專利名稱：一種富硒生物有機(jī)肥及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種富硒生物有機(jī)肥及其制備方法。
背景技術(shù)：
在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)活動(dòng)中，長(zhǎng)期和廣泛大量施用化學(xué)肥料，雖然保證了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)連年增產(chǎn)，但又造成土壤有機(jī)物過渡消耗，土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)的破壞，土壤酸化板結(jié)，土壤通氣性和持水能力下降，土壤微生物菌群失衡，土壤生態(tài)和水資源環(huán)境惡化；此外，長(zhǎng)期大量施用化學(xué)肥料，還造成農(nóng)作物對(duì)化學(xué)肥料吸收和利用率下降，致使農(nóng)作物產(chǎn)品質(zhì)量逐年下降。為了擺脫在農(nóng)業(yè)種植過程對(duì)化學(xué)肥料的過渡依賴，人們重新對(duì)有機(jī)肥料產(chǎn)生濃厚的興趣。
硒是人類和動(dòng)物必須的微量元素之一，服用適量的硒有預(yù)防和治療癌癥的作用， 長(zhǎng)期缺硒可引起多種疾病；制造和服用富硒食品，是人類和動(dòng)物補(bǔ)硒的有效途徑。
富硒生物有機(jī)肥是一類具有生物活性的富硒有機(jī)質(zhì)肥料，施用富硒生物有機(jī)肥料，一方面可增加土壤中硒含量，利于農(nóng)作物對(duì)硒吸收，刺激作物發(fā)芽、生根、促進(jìn)作物生長(zhǎng)、改善作物品質(zhì)，生產(chǎn)制造富硒農(nóng)產(chǎn)品，另一方面，又可使土壤增加有機(jī)質(zhì)含量，增加土壤微生物菌群數(shù)量，起到改善土壤物理性能，優(yōu)化土壤微生物生態(tài)環(huán)境，降低農(nóng)藥、化學(xué)肥料對(duì)農(nóng)產(chǎn)品的污染程度。
目前，生產(chǎn)的生物有機(jī)肥料一般是不含硒的普通生物有機(jī)肥料，使用的原料主要是畜禽糞便，城市垃圾，食品工業(yè)廢棄物，和不含硒的草碳，稻桿、麥桿；煙筋是卷煙工業(yè)副產(chǎn)物，我國累計(jì)年產(chǎn)普通煙筋數(shù)十萬噸。2010年煙草科技(總-281期)報(bào)道了生物發(fā)酵煙梗制備有 機(jī)肥，但其使用的也是的普通煙梗。中國專利2003142203. 9,200910213522. 9、 200910248732.1發(fā)明的富硒生物有機(jī)肥是以硒鹽或硒的鰲合物，與稀土或無機(jī)肥復(fù)配合而成。中國專利2003142203. 9,200710010871,. 200910044507. 6發(fā)明的富硒生物有機(jī)肥是以硒鹽或者硒礦粉拌入不含硒或普通的草炭，雞豬糞便作原料，采用的生產(chǎn)工藝是原料不處理或經(jīng)簡(jiǎn)單處理，調(diào)節(jié)水分后堆積自然發(fā)酵、發(fā)酸周期長(zhǎng)達(dá)3(Γ40天。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種富硒生物有機(jī)肥，用于提高土壤中硒含量。
本發(fā)明另一目的是提供所述富硒生物有機(jī)肥的制備方法。
所述富硒生物有機(jī)肥由以下重量份的原料制成
富硒農(nóng)作物廢棄物100份；離子態(tài)硒O. 005-0. 15份；碳源O. 2-2. 5份；氮源 O. 5-3. 5份；微生物菌劑2-4. 2份；助劑O. 4-5份。
所述富硒農(nóng)作物廢棄物為富硒煙筋，廢棄物富硒煙草秸桿，富硒茶樹修枝廢棄物， 富硒玉米秸桿，富硒魔芋秸桿，富硒馬鈴薯秸桿。
所述離子態(tài)硒為亞硒酸鈉或硒酸鈉以及硒礦粉經(jīng)酸堿處理的富硒水溶液；所述碳源為葡萄糖、玉米漿粉、葡糖糖漿、糖蜜、玉米粉、玉米淀粉、山芋粉；所述氮源為蛋白胨、玉米漿、酵母粉、黃豆餅粉、花生餅粉、菜籽餅、硫酸銨、硝酸銨、磷酸銨、氨水、尿素。
