專利名稱：一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法
技術領域：
本發(fā)明涉及植物修復技術，涉及一種重金屬超富集/超積累植物的篩選方法，具體為一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法。
背景技術：
砷廣泛存在于自然水體和土壤中，盡管與磷屬于同族，但砷及其化合物均被認為是致癌物質。金屬開采及冶煉、污泥農(nóng)用、化肥、除草劑、殺蟲劑等農(nóng)用化學品大量使用和砷污染地下水澆灌農(nóng)田等是砷在土壤中過量積累的主要原因。近年來，砷污染一直是全球(特別是東南亞地區(qū)及我國)非常突出且亟需解決的環(huán)境問題。目前我國受污染(包括重金屬污
染)的耕地面積近2 000 Rhm 2，約占耕地總面積的I/ 5。砷在土壤中大量富集不僅造成環(huán)境污染，而且嚴重影響農(nóng)作物質量與安全。湖南郴州某采礦區(qū)附近水稻田土壤中砷濃度高達1217 mg kg'該污染地區(qū)水稻谷粒中砷濃度高達7. 5 mg kg'遠遠高于我國水稻質量安全標準(0.15 mg kg—1) (GB2762-2005)。全球數(shù)百萬居民正在遭受砷污染危害，其中數(shù)十萬居民死于慢性砷中毒。亟需開發(fā)高效、切實可行的砷污染土壤治理技術。目前，治理土壤中砷等重金屬污染的方法主要有物理、化學和生物的方法。物理化學方法主要包括改土法、石灰改良法、電熱修復法、固化法、淋洗法等。這些方法各有其優(yōu)點，但普遍存在工程量較大、費用高、易造成二次污染、危害治理人員健康、破壞土壤結構及肥力等問題，處理后的土壤往往不太適宜植物生長。物理化學方法主要適用于污染面積小、污染物濃度高的場地污染治理，而不太適合于大面積的農(nóng)田重金屬污染土壤治理。植物修復技術是利用綠色植物及其根際微生物原位修復受污染土壤或水體的一種技術。這項技術以工程措施簡單、投資維護費用低、環(huán)境擾動小以及在水土保持、景觀美化等方面優(yōu)勢明顯成為學術界研究的熱點。超富集植物(Hyperaccumulator)是指植物地上部分能夠吸收超過100 mg kg—1的Cd,或超過 1000 mg kg-1 的 As、Cu、Co、Cr、Ni、Pb,或超過 10000 mg kg-1 的 Zn、Mn ,這一定義最早由Baker和Brooks (1989, Biorecovery, I: 81-126)提出。超富集植物只占植物界很小的一部分，絕大多數(shù)分布在世界極少數(shù)重(類)金屬污染土壤中。目前，世界上累計發(fā)現(xiàn)各類超富集植物420余種，其中砷超富集植物14種。國內已報導砷超富集植物包括蜈蟲公草 Vi ttata L.)、大葉井口邊草cretica L.)等(陳同斌等，2002，科學通報，47: 902-905 ；韋朝陽等，2002，生態(tài)學報，22: 777-778)。超富集植物往往生長周期較長、植株矮小、生物量低、扎根淺，存在修復效率較低等缺點，極大地限制了它們在修復砷污染土壤方面的實際應用。因此，需要篩選更為理想、更為有效的超富集植物，為植物修復技術的產(chǎn)業(yè)化、市場化提供必要的物質基礎。目前，修復植物的系統(tǒng)篩選在世界上尚未有統(tǒng)一的標準，已報道的超富集/超積累植物主要限制于在重金屬污染土壤中篩選，重金屬污染土壤僅占全球很小一部分，這大大限制了發(fā)現(xiàn)超富集植物的數(shù)量和種類
發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，將砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草用于治理砷污染土壤，減少砷在農(nóng)作物和農(nóng)產(chǎn)品中的累積。為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供了一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其包括如下步驟
第一步、野外采集我國多個地區(qū)蜈蚣草孢子，室內繁殖蜈蚣草幼苗；
第二步、利用多個地區(qū)蜈蚣草適齡幼苗，在含砷營養(yǎng)液中進行短期水培試驗，初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草；
