胚芽乳酸桿菌cmu995菌株的新用途
【專利摘要】本發(fā)明揭露一種胚芽乳酸桿菌（Lactobacillus?plantarum）CMU995菌株的新用途，其應用于保護肝臟。本發(fā)明另外揭露一種保護肝臟的方法，包括將上述胚芽乳酸桿菌（Lactobacillus?plantarum）CMU995菌株傳輸至一哺乳動物。本發(fā)明還揭露一種用于保護肝臟的益生菌組合物，其包含上述胚芽乳酸桿菌（Lactobacillus?plantarum）CMU995菌株。
【專利說明】胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的新用途
【技術(shù)領(lǐng)域】[0001]本發(fā)明涉及胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum) CMU995菌株的新用途,且特別是涉及應用于保護肝臟的胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]乳酸菌為存在于人類和動物腸道中的主要細菌，由于其具有許多有益于人體及動物體的生理活性，故常應用于各種益生菌(probiotics)產(chǎn)品中。目前已有許多乳酸桿菌于抑制病原菌的應用的相關(guān)專利，例如美國專利第5，603，930號中所揭露的約氏乳酸桿菌(Lactobacillus johnsonii)菌株,可抑制腸毒素及腸侵入性病原菌；美國專利第3，953, 609號中所揭露的雷特氏乳酸桿菌菌株(Lactobacillus Iactis)菌株，可抑制消化系統(tǒng)中大腸桿菌的生長；以及美國專利第6，491，956號中所揭露的嗜酸乳酸桿菌(Lactobacillus acidophilus)菌株,可預防及治療由幽門螺旋桿菌感染所造成的胃炎、十二指腸潰瘍及胃潰瘍。
[0003]乳酸桿菌若要在動物體內(nèi)有效地發(fā)揮功能，除了需要具備基本的生理或藥理活性外，還需具有兩個重要特性。首先，該乳酸桿菌需對動物腸胃道所分泌的胃酸和膽堿具有耐受性，始可存活于消化系統(tǒng)中而到達腸道。再者，該乳酸菌對動物宿主的腸道上皮細胞需有牢固的吸附能力，始可于腸胃道中與病原菌競爭吸附于腸道。兩者兼?zhèn)洳趴砂l(fā)揮高效率以保護腸道、排除毒素、抑制病原菌的功能。
[0004]本發(fā)明人早期篩選出的腸道吸附型新穎胚芽乳酸桿菌CMU995菌株，經(jīng)由活體內(nèi)及體外的相關(guān)實驗證實，此菌株除了對腸道及泌尿道的病原菌具有良好的抑制效果之外，還發(fā)現(xiàn)對腸胃道及泌尿道的上皮細胞具有優(yōu)異的附著能力，故可持久且有效地保護腸胃道和泌尿道免于病原菌的感染。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株具有穩(wěn)定腸道上皮細胞的功能，且可降低上皮細胞受到腸內(nèi)毒素的破壞而死亡。在動物活體試驗更發(fā)現(xiàn)，胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可抑制酒精所引發(fā)的腸內(nèi)毒素穿越腸道組織進入血液中，因此，可抑制酒精或毒素所誘發(fā)的肝臟發(fā)炎及腸道發(fā)炎現(xiàn)象。又以臨床人體試驗發(fā)現(xiàn)，胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可有效改善肝癌及肝硬化患者的血液毒素及血氨濃度。因此，CMU995菌株可應用于預防和/或治療因酒精和/或毒素所引發(fā)的相關(guān)疾病。
[0006]本發(fā)明的一個實施方式，提供一種胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株的新用途，其應用于保護肝臟。
[0007]前述胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum) CMU995菌株保藏于財團法人食品工業(yè)發(fā)展研究所，其保藏編號為BCRC 910472，同時也保藏于德國國家菌種保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, DSMZ),其保藏編號為 DSM 23780。