所述微生物菌劑由枯草芽孢桿菌Bacillus SubtiLis BC —198、膠凍樣芽孢桿菌、 Bacillus muciLaginosus ASl. 231 和綠色木霉 Trichoderma VirideAS3. 711 制備而成。
枯草芽抱桿菌Bacillus SubtiLis BC-198、膠凍樣芽抱桿菌、Bacillus muciLaginosus ASl. 231 和綠色木霉 TrichodermaVirideAS3. 711 的重量比為 O. 5_1· 0:0. 5_1· O:1. 0_2· O。
枯草芽抱桿菌Bacillus SubtiLis BC-198、膠凍樣芽抱桿菌、Bacillus muciLaginosus AS1. 231 和綠色木霉 TrichodermaVirideAS3. 711 的活菌數(shù)比為 70-100:12-20:1-2。
所述助劑為所述助劑為聚丙烯酰胺或聚谷氨酸及其鈉鹽、聚天門冬氨酸、魔芋粉。 加入量為富硒生物有機(jī)肥制得生物固體發(fā)酵料重量的O. 4%-4. 5%。
所述枯草芽孢桿菌Bacillus Subitilis為從湖北恩施市白楊坪的富硒煙草廢棄物中，通過在O. 15%NaSe03、0. 6%葡萄糖、O. 5%蔗糖、O. 8%蛋白胨、O. 3%酵母膏、O. 4%氯化鈉、 水100毫升配制的培養(yǎng)基中富集分離純化得到。拮抗試驗(yàn)和促生長(zhǎng)試驗(yàn)，篩選得一株菌株 BC-198,該菌株發(fā)酵液對(duì)大豆種子發(fā)芽率、根長(zhǎng)、比對(duì)照提高30-40% ;對(duì)鐮刀菌、青霉抑制圈均大于1. 5厘米。還具有蛋白酶、纖維素酶活力；該菌株形態(tài)或生理生化特征是；革蘭氏染色陽性、細(xì)胞桿狀、直徑< lum、如圖1所示，形成芽孢，不膨大，無伴胞晶體；接觸酶、氧化酶陽性，好氧生長(zhǎng)，VP試驗(yàn)陽 性，VP < PH6試驗(yàn)陽性，VP > PH7試驗(yàn)陰性，甲基紅試驗(yàn)陰性， 利用葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇產(chǎn)酸；利用葡萄糖不產(chǎn)氣；利用檸檬酸鹽，還原硝酸鹽，水解淀粉、液化明膠、分解酪素。在PH5. 7、7%NaCl、50°C均生長(zhǎng)；該菌株16SrRNA基因序列測(cè)定結(jié)果如SEQ ID NO.1所示。
根據(jù)細(xì)胞形態(tài)、生化試驗(yàn)結(jié)果，和基因序列測(cè)定結(jié)果，菌株BC-198鑒定為枯草芽孢桿菌Bacillus Subitilis0該菌株已于2012年8月30日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(簡(jiǎn)稱CCTCC ;地址中國武漢，武漢大學(xué)；郵編430072)，保藏編號(hào)CCTCCNo. M2012321。
本發(fā)明提供的制備方法為以富硒煙筋(富含有機(jī)硒)為主料，拌入少量離子態(tài)硒、 碳源、氮源、經(jīng)破碎、擠壓膨化、滅菌、生物發(fā)酵制備富硒生物有機(jī)肥料的方法，其具體步驟如下
1、擠壓膨化滅菌富硒煙筋
將含硒量彡O. 15mg/kg煙筋破碎至O. 7-1. 5厘米，拌入相對(duì)煙筋原料重量的 O. 005-0. 15%亞硒酸鈉或硒酸鈉，O. 2%-2. 5%的氮源，氮源可以選擇蛋白胨、玉米漿、酵母粉、黃豆餅粉、花生餅粉、菜籽餅、硫酸銨、硝酸銨、磷酸銨、氨水、尿素一種或多種組合， O. 5-3. 5%碳源，碳源可以選擇葡萄糖、玉米漿粉、葡糖糖漿、糖蜜、玉米粉、玉米淀粉、山芋粉一種或多種組合，拌均后喂入螺桿擠壓機(jī)，調(diào)節(jié)螺桿轉(zhuǎn)速90-140轉(zhuǎn)/分，套筒溫度 80-130°C，經(jīng)螺桿擠壓的物料從直徑Φ8-25毫米模孔中噴出，得膨化滅菌的固態(tài)生物發(fā)酵物料。
2、富硒煙筋固態(tài)發(fā)酵
(I)固態(tài)發(fā)酵菌劑的制備