第三步、將初步篩選出的地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草適齡幼苗移栽至不同梯度的人工模擬砷污染土壤中培養(yǎng)12周，以蜈蚣草地上部分生物量、地上部分砷濃度、地上部分砷吸收總量及蜈蚣草對砷的耐性指數(shù)為指標，擇優(yōu)篩選出砷吸收高效生態(tài)型蜈蟲公草。進一步，所述的第二步中的含砷營養(yǎng)液成分包括0. 2 mM KC1，I. 0 mM KNO3, 1.0mM Ca (NO3) 2 4H20, 0. 4 mM MgSO4 7H20, 9 uM H3BO3, I. 8 u M MnCl2 4H20, 0. 15 uMZnSO4 7H20, 0. 07 uM CuSO4 5H20, 0. 03 uM H2MoO H2O, 4 uM Fe-EDTA, 10 100 u M
Na2HAsO4 7H20o進一步，所述的第二步中的短期水培試驗的時間為l 24h。進一步，所述的第三步中的人工模擬砷污染土壤砷含量為l(T250mg kg'進一步，其所述第一步、野外采集我國多個地區(qū)蜈蚣草孢子，室內繁殖蜈蚣草幼苗，它包括以下步驟
A、10月中下旬在我國多個砷污染地區(qū)和未污染地區(qū)采集自然生長的蜈蚣草孢子，室內自然風干后，獲得不同地區(qū)蜈蚣草孢子保存待用，其中砷污染地區(qū)不少于3處，未污染地區(qū)不少于3處，不同地區(qū)之間至少相距100 km ；
B、將粒度小于2mm的未污染土壤與粒度小于2 mm河沙按照重量比4:1混合，作為培養(yǎng)基質，裝入育苗盤和育苗缽，在育苗盤的培養(yǎng)基質表層分別撒播已采集的不同地區(qū)蜈蚣草孢子，播種后均勻撒上一層細土 (粒度小于I mm)，按照基質最大持水量的80%噴水澆濕，農(nóng)用塑料薄膜覆蓋；
C、在可控溫度和光照的溫室中進行培養(yǎng)，每2日稱重育苗盤I次，孢子發(fā)芽后，每周再酌量施加20% Hoagland營養(yǎng)液補充營養(yǎng)，培養(yǎng)過程中按照培養(yǎng)基質最大持水量的80%維持水分；
D、2-3月后將蜈蚣草單株幼苗分栽至育苗缽中，定期酌量施加20%Hoagland營養(yǎng)液，按照培養(yǎng)基質最大持水量的80%維持水分，苗高至4-5厘米待用。進一步，其所述第二步、利用多個地區(qū)蜈蚣草適齡幼苗，在含砷營養(yǎng)液中進行水培試驗，初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草，它包括以下步驟
A、將第一步中得到的不同生態(tài)型蜈蚣草幼苗以自來水沖洗根部泥土，整株蜈蚣草以塑料泡沫板固定，移栽至盛放20% Hoagland營養(yǎng)液的塑料盆中生長，營養(yǎng)液保持充氣且每周更換I次；
B、4周后蜈蟻草幼苗在含砷營養(yǎng)液中分別處理0、1、2、6、12或24h,其中所述的含砷營養(yǎng)液成分包括0. 2 mM KCl, 1.0 mM KNO3, I. 0 mM Ca (NO3) 2 4H20, 0. 4 mM MgSO4 7H20, 9 uM H3BO3, I. 8 uM MnCl2 4H20, 0. 15 uM ZnSO4 7H20, 0. 07 uMCuSO4 5H20, 0. 03 u M H2MoO H2O, 4 uM Fe-EDTA, 10 u M Na2HAsO4 7H20 ；
C、在每一時間點，將蜈蚣草羽葉從葉柄底部與根分開，蜈蚣草地上部分由去離子水清洗后擦干、稱重并干燥；
D、將得到的蜈蚣草地上部分磨碎并經(jīng)混合酸消解，地上部分總砷含量利用電感耦合等離子體質譜測定，初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草，其中所述混合酸為HNO3和HClO4，它們的體積比為85:15，消解溫度不高于120°C。進一步，其所述第三步、將初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草適齡幼苗移栽至不同梯度的人工模擬砷污染土壤中培養(yǎng)12周，以蜈蚣草地上部分生物量、地上部分砷濃度、地上部分砷吸收總量及蜈蚣草對砷的耐性指數(shù)為指標，擇優(yōu)篩選出砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草，包括以下步驟
A、將初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草作為研究對象；
