專利名稱：一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種植物的繁殖方法，尤其是一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法。
背景技術：
長期以來，紅掌一直以葉片、葉柄、莖段為外植體進行組織培養(yǎng)方式繁殖，杜敬然、陳春滿、趙斌等人均對以上材料為外植體，誘導愈傷組織、叢生芽分化等技術做了報道，但存在愈傷組織長期繼代培養(yǎng)后不生長或不分化叢生芽或只生根等現象。紅掌氣生根的研究鮮少報道，僅王桂蘭、陳超等對紅掌氣生根再生團塊體系建立做了報道氣生根再生團塊及叢生芽誘導培養(yǎng)基均采用6-BA、2，4-D，但叢生芽增殖系數低、生根煉苗程序復雜，不適用于工廠規(guī)?；?。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法，可以客服現有技術中再生團塊誘導叢生芽增殖系數較低及生根培養(yǎng)方法復雜的缺點，繁殖速度快、節(jié)約生產成本并適用于工廠規(guī)模化育苗。為解決上述技術問題，本發(fā)明所采用的技術方案是一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法，該方法包括以下步驟
1)選取外植體取紅掌組培苗的氣生根為外植體；
2)再生團塊誘導培養(yǎng)將選取的外植體接種于誘導培養(yǎng)基上，置于溫度26±1°C、濕度80±5%、光照14h、光照強度1800-20001x的培養(yǎng)室內，20天后形成愈傷團塊，繼續(xù)通過40天的培養(yǎng)得到再生團塊；
3)叢生芽誘導培養(yǎng)將誘導出的再生團塊分割成Icm2的團塊，接入叢生芽誘導培養(yǎng)基上，置于溫度24±1°C、濕度80±5%、光照14h、光照強度2000-25001x的培養(yǎng)室內，30天后再生團塊上分化出叢生芽，紅掌組培種苗開始形成；
4)叢生芽增殖繼代將誘導出的叢生芽團分割成3-5個芽的芽叢，接入叢生芽增殖繼代培養(yǎng)基上，置于溫度24± 1°C、濕度80±5%、光照14h、光照強度2000-25001x的培養(yǎng)室內，每30-40天繼代轉管一次，直至長成3-5cm帶有氣生根的的粗壯紅掌幼苗；
5)煉苗移栽將長至3-5cm帶有氣生根的的粗壯紅掌幼苗轉入煉苗室，保持室內溫度24±1°C、濕度85±5%、光照12h、光照強度3000-35001x，3-5天后，打開瓶口取出幼苗，洗凈紅掌幼苗氣生根上的培養(yǎng)基，吸干紅掌幼苗上的水，將紅掌幼苗根浸入50%多菌靈800倍液中浸泡5min，栽入穴盤中，澆施殺菌水，2個月后移栽上盆，即培養(yǎng)成由紅掌氣生根誘導叢生芽途徑繁殖的組培苗。步驟I)中選取的氣生根為經長期繼代培養(yǎng)的愈傷組織或叢生芽上形成的氣生根。步驟2)所用誘導培養(yǎng)基為 1/2MS基本培養(yǎng)基+ TDZ I mg L_1+NAA0. 5 mg L—1+蔗糖30g L-1+瓊脂粉6g L-1。步驟3)所用叢生芽誘導培養(yǎng)基和步驟4)所用的叢生芽增殖繼代培養(yǎng)基為1/2MS基本培養(yǎng)基 + 6-BA0. 5 mg L^+NAAO.1 mg L—1+ 蔗糖 30g L—1+ 瓊脂粉 6g L—1。本發(fā)明克服了現有技術中再生團塊誘導叢生芽增殖系數較低及生根培養(yǎng)方法復雜的缺點，將采用激素TDZ、NAA誘導紅掌氣生根再生叢生芽增殖系數高、生根煉苗程序簡化、氣生根再生團塊比不同材料誘導的愈傷組織分化能力和抗衰老能力強，達到繁殖速度快、節(jié)約生產成本并適用于工廠規(guī)模化育苗的目的。本發(fā)明提供的一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法，有益效果如下1、直接選取紅掌組培苗的氣生根為外植體，不需消毒，減少污染。2、采用氣生根誘導出再生團塊比葉片、葉柄誘導的愈傷組織分化叢生芽的數量多、速度快。3、繼代增殖次數不影響叢生芽的分化，且能保持品種的遺傳特性。4、直接選取帶有氣生根的紅掌幼苗煉苗移栽成活率高，可達85%。5、將帶氣生根的幼苗直接煉苗移栽，減少了生根及壯苗培養(yǎng)的過程，縮短了紅掌整個組培周期(組培周期是指在試驗室的時間，即從根誘導到苗生根的整個時間，不包括室外煉苗的時間)，由原來的130天縮短至100天，降低了生產成本，適用于工廠化規(guī)模育苗的目的。
具體實施例方式一種紅掌氣生根 誘導叢生芽快繁方法，該方法包括以下步驟
1)選取外植體取紅掌組培苗較粗壯、厚實肉質的氣生根為外植體，可直接選取為經長期繼代培養(yǎng)的愈傷組織或叢生芽上形成的氣生根；
2)再生團塊誘導培養(yǎng)將選取的外植體接種于誘導培養(yǎng)基上，置于溫度26±1°C、濕度80±5%、光照14h、光照強度1800-20001x的培養(yǎng)室內，20天后形成愈傷團塊，繼續(xù)通過40天的培養(yǎng)養(yǎng)愈傷團塊由乳白色轉變淡綠色且逐漸增大得到再生團塊；
