專利名稱：中國水仙愈傷組織保存組培方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中國水仙組織培養(yǎng)方法，具體涉及一種中國水仙愈傷組織保存組培方法。
背景技術(shù)：
中國水仙(Akrci1S1SW1Stazetta L. var. chinensis Roem)石蒜科水仙屬多年生球根花卉，是我國傳統(tǒng)十大名花之一，也是世界上冬季室內(nèi)陳設(shè)的花卉之一，具有較高的觀·賞價值、經(jīng)濟(jì)價值和藥用價值。目前，用于生產(chǎn)栽培的中國水仙主要有‘金盞銀臺’和‘玉玲瓏’兩個栽培品種，這主要是由于中國水仙采用側(cè)球繁殖和側(cè)芽繁殖等無性繁殖方法，繁殖周期長，繁殖速度慢，且中國水仙為三倍體，很難自然或人工雜交產(chǎn)生新品種，導(dǎo)致品種單一，品種稀少。此外，在栽培過程中易受到病毒的侵染而導(dǎo)致品質(zhì)下降，品種退化。這些都嚴(yán)重影響中國水仙的商品生產(chǎn)和品種開發(fā)，不能滿足市場需求。Stone (1973 年)首次成功地獲得 Akrci1S1SW1S tazetta cv. ‘Grand Soleil d，Or的脫毒苗。隨著組織培養(yǎng)技術(shù)的不斷完善以及分子生物學(xué)的飛速發(fā)展，中國水仙的離體培養(yǎng)和基因工程研究越來越受到青睞。中國水仙離體培養(yǎng)主要采用小鱗莖發(fā)生途徑獲得再生植株，雖然該途徑再生頻率高，效果好，但是，在遺傳轉(zhuǎn)化研究中以小鱗莖作為受體材料的轉(zhuǎn)化效率低，易發(fā)生褐變。因此，良好的受體系統(tǒng)對于中國水仙品種改良和開發(fā)是十分必要的。愈傷組織是理想的受體材料，目前，利用帶部分鱗片的鱗莖盤、帶部分鱗莖盤的鱗片、花梗、未抽薹的花序、花藥、子房、幼嫩葉片等外植體均可誘導(dǎo)出中國水仙愈傷組織，但是愈傷組織在繼代培養(yǎng)或增殖過程中易褐化，繁殖系數(shù)不高，愈傷組織較難獲得和保存。因此，迫切地需要尋求和建立一條中國水仙愈傷組織保存的有效途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中存在中國水仙愈傷組織難以繼代和保存的問題，提供一種愈傷組織保存的組培方法，培養(yǎng)出良好的愈傷組織。
本發(fā)明的目的是通過以下方法實現(xiàn)的
本發(fā)明的中國水仙愈傷組織保存組培方法，包括材料選擇、誘導(dǎo)培養(yǎng)、愈傷組織保存，其特征在于所述愈傷組織保存培養(yǎng)基為ΜΝ+1.(Γ3. O mg/L 6-BA+O. 5 1. 5 mg/L 2，4_D +0.2mg/L NAA+30 g/L白糖+6 g/L瓊脂粉，ρΗ5· 8 ;其中，MN為基本培養(yǎng)基，1. 0 3· 0 mg/L6-BA+O. 5^1. 5 mg/L 2，4_D +0. 2 mg/L NAA為激素組合；所述MN基本培養(yǎng)基配方如表I所
/Jn ο表I 麗基本培養(yǎng)基配方
權(quán)利要求
1.一種中國水仙愈傷組織保存組培方法，包括材料選擇、誘導(dǎo)培養(yǎng)和愈傷組織保存，其特征在于所述愈傷組織保存培養(yǎng)基為ΜΝ+1. (Γ3. O mg/L 6-BA+0. 5 1. 5 mg/L 2，4-D +0.2 mg/L NAA+30 g/L白糖+ 6 g/L瓊脂粉，pH5. 8 ;其中，麗基本培養(yǎng)基配方如表I所示表I MN基本培養(yǎng)基配方
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中國水仙愈傷組織保存組培方法，其特征在于所述愈傷組織保存培養(yǎng)基為 MN+2. O mg/L 6-BA+0. 5 mg/L 2，4-D +0. 2 mg/L NAA+ 30 g/L 白糖+ 6 g/L 瓊脂粉，pH5.8。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中國水仙愈傷組織保存組培方法，其特征在于所述愈傷組織保存培養(yǎng)基為 MN+3. O mg/L 6-BA+1. 5 mg/L 2, 4-D + O. 4 mg/L NAA+30 g/L 白糖 + 6 g/L 瓊脂粉，pH5.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中國水仙愈傷組織保存組培方法，其特征在于所述愈傷組織保存培養(yǎng)基為 MN+1. O mg/L 6-BA+0. 5 mg/L 2, 4-D +0. 4 mg/L NAA+30 g/L 白糖 + 6 g/L 瓊脂粉，pH5.8。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中國水仙愈傷組織保存組培方法，包括材料選擇、誘導(dǎo)培養(yǎng)和愈傷組織保存。使用本發(fā)明的中國水仙愈傷組織保存培養(yǎng)基，中國水仙愈傷組織的繁殖系數(shù)達(dá)到5.16倍，愈傷組織生長好，繁殖速度快，并且不發(fā)生褐化和分化現(xiàn)象，解決了中國水仙愈傷組織難以繼代和保存、繁殖系數(shù)低以及易褐化和分化嚴(yán)重等問題，實用性強(qiáng)，推廣性好。使用本發(fā)明保存的愈傷組織轉(zhuǎn)到分化培養(yǎng)基上容易分化，是中國水仙遺傳轉(zhuǎn)化受體的良好材料。
文檔編號A01H4/00GK103004590SQ20121051828
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月6日
發(fā)明者馮瑩, 潘東明 申請人:福建農(nóng)林大學(xué)