu)樹葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是地衣芽孢桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入蘋果渣經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成。
[0021]本發(fā)明的目的及解決其技術(shù)問題還可采用以下技術(shù)措施進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)。
[0022]較優(yōu)地，前述的飼料添加劑的制備方法，其中形成所述蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的固體發(fā)酵步驟中還引入麩皮和杜仲葉中至少一種。
[0023]較優(yōu)地，前述的飼料添加劑的制備方法，其中:所述糞腸球菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨2?4%，牛肉膏0.1?0.5%，氯化鈉0.1?0.5%，葡萄糖2?4%，碳酸鈣0.5?1.5%，接種量3?5%，其余為純凈水，pH6.8?7.2，發(fā)酵溫度37°C?40°C，發(fā)酵時間:一、二級20?22小時，三級12?14小時；所述枯草桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨0.5?2%，牛肉膏0.1?0.5%，氯化鈉0.1?0.5%，硫酸鹽0.03%，接種量5?8%，其余為純凈水，pH7.0，發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間18?20小時；所述地衣芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨I?3%，牛肉膏0.1?0.5%，氯化鈉0.1?0.5%，接種量6?10%，其余為純凈水，pH7.0?7.2，培養(yǎng)發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間24?30小時；所述糞腸球菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:杜仲葉40目粗粉100份，碳酸鈣I?1.5%，純凈水是杜仲葉粗粉的60%，混合均勻，置蒸汽滅菌器115?121 °C，滅菌25?30min，冷卻降溫至37?40°C，接種糞腸球菌三級發(fā)酵液，接種量10%，分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8?10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37?42°C，發(fā)酵時間36?42小時，沸騰干燥，溫度40?44°C ;所述枯草桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:構(gòu)樹葉40目粗粉100份，碳酸鈣I?1.5%，純凈水是構(gòu)樹葉粗粉的60%，拌勻后置蒸汽滅菌器115?121°C，滅菌25?30min，冷卻降溫37?40°C，接種枯草桿菌三級發(fā)酵液，接種量8?10%，混合均勻后分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8?10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間24?30小時，沸騰干燥，溫度40?44°C ;所述地衣芽孢桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:蘋果渣40目粗粉100份，麩皮15%，杜仲葉40目粗粉8-10%，無機(jī)鹽0.5?2.0%，加入純凈水量是蘋果渣粗粉的60%，混合后，置蒸汽滅菌，控制滅菌溫度115?121°C，滅菌時間30?60min，冷卻至室溫，接種地衣芽孢桿菌三級發(fā)酵液，接種量10?12%，拌合均勻，分裝置預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器控制厚度8?10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度30?40°C，發(fā)酵時間40?48小時，沸騰干燥40?44°C ；以上三種固體發(fā)酵干燥產(chǎn)物按比例混合，置V型混合機(jī)，混合20?35min，按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格后，即得該飼料添加劑。
[0024]較優(yōu)地，前述的飼料添加劑的制備方法，其中所述糞腸球菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌在進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)時，培養(yǎng)基配方中含有杜仲葉提取濃縮液，其是將合格的杜仲新鮮干葉，按1:6的比例，加純凈水浸泡提取2h，控溫70?80°C，再進(jìn)行膜分離濃縮，控制比重1.20?1.28而得。
[0025]本發(fā)明的目的及解決其技術(shù)問題另外再采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。依據(jù)本發(fā)明提出的前述的飼料添加劑添加到畜禽飼料中的用途。
[0026]借由上述技術(shù)方案，本發(fā)明至少具有下列優(yōu)點(diǎn)及有益效果:
[0027](I)本發(fā)明所選擇三種益生菌，都具有較強(qiáng)的耐酸耐堿能力，芽孢桿菌還具有耐熱耐濕能力，均能在動物體內(nèi)低PH值及膽汁內(nèi)生存，而順利地進(jìn)入胃腸道，切實(shí)起到維持腸道菌群平衡同時可以結(jié)合產(chǎn)品中綠原酸、總黃酮進(jìn)一步強(qiáng)化了殺死和抑制有害菌的生長，提聞富余養(yǎng)殖的成活率。
[0028](2)本發(fā)明產(chǎn)品中的甘露聚糖肽，各種酶活性小肽等豐富的代謝產(chǎn)物能激活動物體內(nèi)吞噬細(xì)胞，干擾病毒核合成，抑制病毒在動物體內(nèi)正常細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制，促進(jìn)體液和細(xì)胞免疫，增強(qiáng)動物的免疫和非特異性免疫功能，具有很強(qiáng)的抗病毒能力，同時對病原微生物不易產(chǎn)生抗藥性，沒有藥殘和抗生素殘留，是一種可以替代抗生素和化學(xué)藥物類的飼料添加劑。
[0029](3)本發(fā)明選擇的杜仲葉，構(gòu)樹葉和蘋果渣三種天然可再生植物資源，豐富多彩的營養(yǎng)成分，既能促進(jìn)三種益生菌的生長繁殖，使產(chǎn)品中活菌體和代謝產(chǎn)物成倍增加，又能使?fàn)I養(yǎng)成分自身得到充分降解。更有利動物的消化吸收，促進(jìn)動物生長，產(chǎn)品獨(dú)有的親在平苷酸成分。臨床證明，具有獨(dú)特的活化動物合成膠原蛋白的能力和降低動物飽和脂肪酸、降低膽固醇能力，使畜禽肉蛋口感更加鮮美，更具野生風(fēng)味?？梢灶A(yù)言，隨著人們對食品安全，生態(tài)安全和環(huán)境保護(hù)的關(guān)注，隨著人們對無公害，保健型肉蛋奶產(chǎn)品需求量的日益增加，本發(fā)明將會在動物生態(tài)養(yǎng)殖中起到越來越重要的作用。
[0030]上述說明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段，而可依照說明書的內(nèi)容予以實(shí)施，并且為了讓本發(fā)明的上述和其他目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更明顯易懂，以下特舉較佳實(shí)施例，詳細(xì)說明如下。
【具體實(shí)施方式】
[0031]為更進(jìn)一步闡述本發(fā)明為達(dá)成預(yù)定發(fā)明目的所采取的技術(shù)手段及功效，以下結(jié)合較佳實(shí)施例，對依據(jù)本發(fā)明提出的飼料添加劑、其制備方法及應(yīng)用其【具體實(shí)施方式】、方法、步驟、特征及其功效，詳細(xì)說明如后。
[0032]實(shí)施例1
[0033]本發(fā)明的綠色復(fù)合型微生物多功能飼料添加劑的制備方法及配方如下:
[0034](一)杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0035]1.制備糞腸球菌斜面菌種:購買一支糞腸球菌原始菌，接種于一級合成流體培養(yǎng)基中，37?40°C恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行活化發(fā)酵培養(yǎng)24小時后從中吸取ImL菌液，置不同稀釋度的平皿，每只平皿倒入20mL的瓊脂營養(yǎng)培養(yǎng)基，凝固后倒置恒溫箱37?40°C，培養(yǎng)72小時，再從中挑選透明大菌落和相對比較小的菌落兩份，其中一份作鑒別試驗(yàn)，以確定原始菌種擴(kuò)繁后的純度和菌落數(shù)量，另一份繼續(xù)置試管液體培養(yǎng)基中40°C恒溫培養(yǎng)24小時后，用接種環(huán)從搖勻后的試管發(fā)酵培養(yǎng)基中鉤取一鉬金耳，在預(yù)先配制滅菌冷卻的固體斜面培養(yǎng)基表面劃線，37?40°C恒溫培養(yǎng)24小時即可,可供生產(chǎn)應(yīng)用的斜面菌種。
[0036]2.1?3級液體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制法
[0037](I)將斜面菌種逐級裝入一、二級試管和三角瓶進(jìn)行增菌培養(yǎng)發(fā)酵。
[0038](2) —、二、三級發(fā)酵用液體培養(yǎng)基的制備:各級培養(yǎng)基配方:蛋白胨4%，牛肉膏
0.5%，氯化鈉0.5%，碳酸鈣0.5%，一、二級用葡萄糖2%，三級用葡萄糖4%，杜仲葉提取濃縮液
1.0%，碳酸鈣1.5%，ρΗ6.8?7.2，接種量4.7%，剩余用純凈水補(bǔ)充到總量100%。
[0039]其中，杜仲葉提取濃縮液的制備方法為:將合格的杜仲新鮮干葉，按1:6的比例，加純凈水浸泡提取2h，控溫70?80°C，再進(jìn)行膜分離濃縮，控制比重1.20?1.28而得。
[0040](3)培養(yǎng)發(fā)酵條件:一、二、三級培養(yǎng)發(fā)酵溫度都為37?40°C;培養(yǎng)發(fā)酵時間一、二級20小時，三級14小時。
[0041 ] (4)三級液體發(fā)酵合格后，轉(zhuǎn)入固體發(fā)酵。
[0042]3.糞腸球菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法:
[0043]( I)將合格的杜仲干葉粉碎過40目篩。