[0008]前述胚芽乳酸桿菌CMU995菌株保護肝臟的新用途，可用于降低評估肝臟功能指針酶，為天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶Aspartate aminotransferase (AST)和/或丙酸轉(zhuǎn)氨酶Alanineaminotransferase (ALT)。
[0009]前述胚芽乳酸桿菌CMU995菌株保護肝臟的新用途，可用以降低血液中的脂質(zhì)、膽固醇、內(nèi)毒素、炎性細胞激素TNF- α和/或酒精含量，也可直接降低肝臟中的膽固醇和/或
內(nèi)毒素含量。
[0010]前述胚芽乳酸桿菌CMU995菌株保護肝臟的新用途，也可用以預防酒精、細胞激素TNF-α和/或內(nèi)毒素所引發(fā)的肝臟發(fā)炎。
[0011]通過上述用途，一方面減輕肝臟代謝的負擔，另一方面預防肝炎的發(fā)生，并降低AST和/或ALT的肝臟功能指數(shù)，進而達到保護肝臟的功效。
[0012]根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，提供一種能保護肝臟的方法，包括將前述胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum) CMU995菌株傳輸至一哺乳動物，且哺乳動物可為人類。
[0013]本發(fā)明的一個實施方式是在提供一種用于保護肝臟的益生菌組合物，其包含前述胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株，其中CMU995菌株的有效濃度范圍為 I X 105CFU/g 至 I X 1012CFU/g 的干燥粉末。
[0014]根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，前述保護肝臟的益生菌組合物，其為藥品、飼料、飲料、營養(yǎng)補充品、乳制品、食品、健康食品。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，前述保護肝臟的益生菌組合物，其形式可為粉劑、錠劑、造粒、栓劑、微膠囊、安瓿(安瓶；ampoule/ampule)、液劑、噴劑或塞劑等劑型。另外 ，保護肝臟的益生菌組合物也可用以預防或治療包括降低酒精及毒素所引發(fā)的全身性發(fā)炎、肝炎、腸炎或腎炎等相關(guān)疾病，并可降低毒素所誘導的臟器病變，例如:腎臟發(fā)炎、腎衰竭或大腸癌生成等的器官病變。
[0015]本發(fā)明的技術(shù)及實施方式，將描述于以下內(nèi)容中，以供本發(fā)明所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員據(jù)以明了本發(fā)明的特征。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0016]為了使本發(fā)明的上述和其它目的、特征、優(yōu)點與實施例能更明顯易懂，提供附圖，在附圖中:
[0017]圖1繪示本發(fā)明的一個實施例的血清中天冬氨酸轉(zhuǎn)胺酶(AST, aspartateaminotransferase)在實驗期間的濃度變化圖。
[0018]圖2繪示本發(fā)明的一個實施例的血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT, alanineaminotransferase)在實驗期間的濃度變化圖。
[0019]圖3繪示本發(fā)明的一個實施例的血清中三酸甘油酯在實驗期間的濃度變化圖。
[0020]圖4繪示本發(fā)明的一個實施例的血清中總膽固醇在實驗期間的濃度變化圖。
[0021]圖5繪示本發(fā)明的一個實施例的血清中內(nèi)毒素在實驗期間的濃度變化圖。
[0022]圖6繪示本發(fā)明的一個實施例的肝臟中內(nèi)毒素在實驗期間的濃度變化圖。
[0023]圖7繪示本發(fā)明的一個實施例的肝臟中TNF-α的濃度在實驗期間的濃度變化圖。
[0024]圖8繪示本發(fā)明的一個實施例的大腸中TNF-α的濃度在實驗期間的濃度變化圖。
[0025]圖9a繪示本發(fā)明的一個實施例的服用包含胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的益生菌組合物的肝硬化患者血液中TNF- α變化數(shù)據(jù)。