3)叢生芽誘導培養(yǎng)將誘導出的再生團塊分割成Icm2的團塊，接入叢生芽誘導培養(yǎng)基上，置于溫度24±1°C、濕度80±5%、光照14h、光照強度2000-25001x的培養(yǎng)室內，30天后再生團塊上分化出叢生芽，紅掌組培種苗開始形成；
4)叢生芽增殖繼代將誘導出叢生芽的再生團塊分割成3-5個芽/叢，置于叢生芽增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，每30-40天繼代轉管一次，直至長成3-5cm帶有氣生根的的粗壯紅掌幼苗；
5)煉苗移栽將長至3-5cm帶有氣生根的粗壯紅掌幼苗轉入煉苗室，保持室內溫度24± 1°C、濕度85 ±5%、光照12h、光照強度3000-3500lx，3-5天后，打開瓶口取出幼苗，洗凈紅掌幼苗氣生根上的培養(yǎng)基，吸干紅掌幼苗上的水，將紅掌幼苗根部浸入50%多菌靈800倍溶液中浸泡5min，栽入珍珠巖和泥炭的質量比為3:1的基質穴盤中，澆施殺菌水，2個月后移栽上盆，即培養(yǎng)成由紅掌氣生根誘導叢生芽途徑繁殖的組培苗。步驟2)所用誘導培養(yǎng)基為1/2MS基本培養(yǎng)基+ TDZ I mg L_1+NAA0. 5 mg L—1+蔗糖30g L-1+瓊脂粉6g L-1。步驟3)所用叢生芽誘導培養(yǎng)基和步驟4)所用的叢生芽增殖繼代培養(yǎng)基為1/2MS基本培養(yǎng)基 + 6-BA0. 5 mg L^+NAAO.1 mg L—1+ 蔗糖 30g L—1+ 瓊脂粉 6g L—1。
權利要求
1.一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法，其特征在于該方法包括以下步驟 1)選取外植體取紅掌組培苗的氣生根為外植體； 2)再生團塊誘導培養(yǎng)將選取的外植體接種于誘導培養(yǎng)基上，置于溫度26±1°C、濕度80±5%、光照14h、光照強度1800-20001x的培養(yǎng)室內，20天后形成愈傷團塊，繼續(xù)通過40天的培養(yǎng)得到再生團塊； 3)叢生芽誘導培養(yǎng)將誘導出的再生團塊分割成Icm2的團塊，接入叢生芽誘導培養(yǎng)基上，置于溫度24±1°C、濕度80±5%、光照14h、光照強度2000-25001x的培養(yǎng)室內，30天后再生團塊上分化出叢生芽，紅掌組培種苗開始形成； 4)叢生芽增殖繼代將誘導出的叢生芽團分割成3-5個芽的芽叢，接入叢生芽增殖繼代培養(yǎng)基上，置于溫度24± 1°C、濕度80±5%、光照14h、光照強度2000-25001x的培養(yǎng)室內，每30-40天繼代轉管一次，直至長成3-5cm帶有氣生根的的粗壯紅掌幼苗； 5)煉苗移栽將長至3-5cm帶有氣生根的的粗壯紅掌幼苗轉入煉苗室，保持室內溫度24±1°C、濕度85±5%、光照12h、光照強度3000-35001x，3-5天后，打開瓶口取出幼苗，洗凈紅掌幼苗氣生根上的培養(yǎng)基，吸干紅掌幼苗上的水，將紅掌幼苗根浸入50%多菌靈800倍液中浸泡5min，栽入穴盤中，澆施殺菌水，2個月后移栽上盆，即培養(yǎng)成由紅掌氣生根誘導叢生芽途徑繁殖的組培苗。
2.根據權利要求1所述的一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法，其特征在于步驟I)中選取的氣生根為經長期繼代培養(yǎng)的愈傷組織或叢生芽上形成的氣生根。
3.根據權利要求1或2所述的一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法，其特征在于步驟2)所用誘導培養(yǎng)基為1/2MS基本培養(yǎng)基+TDZ I mg L^+NAAO. 5 mg L-1+蔗糖30g L-1+瓊脂粉6g L'
4.根據權利要求1或2所述的一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法，其特征在于步驟3)所用叢生芽誘導培養(yǎng)基和步驟4)所用的叢生芽增殖繼代培養(yǎng)基為1/2MS基本培養(yǎng)基+6-BAO. 5 mg L ^NAAO.1 mg L :+ 鹿糖 30g .L1+ 瓊脂粉 6g L全文摘要
一種紅掌氣生根誘導叢生芽快繁方法，該方法包括以下步驟1)選取外植體2)再生團塊誘導培養(yǎng)；3)叢生芽誘導培養(yǎng)；4)叢生芽增殖；5)煉苗移栽2個月后移栽上盆，即為由紅掌氣生根誘導叢生芽途徑繁殖的組培苗。本發(fā)明克服了現有技術中再生團塊誘導叢生芽增殖系數較低及生根培養(yǎng)方法復雜的缺點，將采用激素TDZ、NAA誘導紅掌氣生根再生叢生芽增殖系數高、生根煉苗程序簡化、氣生根再生團塊比不同材料誘導的愈傷組織分化能力和抗衰老能力強，達到繁殖速度快、節(jié)約生產成本并適用于工廠規(guī)模化育苗的目的。
文檔編號A01H4/00GK103053417SQ20121057311
公開日2013年4月24日 申請日期2012年12月26日 優(yōu)先權日2012年12月26日
發(fā)明者胡梅香, 張國禹, 黃桂云, 馬曉波, 邱利文, 吳笛, 張海波, 汪磊, 楊蘭芳 申請人:中國長江三峽集團公司, 長江三峽生態(tài)園林有限公司