[0044](2)稱取40目杜仲粉100份，碳酸鈣1.5%、純凈水是杜仲葉粗粉的60%，置球型蒸汽滅菌器115?121 °C，滅菌時間30min，迅速冷卻降溫至37?40°C，接種于上述制備好的三級發(fā)酵液，接種量為10%，球型蒸汽滅菌旋轉(zhuǎn)，內(nèi)置物料混合均勻后，分裝于預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器內(nèi)，控制厚度8?10cm，置滅菌恒溫培養(yǎng)間進(jìn)行固體發(fā)酵，控制培養(yǎng)發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間42小時，即可轉(zhuǎn)入沸騰干燥進(jìn)行控溫干燥，440C，干燥至水分含量合格為止，制成杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物，供總混備用。
[0045](二)構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0046]1.制備枯草桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨0.5%，牛肉膏0.1%，氯化鈉0.17%,杜仲葉提取濃縮液0.5%，硫酸鹽0.03%,純凈水93.7%，pH7.0,發(fā)酵溫度37~40°C，接種量5%，發(fā)酵時間18小時。
[0047]2.枯草芽孢桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方及制備:所述枯草桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:構(gòu)樹葉40目粗粉100份，碳酸鈣1%，純凈水是構(gòu)樹葉粗粉的60%，拌勻后置蒸汽滅菌器115~121 °C，滅菌25~30min，冷卻降溫37~40°C，接種枯草桿菌三級發(fā)酵液，接種量8%，混合均勻后分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8~10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37~40°C，發(fā)酵時間24小時。
[0048]3.固體發(fā)酵結(jié)束后，進(jìn)行沸騰干燥控制干燥溫度40~44°C即得構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌干燥產(chǎn)物，密封，裝桶，備用。
[0049](三)蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0050]1.所述地衣芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨1%，牛肉膏
0.1%，氯化鈉0.1%，杜仲葉提取濃縮液0.5%，純凈水92.3%，ρΗ7.0~7.2，接種量6%，培養(yǎng)發(fā)酵溫度37~40°C，發(fā)酵時間24小時。
[0051]2.地衣芽孢桿菌固體培養(yǎng)基的配方和制備
[0052]合格干燥的40目蘋果渣粗粉100份，麩皮15%，杜仲葉40目粗粉8%，無機(jī)鹽0.5%，純凈水的總量是蘋果渣粗粉的60%，混合后，置球型蒸汽滅菌器混勻，控制滅菌溫度115~121°C，滅菌時間30min，抽真空迅速降溫至室溫，接種地衣芽孢桿菌三級發(fā)酵液，接種量10%。
[0053]3.接種后的地衣芽孢桿菌固體發(fā)酵物料攪拌均勻，分裝置預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器控制厚度8~IOcm,置無菌恒溫培養(yǎng)間,控制發(fā)酵溫度30~40°C,發(fā)酵時間40小時,沸騰干燥40~44°C。
[0054](四)總混
[0055]將上述杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物60份，構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物30份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物10份，三者精確稱量置V型混合機(jī)混合20~35min,取樣送檢合格后包裝。
[0056]最終產(chǎn)品每克含活性糞腸球菌至少2個億，每克含枯草桿菌至少I個億,每克含地衣芽孢桿菌至少I個億。含甘露聚糖肽> 200mg/kg、含綠原酸> 0.4%、京尼平苷酸> 0.4%、總黃酮≥4.0%、含總糖≥12%、含蛋白質(zhì)≥12%。
[0057]實(shí)施例2
[0058]本發(fā)明的綠色復(fù)合型微生物多功能飼料添加劑的制備方法及配方如下:
[0059](一)杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0060]1.糞腸球菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨3%，牛肉膏0.5%，氯化鈉0.5%，葡萄糖3%，碳酸鈣1%，杜仲葉提取濃縮液1.5%，純凈水86%，ρΗ6.8~7.2，接種量4.5%，發(fā)酵溫度37°C~40°C，發(fā)酵時間:一、二級22小時，三級14小時。
[0061]2.糞腸球菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法
[0062]( I)將合格的杜仲干葉粉碎過40目篩。[0063](2)稱取40目杜仲粉100份，碳酸鈣1.5%、純凈水是杜仲葉粗粉的60%，置球型蒸汽滅菌器115-121 °C，滅菌時間25-30min，迅速冷卻降溫至37-40°C，接種于上述制備好的三級發(fā)酵液，接種量為10%，球型蒸汽滅菌旋轉(zhuǎn)，內(nèi)置物料混合均勻后，分裝于預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器內(nèi)，控制厚度8-10cm，置滅菌恒溫培養(yǎng)間進(jìn)行固體發(fā)酵，控制培養(yǎng)發(fā)酵溫度37-42°C，發(fā)酵時間42小時，即可轉(zhuǎn)入沸騰干燥進(jìn)行控溫干燥，溫度40-44°C。干燥至水分含量合格為止，制成杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物，供總混備用。