[0026]圖9b繪示本發(fā)明的一個實施例的服用包含胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的益生菌組合物的肝硬化患者血液中血氨變化數(shù)據(jù)。
[0027]圖9c繪示本發(fā)明的一個實施例的服用包含胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的益生菌組合物的肝硬化患者血液中內(nèi)毒素變化數(shù)據(jù)。
【具體實施方式】
[0028]下述將更詳細討論本發(fā)明的實施方式。然而，此實施方式可為各種發(fā)明概念的應用，可被具體實行在各種不同的特定范圍內(nèi)。特定的實施方式是僅以說明為目的，且不受限于揭露的范圍。
[0029]本申請新穎用途的胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum),或可稱為植物乳酸桿菌，菌株是本發(fā)明人早期所篩選出，并將之命名為CMU995菌株，其保藏于財團法人食品工業(yè)發(fā)展研究所，保藏編號為BCRC 910472，以下稱為胚芽乳酸桿菌CMU995菌株。
[0030]經(jīng)由活體內(nèi)及體外的相關(guān)實驗，上述胚芽乳酸桿菌CMU995菌株，除了具有抑制病原菌活性的功效之外，尚發(fā)現(xiàn)對腸胃道或泌尿道的上皮細胞具有優(yōu)異的附著能力，故可持久且有效地保護腸胃道和泌尿道免于病原菌的感染。
[0031]由于胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可持久且有效地保護腸胃道和/或泌尿道免受病原菌感染，使用胚芽乳酸桿菌CMU995菌株，可降低酒精進入生體的血液中，因此可制成具有代謝酒精或抵擋酒精進入血液功能的解酒藥品或食品或飲料等制劑，由此運用于保護肝臟。此外，因為酒精也會引發(fā)腸道內(nèi)病原菌及毒素的增加，而胚芽乳酸桿菌CMU995菌株也具有抑制腸內(nèi)毒素產(chǎn)生的功能，故可降低毒素進入血液內(nèi)而運行至肝臟及其它器官組織。因此，胚芽乳酸桿菌CMU995菌株具有排除毒素的功效及保護肝臟的用途。
[0032]本發(fā)明的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株及其益生菌組合物，可制造成藥品、健康食品、營養(yǎng)補充品、飲料、酸奶、一般食品及動物飼料等形式的食用品。再者，前述保護肝臟的益生菌組合物，其劑型可為粉劑、膠囊、造粒、微膠囊、錠劑、噴劑、液劑或塞劑等劑型。根據(jù)本發(fā)明的一個實施例的含胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的益生菌組合物，其具有預防或治療疾病的功效，可應用于保護腸道細胞、降低腸道及血液毒素、抑制酒精吸收，進而達到保護肝臟器官的效果。
[0033]現(xiàn)以下列具體實施例進一步例示說明本發(fā)明。下列實施例僅提供作為說明，而非用以限制本發(fā)明的范疇。
[0034][實施例1]
[0035]附著力分析
[0036](I)制備乳酸桿菌菌株
[0037]進行腸胃道細胞的附著力分析所使用的乳酸桿菌包括:本發(fā)明的Lactobacillusplantarum CMU995> Lactobacillus rhamnosus GG (LGG,鼠李糖乳酸桿菌，ATCC 53103) >Lactobacillus plantarum 299v 及 Lactobacillus casei strain Shirota0 以 MRS 培養(yǎng)液(Difco)活化所有受試乳酸桿菌兩次后，分別將菌株接種至5毫升的MRS培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)。24小時后，取I毫升菌液，并以6000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，以pH 7.2的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)清洗兩次后， 以吸光值600nm調(diào)整濃度至IxlO9個菌落形成單位(Colony-FormingUnit, CFU)/mL以進行后續(xù)的吸附試驗。
[0038](2)培養(yǎng)腸胃道細胞株