a.固態(tài)發(fā)酵菌劑采用菌種分別是枯草芽孢桿菌BacillusSubtiLis BC-198。從富硒煙草廢棄物分離得到，具有較高降鮮纖維素酶、蛋白酶活力，對(duì)作物有促生和生防作用，該菌種保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(武漢)保藏中心保藏編號(hào)CCTCCNO:M2012321 ；膠凍樣芽抱桿菌、Bacillus muciLaginosus ASl. 231 和綠色木霉 Trichoderma VirideAS3. 711，經(jīng)含硒培養(yǎng)基連續(xù)訓(xùn)化。
b.培養(yǎng)菌劑采用的培養(yǎng)基組成
枯草芽孢桿菌培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):葡萄糖1. O、淀粉O. 4、蛋白胨O. 5酵母膏O. 3、玉米漿粉O. 6、氯化鈉O. 4、水100毫升，PH7. 2
膠凍樣芽孢桿菌培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):蔗糖1. 5，酵母膏O. 5，蛋白胨O. 2，磷酸氫二鉀 O. 5、硫酸鎂O. 15，碳酸鈣O. 2、水100毫升PH7. O
綠色木霉培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):葡萄糖O. 4、淀粉1. O、蛋白胨O. 6、酵母膏O. 2、硝酸鉀 O. 3。硫酸鎂 O. 03、水 100 毫升 PH5. 5-6. O
c.固態(tài)發(fā)酵菌劑培養(yǎng)
按上述培養(yǎng)基組成分別配制枯草芽孢桿菌，膠凍樣芽孢桿菌和綠色木霉培養(yǎng)基， 在500毫升三角瓶中裝量150毫升，121°C滅菌30分鐘，冷卻后分別接入枯草芽孢桿菌，膠凍樣芽孢桿菌和綠色木霉菌。放置旋轉(zhuǎn)搖瓶機(jī)上(200轉(zhuǎn)/分鐘)28-30°C分別培養(yǎng)24小時(shí)， 30小時(shí)和48小時(shí)，得枯草芽孢桿菌菌劑，膠凍樣芽孢桿菌菌劑和綠色木霉菌劑。
(2)富硒煙筋固態(tài)生物發(fā)酵
待經(jīng)擠壓機(jī)膨化滅菌的煙筋原料溫度下降到35_37°C時(shí)，補(bǔ)加入溫度30_35°C過濾除菌水，同時(shí)接入固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的O. 5-1. 0%的枯草芽孢桿菌菌劑，固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的O. 5-1. 0%的膠凍樣芽孢桿菌和固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的1. 0-2. 0%綠色木霉菌劑，使其固體物料與液體重量比為1. O :1. 5-2. 5，拌均后放置26-35°C培養(yǎng)室內(nèi)，發(fā)酵約15-20天，即得固態(tài)發(fā)酵后的物料。
(3)將上述制得的固態(tài)發(fā)酵后的物料均勻地混配入固態(tài)發(fā)酵后物料總重量的 O. 4%-4. 5%的助劑，助劑可選擇聚丙烯酰胺或聚谷氨酸及其鈉鹽、魔芋一種或兩種，常溫下干燥，即得以膨化富硒煙筋為原料固態(tài)發(fā)酵制備的富硒(彡50mg/kg)，微生物活菌數(shù)彡4 億/克的生物有機(jī)肥料。
本發(fā)明的有益效果
(I)工藝操作簡(jiǎn)單，制作成本低，制備所得富硒生物有機(jī)肥不但含有豐富的硒(還有大量的有機(jī)硒)，更有利于植物吸收利用；
(2)還含有大量的能促進(jìn)植物生長(zhǎng)、防治病害、降解纖維素的枯草芽孢桿菌BC-198 和有促進(jìn)土壤鉀的利用的膠凍樣芽孢桿菌及加速纖維素降解的木霉菌等有益微生物及其菌種科學(xué)組合，為土壤提供充足的有機(jī)質(zhì)和腐植酸，可促進(jìn)作物生長(zhǎng)，增加產(chǎn)量30%-40%， 產(chǎn)品維生素C含量提高50%-70% ;氨基酸含量提高20%-30%，生產(chǎn)的農(nóng)產(chǎn)品達(dá)到湖北省農(nóng)產(chǎn)品富硒含量地方標(biāo)準(zhǔn)，改善土壤生態(tài)環(huán)境，提高地力；
(3)本地發(fā)明也適用于其它的富硒農(nóng)作物廢棄物的處理。