[0064](二)構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0065]1.制備枯草桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨1.5%，牛肉膏
0.5%，氯化鈉0.47%，杜仲葉提取濃縮液1.5%，硫酸鹽0.03%,純凈水90%, ρΗ7.0,發(fā)酵溫度37-40°C，接種量6%，發(fā)酵時間20小時。
[0066]2.枯草芽孢桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方及制備:所述枯草桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:構(gòu)樹葉40目粗粉100份，碳酸鈣1.5%，純凈水是構(gòu)樹葉粗粉的60%，拌勻后置蒸汽滅菌器115-121 °C，滅菌25-30min，冷卻降溫37-40°C，接種枯草桿菌三級發(fā)酵液，接種量10%，混合均勻后分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8-10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37-40°C，發(fā)酵時間30小時。
[0067]3.固體發(fā)酵結(jié)束后，進(jìn)行沸騰干燥控制干燥溫度40-44°C即得構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌干燥產(chǎn)物，密封，裝桶，備用。
[0068](三)蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0069]1.制備地衣芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為蛋白胨2%，牛肉膏
0.3%，氯化鈉0.2%，杜仲葉提取濃縮液1.5%，純凈水90%，pH7.0-7.2，接種量6%，培養(yǎng)發(fā)酵溫度37-40°C，發(fā)酵時間24小時。
[0070]2.地衣芽孢桿菌固體培養(yǎng)基的配方和制備
[0071 ] 合格干燥的40目蘋果渣粗粉100份，麩皮15%，杜仲葉40目粗粉10%，無機(jī)鹽2%，純凈水的總量是蘋果渣粗粉的60%，混合后，置球型蒸汽滅菌器混勻，控制滅菌溫度115-121 °C，滅菌時間60min，抽真空迅速降溫至室溫，接種地衣芽孢桿菌三級發(fā)酵液，接種量10%。
[0072]3.接種后的地衣芽孢桿菌固體發(fā)酵物料攪拌均勻，分裝置預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器控制厚度8-IOcm,置無菌恒溫培養(yǎng)間,控制發(fā)酵溫度30-40°C,發(fā)酵時間48小時,沸騰干燥40-44°C。
[0073](四)總混
[0074]將上述杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物50份，構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物30份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20份，三者精確稱量置V型混合機(jī)混合20-35min，取樣送檢合格后包裝，即得該飼料添加劑。
[0075]最終產(chǎn)品每克含活性糞腸球菌至少2個億，每克含枯草桿菌至少1個億，每克含地衣芽孢桿菌至少1個億。含甘露聚糖肽≥200mg/kg、含綠原酸> 0.4%、京尼平苷酸≥0.4%、總黃酮≥4.0%、含總糖≥12%、含蛋白質(zhì)≥12%。
[0076]實(shí)施例3
[0077]本發(fā)明的綠色復(fù)合型微生物多功能飼料添加劑的制備方法及配方如下:
[0078](—)杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備[0079]1.糞腸球菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨4%，牛肉膏0.5%，氯化鈉0.5%，葡萄糖4%，碳酸鈣1.5%，純凈水84.5%，ρΗ6.8?7.2，接種量5%，發(fā)酵溫度37°C?40°C，發(fā)酵時間:一、二級22小時，三級14小時，三級液體發(fā)酵合格后，轉(zhuǎn)入固體發(fā)酵。
[0080]3.糞腸球菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法[0081 ] (I)將合格的杜仲干葉粉碎過40目篩。
[0082](2)稱取40目杜仲粉100份，碳酸鈣1.5%、純凈水是杜仲葉粗粉的60%，置球型蒸汽滅菌器115?121 °C，滅菌時間25?30min，迅速冷卻降溫至37?40°C，接種于上述制備好的三級發(fā)酵液，接種量為10%，球型蒸汽滅菌旋轉(zhuǎn)，內(nèi)置物料混合均勻后，分裝于預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器內(nèi)，控制厚度8?10cm，置滅菌恒溫培養(yǎng)間進(jìn)行固體發(fā)酵，控制培養(yǎng)發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間42小時，即可轉(zhuǎn)入沸騰干燥進(jìn)行控溫干燥，溫度40?44°C，干燥至水分含量合格為止，制成杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物，供總混備用。
