一種沉水植物黑藻的人工種子制作方法
【專利摘要】本發(fā)明是一種沉水植物黑藻的人工種子制備方法。包括有如下步驟：1）取黑藻苗，用水沖洗除去植物表面的浮游生物；2）切去植株的所有根及葉，取生長(zhǎng)旺盛的植株，用蒸餾水沖洗；3）將帶有節(jié)間的側(cè)芽和頂芽切下，置于由海藻酸鈉+霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液+NAA混合而成的凝膠液中；4）用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進(jìn)行固化反應(yīng)，固化反應(yīng)后取出，用無(wú)菌蒸餾水漂洗，終止反應(yīng)即得黑藻人工種子。本發(fā)明省去植物組織培養(yǎng)，且無(wú)需在無(wú)菌條件下進(jìn)行，大大減少制備的工序，大大降低了成本，縮短周期，并且成活率高。
【專利說(shuō)明】一種沉水植物黑藻的人工種子制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種沉水植物的繁殖方法，是將人工種子技術(shù)應(yīng)用于沉水植物繁殖的方法，特別是一種沉水植物黑藻的人工種子制作方法，屬于沉水植物黑藻的人工種子制作方法的創(chuàng)新技術(shù)。
【背景技術(shù)】
[0002]人工種子技術(shù)是將植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的體細(xì)胞胚或能發(fā)育成完整植株的分生組織(芽、愈傷組織、胚狀體等)包埋在含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和具有保護(hù)功能的外殼內(nèi)形成的在適宜條件下能夠發(fā)芽出苗的顆粒體。1981年Lawrence等研究了芹萊和茜筐體細(xì)胞包裹的液膠包埋帶技術(shù)以后，便有越來(lái)越多的人工種子方面的報(bào)道。1987年我國(guó)開(kāi)始將人工種子納入國(guó)家高科技發(fā)展規(guī)劃(863計(jì)劃)，對(duì)一些經(jīng)濟(jì)作物如橡膠樹(shù)和一些我國(guó)南方的特有果樹(shù)的人工種子進(jìn)行研究。據(jù)王宏霞等的研究(2011)，結(jié)果表明，以MS液體培養(yǎng)基+海藻酸鈉(3%)+ 活性炭(0.5%)+ 多菌靈(0.3%)+ 苯甲酸鈉(0.2%)+ 殼聚糖(0.05%)+6-BA(0.5mg/L)+NAA(lmg/L)制作的半夏人工種子，其萌發(fā)率最高，達(dá)到80% ;據(jù)安彥杰等的研究(2009)，以海藻酸鈉+MS+蔗糖+ IBA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L制作的菹草人工種子在滅菌自來(lái)水中萌發(fā)率可達(dá)80%，且轉(zhuǎn)株率達(dá)20%。國(guó)內(nèi)外的研究和應(yīng)用表明，人工種子與天然種子相t匕，具有繁殖速度快、生產(chǎn)周期短，可工廠化大規(guī)模制備、貯藏、迅速推廣、生產(chǎn)不受季節(jié)限制等優(yōu)點(diǎn)。目前，人工種子的研究范圍主要集中于一些重要的糧食作物和經(jīng)濟(jì)作物，藥用植物，以及觀賞植物等，但在沉水植物的應(yīng)用較少，僅應(yīng)用在菹草的繁殖。中國(guó)專利說(shuō)明書(shū)CN101120655公開(kāi)了一種沉水植物菹草人工種子制作方法，其制做步驟是:首先是在在含激素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)生芽，待芽長(zhǎng)到一定長(zhǎng)度時(shí)，將誘導(dǎo)出的芽置于盛海藻酸鈉+MS+蔗糖+ IBA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L的凝膠液中，無(wú)菌條件下，用滴管將含有芽的凝膠滴入CaCl2中進(jìn)行固化 反應(yīng)，最后用無(wú)菌水漂洗，即制成菹草人工種子。但該方法首先在含激素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)生芽，即通過(guò)植物組織培養(yǎng)方法誘導(dǎo)生芽，植物組織培養(yǎng)技術(shù)的實(shí)驗(yàn)條件和操作要求高，該制備方法繁瑣、風(fēng)險(xiǎn)高、周期長(zhǎng)、應(yīng)用價(jià)值受到了一定得限制。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于考慮上述問(wèn)題而提供一種簡(jiǎn)潔、快速的沉水植物黑藻的人工種子制備方法。本發(fā)明省去植物組織培養(yǎng)，且無(wú)需在無(wú)菌條件下進(jìn)行，大大減少制備的工序，大大降低了成本,縮短周期,并且成活率高。