圖1為茶葉枝條芽頭長(zhǎng)勢(shì)圖，其中I為施用富硒生物有機(jī)肥，2為未使用富硒生物有機(jī)肥；
圖2為茶葉枝葉長(zhǎng)勢(shì)圖；其中I為施用富硒生物有機(jī)肥，2為未使用富硒生物有機(jī)肥的。
具體實(shí)施方式
以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的情況下，對(duì)本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍。
若為特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。
本發(fā)明中涉及到的百分號(hào)“％”，若未特別說明，食指質(zhì)量百分比；但溶液的百分 t匕，除另有規(guī)定外，是指溶液IOOml中含有溶質(zhì)若干克；液體之間的百分比，是指20°C時(shí)容量的比例
實(shí)施例1富硒生物有機(jī)肥的制備
(I)擠壓膨化富硒煙筋
將含硒煙筋粉碎，過孔徑O. 7-1. O厘米。拌入相對(duì)煙筋主料重量的O. 015%亞硒酸鈉，O. 4%蛋白胨、2%磷酸銨、O. 5%葡萄糖，3%玉米淀粉、O. 2%玉米漿粉，拌均后喂入螺桿擠壓機(jī)膨化，調(diào)節(jié)螺桿轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)/分鐘。套筒溫度95°C，經(jīng)螺桿擠壓的煙筋物料從直徑15毫米模孔中噴出，得膨化滅菌的固態(tài)發(fā)酵基料。
(2)膨化富硒煙筋固態(tài)生物發(fā)酵
I)固態(tài)生物發(fā)酵菌劑的制備
a.固態(tài)發(fā)酵采用菌種枯草芽孢桿菌BC-198，膠凍樣芽孢桿菌ASl. 231和綠色木霉菌 AS3. 711。
b.培養(yǎng)菌劑用的培養(yǎng)基組成
培養(yǎng)枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基(％):葡萄糖1. O、淀粉O. 4、蛋白胨O. 5、酵母膏O. 3、玉米漿粉O. 6、氯化鈉O. 4、水100毫升。PH7. 2
培養(yǎng)膠凍樣芽孢桿菌培養(yǎng)基(％):蔗糖1. 5，酵母膏O. 5，蛋白胨O. 2，磷酸氫二鉀 O. 5，硫酸鎂O. 15，碳酸鈣O. 2，水100毫升，PH7. 2
培養(yǎng)綠色木霉培養(yǎng)基(％):葡萄糖O. 4、淀粉1. O、蛋白胨O. 6、酵母膏O. 2、硝酸鉀 O. 3、硫酸鎂O. 03、水100毫升。PH5. 5 6. O
c.固態(tài)發(fā)酵菌劑的培養(yǎng)條件
按上述培養(yǎng)基組成分別配制枯草芽孢桿菌，膠凍樣芽孢桿菌和木霉菌培養(yǎng)基在 500毫升三角瓶中裝量150毫升，121 °C滅菌30分鐘，冷卻后分別對(duì)應(yīng)接入枯草芽孢桿菌，膠凍樣芽孢桿菌和綠色木霉菌，放置旋搖瓶機(jī)上(200轉(zhuǎn)/分鐘)、28 3(TC條件下分別培養(yǎng)24 小時(shí)，30小時(shí)和48小時(shí)，得枯草芽孢桿菌菌劑，膠凍樣芽孢桿菌和綠色木霉菌劑。
2)富硒煙筋固態(tài)生物發(fā)酵
經(jīng)擠壓機(jī)膨化滅菌煙筋溫度下降到35°C，補(bǔ)加入溫度30°C的過濾除菌水，同時(shí)接入固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的O. 5%的枯草芽孢桿菌菌劑，活菌數(shù)1000億/克，固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的O. 8%膠凍樣芽孢桿菌菌劑活菌數(shù)200億/克和固態(tài)發(fā)酵煙筋料重量的1. 2%的綠色木霉菌劑，活菌數(shù)有效活菌數(shù)10億個(gè)/克。拌均后放置28°C培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，發(fā)酵18天得固態(tài)生物發(fā)酵后物料。