[0083](二)構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0084]1.枯草桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨2%，牛肉膏0.5%，氯化鈉0.5%，硫酸鹽0.03%,純凈水88.97%，ρΗ7.0,發(fā)酵溫度37?40°C，接種量8%，發(fā)酵時間20小時。
[0085]2.枯草芽孢桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方及制備:所述枯草桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:構(gòu)樹葉40目粗粉100份，碳酸鈣1.5%，純凈水是構(gòu)樹葉粗粉的60%，拌勻后置蒸汽滅菌器115?121 °C，滅菌25?30min，冷卻降溫37?40°C，接種枯草桿菌三級發(fā)酵液，接種量10%，混合均勻后分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8?10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間30小時。
[0086]3.固體發(fā)酵結(jié)束后，進(jìn)行沸騰干燥控制干燥溫度40?44°C即得構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌干燥產(chǎn)物，密封，裝桶，備用。
[0087](三)蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0088]1.地衣芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨2%，牛肉膏
0.5%，氯化鈉0.5%，純凈水90%，pH7.0?7.2，接種量7%，培養(yǎng)發(fā)酵溫度37?40°C，發(fā)酵時間30小時。
[0089]2.地衣芽孢桿菌固體培養(yǎng)基的配方和制備:
[0090]合格干燥的40目蘋果渣粗粉100份，麩皮15%，杜仲葉40目粗粉10%，無機(jī)鹽2%，純凈水的總量是蘋果渣粗粉的60%，混合后，置球型蒸汽滅菌器混勻，控制滅菌溫度115?121 °C，滅菌時間30min，抽真空迅速降溫至室溫，接種地衣芽孢桿菌三級發(fā)酵液，接種量12%。
[0091]3.接種后的地衣芽孢桿菌固體發(fā)酵物料攪拌均勻，分裝置預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器控制厚度8?IOcm,置無菌恒溫培養(yǎng)間,控制發(fā)酵溫度30?40°C,發(fā)酵時間48小時,沸騰干燥40?44°C。
[0092]4.總混，將上述杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物60份，構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20份，三者精確稱量置V型混合機(jī)混合20?35min,取樣送檢合格后包裝。
[0093]最終產(chǎn)品每克含活性糞腸球菌至少2個億，每克含枯草桿菌至少I個億,每克含地衣芽孢桿菌至少I個億。含甘露聚糖肽> 200mg/kg、含綠原酸> 0.4%、京尼平苷酸> 0.4%、總黃酮≥4.0%、含總糖≥12%、含蛋白質(zhì)≥12%。
[0094]實(shí)施例4
[0095]本發(fā)明的綠色復(fù)合型微生物多功能飼料添加劑的制備方法及配方如下:
[0096](一)杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備:
[0097]1.糞腸球菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨3%，牛肉膏0.5%，氯化鈉0.5%，葡萄糖4%，碳酸鈣1%，純凈水86%，pH6.8-7.2，接種量5%，發(fā)酵溫度37°C-40°C，發(fā)酵時間:一、二級22小時，三級14小時，三級液體發(fā)酵合格后，轉(zhuǎn)入固體發(fā)酵。
[0098]2.糞腸球菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法
[0099]( I)將合格的杜仲干葉粉碎過40目篩
[0100](2)稱取40目杜仲粉100份，碳酸鈣1.5%、純凈水是杜仲葉粗粉的60%，置球型蒸汽滅菌器115-121 °C，滅菌時間25-30min，迅速冷卻降溫至37-40°C，接種于上述制備好的三級發(fā)酵液，接種量為10%，球型蒸汽滅菌旋轉(zhuǎn)，內(nèi)置物料混合均勻后，分裝于預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器內(nèi)，控制厚度8-10cm，置滅菌恒溫培養(yǎng)間進(jìn)行固體發(fā)酵，控制培養(yǎng)發(fā)酵溫度37-40°C，發(fā)酵時間44小時，即可轉(zhuǎn)入沸騰干燥進(jìn)行控溫干燥，溫度40-44°C，干燥至水分含量合格為止，制成杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物，供總混備用。