[0039]本試驗使用的腸胃道細胞株為Caco-2 & HT-29人體腸癌細胞株(human colonadenocarcinoma)及AGS胃癌細胞株(gastric adenocarcinoma),皆購自臺灣生物資源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research Center, BCRC)。Caco-2 & HT-29細胞的培養(yǎng)基為DMEM培養(yǎng)基，AGS細胞的培養(yǎng)基為F-12培養(yǎng)基，以上培養(yǎng)基皆需添加10體積％的胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)細胞經(jīng)活化穩(wěn)定后才進行后續(xù)實驗。
[0040](3)乳酸桿菌附著性分析
[0041]將實驗B中制備的細胞分裝于96孔細胞培養(yǎng)盤中，每個孔中加入I X IO4個細胞，每天置換200微升(μ?的新鮮培養(yǎng)基。于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時后，加入20微升實驗A所制備的不同乳酸菌于細胞中，進行附著I小時后，使用磷酸鹽緩沖溶液清洗3次，以去除未附著的乳酸菌，以10%的福爾馬林液固定細胞及乳酸菌，30分鐘后，再以磷酸鹽緩沖溶液清洗細胞3次，最后以100微升結(jié)晶紫進行染色5分鐘，再以75%酒精清洗以去除細胞上的染色劑。利用相差顯微鏡觀察各種乳酸菌對腸胃道上皮細胞的吸附性，并隨機在不同的顯微鏡視野下，觀察并計算約50個細胞的總?cè)樗峋搅?，最后計算每個細胞的平均吸附菌數(shù)。
[0042]附著力分析的實驗結(jié)果
[0043]結(jié)果如下列表1所示。由表1結(jié)果可知，胚芽乳酸桿菌CMU995菌株相較于其它菌株，具有更優(yōu)異的腸胃道上皮細胞附著能力。
[0044]表1各菌株對不同的腸胃道上皮細胞的附著能力比較乳酸菌附著數(shù)(菌落形成單位 / 細胞)(CFU/cell)
[0045]
大腸上皮細胞株結(jié)腸上皮細胞株胃上皮細胞株
菌株種類
Caco-2HT-29AGS
CMU99553.6±6.858.2±10.5M 7±6，
LGG (ATCC 53103)7.5±1.56.7+2.94.4±0.8
LaciohaciIhis casei

3.2 士 3.45.5 土 2.12.8 土 3.0
strain Shirota
LaciohacilIus

15.7=3.516.5:3.212.6 士 2.4
plantarum 299v
[0046][實施例2]
[0047]動物試驗
[0048](1)實驗分組
[0049]本試驗的酒精性肝炎模式乃參考Segawa等人(2008)的研究報告。將8周大的C57BL/6J小鼠隨機分成6組，每組8只，起始體重為23± I克，實驗分組如下:
[0050]A組；正常對照組(Control):小鼠可任意取食無酒精添加的Lieber-DeCarli流質(zhì)飼料，且每天管灌喂食0.2mL滅菌的生理食鹽水。[0051]B組；陰性對照組(酒精肝損傷組，Alcohol):小鼠可任意取食含酒精的Lieber-DeCarli流質(zhì)飼料,且每天管灌喂食0.2mL滅菌的生理食鹽水。
[0052]C 組；Lactobacillus plantarum CMU995 實驗組(CMU995):小鼠可任意取食含酒精的Lieber-DeCarli流質(zhì)飼料，且每天管灌喂食0.2mL濃度為2X 1010CFU/mL的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株。
[0053]D組；Lactobacillus rhamnosus GG實驗組(LGG):小鼠可任意取食含酒精的Lieber-DeCarli流質(zhì)飼料，且每天管灌喂食0.2mL濃度為2X 1010CFU/mL的LGG益生菌。
[0054]E 組；Lactobacillus casei strain Shirota 實驗組(LC):小鼠可任意取食含酒精的Lieber-DeCarli流質(zhì)飼料，且每天管灌喂食0.2mL濃度為2X1010CFU/mL的Lactobacillus casei strain Shirota 益牛菌。
[0055](2)菌液的制備
