一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法，將栽培過程中出現(xiàn)真菌污染的培養(yǎng)基表面以吸附有殺真菌劑的河沙進(jìn)行覆蓋。本發(fā)明提供的處理方法操作簡(jiǎn)便，原材料來源廣泛，成本低廉，能夠方便、快速處理蛹蟲草栽培過程中出現(xiàn)的真菌污染。處理之后得到的蛹蟲草子實(shí)體產(chǎn)量高、質(zhì)量好，因此，本發(fā)明提供的處理方法具有廣闊的應(yīng)用前景。
【專利說明】一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及蛹蟲草的栽培領(lǐng)域，具體涉及一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蛹蟲草(Cordyceps militaris (L.Fr) Link),又名蠶蟲草、北冬蟲夏草，屬子囊菌門(Ascomycota)、核菌綱(Pyrenomycetes)、球殼目(Sphaeriales)、麥角菌科(Clavicipitaceae)、蟲草屬(Cordyceps (F r.) Link)真菌。蛹蟲草是蟲草屬真菌的模式種，在自然界多寄生在多寄生在多種鱗翅日昆蟲的幼蟲和蛹上。
[0003]近年來，很多研究都表明，人工栽培的蛹蟲草化學(xué)成分及藥理作用與冬蟲夏草相似，但價(jià)格卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于冬蟲夏草，因此，蛹蟲草的開發(fā)應(yīng)用具有極大的潛在市場(chǎng)。
[0004]目前的規(guī)?；枷x草生產(chǎn)中均采用了半人工合成培養(yǎng)基進(jìn)行規(guī)模化栽培，主要的原因是原料(大米、小米、高粱、玉米、奶粉、黃豆等)的來源廣泛且容易保存不受季節(jié)的限制。但由于在培養(yǎng)基輔料中添加了葡萄糖、奶粉、豆?jié){等物質(zhì)所以在培養(yǎng)過程中很容易造成真菌污染。真菌污染不但影響產(chǎn)量，而其會(huì)造成產(chǎn)品雜菌超標(biāo)，從而導(dǎo)致衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)不合格，而且污染容器的處理費(fèi)時(shí)費(fèi)力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為克服現(xiàn)有蛹蟲草栽培過程中易出現(xiàn)真菌污染、從而影響子實(shí)體生長(zhǎng)的技術(shù)缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法。
[0006]本發(fā)明提供的處理方法為:將栽培過程中出現(xiàn)真菌污染的培養(yǎng)基表面以吸附有殺真菌劑的河沙進(jìn)行覆蓋。
[0007]所述河沙覆蓋的厚度可根據(jù)真菌污染情況、選取的殺真菌劑種類、濃度等來確定，以能殺滅真菌污染、防止其擴(kuò)散為準(zhǔn)，優(yōu)選地，河沙覆蓋的厚度為I~20mm，更優(yōu)選5~IOmm0
[0008]所述處理過程在蛹蟲草的暗培養(yǎng)階段結(jié)束后開始并貫穿整個(gè)光培養(yǎng)階段。
[0009]所述殺真菌劑選自酒精、碘酒、硫酸、鹽酸、高錳酸鉀溶液、雙氧水中的一種或多種。
[0010]本發(fā)明采用的殺真菌劑主要分為兩大類:強(qiáng)氧化劑(硫酸、鹽酸、高錳酸鉀、雙氧水等)和蛋白變性劑(酒精、碘酒等)。選取此殺真菌劑的主要原因是成本低廉、無殘留，且不會(huì)對(duì)未污染部分的蛹蟲草子實(shí)體造成食用安全危害。
[0011]優(yōu)選地，所述碘酒為常規(guī)市售碘酒；所述酒精的質(zhì)量百分比濃度為70~90%，最優(yōu)選質(zhì)量百分比濃度為75%的醫(yī)用酒精；所述硫酸、鹽酸的質(zhì)量百分比濃度為2~10% ;所述高錳酸鉀溶液為質(zhì)量百分比濃度為0.05~0.5%的水溶液；所述雙氧水的質(zhì)量百分比濃度為I~10% ο
[0012]所述吸附有殺真菌劑的河沙的制備過程如下:選取60~80目的河沙，滅菌后將其浸入所述殺真菌劑中，備用。
[0013]優(yōu)選地，所述吸附有殺真菌劑的河沙的制備過程如下:選取60~80目的河沙，采用質(zhì)量百分比濃度為10~20%的稀鹽酸浸泡20~30小時(shí)，清水洗至中性，然后在120~200°C下干法滅菌90~120min，滅菌后將其浸入所述殺真菌劑中，備用。
[0014]以上技術(shù)方案中的處理方法還包括在所述河沙上加蓋器皿。由于以上采用的殺真菌劑多為易揮發(fā)的物質(zhì)如酒精、碘酒、雙氧水等，為保證殺真菌劑在真菌污染物表面發(fā)揮作用，因此采用器皿將河沙進(jìn)行覆蓋，防止揮發(fā)。