[0101](二)構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0102]1.枯草桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨2%，牛肉膏0.5%，氯化鈉0.5%，硫酸鹽0.03%,純凈水90%, ρΗ7.0,發(fā)酵溫度37-40°C，接種量6.97%，發(fā)酵時間20小時。
[0103]2.枯草芽孢桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方及制備:所述枯草桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:構(gòu)樹葉40目粗粉100份，碳酸鈣1.5%，純凈水是構(gòu)樹葉粗粉的60%，拌勻后置蒸汽滅菌器115-121 °C，滅菌25-30min，冷卻降溫37-40°C，接種枯草桿菌三級發(fā)酵液，接種量8%，混合均勻后分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8-10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37-40°C，發(fā)酵時間30小時。
[0104]3.固體發(fā)酵結(jié)束后，進(jìn)行沸騰干燥控制干燥溫度40-44°C即得構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌干燥產(chǎn)物，密封，裝桶，備用。
[0105](三)蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的制備
[0106]1.地衣芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨3%，牛肉膏
0.5%，氯化鈉0.5%，純凈水90%，pH7.0-7.2，接種量6%，培養(yǎng)發(fā)酵溫度37-40°C，發(fā)酵時間30小時。
[0107]2.地衣芽孢桿菌固體培養(yǎng)基的配方和制備
[0108]合格干燥的40目蘋果渣粗粉100份，麩皮15%，杜仲葉40目粗粉10%，無機(jī)鹽2%，純凈水的總量是蘋果渣粗粉的60%，混合后，置球型蒸汽滅菌器混勻，控制滅菌溫度115-121°C，滅菌時間60min，抽真空迅速降溫至室溫，接種地衣芽孢桿菌三級發(fā)酵液，接種量12%。
[0109]3.接種后的地衣芽孢桿菌固體發(fā)酵物料攪拌均勻，分裝置預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器控制厚度8-IOcm,置無菌恒溫培養(yǎng)間,控制發(fā)酵溫度30-40°C,發(fā)酵時間48小時，沸騰干燥40-44°C。
[0110]4.總混，將上述杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物50份，構(gòu)樹葉枯草芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物30份，三者精確稱量置V型混合機(jī)混合20~35min,取樣送檢合格后包裝。
[0111]最終產(chǎn)品每克含活性糞腸球菌至少2個億，每克含枯草桿菌至少I個億，每克含地衣芽孢桿菌至少I個億。含甘露聚糖肽≥200mg/kg、含綠原酸≥0.4%、京尼平苷酸≥0.4%、總黃酮≥4.0%、含總糖≥12%、含蛋白質(zhì)≥12%。
[0112]需說明的是，以上各實(shí)施例中，本發(fā)明的飼料添加劑的制備方法并不僅限于此，一些步驟或操作方法可由本領(lǐng)域技術(shù)人員得知的其他慣用步驟或方法所替換以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。
[0113]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例揭露如上，然而并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明技術(shù)方案范圍內(nèi)，當(dāng)可利用上述揭示的方法及技術(shù)內(nèi)容作出些許的更動或修飾為等同變化的等效實(shí)施例，但凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對以上實(shí)施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種飼料添加劑，其特征在于其是由以下重量份的組分混合配制而成:杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物40~60份，構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20~30份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物10~30份；其中，杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是糞腸球菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入杜仲葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是枯草桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入構(gòu)樹葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是地衣芽孢桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入蘋果渣經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成。