[0056]各菌株的實驗菌粉為菌數(shù)濃度達I X 10nCFU/g的冷凍干燥粉末，菌粉放置于4°C冰箱中。于每日喂食小鼠前新鮮制備，將菌粉精秤I克裝入無菌離心管中，以滅菌的生理食鹽水充分混合配制成濃度為2X 101(lCFU/mL的菌液。
[0057](3)益生菌喂食與肝炎誘導
[0058]實驗初期，各組小鼠皆以Lieber-DeCarli流質(zhì)飼料給予自由攝食，待適應環(huán)境一周后即開始進行實驗。首先，各組小鼠開始每天管灌喂食0.2mL不同的實驗樣品，A、B組喂食生理食鹽水，C、D、E組則喂食新鮮制備的益生菌菌液，連續(xù)每天喂食I次至小鼠犧牲為止。肝炎誘導則從益生菌投予的第3天開始進行，除了 A組之外，其余B、C、D、E組的小鼠飼料中均添加入酒精，酒精起始濃度為1.25%，以每兩天增加1.25%劑量的酒精濃度于飼料中，最后增加到最高酒精濃度為5%，并持續(xù)喂食此酒精濃度6周，肝炎誘導期共7周。
[0059](4)小鼠犧牲與檢體收集
[0060]本試驗定義在小鼠開始喂食酒精以誘導肝炎之日為實驗期的第O天，小鼠于第7周結(jié)束后(第49天)犧牲。在小鼠適應環(huán)境及肝炎誘導實驗期間，于實驗期的第O天及第28天以臉頰采血法收集適量每只小鼠的血液，于犧牲前隔夜禁食，犧牲時以斷頭法收集每只小鼠的全血，并小心解剖后取出小鼠的肝臟及大腸段后，放入_80°C冷凍冰箱中急速冷凍。
[0061](5)血液、肝臟及腸道的分析
[0062]將冰凍的肝臟或大腸段分別取出適當重量后放入研缽中，倒入液態(tài)氮研磨檢體后，收集檢體粉末至離心管，秤重后加入定量的HEPES緩沖溶液，混合均勻后準備進行后續(xù)分析工作。血液則以低速離心后取出血清準備后續(xù)分析。分析以全自動血液分析儀(CobasMira plus, Roche, USA)或酶聯(lián)免疫分析儀進行各項生化檢測,項目包含天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、三酸甘油酯、總膽固醇、內(nèi)毒素、TNF-α的濃度測定。
[0063](6)統(tǒng)計分析
[0064]實驗數(shù)據(jù)使用SAS 統(tǒng)計分析軟件(Statistical Analysis System, V.8.02ForWindows, 2001)進行ANOVA分析各組間的差異性,顯著性差異的判斷標準為p < 0.05,實驗結(jié)果以SigmaPlot 10.0軟件作圖。
[0065]動物試驗的結(jié)果
[0066]參照圖1及圖2，其分別繪示血清中AST及ALT在實驗期間的濃度變化圖。由圖中可見，喂食胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的小鼠，血液中所檢測到的肝臟功能評估指針酶AST及ALT明顯較其它喂食酒精誘導肝炎的小鼠低，表示胚芽乳酸桿菌CMU995菌株有良好的保護肝臟效果，可降低酒精對肝臟的傷害。
[0067]參照圖3及圖4，其分別繪示血清中三酸甘油酯以及總膽固醇在實驗期間的濃度變化。由圖中可見，喂食胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的小鼠，血液中所檢測到的三酸甘油酯及總膽固醇明顯較其它喂食酒精誘導肝炎的小鼠低，表示胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可降低酒精所引發(fā)的聞血脂癥。
[0068]參照圖5及圖6，其分別繪示血清中內(nèi)毒素(Endotoxin)以及肝臟中內(nèi)毒素在實驗期間的濃度變化。由圖中可見，喂食胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的小鼠，在血液及肝臟中所檢測到的內(nèi)毒素均明顯較其它喂食酒精誘導肝炎的小鼠低，表示胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可降低酒精所引發(fā)的毒素進入體內(nèi)。
[0069]參照圖7及圖8，其分別繪示肝臟以及大腸中發(fā)炎細胞激素TNF-α的濃度在實驗期間的濃度變化。由圖中可見，喂食胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的小鼠，肝臟及腸道中所檢測到的發(fā)炎細胞激素TNF-α明顯較其它喂食酒精誘導肝炎的小鼠低，表示胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可降低肝臟及腸道的發(fā)炎現(xiàn)象。