3)將上述制得固態(tài)生物發(fā)酵后物料均勻地混入固態(tài)發(fā)酵后物料總重量的O. 6%的聚丙烯酰胺，常溫下干燥，即得以膨化富硒煙筋為主料固態(tài)生物發(fā)酵制備的富硒生物有機(jī)肥料，肥料中含硒量52. lmg/kg、有機(jī)質(zhì)53%、腐植酸4. 8%、微生物活菌數(shù)5.1億個(gè)/克。
實(shí)施例2富硒生物有機(jī)肥的制備
( I)擠壓膨化滅菌處理富硒煙筋
將含硒量O. 18毫克/公斤的煙筋破碎，過直徑Φ1. 5厘米篩板，拌入相對(duì)煙筋料重量的O. 08%的亞硒酸鈉，O. 18%酵母粉、O. 4%的玉米漿粉、2%黃豆餅粉、O. 4%葡萄糖、1%糖蜜，拌均后喂入螺桿擠壓機(jī)。調(diào)節(jié)螺桿轉(zhuǎn)速到120轉(zhuǎn)/分鐘，套筒溫度、125°C，經(jīng)螺桿擠壓的煙筋料從直徑Φ20毫米?？字袊姵觯门蚧瘻缇墓虘B(tài)發(fā)酵物料。
(2)富硒煙筋料的固態(tài)生物發(fā)酵
I)固態(tài)生物發(fā)酵菌劑的制備
a.固態(tài)發(fā)酵菌劑采用菌種分別是枯草芽孢桿菌B. subtilis BC —198。膠凍樣芽抱桿菌 B. mucilagimosrs ASl. 231 和綠色木霉 Trichoderma Viride AS3.711。
b.培養(yǎng)菌劑米用的培養(yǎng)基組成
枯草芽孢桿菌培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):葡萄糖1. O、淀粉O. 4、蛋白胨O. 5、酵母膏O. 3、玉米漿粉O. 6、氯化鈉O. 4、水100毫升。PH7. 2
膠凍樣芽孢桿菌培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):蔗糖1. 5、酵母膏O. 5、蛋白胨O. 2、磷酸氫二鉀O. 5、硫酸鎂O. 15、碳酸鈣O. 2、水100毫升。PH7. O
木霉培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):葡萄糖O. 4、淀粉1. O、蛋白胨O. 6、酵母膏O. 2、硝酸鉀O. 3、 硫酸鎂O. 03、水100毫升。PH5. 5 6. O
c.固態(tài)發(fā)酵菌劑培養(yǎng)
按上述培養(yǎng)基組成分別配制枯草芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和綠色木霉的培養(yǎng)基，在500毫升三角瓶?jī)?nèi) 裝量120毫升，121 °C滅菌30分鐘。冷卻后分別接入枯草芽孢桿菌、 膠凍樣芽孢桿菌和綠色木霉菌，放置旋轉(zhuǎn)搖瓶機(jī)上(200轉(zhuǎn)/分鐘)28 30°C條件下分別培養(yǎng) 24小時(shí)、30小時(shí)和48小時(shí)，得枯草芽孢桿菌菌劑、膠凍樣芽孢桿菌菌劑和綠色木霉菌菌劑。
2)富硒煙筋料固態(tài)生物發(fā)酵
待經(jīng)擠壓膨化滅菌的富硒煙筋料的溫度下降到360C時(shí)，補(bǔ)加入溫度320C的過濾除菌水，同時(shí)接入固態(tài)發(fā)酵煙筋料重量的O. 7%的枯草芽孢桿菌菌劑，有效活菌數(shù)700億個(gè) /克，固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的O. 6%的膠凍樣芽孢桿菌菌劑，有效活菌數(shù)120億個(gè)/克，固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的1. 5%的綠色木霉菌菌劑，有效活菌數(shù)15億個(gè)/克。并使其固體物料與液體的重量比為1:1. 8，拌勻后放置32°C培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)發(fā)酵15天即得固態(tài)生物發(fā)酵后的物料。
3)將上述制得的固態(tài)生物發(fā)酵后的物料均勻地混配入固態(tài)發(fā)酵后物料總重量的O.4%聚谷氨酸、1. 5%魔芋粉，常溫下干燥，即得以膨化富硒煙筋為原料生物發(fā)酵制備的富硒生物有機(jī)肥料。有機(jī)肥料中硒含量50. 8mg/kg、有機(jī)質(zhì)48%，腐植酸5. 2%，細(xì)菌菌數(shù)4. 8億個(gè)/克。
實(shí)施例3富硒生物有機(jī)肥的制備