[0004]本發(fā)明的技術(shù)方案是:本發(fā)明的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，包括有如下步驟:
1)取黑藻苗，用水沖洗除去植物表面的浮游生物；
2)切去植株的所有根及葉，取生長(zhǎng)旺盛的植株，用蒸餾水沖洗；
3)將帶有節(jié)間的側(cè)芽和頂芽切下，置于由海藻酸鈉+霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液+萘乙酸混合而成的凝膠液中；
4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進(jìn)行固化反應(yīng)，固化反應(yīng)后取出，用無(wú)菌蒸餾水漂洗，終止反應(yīng)即得黑藻人工種子。
[0005]上述凝膠液是由1.5%海藻酸鈉+50%霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液+ 0.lmg/L萘乙酸混合而成的凝膠液。
[0006]上述步驟4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進(jìn)行固化反應(yīng)，IOmin后取出。
[0007]上述步驟4)用無(wú)菌蒸餾水漂洗4~6次。
[0008]上述步驟I)用自來(lái)水沖洗0.8 h~1.2 h。
[0009]上述步驟2)切去植株的所有根及葉，取生長(zhǎng)旺盛的植株，用蒸餾水沖洗2~3次。
[0010]上述制成的黑藻人工種子直徑約為5~6mm,百粒重為6~8g。
[0011]上述將制成的人工種子放入自來(lái)水中培養(yǎng)，一周后芽逐漸長(zhǎng)大突破種皮，兩周后長(zhǎng)出新根。
[0012]本發(fā)明克服現(xiàn)有的沉水植物菹草人工種子制備方法繁瑣、風(fēng)險(xiǎn)高、周期長(zhǎng)、應(yīng)用價(jià)值低等缺點(diǎn)，提供一種簡(jiǎn)潔、快速的沉水植物黑藻人工種子制備方法，省去植物組織培養(yǎng)，且無(wú)需在無(wú)菌條件下進(jìn)行，大大減少制備的工序，而且由霍格蘭仕營(yíng)養(yǎng)液作為人工胚乳，大大降低了成本，縮短周期，并 且成活率達(dá)到80%。本發(fā)明是一種操作簡(jiǎn)單、周期短、成本低、應(yīng)用性強(qiáng)、成活率高的沉水植物黑藻的人工種子制備方法。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1是本發(fā)明黑藻人工種子外觀結(jié)構(gòu)示意圖；
圖2是本發(fā)明黑藻人工種子制作過(guò)程圖；
圖3是本發(fā)明黑藻人工種子長(zhǎng)芽突破種皮圖；
圖4是本發(fā)明黑藻人工種子長(zhǎng)根圖。
【具體實(shí)施方式】
[0014]實(shí)施例:
本發(fā)明的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，包括有如下步驟:
1)取黑藻苗，用水沖洗除去植物表面的浮游生物；
2)切去植株的所有根及葉，取生長(zhǎng)旺盛的植株，用蒸餾水沖洗；
3)將帶有節(jié)間的側(cè)芽和頂芽切下，置于由海藻酸鈉+霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液+萘乙酸(NAA)混合而成的凝膠液中；
4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進(jìn)行固化反應(yīng)，固化反應(yīng)后取出，用無(wú)菌蒸餾水漂洗，終止反應(yīng)即得黑藻人工種子。
[0015]上述凝膠液是由1.5%海藻酸鈉+50%霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液+ 0.lmg/L萘乙酸混合而成的凝膠液。上述霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液是通用的營(yíng)養(yǎng)液。
[0016]上述步驟4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進(jìn)行固化反應(yīng)，IOmin后取出。
[0017]上述步驟4)用無(wú)菌蒸餾水漂洗4~6次。本實(shí)施例中，用無(wú)菌蒸餾水漂洗5次。[0018]上述步驟I)用自來(lái)水沖洗0.8 h~1.2 h。本實(shí)施例中，用自來(lái)水沖洗1.0 h。
[0019]上述步驟2)切去植株的所有根及葉，取生長(zhǎng)旺盛的植株，用蒸餾水沖洗2~3次。本實(shí)施例中，用蒸餾水沖洗3次。
[0020]上述制成的黑藻人工種子直徑約為5~6mm,百粒重為6~8g。
[0021]上述將制成的人工種子放入自來(lái)水中培養(yǎng)，一周后芽逐漸長(zhǎng)大突破種皮，兩周后長(zhǎng)出新根。