[0015]優(yōu)選地，用于覆蓋河沙的所述器皿為蓋狀結(jié)構(gòu)的器皿，扣于所述河沙之上并壓緊。
[0016]所述蓋狀器皿更優(yōu)選采用耐酸堿、耐腐蝕的塑料瓶蓋，如各種飲料瓶、礦泉水瓶或者試劑瓶蓋，采用蓋狀器皿覆蓋在河沙上并壓緊的目的是為了防止殺真菌劑揮發(fā)，同時(shí)，還可以將真菌污染物進(jìn)行隔離，控制在蓋狀器皿之中，防止真菌污染的擴(kuò)散。
[0017]所述蓋狀器皿的高度為I~5cm ;優(yōu)選I~3cm。
[0018]上述器皿在使用之前浸泡于酒精中備用，以殺滅細(xì)菌。優(yōu)選浸泡于質(zhì)量百分比為75%的醫(yī)用酒精中備用。
[0019]本發(fā)明提供的處理方法操作簡(jiǎn)便，原材料來源廣泛，成本低廉，能夠方便、快速地處理蛹蟲草栽培過程中出現(xiàn)的真菌污染。處理之后得到的蛹蟲草子實(shí)體產(chǎn)量高、質(zhì)量好，因此，本發(fā)明提供的處理方法具有廣闊的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0020]以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0021]實(shí)施例1蛹蟲草的栽培
[0022]一、時(shí)間:2012 年 4 月:
[0023]二、材料:
[0024](I)菌種:采用菌株編號(hào)為HX-64的蛹蟲草菌株(購(gòu)自北京市農(nóng)林科學(xué)院生物中心)。
[0025](2 )菌種固體培養(yǎng)基:PDA斜面。
[0026](3)液體搖瓶用培養(yǎng)基:去皮土豆250克(煮汁)、葡萄糖8克、蛋白胨2.5克、磷酸二氫鉀0.6克、硫酸鎂1.2克、水1000毫升，pH自然。
[0027](4)子實(shí)體生產(chǎn)營(yíng)養(yǎng)液:黃豆2.2%、葡萄糖1.5%、奶粉4.5%、磷酸二氫鉀0.8%、硫酸鎂0.06%、維生素BI 15mg/1000ml的比例配成營(yíng)養(yǎng)液，調(diào)整pH在5.6~7.2。
[0028](5)常規(guī)栽培培養(yǎng)容器:高12cm，直徑8cm，裝大米30克，營(yíng)養(yǎng)液45ml。
[0029]三、吸附殺真菌劑河沙、蓋狀器皿的制備
[0030](I)將河沙用60目過篩，棄去大顆粒及雜質(zhì)，再用80目過篩，去掉細(xì)沙。用吸鐵石吸去鐵質(zhì)，放入容器中用質(zhì)量百分比濃度為10%的稀鹽酸浸泡，24小時(shí)后倒去鹽酸，用水洗泡數(shù)次直至表面為中性，將河沙置于金屬容器中于160°C下干熱滅菌120min左右，然后裝Λ 500ml的容量瓶中，裝量為整個(gè)容量瓶的2/3左右。
[0031](2)選用質(zhì)量百分比濃度為75%的醫(yī)用酒精作為殺真菌劑，然后將殺真菌劑裝入上述容量瓶中，使滅菌河沙完全浸沒在殺真菌劑中，備用。
[0032](3)蓋狀器皿選用高度約為1.0cm、直徑約為1.5cm的礦泉水瓶塑料蓋，使用之前將其清洗干凈、烘干，浸泡到質(zhì)量百分比濃度為75%的醫(yī)用酒精中備用。
[0033]四、栽培過程:
[0034]( I)培養(yǎng)基的滅菌:
[0035]121°C、20分鐘常規(guī)滅菌。
[0036](2)接種工藝:
[0037]將接種頭做成蓮蓬狀進(jìn)行噴淋式接種。
[0038](3)暗培養(yǎng)階段:
[0039]將接種后的培養(yǎng)容器直接放入暗培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)即可，保持溫度18_22°C進(jìn)行避光培養(yǎng)，6天后菌絲覆蓋整個(gè)培養(yǎng)基表面后，暗培養(yǎng)結(jié)束。
[0040](4)污染培養(yǎng)容器的處理:
[0041]將暗培養(yǎng)結(jié)束后發(fā)現(xiàn)有真菌污染的培養(yǎng)容器全部挑選出，隨機(jī)分成兩組。一組不進(jìn)行任何處理，繼續(xù)進(jìn)行光培養(yǎng)；另一組采用本發(fā)明所述的方法進(jìn)行處理，過程如下:將待處理的培養(yǎng)容器集中，在超凈工作臺(tái)內(nèi)，打開培養(yǎng)容器，用塑料勺從裝有河沙的容量瓶中撈取浸滿殺真菌劑的無菌河沙，輕輕的覆蓋到真菌污染物的表面，形成約5mm的均勻一層，此時(shí)不能有游離的殺真菌劑存在，并要防止液體殺真菌劑滴落到未污染的部分，然后把浸泡在酒精中的塑料蓋取出，扣在河沙之上，壓緊，防止殺真菌劑的揮發(fā)，同時(shí)也將被真菌污染的部分控制于塑料蓋的覆蓋下，防止污染物在平面方向的擴(kuò)散。上述操作完畢之后，處理下一個(gè)污染點(diǎn)，直至培養(yǎng)基表面上凡是有真菌污染的部分，全部用河沙和器皿覆蓋進(jìn)行處理，處理完畢的組進(jìn)行光培養(yǎng)。
[0042](5)光照培養(yǎng):
[0043]培養(yǎng)室溫度應(yīng)為(20~23) °C。