( I)擠壓膨化滅菌處理富硒煙筋
將含富硒量O. 16毫克/公斤的煙筋破碎，過直徑Φ1. 5厘米篩板拌入相對(duì)煙筋料重量的O. 05%的硒酸鈉、O. 4%硫酸銨、O. 7%玉米漿粉、1%菜籽餅、1. 3%葡萄糖、1. 5%玉米淀粉、拌均后喂入螺桿擠壓機(jī)。調(diào)節(jié)螺桿轉(zhuǎn)速到125轉(zhuǎn)/分鐘，套筒溫度130°C經(jīng)螺桿擠壓的煙筋料從直徑Φ20毫米?？字袊姵觯门蚧瘻缇墓虘B(tài)發(fā)酵物料。
(2)富硒煙筋料的固態(tài)生物發(fā)酵
I)固態(tài)生物發(fā)酵菌劑的制備
a固態(tài)發(fā)酵菌劑采用菌種分別是枯草芽孢桿菌B. subtilis BC —198、膠凍樣芽孢桿菌 B. mucilagimosrs ASl. 231 和綠色木霉 Trichoderma Viride AS3.711。
b培養(yǎng)菌劑采用的培養(yǎng)基組成
枯草芽孢桿菌培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):葡萄糖1. O、淀粉O. 4、蛋白胨O. 5、酵母膏O. 3、玉米漿粉O. 6、氯化鈉O. 4、水100毫升。PH7. 2
膠凍樣芽孢桿菌培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):蔗糖1. 5、酵母膏O. 5、蛋白胨O. 2、磷酸氫二鉀O. 5、硫酸鎂O. 15、碳酸鈣O. 2、水100毫升。PH7. O
木霉培養(yǎng)用培養(yǎng)基(％):葡萄糖O. 4、淀粉1. O、蛋白胨O. 6、酵母膏O. 2、硝酸鉀O. 3、 硫酸鎂O. 03、水100毫升。PH5. 5 6. O
c固態(tài)發(fā)酵菌劑培養(yǎng)
按上述培養(yǎng)基組成分別配制枯草芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和綠色木霉的培養(yǎng)基，在500毫升三角瓶?jī)?nèi)裝量120毫升，121 °C滅菌30分鐘。冷卻后分別接入枯草芽孢桿菌、 膠凍樣芽孢桿菌和綠色木霉菌，放置旋轉(zhuǎn)搖瓶機(jī)上(200轉(zhuǎn)/分鐘)28 30°C條件下分別培養(yǎng) 24小時(shí)、30小時(shí)和48小時(shí)，得枯草芽孢桿菌菌劑、膠凍樣芽孢桿菌菌劑和綠色木霉菌菌劑。
2)富硒煙筋料固態(tài)生物發(fā)酵
待經(jīng)擠壓膨化滅菌的富硒煙筋料的溫度下降到35°C時(shí)，補(bǔ)加入溫度30°C膜過濾除菌水，同時(shí)接入固態(tài)發(fā)酵煙筋料重量的1.0%的枯草芽孢桿菌菌劑，有效活菌數(shù)1000億個(gè) /克，固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的1. 0%膠凍樣芽孢桿菌菌劑，有效活菌數(shù)200億個(gè)/克，固態(tài)發(fā)酵煙筋重量的2%的木霉菌菌劑，有效活菌數(shù)20億個(gè)/克。并使其固體物料與液體重量比為1:2. 5，拌勻后放置32°C培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)發(fā)酵20天即得固態(tài)發(fā)酵后的物料。
3)將上述制得的固態(tài)發(fā)酵后的物料均勻地混配入固態(tài)發(fā)酵后物料總重量的2. 5% 魔芋粉，O. 2%聚丙烯酰胺，常溫下干燥，即得以膨化富硒煙筋為原料發(fā)酵制備的含硒達(dá) 50. 3mg/kg生物有機(jī)肥料。
將制備的富硒生物有機(jī)肥施用于明前茶，施用量IOOkg/畝，結(jié)果如表I所示。植株生長(zhǎng)狀況如圖1、2所不。
表12009年-2012年施用實(shí)施例3富硒生物有機(jī)肥的明前茶結(jié)果
處理植株生長(zhǎng)狀況__茶堿斿再氨茶多 Se 清明前采產(chǎn)量
權(quán)利要求