[0070][實施例3]
[0071]臨床試驗
[0072]試驗規(guī)劃收集肝硬化的患者，完成試驗的受試者共26人。參與研究的受試者于試驗前及服用胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum) CMU995益生菌組合物4周后,分別收集患者的血液及糞便以進行檢驗分析。
[0073](1)試驗的主要納入與排除條件:
[0074]A.納入條件:
[0075]1.肝硬化的病患，年齡30-70歲。
[0076]B.排除條件:
[0077]1.其它主要門靜脈高壓癥并發(fā)癥，如肝腎綜合征或細菌性腹膜炎者。
[0078]2.其它神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者和急性代謝疾病，如中風，心臟衰竭或呼吸衰竭或急性腎衰竭或敗血癥者。
[0079]3.嚴重肝昏迷(心理狀態(tài)等級3-4)者。
[0080]4.同時合并有嚴重系統(tǒng)性疾病，包括癌癥、腎臟及心肺功能不全者。
[0081]5.目前服用含有益生菌的相關(guān)組合物或產(chǎn)品者。
[0082]6.女性病患有懷孕及哺乳者。
[0083](2)益生菌組合物:
[0084]臨床試驗所施用的益生菌組合物為胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株及其它賦形劑所組成。前述益生菌組合物每單位為3克粉末，內(nèi)含總益生菌菌數(shù)為3xl01(lCFU，即菌粉的菌數(shù)濃度為lxl01(lCFU/g。
[0085](3)檢驗分析
[0086]實驗規(guī)劃共收集26例肝硬化的患者，經(jīng)簽署受試者同意書后給予患者4周份量的益生菌組合物，每日服用一單位，于餐后服用。于服用益生菌組合物前及服用益生菌組合物4周后，采集患者的血液以供檢驗，分析項目包括血清炎性細胞激素TNF-α、血液內(nèi)毒素及血氨濃度，以評估益生菌治療前后對患者的改善情形。實驗分析操作步驟皆按照發(fā)明人所在單位的藥學系微生物實驗室的微生物標準分析步驟進行，血液分析則依照現(xiàn)有商業(yè)試劑盒步驟進行檢測，并以其標準品做檢量線。最后所得到的數(shù)據(jù)以SigmaPlotl0.0進行作圖及統(tǒng)計分析。
[0087]臨床試驗的結(jié)果
[0088]參照圖9a至圖9c，其分別繪示服用包含胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的益生菌組合物的肝硬化患者血液中的炎性細胞激素TNF-α、血氨及內(nèi)毒素的變化數(shù)據(jù)。由圖中可見，肝硬化的患者每日服用含有胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的益生菌組合物，4周后，血液中的炎性細胞激素TNF-α、血氨及內(nèi)毒素皆有顯著性降低(a，b英文小寫字母不同表示治療前后有顯著性差異JPP〈0.05)。因此，證明肝硬化的患者服用前述益生菌組合物后，血液確實有改善的現(xiàn)象。
[0089]由上述本發(fā)明實施方式可知，應用本發(fā)明具有下列優(yōu)點:
[0090]1.此胚芽乳酸桿菌CMU995菌株對胃酸及膽鹽具有良好的耐受力，并且對動物宿主的腸道上皮細胞有牢固的附著能力，因此，可常駐生存于胃腸道消化系統(tǒng)中，進而與腸道中的病原菌競爭吸附，達到排除病原菌的效果。前述胚芽乳酸桿菌CMU995菌株也可牢固地附著于泌尿道的上皮細胞，故也可與泌尿道中的病原菌競爭吸附，達到保護泌尿道的功效。更進一步地，經(jīng)由腸道細胞、動物及人體實驗證實，胚芽乳酸桿菌CMU995菌株對腸道細胞具有穩(wěn)定的效果，可降低細胞受到內(nèi)生性或外生性的毒素傷害。再以動物及人體臨床實驗證實，胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可抑制酒精和/或毒素穿越腸道進入人體或動物體內(nèi)，而達到保護腸道、肝臟及其它器官的效果。
[0091]2.就預防應用而言，可將胚芽乳酸桿菌CMU995菌株添加于如飼料、飲料、營養(yǎng)補充品、或保健食品中，使此菌株附著及保護食用者的`腸胃道上皮細胞，而抑制內(nèi)毒素、酒精、霉菌毒素或細菌侵入體內(nèi)，而產(chǎn)生保護肝臟、降低毒素進入血液、解酒、排毒、抑制發(fā)炎、降低器官病變及抗癌等的效果。