2.如權(quán)利要求1所述的飼料添加劑，其特征在于形成所述蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的固體發(fā)酵步驟中還引入麩皮和杜仲葉中至少一種。
3.如權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑，其特征在于每克所述飼料添加劑含糞腸球菌至少2個億、枯草桿菌至少I個億、地衣芽孢桿菌至少I個億，甘露聚糖≥200mg/kg、綠原酸≥0.4%、京尼平苷酸≥0.4%、總黃酮≥4.0%、含總糖≥12%、含蛋白質(zhì)≥12%。
4.如權(quán)利要求2所述的飼料添加劑，其特征在于:所述糞腸球菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨2~4%，牛肉膏0.1~.0.5%，氯化鈉0.1~0.5%，葡萄糖2~4%，碳酸鈣0.5~1.5%，接種量3~5%，其余為純凈水，pH6.8~7.2，發(fā)酵溫度37°C~40°C，發(fā)酵時間:一、二級20~22小時，三級12~14小時；所述枯草桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨0.5~2%，牛肉膏.0.1~0.5%，氯化鈉0.1~0.5%，硫酸鹽0.03%,接種量5~8%，其余為純凈水，pH7.0,發(fā)酵溫度37~40°C，發(fā)酵時間18~20小時；所述地衣芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨I~3%，牛肉膏.0.1~0.5%，氯化鈉0.1~0.5%，接種量6~10%,其余為純凈水，pH7.0~7.2，培養(yǎng)發(fā)酵溫度37~40°C，發(fā)酵時間24~30小時；所述糞腸球菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:杜仲葉40目粗粉100份，碳酸鈣I~1.5%，純凈水是杜仲葉粗粉的60%，混合均勻，置蒸汽滅菌器115~121°C，滅菌25~.30min,冷卻降溫至37~40°C，接種糞腸球菌三級發(fā)酵液，接種量10%，分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8~10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37~42°C，發(fā)酵時間.36~42小時，沸騰干燥，溫度40~44°C ；所述枯草桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:構(gòu)樹葉40目粗粉100份，碳酸鈣I~1.5%，純凈水是構(gòu)樹葉粗粉的60%，拌勻后置蒸汽滅菌器115~121°C，滅菌25~30min，冷卻降溫37~40°C，接種枯草桿菌三級發(fā)酵液，接種量8~10%，混合均勻后分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8~10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37~40°C，發(fā)酵時間24~30小時，沸騰干燥，溫度40~44°C ;所述地衣芽孢桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:蘋果渣40目粗粉100份，麩皮15%，杜仲葉40目粗粉8-10%，無機(jī)鹽0.5~2.0%，加入純凈水量是蘋果渣粗粉的60%，混合后，置蒸汽滅菌，控制滅菌溫度115~121°C，滅菌時間30~60min，冷卻至室溫，接種地衣芽孢桿菌三級發(fā)酵液，接種量10~12%，拌合均勻，分裝置預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器控制厚度8~IOcm,置無菌恒溫培養(yǎng)間,控制發(fā)酵溫度30~40°C,發(fā)酵時間40~48小時,沸騰干燥40~44°C ；以上三種固體發(fā)酵干燥產(chǎn)物按比例混合，置V型混合機(jī)，混合20~35min，按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格后，即得該飼料添加劑。
5.如權(quán)利要求1、2或4所述的飼料添加劑，其特征在于所述糞腸球菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌在進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)時，培養(yǎng)基配方中含有杜仲葉提取濃縮液，其是將合格的杜仲新鮮干葉，按1:6的比例，加純凈水浸泡提取2h，控溫70~80°C，再進(jìn)行膜分離濃縮，控制比重1.20~1.28而得。
6.一種飼料添加劑的制備方法，其特征在于其是由以下重量份的組分混合配制而成:杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物40~60份，構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物20~30份，蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物10~30份；其中，杜仲葉糞腸球菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是糞腸球菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入杜仲葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；構(gòu)樹葉枯草桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是枯草桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入構(gòu)樹葉經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成；蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物是地衣芽孢桿菌先經(jīng)液體發(fā)酵、再引入蘋果渣經(jīng)固體發(fā)酵，而后經(jīng)干燥而成。