1.一種富硒生物有機(jī)肥由以下重量份的原料制成 富硒農(nóng)作物廢棄物100份；離子態(tài)硒0. 005-0. 15份；碳源0. 2-2. 5份；氮源0. 5-3. 5份；微生物菌劑2-4. 2份；助劑0. 4-5份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富硒生物有機(jī)肥，其特征在于，所述微生物菌劑由枯草芽孢桿菌 Bacillus SubtiLis BC-198、膠凍樣芽抱桿菌、Bacillus muciLaginosus ASl. 231 和綠色木霉 TrichodermaVirideAS3. 711 制備而成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富硒生物有機(jī)肥，其特征在于，枯草芽孢桿菌BacillusSubtiLis BC-198 保藏號(hào)為 CCTCC NO. M 2012321。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富硒生物有機(jī)肥，其特征在于，枯草芽孢桿菌BacillusSubtiLis BC-198、膠凍樣芽抱桿菌 BacillusmuciLaginosus AS 1.231 和綠色木霉Trichoderma VirideAS3. 711 的重量比為 0. 5-1. 0:0. 5-1. 0:1. 0-2. O。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富硒生物有機(jī)肥，其特征在于，所述富硒農(nóng)作物廢棄物為富硒煙草秸桿，富硒茶樹修枝廢棄物，富硒玉米秸桿，富硒魔芋秸桿，富硒馬鈴薯秸桿中的一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富硒生物有機(jī)肥，其特征在于，所述離子態(tài)硒為亞硒酸鈉、硒酸鈉、硒礦粉經(jīng)酸堿處理的富硒水溶液中的一種或幾種；所述碳源為葡萄糖、玉米漿粉、葡糖糖漿、糖蜜、玉米粉、玉米淀粉、山芋粉中的一種或幾種；所述氮源為蛋白胨、玉米漿、酵母粉、黃豆餅粉、花生餅粉、菜籽餅、硫酸銨、硝酸銨、磷酸銨、氨水、尿素中的一種或多種；所述助劑為聚丙烯酰胺、聚谷氨酸及其鈉鹽、聚天門冬氨酸、魔芋粉中的一種或幾種。
7.制備權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述富硒生物有機(jī)肥的方法，其特征在于，以富硒農(nóng)作物廢棄物為主料，加入離子態(tài)硒、碳源、氮源、經(jīng)擠壓膨化得固態(tài)發(fā)酵煙筋；經(jīng)滅菌、生物發(fā)酵制得生物固體發(fā)酵料。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，接入固態(tài)發(fā)酵煙筋重量0.5-1. 0%的枯草芽孢桿菌菌劑，0. 5-1. 0%的膠凍樣芽孢桿菌和1. 0-2. 0%的綠色木霉菌劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，進(jìn)一步加入助劑，加入量為生物固體發(fā)酵料重量的0. 4%-4. 5%。
10.權(quán)利要求1所述的富硒生物有機(jī)肥在茶葉、魔芋、馬鈴薯、蔬菜、果樹、玉米、中草藥種植中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種富硒生物有機(jī)肥及其制備方法。由以下原料制成富硒農(nóng)作物廢棄物100份；離子態(tài)硒0.005-0.15份；碳源0.2-2.5份；氮源0.5-3.5份；微生物菌劑2-4.2份；助劑0.4-5份。本發(fā)明工藝操作簡(jiǎn)單，制作成本低，制備所得富硒生物有機(jī)肥不但含有豐富的硒，更有利于植物吸收利用；本發(fā)明所用菌劑為土壤提供充足的有機(jī)質(zhì)和腐植酸，可促進(jìn)作物生長(zhǎng)，增加產(chǎn)量30%-40%，產(chǎn)品維生素C含量提高50%-70%；氨基酸含量提高20%-30%，改善土壤生態(tài)環(huán)境，提高地力。
文檔編號(hào)C05G1/00GK103011928SQ20121039056
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月12日
發(fā)明者陳家任, 劉金龍 申請(qǐng)人:恩施和諾生物工程有限責(zé)任公司, 陳家任, 劉金龍