[0092]3.就治療應用方面，當人體或動物體的體內(nèi)遭受病原菌產(chǎn)生的毒素、酒精或其它有毒物質(zhì)侵入時，而造成血液異?；蚣膊〔≌鲿r，例如:內(nèi)毒素、血氨等毒化物過高時，可服用包含胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的藥物或食品，透過胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的攝取后可達成降低血液毒素的效果。舉例而言，肝癌或肝炎患者可服用胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的相關(guān)制劑，來降低血氨過高、肝臟發(fā)炎或腸道發(fā)炎的現(xiàn)象。因此，總體來說，胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可達到預防或治療因毒素或酒精所引發(fā)的腸胃道和肝臟等的相關(guān)疾病。
[0093]4.胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可通過穩(wěn)定腸道細胞來抑制腸胃道中的毒素轉(zhuǎn)入血液之外，尚可抑制細菌或毒素在腸道中累積，經(jīng)由此二種排毒機制的加乘作用來保護攝取者?！号哦尽灰辉~的『毒』，為有害物質(zhì)、霉菌毒素、致癌物等，例如:腸道內(nèi)毒素、血液毒素、腸道中病原菌、酒精、有毒藥物、化學性有害物質(zhì)及塑化劑等，這些毒素會進入血液而運行至動物或人類的全身，而導致肝臟或其它器官的病變和傷害。又，本菌株及其組合物也具有幫助血液或腸道中的有毒物質(zhì)、病原菌或酒精加速從體內(nèi)排除的功效。
[0094]5.由于本發(fā)明菌株的具有抑制毒素進入血液及排除毒素的雙重特性，其可廣泛地運用于各種醫(yī)療及保健產(chǎn)品中。因此，本發(fā)明也提供一種用以保護肝臟的益生菌組合物，其包含胚芽乳酸桿菌CMU995菌株?；谏鲜雠哐咳樗釛U菌CMU995菌株的特性，前述益生菌組合物可用于抑制各種毒物吸收、抑制酒精吸收或抑制病原菌。
[0095]6.胚芽乳酸桿菌CMU995菌株可用于抑制腸胃道中的各種有害物質(zhì)，舉例而言，可抑制選自以下群組的有害物質(zhì):細菌產(chǎn)生毒素、霉菌產(chǎn)生毒素、病毒產(chǎn)生毒素、酒精、飲食中的毒素、農(nóng)藥、藥物、食品添加物、化學性有害物質(zhì)、塑化劑及前述的組合，尤其是用于抑制酒精及微生物所產(chǎn)生的毒素。
[0096]7.本發(fā)明的保護肝臟的益生菌組合物可呈任何形式，包含:藥品、飼料、飲料、營養(yǎng)補充品、食品、保健食品、乳制品或塞劑。胚牙乳Ife桿囷CMU995囷株也可添加于食品中，例如制成包含此菌株的乳制品等。
[0097]8.另外，也可視需要于本發(fā)明益生菌組合物中添加任何適宜的添加物，而進一步加強胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的附著效果，和/或抑制毒素進入血液，和/或加速毒素排除的效果。又或可以添加其它營養(yǎng)成分或藥物成分，以增加組合物的運用靈活性與調(diào)配度。舉例言之，本發(fā)明的益生菌組合物可另含有一種或多種如綜合維生素，或添加其它益生菌，亦或其它中草藥成分等物質(zhì)，以加強排毒作用或肝臟的代謝，只要添加的該活性成分對胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的效益沒有不利的影響，將可與胚芽乳酸桿菌CMU995菌株混合，用以發(fā)揮協(xié)同或加成的效果。
[0098]9.本發(fā)明的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株及其組合物，具有多種應用形式用以保護腸道細胞、降低腸道及血液毒素、抑制酒精吸收、保護肝臟及全身其它器官等的效果。例如，胚芽乳酸桿菌CMU995菌株及其組合物可制造成醫(yī)藥組合物、健康食品、營養(yǎng)補充品、飲料、酸奶、一般食品及動物飼料等型式，以預防或治療疾病。