B、以未污染地區(qū)表層土(5-15cm)為栽培介質(粒度小于2 _)，不同生態(tài)型苗高4_5厘米蜈蚣草適齡幼苗將移植于塑料盆內，塑料盆裝人工模擬砷污染土壤，每盆中移植I棵幼苗，土壤砷含量為O、10、50、250 mg kg_1 ；
C、蜈蚣草每2天用去離子水澆灌I次,每周酌量施加20%Hoagland營養(yǎng)液補充營養(yǎng)，稱重法保持80%持水量，12周后蜈蚣草地上部分及根分離后用去離子水浸洗、擦干、稱重并干燥；
D、將得到的蜈蚣草地上部分磨碎并經(jīng)混合酸消解，總砷含量利用電感耦合等離子體質譜測定，以蜈蚣草地上部分生物量、地上部分砷濃度、地上部分砷吸收總量及蜈蚣草對砷的耐性指數(shù)為指標，篩選出一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草，其中所述混合酸為HNO3和HClO4，它們的體積比為85:15，消解溫度不高于120°C。進一步，所述的20% 的 Hoagland 營養(yǎng)液成分包括0. 2 mM KH2PO4, I. 0 mM KNO3,I. 0 mM Ca (NO3) 2 4H20, 0. 4 mM MgSO4 7H20, 9 uM H3BO3, I. 8 u M MnCl2 4H20, 0. 15U M ZnSO4 7H20, 0. 07 uM CuSO4 5H20, 0. 03 uM H2MoO H2O, 4 uM Fe-EDTA。本發(fā)明原理如下
在長期的進化過程中，為適應特殊立地條件下不利的自然環(huán)境，生長于重金屬污染土壤的植物(污染生態(tài)型)與生長于非污染土壤的植物(非污染生態(tài)型)相比往往存在明顯的基因差異(van Hoof et al. , 2001, Plant Physiology, 126: 1519-1526; Mengoni etal. , 2003，Plant and Soil, 257: 451-457)和生理差異(Bleeker et al. , 2003，NewPhytologist, 175: 33-38)。已有研究結果顯示超富集砷是蜈蟻草的一種先天固有的屬性。蔡保松等(2007，浙江大學學報，33: 473-478)發(fā)現(xiàn)采集于廣西、湖南、重慶、廣東和福建等地的蜈蚣草孢子培育出幼苗的田間試驗結果表明蜈蚣草地上部和根部的砷濃度存在顯著的基因型差異。蜈蚣草在我國地域分布較廣，在南部18個省份均有分布(陳同斌等，2005，地理研究，24: 825-833)。我國幅員遼闊，地域差別明顯，因此，篩選出砷吸收存在明顯差異的蜈蚣草生態(tài)型存在必然性。本發(fā)明具有以下優(yōu)點
I具有首創(chuàng)性。從已有的相關文獻報道來看，以多個地區(qū)廣泛存在的砷超富集植物蜈蚣草為篩選對象，利用水培和土壤砷污染模擬試驗進行砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選研究在國內外均未曾涉及；2方法簡單，可操作性強。本篩選方法采用人工可控制的砷污染條件，參試的不同生態(tài)型蜈蚣草均處于相對一致的生長環(huán)境，不同生態(tài)型蜈蚣草之間對砷的耐性及富集特征具有可比性。利用室內常規(guī)的水培試驗和土培試驗兩步篩選，方法簡單，可操作性強；
3經(jīng)濟可行。蜈蚣草孢子廣泛存在，易于采集，篩選成本相對較低。


圖I短期(0_24h)水培試驗條件下，不同生態(tài)型蜈蚣地上部分砷吸收效應初步篩選試驗結果。圖2砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草在典型砷污染土壤中植物修復驗證試驗。
具體實施方式
下面結合具體的實施例對本發(fā)明做進一步的說明。實施例I
一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法