[0022]本實(shí)施例中，圖1中，海藻酸鈉I作為包埋基質(zhì),形成的人工種皮；霍格蘭仕營(yíng)養(yǎng)液2作為人工胚乳；帶有芽的節(jié)間的植物供體10。用海藻酸鈉I作為包埋基質(zhì)，將黑藻側(cè)芽和頂芽與霍格蘭仕營(yíng)養(yǎng)液2包埋并在CaCl2溶液中進(jìn)行固化反應(yīng)形成人工種子。用水凝膠性的海藻酸鈉作為包埋基質(zhì)，它具有生物活性、無(wú)毒、成本低、包埋制作工藝簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，在CaCl2溶液中進(jìn)行固化反應(yīng)和離子交換，同時(shí)氯化鈣有利于向培養(yǎng)物供氧，提高人工種子發(fā)芽率和貯藏性，霍格蘭仕營(yíng)養(yǎng)液作為人工胚乳，為植物新陳代謝和生長(zhǎng)發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，加入NAA促進(jìn)人工種子生根。
[0023]圖2中，取生長(zhǎng)旺盛的黑藻種苗3，用自來(lái)水沖洗I h，用來(lái)除去植物表面的浮游生物，切去沖洗干凈植株的所有根4及葉5，取生長(zhǎng)旺盛的植株，用蒸餾水沖洗2-3次，將帶有節(jié)間的側(cè)芽和頂芽6切下，將切下帶有節(jié)間的側(cè)芽和頂芽的植物供體置于盛海藻酸鈉+霍格蘭仕營(yíng)養(yǎng)液+ NAA 0.1 mg/L的凝膠液7中，用滴管將含有芽的凝膠滴入CaCl2溶液8中進(jìn)行固化反應(yīng)，固化反應(yīng)結(jié)束后，用無(wú)菌蒸餾水漂洗5次，即得黑藻人工種子9。
[0024]圖3表示經(jīng)過(guò)一周的生長(zhǎng),黑藻人工種子芽突破種皮的示意圖。圖4中表示經(jīng)過(guò)兩周的生長(zhǎng)，黑藻人工種子長(zhǎng)`出根的示意圖。
【權(quán)利要求】
1.一種沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于包括有如下步驟: 1)取黑藻苗，用水沖洗除去植物表面的浮游生物； 2)切去植株的所有根及葉，取生長(zhǎng)旺盛的植株，用蒸餾水沖洗； 3)將帶有節(jié)間的側(cè)芽和頂芽切下，置于由海藻酸鈉+霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液+萘乙酸混合而成的凝膠液中； 4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進(jìn)行固化反應(yīng)，固化反應(yīng)后取出，用無(wú)菌蒸餾水漂洗，終止反應(yīng)即得黑藻人工種子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述凝膠液是由1.5%海藻酸鈉+50%霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液+ 0.lmg/L萘乙酸混合而成的凝膠液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述步驟4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進(jìn)行固化反應(yīng)，IOmin后取出。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述步驟4)用無(wú)菌蒸餾水漂洗4~6次。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述步驟I)用自來(lái)水沖洗0.8 h~1.2 h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述步驟2)切去植株的所有根及葉，取生長(zhǎng)旺盛的植株，用蒸餾水沖洗2~3次。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的 沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述制成的黑藻人工種子直徑約為5~6mm,百粒重為6~8g。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述將制成的人工種子放入自來(lái)水中培養(yǎng)，一周后芽逐漸長(zhǎng)大突破種皮，兩周后長(zhǎng)出新根。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103477979SQ201310400769
【公開(kāi)日】2014年1月1日 申請(qǐng)日期:2013年9月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月6日
【發(fā)明者】閆志強(qiáng), 劉黽, 陳章和, 劉燕, 吳小業(yè), 劉俊 申請(qǐng)人:華南師范大學(xué), 嶺南園林股份有限公司