[0099]雖然本發(fā)明已以實施方式揭露如上，然而其并非用以限定本發(fā)明，任何本領(lǐng)域技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，可作各種修改與改變，因此本發(fā)明的保護范圍以權(quán)利要求書中所界定為準。`
【權(quán)利要求】
1.一種胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株的用途,其應用于保護肝臟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該胚芽乳酸桿菌CMU995菌株保藏于財團法人食品工業(yè)發(fā)展研究所，其保藏編號為BCRC 910472，及保藏于德國國家菌種保藏中心，其保藏編號為DSM23780。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該應用于保護肝臟是用以降低評估肝臟功能指針天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)和/或丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)以保護肝臟。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該應用于保護肝臟是用以降低血液和/或肝臟中的膽固醇以保護肝臟。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該應用于保護肝臟是用以降低血液中的血脂以保護肝臟。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該應用于保護肝臟是用以降低血液中的酒精含量以保護肝臟。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該應用于保護肝臟是用以降低血液中的內(nèi)毒素以保護肝臟。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該應用于保護肝臟是用以降低肝臟的內(nèi)毒素以保護肝臟。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該應用于保護肝臟是用以降低血液中的炎性細胞激素TNF- α以保護肝臟。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株的用途，其中該應用于保護肝臟是用以預防酒精、炎性細胞激素TNF-α或內(nèi)毒素所引發(fā)的肝臟發(fā)炎。
11.一種保護肝臟的方法，包括將權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌(Lactobacillusplantarum) CMU995菌株傳輸至一哺乳動物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的保護肝臟的方法，其中該哺乳動物為人類。
13.一種用于保護肝臟的益生菌組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1的胚芽乳酸桿菌CMU995菌株，其中該胚芽乳酸桿菌CMU995菌株系濃度為I X 105CFU/g至I X 1012CFU/g的干燥粉末。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的保護肝臟的益生菌組合物，其作為藥品、飼料、飲料、營養(yǎng)補充品、乳制品、食品、健康食品O
15.根據(jù)權(quán)利要求13的保護肝臟的益生菌組合物，其用以預防或治療包括降低酒精及內(nèi)毒素所引發(fā)的肝臟發(fā)炎，并降低內(nèi)毒素所誘導的病變和/或癌癥的生成。
16.根據(jù)權(quán)利要求13的保護肝臟的益生菌組合物，其形式為粉劑、錠劑、造粒、栓劑、微膠囊、安瓿、液劑、噴劑或塞劑。
【文檔編號】A23K1/16GK103655637SQ201210380750
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2012年10月9日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月29日
【發(fā)明者】林文鑫, 吳啟瑞 申請人:中國醫(yī)藥大學