采用水培試驗和土培試驗，分三步篩選出砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草。蜈蚣草幼苗培育2008年10月中下旬，采集我國多個地區(qū)自然生長的蜈蚣草成熟孢子，采樣地點包括3個非污染地區(qū)[香港大埔窖自然保護區(qū)(簡稱香港)、廣東省中山大學校園(簡稱廣州)和廣西省南寧市廣西植物研究所林地(簡稱南寧)]和4個砷不同程度污染地區(qū)[廣東省韶關市樂昌尾礦區(qū)(簡稱樂昌)、湖南省桂陽縣大順壟鉛鋅廢棄礦區(qū)(簡稱大順壟)、湖南省郴州市蘇仙區(qū)野雞尾鉛鋅廢棄礦區(qū)(簡稱野雞尾)和浙江省衢州市灰坪鄉(xiāng)鉛鋅廢棄礦區(qū)(簡稱衢州)]，用刀片輕輕刮下蜈蚣草羽葉背面孢子粉或將帶孢子的羽葉剪下，室內自然風干后保存待用。2008年12月下旬于香港浸會大學溫室育苗盤(75 cmX40cmX12 cm，長X寬X高)內播種孢子，無污染土壤與河沙混合物(粒徑均小于2 _，重量比4:1)作為培養(yǎng)基質，播種后均勻撒上一層細土，噴水澆濕(按照基質最大持水量的80%澆水)，塑料薄膜覆蓋。15日后孢子萌發(fā)，按照基質最大持水量的80%維持水分，每周酌量施加20%Hoagland營養(yǎng)液補充營養(yǎng)。2_3月后將蜈蚣草幼苗單株幼苗分栽至育苗缽(0 =12cm, H=15 cm)中，苗高至4-5厘米待用。其中20%的Hoagland營養(yǎng)液成分包括0. 2 mMKH2PO4, LOmMKNO3, I. 0 mM Ca(NO3)2 4H20, 0. 4 mM MgSO4 7H20, 9 uM H3BO3, I. 8U M MnCl2 4H20, 0. 15 uM ZnSO4 7H20, 0. 07 uM CuSO4 5H20, 0. 03 uM H2MoO H2O,
4uM Fe-EDTA。水培試驗2009年4月，7種不同生態(tài)型(香港、廣州、南寧、樂昌、大順壟、野雞尾和衢州)適齡蜈蚣草幼苗(苗高4-5厘米)以自來水沖洗干凈根部泥土，塑料泡沫板固定后整株移栽至盛放3.0 L 20% Hoagland營養(yǎng)液的塑料盆(18 cmX12 cmX15 cm，長X寬X高)中生長，營養(yǎng)液保持充氣且每周更換I次。4周后蜈蚣草幼苗在含砷營養(yǎng)液中分別處理O、I、2、6、12或24 h，重復4次，其中所述的含砷營養(yǎng)液成分包括0.2 mM KCl, I. 0 mMKNO3, I. 0 mM Ca (NO3) 2 4H20, 0. 4 mM MgSO4 7H20, 9 uM H3BO3, I. 8 u M MnCl2 4H20,0. 15 u M ZnSO4 7H20, 0. 07 uM CuSO4 5H20, 0. 03 uM H2MoO H2O, 4 uM Fe-EDTA, 10UM Na2HAsO4 7H20。在每一個時間點，蜈蚣草羽葉將從葉柄的底部(大約根上Icm)與根分開，蜈蚣草地上部分由去離子水清洗后擦干、稱重并干燥。植物樣品磨碎并經(jīng)混合酸(HNO3和HClO4,85:15，v/v)消解后(=120°C )，總砷含量利用電感耦合等離子體質譜測定，結果見圖I。根據(jù)蜈蚣草地上部分砷濃度高低初步篩選出2種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草。如圖I所示南寧和廣州生態(tài)型分別在第6、12和24小時砷吸收能力顯著高于其余4種生態(tài)型，在第24h時南寧和廣州生態(tài)型地上部分砷濃度分別為2025和2013 mg kg—1，分別是大順壟生態(tài)型的5. 56和5. 55倍，南寧和廣州生態(tài)型可初步篩選為砷吸收高效型蜈蚣草。土培試驗2009年5月，米集非污染地區(qū)表層(5-15 cm)土壤風干、過2mm篩后,分別與一定量的Na2HAsO4 7H20混合裝入塑料盆(￠=18 cm, H=22 cm)，土壤中的砷擬有以下4個水平0、10、50、250 mg kg'平衡2周后，將水培試驗初步篩選出的2種砷吸收高效生態(tài)型(南寧及廣州生態(tài)型)蜈蚣草及與其砷吸收存在明顯差異的4種生態(tài)型(香港、大順壟、野雞尾和衢州)蜈蚣草幼苗(苗高4-5厘米)移植于塑料盆內，每盆中移植I棵幼苗，重復4次。選擇另外4種生態(tài)型蜈蚣草研究(香港、大順壟、野雞尾和衢州)的主要目的是作為對照，在處于相對一致的生長環(huán)境下與南寧和廣州生態(tài)型蜈蚣草砷的耐性及富集特征進行比較。不定期澆去離子水及酌量施加20%Hoagland營養(yǎng)液補充營養(yǎng)，稱重法保持基質 80%持水量。12周后，蜈蚣草地上部分及根分離后用去離子水浸洗、擦干、稱重并干燥。地 上部分磨碎并經(jīng)混合酸(HNO3和HClO4,85:15, v/v)消解(寫120°C )，總砷含量利用電感耦合等離子體質譜測定，結果見表I。以蜈蚣草的地上部分生物量、地上部分砷濃度及吸收總量及對砷的耐性指數(shù)為篩選標準。所得數(shù)據(jù)利用軟件SAS8. I進行方差分析，與其他生態(tài)型相比，地上部分生物量、砷濃度及砷吸收總量顯著性(/7 > 0.05)高的生態(tài)型為砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣。