7.如權(quán)利要求6所述的飼料添加劑的制備方法，其特征在于形成所述蘋果渣地衣芽孢桿菌發(fā)酵干燥產(chǎn)物的固體發(fā)酵步驟中還引入麩皮和杜仲葉中至少一種。
8.如權(quán)利要求7所述的飼料添加劑的制備方法，其特征在于:所述糞腸球菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨2~4%，牛肉膏0.1~0.5%，氯化鈉0.1~0.5%，葡萄糖2~4%，碳酸鈣0.5~1.5%，接種量3~5%，其余為純凈水，pH6.8~7.2，發(fā)酵溫度37°C~40°C，發(fā)酵時間:一、二級20~22小時，三級12~14小時；所述枯草桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨0.5~2%，牛肉膏0.1~0.5%，氯化鈉0.1~0.5%，硫酸鹽0.03%,接種量5~8%，其余為純凈水，pH7.0,發(fā)酵溫度37~40°C，發(fā)酵時間18~20小時；所述地衣芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝參數(shù)為:蛋白胨I~3%，牛肉膏0.1~0.5%，氯化鈉0.1~0.5%，接種量6~10%,其余為純凈水，pH7.0~7.2，培養(yǎng)發(fā)酵溫度37~40°C，發(fā)酵時間24~30小時；所述糞腸球菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:杜仲葉40目粗粉100份，碳酸鈣1~1.5%，純凈水是杜仲葉粗粉的60%，混合均勻，置蒸汽滅菌器115~121°C，滅菌25~30min,冷卻降溫至37~40°C，接種糞腸球菌三級發(fā)酵液，接種量10%，分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8~10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37~42°C，發(fā)酵時間36~42小時，沸騰干燥，溫度40~44°C ；所述枯草桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:構(gòu)樹葉40目粗粉100份，碳酸鈣1~1.5%，純凈水是構(gòu)樹葉粗粉的60%，拌勻后置蒸汽滅菌器115~121°C，滅菌25~30min，冷卻降溫37~40°C，接種枯草桿菌三級發(fā)酵液，接種量8~10%，混合均勻后分裝預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器，控制厚度8~10cm，置無菌恒溫培養(yǎng)間，控制發(fā)酵溫度37~40°C，發(fā)酵時間24~30小時，沸騰干燥，溫度40~44°C ;所述地衣芽孢桿菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方和制備方法為:蘋果渣40目粗粉100份，麩皮15%，杜仲葉40目粗粉8-10%，無機(jī)鹽0.5~2.0%，加入純凈水量是蘋果渣粗粉的60%，混合后，置蒸汽滅菌，控制滅菌溫度115~121°C，滅菌時間30~60min，冷卻至室溫，接種地衣芽孢桿菌三級發(fā)酵液，接種量10-12%，拌合均勻，分裝置預(yù)先滅菌的不銹鋼篩網(wǎng)容器控制厚度8-IOcm,置無菌恒溫培養(yǎng)間,控制發(fā)酵溫度30-40°C,發(fā)酵時間40-48小時,沸騰干燥40-44°C ；以上三種固體發(fā)酵干燥產(chǎn)物按比例混合，置V型混合機(jī)，混合20-35min，按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格后，即得該飼料添加劑。
9.如權(quán)利要求6、7或8所述的飼料添加劑的制備方法，其特征在于所述糞腸球菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌在進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)時，培養(yǎng)基配方中含有杜仲葉提取濃縮液，其是將合格的杜仲新鮮干葉，按1:6的比例，加純凈水浸泡提取2h，控溫70-80°C，再進(jìn)行膜分離濃縮，控制比重1.20-1.28而得。
10.如權(quán)利要求1-5任一權(quán)利要求所述的飼料添加劑添加到畜禽飼料中的用途。
【文檔編號】A23K1/16GK103444985SQ201310435902
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2013年9月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月23日
【發(fā)明者】朱銘強(qiáng), 蘇印泉, 鄒吉祥, 符景明, 尉芹, 亢福仁 申請人:西北農(nóng)林科技大學(xué)