[0044](6)采收:
[0045]當(dāng)子實(shí)體高度為5-8cm時(shí)及時(shí)采收。
[0046]實(shí)施例2
[0047]采用質(zhì)量百分比濃度為5%的稀鹽酸溶液作為殺真菌劑，其余同
[0048]實(shí)施例1。
[0049]實(shí)施例3
[0050]采用質(zhì)量百分比濃度為3%的稀硫酸溶液作為殺真菌劑，其余同實(shí)施例1。
[0051]實(shí)施例4
[0052]采用質(zhì)量百分比濃度為0.1%的高錳酸鉀水溶液作為殺真菌劑，其余同實(shí)施例1。
[0053]實(shí)施例5
[0054]采用質(zhì)量百分比濃度為3%的雙氧水作為殺真菌劑，其余同實(shí)施例1。
[0055]實(shí)施例1-5中未做任何處理的組中，真菌污染在暗培養(yǎng)結(jié)束后的基礎(chǔ)上繼續(xù)蔓延，蔓延的部分無子實(shí)體形成，且瓶?jī)?nèi)子實(shí)體的正常生長(zhǎng)收到很大影響，造成嚴(yán)重減產(chǎn)，采收時(shí)污染真菌形成的孢子對(duì)蛹蟲草子實(shí)體產(chǎn)生了嚴(yán)重的污染。
[0056]按照本發(fā)明所述處理方法處理后的組中，真菌污染在暗培養(yǎng)結(jié)束后的得到了嚴(yán)格控制，沒有蔓延到其它部分，且對(duì)子實(shí)體的正常生長(zhǎng)沒有影響，子實(shí)體生長(zhǎng)正常，采收時(shí)污染真菌形成的孢子也沒有對(duì)蛹蟲草子實(shí)體產(chǎn)生污染。
[0057]綜上所述，采用了本發(fā)明所述方法處理后收獲的蛹蟲草子實(shí)體，產(chǎn)率明顯高于未經(jīng)污染處理得到的子實(shí)體，而且質(zhì)量也明顯優(yōu)于未經(jīng)污染處理得到的子實(shí)體，符合蛹蟲草的各項(xiàng)指標(biāo)要求。
[0058] 雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法，其特征在于，將栽培過程中出現(xiàn)真菌污染的培養(yǎng)基表面以吸附有殺真菌劑的河沙進(jìn)行覆蓋。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的處理方法，其特征在于，所述處理在蛹蟲草的暗培養(yǎng)階段結(jié)束后開始并貫穿整個(gè)光培養(yǎng)階段。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的處理方法，其特征在于，所述殺真菌劑選自酒精、碘酒、硫酸、鹽酸、高錳酸鉀溶液、雙氧水中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的處理方法，其特征在于，所述酒精的質(zhì)量百分比濃度為70~90% ;所述硫酸、鹽酸的質(zhì)量百分比濃度為2~10% ;所述高錳酸鉀溶液為質(zhì)量百分比濃度0.05~0.5%的水溶液；所述雙氧水的質(zhì)量百分比濃度為I~10%。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的處理方法，其特征在于，所述吸附有殺真菌劑的河沙的制備過程如下:選取60~80目的河沙，滅菌后將其浸入所述殺真菌劑中，備用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的處理方法，其特征在于，所述吸附有殺真菌劑的河沙的制備過程如下:選取60~80目的河沙，采用質(zhì)量百分比濃度為10~20%的稀鹽酸浸泡20~30小時(shí)，清水洗至中性，然后在120~200 V下干法滅菌90~120min，滅菌后將其浸入所述殺真菌劑中，備用。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的處理方法，其特征在于，所述處理方法還包括在所述河沙上加蓋器皿。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的處理方法，其特征在于，所述器皿為為蓋狀器皿，扣于所述河沙之上并壓緊。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的處理方法，其特征在于，所述蓋狀器皿的高度為I~5cm。
10.根據(jù)權(quán)利要求7-9任一項(xiàng)所述的處理方法，其特征在于，所述器皿在使用之前浸泡于酒精中備用。
【文檔編號(hào)】A01G1/04GK103563647SQ201210279740
【公開日】2014年2月12日 申請(qǐng)日期:2012年8月7日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月7日
【發(fā)明者】胡健 申請(qǐng)人:北京中怡遠(yuǎn)大機(jī)電設(shè)備有限公司