權利要求
1.一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其特征在于，其包括如下步驟 第一步、野外采集我國多個地區(qū)蜈蚣草孢子，室內繁殖蜈蚣草幼苗； 第二步、利用多個地區(qū)蜈蚣草適齡幼苗，在含砷營養(yǎng)液中進行短期水培試驗，初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草； 第三步、將初步篩選出的地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草適齡幼苗移栽至不同梯度的人工模擬砷污染土壤中培養(yǎng)12周，以蜈蚣草地上部分生物量、地上部分砷濃度、地上部分砷吸收總量及蜈蚣草對砷的耐性指數(shù)為指標，擇優(yōu)篩選出砷吸收高效生態(tài)型蜈蟲公草。
2.根據(jù)權利要求I所述的一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其特征在于所述的第二步中的含砷營養(yǎng)液成分包括0. 2 mM KC1，I. 0 mM KNO3, I. 0 mM Ca (NO3) 2 4H20,0. 4 mM MgSO4 7H20, 9 uM H3BO3, I. 8 uM MnCl2 4H20, 0. 15 uM ZnSO4 7H20, 0. 07U M CuSO4 5H20, 0. 03 uM H2MoO H2O, 4 uM Fe-EDTA, 10 100 u M Na2HAsO4 7H20。
3.根據(jù)權利要求I所述的一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其特征在于所述的第二步中的短期水培試驗的時間為l 24h。
4.根據(jù)權利要求I所述的一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其特征在于所述的第三步中的人工模擬砷污染土壤中的砷的含量為l(T250mg kg'
5.根據(jù)權利要求I所述的一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其特征在于其所述第一步、野外采集我國多個地區(qū)蜈蚣草孢子，室內繁殖蜈蚣草幼苗，它包括以下步驟 A、10月中下旬在我國多個砷污染地區(qū)和未污染地區(qū)采集野外生長的蜈蚣草孢子，室內自然風干后，獲得不同地區(qū)蜈蚣草孢子保存待用，其中砷污染地區(qū)不少于3處，未污染地區(qū)不少于3處，不同地區(qū)之間至少相距100 km ； B、將粒度小于2mm的未污染土壤與粒度小于2 mm河沙按照重量比4:1混合，作為培養(yǎng)基質，裝入育苗盤和育苗缽，在育苗盤的培養(yǎng)基質表層分別撒播已采集的不同地區(qū)蜈蚣草孢子，播種后均勻撒上一層細土 (粒度小于I mm)，按照基質最大持水量的80%噴水澆濕，農(nóng)用塑料薄膜覆蓋； C、在可控溫度和光照的溫室中進行培養(yǎng)，每2日稱重育苗盤I次，孢子發(fā)芽后，每周酌量施加20% Hoagland營養(yǎng)液補充營養(yǎng)，培養(yǎng)過程中按照培養(yǎng)基質最大持水量的80%維持水分； D、2-3月后將蜈蚣草單株幼苗分栽至育苗缽中，定期酌量施加20%Hoagland營養(yǎng)液，按照培養(yǎng)基質最大持水量的80%維持水分，苗高至4-5厘米待用。
6.根據(jù)權利要求I所述的一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其特征在于其所述第二步、利用蜈蚣草幼苗，在含砷營養(yǎng)液中進行水培試驗，初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草，它包括以下步驟 A、將第一步中得到的不同生態(tài)型的苗高4-5厘米的蜈蚣草幼苗以自來水沖洗根部泥土，整株蜈蚣草以塑料泡沫板固定，移栽至盛放20% Hoagland營養(yǎng)液的塑料盆中生長，營養(yǎng)液保持充氣且每周更換I次； B、4周后蜈蟻草幼苗在含砷營養(yǎng)液中分別處理0、1、2、6、12或24h,其中所述的含砷營養(yǎng)液成分包括 0. 2 mM KCl, 1.0 mM KNO3, I. 0 mM Ca(NO3)2 4H20, 0. 4 mMMgSO4 7H20, 9 uM H3BO3, I. 8 uM MnCl2 4H20, 0. 15 uM ZnSO4 7H20, 0. 07 uMCuSO4 5H20, 0. 03 u M H2MoO H2O, 4 uM Fe-EDTA, 10-100 u M Na2HAsO4 7H20 ； C、在每一時間點，蜈蟻草羽葉將從葉柄的底部與根分開，蜈蟻草地上部分由去尚子水清洗后擦干、稱重并干燥； D、植物樣品磨碎并經(jīng)混合酸消解，地上部分總砷含量利用電感耦合等離子體質譜測定，初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草，其中所述混合酸為HNO3和HClO4，它們的體積比為85:15，消解溫度不高于120°C。
7.根據(jù)權利要求I所述的一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其特征在于其所述第三步、將初步篩選出的地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草適齡幼苗移栽至不同梯度的人工模擬砷污染土壤中培養(yǎng)12周，以蜈蚣草地上部分生物量、地上部分砷濃度、地上部分砷吸收總量及蜈蚣草對砷的耐性指數(shù)為指標，擇優(yōu)篩選出砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草，包括以下步驟 A、將初步篩選出地上部分砷濃度較高的2飛種生態(tài)型蜈蚣草作為研究對象； B、以未污染地區(qū)表層土為栽培介質，不同生態(tài)型蜈蚣草適齡幼苗將移植于塑料盆內，塑料盆裝人工模擬砷污染土壤，每盆中移植I棵幼苗，土壤砷含量為0、10、50、250 mgkg-1 ； C、蜈蚣草每2天用去離子水澆灌I次,每周酌量施加20%Hoagland營養(yǎng)液補充營養(yǎng)，稱重法保持80%持水量，12周后蜈蚣草地上部分及根分離后用去離子水浸洗、擦干、稱重并干燥； D、地上部分磨碎并經(jīng)混合酸消解，總砷含量利用電感耦合等離子體質譜測定，以蜈蚣草地上部分生物量、地上部分砷濃度、地上部分砷吸收總量及蜈蚣草對砷的耐性指數(shù)為標準，篩選出一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草，其中所述混合酸為HNO3和HClO4，它們的體積比為85:15，消解溫度不高于120°C。
8.根據(jù)權利要求I所述的一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，其特征在于所述的 20% 的 Hoagland 營養(yǎng)液成分包括0. 2 mM KH2PO4, I. 0 mM KNO3, I. 0 mMCa (NO3) 2 4H20, 0. 4 mM MgSO4 7H20, 9 uM H3BO3, I. 8 u M MnCl2 4H20, 0. 15 uMZnSO4 7H20, 0. 07 uM CuSO4 5H20, 0. 03 uM H2MoO H2O, 4 uM Fe-EDTA。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草的篩選方法，包括如下步驟第一步、野外采集我國多個地區(qū)蜈蚣草孢子，室內繁殖蜈蚣草幼苗；第二步、利用多個地區(qū)蜈蚣草適齡幼苗，在含砷營養(yǎng)液中進行短期水培試驗，初步篩選出地上部分砷濃度較高的2~5種生態(tài)型蜈蚣草；第三步、將初步篩選出的地上部分砷濃度較高的2~5種生態(tài)型蜈蚣草適齡幼苗移栽至不同梯度的人工模擬砷污染土壤中培養(yǎng)12周，以蜈蚣草地上部分生物量、地上部分砷濃度、地上部分砷吸收總量及蜈蚣草對砷的耐性指數(shù)為指標，擇優(yōu)篩選出砷吸收高效生態(tài)型蜈蚣草。本發(fā)明的篩選方法簡單易行，程序化高，易于推廣，對于修復砷污染土壤、保護農(nóng)產(chǎn)品質量安全具有重要意義。
文檔編號A01H1/04GK102715082SQ201210244459
公開日2012年10月10日 申請日期2012年7月16日 優(yōu)先權日2012年7月16日
發(fā)明者劉軍華, 吳福勇, 李會杰 申請人:河南城建學院